用于劃痕實(shí)驗的細(xì)胞培養(yǎng)插件及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于劃痕實(shí)驗的裝置，包括：用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片以及細(xì)胞培養(yǎng)插件。所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)。本發(fā)明的這種特殊設(shè)計的細(xì)胞培養(yǎng)插件，可以在劃痕實(shí)驗中簡便形成整齊的劃痕空白區(qū)，從而大大簡化了劃痕實(shí)驗的操作步驟，極大地提升了該實(shí)驗的易操作性和可重復(fù)性。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)插件、含所述插件的培養(yǎng)裝置及其應(yīng)用。
【專利說明】
用于劃痕實(shí)驗的細(xì)胞培養(yǎng)插件及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞功能分析領(lǐng)域，具體地涉及用于劃痕實(shí)驗的細(xì)胞培養(yǎng)插件、含所述插件的培養(yǎng)裝置及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]劃痕實(shí)驗也叫傷口愈合實(shí)驗，是用來分析細(xì)胞迀移、運(yùn)動能力最常用的實(shí)驗方法。通常被用來研究運(yùn)動細(xì)胞如足細(xì)胞等，以及各種腫瘤細(xì)胞的迀移能力。
[0003]做劃痕實(shí)驗的傳統(tǒng)方法是在細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)皿之后，用槍頭劃，刮掉細(xì)胞，形成空白的區(qū)域。然而，該方法存在明顯的缺點(diǎn)，主要包括:(I)劃痕操作依賴操作者的經(jīng)驗；(2)劃痕形成的空白區(qū)通常不夠整齊，無法進(jìn)行定量的分析；(3)重復(fù)性差，每次操作的差異性(variat1n)比較大；(4)用槍頭劃，會損傷培養(yǎng)皿底部的包被物，甚至破壞底部表面的平整度，使得一些貼壁的細(xì)胞不能在空白區(qū)生長，導(dǎo)致細(xì)胞迀移能力弱的陰性結(jié)果。
[0004]由于現(xiàn)有的劃痕方法存在諸多不足，例如數(shù)據(jù)不夠漂亮，劃痕區(qū)域鋸齒狀，不整齊，重復(fù)性差，不容易獲得定量結(jié)果，更不能獲得統(tǒng)計差異，因此，很多科研工作者在做相關(guān)實(shí)驗時，通常只能用劃痕實(shí)驗做預(yù)實(shí)驗，或者只能將劃痕實(shí)驗結(jié)果放在補(bǔ)充數(shù)據(jù)中。
[0005]因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)操作簡便、重復(fù)性高、甚至可用于定量分析劃痕實(shí)驗的裝置和方法。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]本發(fā)明的目的是提供一種操作簡便、重復(fù)性高、甚至可用于定量分析劃痕實(shí)驗的裝置和方法。
[0007]在本發(fā)明的第一方面，提供了一種用于劃痕實(shí)驗的裝置，所述裝置包括:
[0008](a)用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板以及腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室；
[0009](b)細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)；
[0010]其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形；
[0011]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)。
[0012]優(yōu)選地，所述I 為0.5 — I Ocm，所述 d為 100-1 ΟΟΟμ??。
[0013]在另一優(yōu)選例中，所述第一支撐擋板和第二支撐擋板之間的夾角a以及所述第三支撐擋板和第四支撐擋板之間的夾角b為30-330度。
[0014]在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件與所述培養(yǎng)皿之間的吸附力大于所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的重力。
[0015]在另一優(yōu)選例中，所述的各支撐擋板的截面為長條型、弧形、或矩形。
[0016]在另一優(yōu)選例中，所述的各支撐擋板與培養(yǎng)面形成的貼合接觸面的面積Sz為
0.5 — 10mm20
[0017]在另一優(yōu)選例中，所述的各支撐擋板是相同的或不同。
[0018]在另一優(yōu)選例中，所述的一個或多個支撐擋板的截面為矩形，并且對應(yīng)于所述的一個或多個支撐擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成輔助劃痕空白區(qū)。
[0019]在另一優(yōu)選例中，所述培養(yǎng)皿為直徑為3.5cm、6cm、7cm、9cm、10cm、15cm等不同培養(yǎng)表面大小的培養(yǎng)皿。
[0020]在另一優(yōu)選例中，所述腔室載玻片具有2、3、4、6、8、10、12個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室。
[0021]在另一優(yōu)選例中，所述的培養(yǎng)板具有2、4、6、8、16、24、48和96個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室。
[0022]在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件為生物兼容性的硅膠插件。
[0023]在另一優(yōu)選例中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件在其上部具有粗糙表面。
[0024]在另一優(yōu)選例中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件在其下部具有光滑平整表面。
[0025]在本發(fā)明的第二方面，提供了一種用于劃痕實(shí)驗的耗材套裝，所述套裝包括:
[0026](a)第一容器，以及位于所述第一容器內(nèi)的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板與所述的腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室；
[0027](b)第二容器，以及位于所述第二容器內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)；
[0028]其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形，且所述I為0.5— 10cm，所述d為 100-1000μπι;
[0029]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)；
[0030](C)任選的使用說明書。
[0031]在本發(fā)明的第三方面，提供了一種用于劃痕實(shí)驗的耗材套裝，所述套裝包括:
[0032](a)第一容器，以及位于所述第一容器內(nèi)的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板與所述腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室，并且在每個培養(yǎng)細(xì)胞的腔室中預(yù)置有細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)；
[0033]其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形，且所述I為0.5— 10cm，所述d為 100-1000μ??;
[0034]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)；
[0035](b)任選的使用說明書。
[0036]優(yōu)選地，所述的耗材套裝還含有第二容器，以及位于所述第二容器內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)插件，其中所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件與所述第一容器中預(yù)置好的細(xì)胞培養(yǎng)插件的規(guī)格是相同的或不同的，所述規(guī)格按所述劃痕擋板的截面積的大小和形狀進(jìn)行劃分。
[0037]在本發(fā)明的第四方面，提供了一種非診斷性和非治療性的測定細(xì)胞迀移能力的方法，包括步驟:
[0038](a)提供第一方面所述的裝置，其中所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件被放置于所述培養(yǎng)皿或所述培養(yǎng)板的腔室或所述腔室載玻片的腔室中，使得所述細(xì)胞培養(yǎng)插件貼合于所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述培養(yǎng)板、所述腔室載玻片的培養(yǎng)面；
[0039](b)向所述的裝置中添加適量的細(xì)胞懸液；
[0040](c)培養(yǎng)所述的細(xì)胞，直至所述細(xì)胞貼壁且鋪滿或基本鋪滿底部的培養(yǎng)面；
[0041](d)移除所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件，從而形成劃痕空白區(qū)；
[0042](e)繼續(xù)培養(yǎng)所述的細(xì)胞，并觀察和分析所述細(xì)胞的迀移能力。
[0043]優(yōu)選地，在步驟(d)中，移除所述細(xì)胞培養(yǎng)插件后，形成平整的的劃痕空白區(qū)；
[0044]在步驟(e)中，在相同大小的所述腔室中用相同規(guī)格的所述細(xì)胞培養(yǎng)插件所形成的各劃痕空白區(qū)，進(jìn)行定性和/或定量和/或統(tǒng)計分析。
[0045]在另一優(yōu)選例中，在步驟(d)中，移除所述細(xì)胞培養(yǎng)插件后，形成平整的劃痕空白區(qū)，不破壞所述培養(yǎng)皿或所述培養(yǎng)板的腔室或所述腔室載玻片的腔室的底部培養(yǎng)表面，細(xì)胞可在所述培養(yǎng)表面貼壁生長、迀移運(yùn)動。
[0046]在另一優(yōu)選例中，所述的培養(yǎng)面為載玻片表面。
[0047]在另一優(yōu)選例中，在步驟(b)中，所述細(xì)胞懸液的添加量為50-15000微升/腔室，依據(jù)所用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板、腔室載玻片的具體腔室大小而定。
[0048]在另一優(yōu)選例中，在步驟(b)中，所述細(xì)胞懸液的中細(xì)胞的濃度為IX 14-1X 16個細(xì)胞/ml，具體依據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)胞類型而定。
[0049]在另一優(yōu)選例中，所述的劃痕空白區(qū)的寬度d為100-1000μπι，長度I為0.5 — 10cm。
[0050]在另一優(yōu)選例中，所述的培養(yǎng)板包括η個相同或不同大小的腔室。
[0051]在另一優(yōu)選例中，所述的腔室載玻片包括η個相同或不同大小的腔室。
[0052]在另一優(yōu)選例中，在步驟(e)中，所述的分析為定量分析。
[0053]在另一優(yōu)選例中，在步驟(e)中，在相同大小腔室中用相同規(guī)格的所述細(xì)胞培養(yǎng)插件所形成的各劃痕空白區(qū)，進(jìn)行定量和/或統(tǒng)計分析。
[0054]應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
【附圖說明】
[0055]圖1為實(shí)施例1中劃痕實(shí)驗裝置的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0050]圖2為實(shí)施例1中劃痕實(shí)驗時形成的劃痕空白區(qū)的結(jié)構(gòu)不意圖；
[0057]圖3為實(shí)施例2中劃痕實(shí)驗裝置的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0058]圖4為實(shí)施例3中劃痕實(shí)驗裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0059]本發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究，首次開發(fā)了一種用于劃痕實(shí)驗的細(xì)胞培養(yǎng)插件。通過這種特殊設(shè)計的生物相容的硅膠插件，可以在劃痕實(shí)驗中簡便形成整齊的劃痕空白區(qū)，從而大大簡化了劃痕實(shí)驗的操作步驟，極大地提升了該實(shí)驗的易操作性和可重復(fù)性。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。
[0060]術(shù)語
[0061 ]如本文所用，術(shù)語“本發(fā)明細(xì)胞培養(yǎng)插件”、“本發(fā)明培養(yǎng)插件”、“本發(fā)明插件”可互換使用，指本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)插件
[0062]如本文所用，術(shù)語“工字型”“H型”可互換使用，指細(xì)胞培養(yǎng)插件的形狀，支撐擋板可以是直線型、曲線型、折線型、或其組合，例如，兩個擋板(以第一擋板和第二擋板為例)，當(dāng)其都為直線型時，可以共同構(gòu)成一直線(即夾角α = 180°)，也可以構(gòu)成其它任意角度，優(yōu)選30-320度，60-300度，90-270度，120-240度，150-210度，從而構(gòu)成“〈”、“〉”(對H型而言)、“V”或倒“V”(對于“工”型而言)或其它類似角度，如“U”、“C"等。
[0063]劃痕實(shí)驗裝置
[0064]在一實(shí)施方式中，提供了一種用于劃痕實(shí)驗的裝置，所述裝置包括:
[0065](a)用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板以及腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室；
[0066](b)細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)。
[0067]其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形。
[0068]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)。
[0069 ]優(yōu)選地，所述 I 為0.5 — I Ocm，所述 d為 100-1 ΟΟΟμπι。
[0070]在另一優(yōu)選例中，所述第一支撐擋板和第二支撐擋板之間的夾角a以及所述第三支撐擋板和第四支撐擋板之間的夾角b為30-330度。
[0071]在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件與所述培養(yǎng)皿之間的吸附力大于所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的重力。
[0072]在另一優(yōu)選例中，所述的各支撐擋板的截面為長條型、弧形、或矩形。
[0073]在另一優(yōu)選例中，所述的各支撐擋板與培養(yǎng)面形成的貼合接觸面的面積Sz為0.5 — 10mm20
[0074]在另一優(yōu)選例中，所述的各支撐擋板是相同的或不同。
[0075]在另一優(yōu)選例中，所述的一個或多個支撐擋板的截面為矩形，并且對應(yīng)于所述的一個或多個支撐擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成輔助劃痕空白區(qū)。
[0076]在另一優(yōu)選例中，所述培養(yǎng)皿為直徑為3.5cm、6cm、7cm、9cm、10cm、15cm等不同培養(yǎng)表面大小的培養(yǎng)皿。
[0077]在另一優(yōu)選例中，所述腔室載玻片具有2、3、4、6、8、10、12個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室。
[0078]在另一優(yōu)選例中，所述的培養(yǎng)板具有2、4、6、8、16、24、48和96個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室。
[0079]在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件為生物兼容性的硅膠插件。
[0080]在另一優(yōu)選例中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件在其上部具有粗糙表面。
[0081]在另一優(yōu)選例中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件在其下部具有光滑平整表面。
[0082]在另一優(yōu)選例中，所述硅膠插件可以通過靜電相互作用使其貼在腔室載玻片的底部，硅膠插件的底部固定寬度為500μπι。
[0083]在另一優(yōu)選例中，所述硅膠插件的底部(即與腔室載玻片表面接觸的接觸面)是平坦光潔的，因而不僅可以與腔室載玻片表面形成良好的貼合接觸，從而提供吸附力(吸力)，此外，所述硅膠插件可以進(jìn)一步通過靜電相互作用等作用力使其固定或吸附于腔室載玻片。
[0084]在另一優(yōu)選例中，所述的硅膠插件的上部和下部由相同材料構(gòu)成。
[0085]在另一優(yōu)選例中，所述的硅膠插件的上部和下部由不同的材料構(gòu)成。例如，上部采用是粗糙的材料，而下部使用的是較細(xì)膩的材料。
[0086]在另一優(yōu)選例中，所述的硅膠插件的上部和下部雖然由相同或基本相同的材料構(gòu)成，但是上部具有較為粗糙的表面，而下部具有光滑的表面。這樣，便于插件牢固的固定于培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板、腔室載玻片的培養(yǎng)面；另外，在進(jìn)行移除操作時，容易移除本發(fā)明插件，而不會對細(xì)胞迀移實(shí)驗造成影響。
[0087]耗材套裝
[0088]在另一實(shí)施方式中，提供了一種用于劃痕實(shí)驗的耗材套裝，所述套裝包括:
[0089](a)第一容器，以及位于所述第一容器內(nèi)的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板與所述的腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室；
[0090](b)第二容器，以及位于所述第二容器內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)；
[0091]其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形，且所述I為0.5— 10cm，所述d為 100-1000μπι;
[0092]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)；
[0093](C)任選的使用說明書。
[0094]耗材套裝
[0095]在另一實(shí)施方式中，提供了一種用于劃痕實(shí)驗的耗材套裝，所述套裝包括:
[0096](a)第一容器，以及位于所述第一容器內(nèi)的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板與所述腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室，并且在每個培養(yǎng)細(xì)胞的腔室中預(yù)置有細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)；
[0097]其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形，且所述I為0.5— 10cm，所述d為 100-1000μπι;
[0098]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)；
[0099](b)任選的使用說明書。
[0100]優(yōu)選地，所述的耗材套裝還含有第二容器，以及位于所述第二容器內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)插件，其中所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件與所述第一容器中預(yù)置好的細(xì)胞培養(yǎng)插件的規(guī)格是相同的或不同的，所述規(guī)格按所述劃痕擋板的截面積的大小和形狀進(jìn)行劃分。
[0101]測定細(xì)胞迀移能力的方法
[0102]在另一實(shí)施方式中，提供了一種非診斷性和非治療性的測定細(xì)胞迀移能力的方法，包括步驟:
[0103](a)提供劃痕實(shí)驗裝置所述的裝置，其中所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件被放置于所述培養(yǎng)皿或所述培養(yǎng)板的腔室或所述腔室載玻片的腔室中，使得所述細(xì)胞培養(yǎng)插件貼合于所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述培養(yǎng)板、所述腔室載玻片的培養(yǎng)面；
[0104](b)向所述的裝置中添加適量的細(xì)胞懸液；
[0105](C)培養(yǎng)所述的細(xì)胞，直至所述細(xì)胞貼壁且鋪滿或基本鋪滿底部的培養(yǎng)面；
[0106](d)移除所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件，從而形成劃痕空白區(qū)；
[0107](e)繼續(xù)培養(yǎng)所述的細(xì)胞，并觀察和分析所述細(xì)胞的迀移能力。
[0108]優(yōu)選地，在步驟(d)中，移除所述細(xì)胞培養(yǎng)插件后，形成平整的的劃痕空白區(qū)；
[0109]在步驟(e)中，在相同大小的所述腔室中用相同規(guī)格的所述細(xì)胞培養(yǎng)插件所形成的各劃痕空白區(qū)，進(jìn)行定性和/或定量和/或統(tǒng)計分析。
[0110]在另一優(yōu)選例中，在步驟(d)中，移除所述細(xì)胞培養(yǎng)插件后，形成平整的劃痕空白區(qū)，不破壞所述培養(yǎng)皿或所述培養(yǎng)板的腔室或所述腔室載玻片的腔室的底部培養(yǎng)表面，細(xì)胞可在所述培養(yǎng)表面貼壁生長、迀移運(yùn)動。
[0111]在另一優(yōu)選例中，所述的培養(yǎng)面為載玻片表面。
[0112]在另一優(yōu)選例中，在步驟(b)中，所述細(xì)胞懸液的添加量為50-5000毫升/腔室，依據(jù)所用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板、腔室載玻片的具體腔室大小而定。
[0113]在另一優(yōu)選例中，在步驟(b)中，所述細(xì)胞懸液的中細(xì)胞的濃度為IX 14-1X 16個細(xì)胞/ml，具體依據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)胞類型而定。
[0114]在另一優(yōu)選例中，所述的劃痕空白區(qū)的寬度(1為100-100(^111，長度1為0.5 — 10011。
[0115]在另一優(yōu)選例中，所述的培養(yǎng)板包括η個相同或不同大小的腔室。
[0116]在另一優(yōu)選例中，所述的腔室載玻片包括η個相同或不同大小的腔室。
[0117]在另一優(yōu)選例中，在步驟(e)中，所述的分析為定量分析。
[0118]在另一優(yōu)選例中，在步驟(e)中，在相同大小腔室中用相同規(guī)格的所述細(xì)胞培養(yǎng)插件所形成的各劃痕空白區(qū)，進(jìn)行定量和/或統(tǒng)計分析。
[0119]在本實(shí)施方式中，對于同一規(guī)格的兩個插件形成的劃痕空白區(qū)，其相差幅度可按下式計算:
[0120]相差幅度F(%)= 100% X dl-d2|/((dl+d2)/2)
[0121 ]式中，dl為第一個劃痕空白區(qū)的寬度(或跨度)；
[0122]d2為第二個劃痕空白區(qū)的寬度(或跨度)。
[0123]對于同一規(guī)格的η個插件形成的劃痕空白區(qū)，其相差幅度可按下式計算:
[0124]相差幅度F(%) = 100% X dmax—dmin | /(!average
[0125]式中，
[0126]dmax為寬度最大的劃痕空白區(qū)的寬度(或跨度)；
[0127]dmin為寬度最小的劃痕空白區(qū)的寬度(或跨度)；
[0128]daverage為η個劃痕空白區(qū)的平均寬度(或平均跨度)(通常，daverage與同一規(guī)格插件的設(shè)計寬度相同或基本相同)。
[0129]材料和通用方法
[0130]細(xì)胞:人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)。
[0131]培養(yǎng)基:內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基，10%胎牛血清。
[0132]培養(yǎng)方法:37°C，5%CO2，于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
[0133]細(xì)胞迀移測定:顯微鏡獲取實(shí)驗圖像，ImageJ軟件或者WimScratch軟件分析空白區(qū)域的覆蓋面積。
[0134]需要說明的是，在本專利的權(quán)利要求和說明書中，諸如第一和第二等之類的關(guān)系術(shù)語僅僅用來將一個實(shí)體或者操作與另一個實(shí)體或操作區(qū)分開來，而不一定要求或者暗示這些實(shí)體或操作之間存在任何這種實(shí)際的關(guān)系或者順序。而且，術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設(shè)備不僅包括那些要素，而且還包括沒有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個”限定的要素，并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。
[0135]本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)包括:
[0136](a)本發(fā)明細(xì)胞培養(yǎng)插件的結(jié)構(gòu)合理，非常適用于劃痕實(shí)驗。
[0137](b)用本發(fā)明細(xì)胞培養(yǎng)插件進(jìn)行劃痕實(shí)驗時，操作簡單、節(jié)約時間。
[0138](c)本發(fā)明可形成寬度一定(如200微米、300微米、500微米等)、區(qū)域明顯的空白區(qū)(即類似于常規(guī)的劃痕區(qū))，易于進(jìn)行定量分析。
[0139](d)用本發(fā)明細(xì)胞培養(yǎng)插件進(jìn)行的劃痕實(shí)驗，重復(fù)性非常高。
[0140](e)本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)插件基于優(yōu)異的牢固性:在跌落實(shí)驗中，將插件固定后的細(xì)胞培養(yǎng)皿倒置，本發(fā)明插件不會跌落;此外，加入細(xì)胞懸液后，在有溶液的情況下，培養(yǎng)48小時后(滿足劃痕實(shí)驗所需的時長)，不會發(fā)生漏液。
[0141](f)本發(fā)明細(xì)胞培養(yǎng)插件固定于細(xì)胞培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或腔室載玻片中后，外包裝處理后，可以進(jìn)行長途運(yùn)輸，保持無菌環(huán)境，插件不會脫落。
[0142]下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)是重量百分比和重量份數(shù)。
[0143]實(shí)施例1
[0144]采用培養(yǎng)皿進(jìn)行劃痕實(shí)驗
[0145]圖1為本實(shí)施例中劃痕實(shí)驗裝置的結(jié)構(gòu)示意圖，圖2為本實(shí)施例中劃痕實(shí)驗時形成的劃痕空白區(qū)的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0146]如圖1所示，本實(shí)施例提供了一種用于劃痕實(shí)驗的裝置，所述裝置包括:
[0147](a)用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)皿7;
[0148](b)細(xì)胞培養(yǎng)插件8，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件8具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件8設(shè)有一個用于形成劃痕空白區(qū)9的劃痕擋板6以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件8的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板I和第二支撐擋板2固定于所述劃痕擋板6的一端，而第三支撐擋板3和第四支撐擋板4固定于所述劃痕擋板6的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)。
[0149]其中，所述的劃痕擋板6的截面為長度I，寬度d的矩形。
[0150]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件8置于所述的培養(yǎng)皿7中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件8的底面與所述培養(yǎng)皿7的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板6的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)9。
[0151 ] 本實(shí)施例中，所述I為3cm，所述d為500μηι。
[0152]所述第一支撐擋板I和第二支撐擋板2之間的夾角a以及所述第三支撐擋板3和第四支撐擋板4之間的夾角b為180度。
[0153]所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件8通過靜電相互作用使其貼在培養(yǎng)皿7的培養(yǎng)面，且所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件8與所述培養(yǎng)皿7之間的吸附力大于所述細(xì)胞培養(yǎng)插件8的重力。
[0154]所述的各支撐擋板是相同的，且各支撐擋板的截面為長條型。
[0155]所述的各支撐擋板與培養(yǎng)皿7的培養(yǎng)面形成的貼合接觸面的面積Sz為10mm2。
[0156]所述的支撐擋板的截面為矩形，并且對應(yīng)于所述支撐擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成輔助劃痕空白區(qū)9。
[0157]所述培養(yǎng)皿7為直徑為6cm培養(yǎng)表面大小的培養(yǎng)皿7。
[0158]所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件8為生物兼容性的硅膠插件8，且所述硅膠插件8的底部固定寬度為500μηι。
[0159]所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件8的上部和下部由不同材料構(gòu)成:上部采用是粗糙的材料，而下部使用的是較細(xì)膩的材料。
[0160]對實(shí)施例1中的裝置進(jìn)行如下實(shí)驗:
[0161](a)將細(xì)胞培養(yǎng)插件8固定后的細(xì)胞培養(yǎng)皿7倒置；
[0162](b)向培養(yǎng)皿7內(nèi)一次性加入所需的細(xì)胞懸液，添加量為1000微升，細(xì)胞的濃度為IX 15個細(xì)胞/ml，培養(yǎng)48小時后(滿足劃痕實(shí)驗所需的時長)，移除細(xì)胞培養(yǎng)插件8;
[0163](c)將細(xì)胞培養(yǎng)插件8固定于培養(yǎng)皿7，外包裝處理后，進(jìn)行長途運(yùn)輸。
[0164]經(jīng)過相關(guān)實(shí)驗人員跟蹤實(shí)驗，得到如下結(jié)果:
[0165](a)將細(xì)胞培養(yǎng)皿7倒置，細(xì)胞培養(yǎng)插件8不會跌落；
[0166](b)培養(yǎng)48小時后，細(xì)胞培養(yǎng)插件8不會發(fā)生漏液，移除細(xì)胞培養(yǎng)插件8，劃痕空白區(qū)9明顯，且劃痕空白區(qū)9寬度一致為500微米(如圖2所示)，細(xì)胞生長狀態(tài)良好；
[0167](c)長途運(yùn)輸過程中，細(xì)胞培養(yǎng)插件8不會脫落。
[0168]對比例I
[0169]采用和實(shí)施例1相同的裝置(包括材質(zhì)、規(guī)格)，不同之處在于:對比例I中的細(xì)胞培養(yǎng)插件為“日”型結(jié)構(gòu);對比例I中的細(xì)胞培養(yǎng)插件通過膠處理與培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面相貼合。
[0170]對對比例I中的裝置進(jìn)行如下實(shí)驗:
[0171](a’)將細(xì)胞培養(yǎng)插件固定于細(xì)胞培養(yǎng)皿，然后移除；
[0172](b’)向培養(yǎng)皿內(nèi)加入預(yù)處理的細(xì)胞懸液，培養(yǎng)48小時后，移除細(xì)胞培養(yǎng)插件，加入細(xì)胞培養(yǎng)液；
[0173](c’)將細(xì)胞培養(yǎng)插件固定于培養(yǎng)皿，外包裝處理后，進(jìn)行長途運(yùn)輸。
[0174]經(jīng)過相關(guān)實(shí)驗人員跟蹤實(shí)驗，得到如下結(jié)果:
[0175](a’)用膠處理將插件固定于培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面，移除插件時不易于操作，會破壞培養(yǎng)面的親水性、光滑度等特性，不利于貼壁細(xì)胞的生長，進(jìn)而容易造成細(xì)胞迀移能力差的陰性結(jié)果；
[0176](b ’)培養(yǎng)48小時后，細(xì)胞生長緩慢，移除細(xì)胞培養(yǎng)插件，加入細(xì)胞培養(yǎng)液后，細(xì)胞的生長狀態(tài)不好；
[0177](c’)長途運(yùn)輸過程中，細(xì)胞培養(yǎng)插件會脫落。
[0178]上述結(jié)果表明:本發(fā)明的“工”字形的插件8構(gòu)造非常有利于細(xì)胞的生長;本發(fā)明的插件8可形成寬度一定、區(qū)域明顯的劃痕空白區(qū)9，易于進(jìn)行定量分析;本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)插件8通過靜電作用固定于細(xì)胞培養(yǎng)皿7，倒置時不會跌落，長途運(yùn)輸時，插件8不會脫落;本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)插件8固定于細(xì)胞培養(yǎng)皿7，在有溶液的情況下，培養(yǎng)48小時后，不會發(fā)生漏液，且細(xì)胞生長狀態(tài)良好。
[0179]實(shí)施例2
[0180]采用培養(yǎng)皿進(jìn)行劃痕實(shí)驗
[0181]圖3為本實(shí)施例中劃痕實(shí)驗裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0182]如圖3所示，在本實(shí)施例中，采用實(shí)施例1中相同的裝置，不同點(diǎn)在于:本實(shí)施例中，細(xì)胞培養(yǎng)插件8的第一支撐擋板I和第二支撐擋板2之間的夾角a以及所述第三支撐擋板3和第四支撐擋板4之間的夾角b為60度;劃痕擋板6的截面長度I為4cm，寬度d為350μπι。
[0183]細(xì)胞培養(yǎng)6-8小時，待細(xì)胞基本鋪滿細(xì)胞培養(yǎng)面后，移去所述的插件8。
[0184]然后，在相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)6-10小時，顯微鏡獲取實(shí)驗圖像，軟件分析劃痕空白區(qū)的覆蓋面積。
[0185]結(jié)果:插件8移除后，形成明顯的大小(寬度)為350微米的劃痕空白區(qū)。
[0186]實(shí)施例3
[0187]采用2孔腔室的載玻片進(jìn)行劃痕實(shí)驗
[0188]圖4為本實(shí)施例中劃痕實(shí)驗裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0189]如圖4所示，在本實(shí)施例中，采用實(shí)施例1中相同的細(xì)胞培養(yǎng)插件8，不同點(diǎn)在于，采用具有2孔腔室10的載玻片11替代實(shí)施例1中的培養(yǎng)皿7，并在每個腔室10中分別放置一個“工”型插件8，“工”型插件8的尺寸同實(shí)施例1。
[0190]細(xì)胞培養(yǎng)6-8小時，待細(xì)胞基本鋪滿細(xì)胞培養(yǎng)面后，移去所述的“工”型插件8。
[0191]然后，在相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)6-10小時，顯微鏡獲取實(shí)驗圖像，軟件分析劃痕空白區(qū)的覆蓋面積。
[0192]結(jié)果:2個孔腔室10內(nèi)的插件8移除后，均形成明顯的大小(寬度)為500微米的劃痕空白區(qū)，且兩個劃痕空白區(qū)的寬度dl和d2兩者相差幅度< I %。
[0193]實(shí)施例4
[0194]采用4孔腔室的載玻片進(jìn)行劃痕實(shí)驗
[0195]在本實(shí)施例中，采用實(shí)施例1中相同的細(xì)胞培養(yǎng)插件，不同點(diǎn)在于，采用具有4孔腔室的載玻片替代實(shí)施例1中的培養(yǎng)皿，并在每個腔室中分別放置一個“工”型插件，“工”型插件的尺寸同實(shí)施例1。
[0196]細(xì)胞培養(yǎng)6-8小時，待細(xì)胞基本鋪滿細(xì)胞培養(yǎng)面后，移去所述的“工”型插件。
[0197]然后，在相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)6-10小時，顯微鏡獲取實(shí)驗圖像，軟件分析劃痕空白區(qū)的覆蓋面積。
[0198]結(jié)果:4個孔腔內(nèi)的插件移除后，均形成明顯的大小(寬度)為500微米的劃痕空白區(qū)，且4個劃痕空白區(qū)的寬度dl、d2、d3和d4之間的相差幅度<1%。
[0199]將“工”型插件放于2孔、4孔、8孔等不同腔室載玻片中，好處如下:節(jié)約細(xì)胞(培養(yǎng)皿需要的細(xì)胞量多，浪費(fèi));方便做對照實(shí)驗、重復(fù)實(shí)驗;在同一個載玻片上，易于操作;節(jié)約成本;同樣大小的插件設(shè)計使得在不同腔室載玻片中進(jìn)行實(shí)驗，在進(jìn)行不同批次的實(shí)驗時，不受培養(yǎng)耗材的限制和約束，實(shí)驗結(jié)果具有可比性。
[0200]實(shí)施例5
[0201]本實(shí)施例提供了一種用于劃痕實(shí)驗的耗材套裝，所述套裝包括:i02Q2] (a)第一容器，以及位于所述第一容器內(nèi)的培養(yǎng)皿；
[0203](b)第二容器，以及位于所述第二容器內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)。
[0204]其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形，且所述I為3cm，所述d為500μmD
[0205]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)。
[0206]實(shí)施例6
[0207]本實(shí)施例提供了一種用于劃痕實(shí)驗的耗材套裝，所述套裝包括:
[0208](a)第一容器，以及位于所述第一容器內(nèi)的培養(yǎng)板，其中所述的培養(yǎng)板具有多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室，并且在每個培養(yǎng)細(xì)胞的腔室中預(yù)置有細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)；
[0209]其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形，且所述I為8cm，所述d為800μm；
[0210]并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)；
[0211](b)第二容器，以及位于所述第二容器內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)插件，其中所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件與所述第一容器中預(yù)置好的細(xì)胞培養(yǎng)插件的規(guī)格是相同的，所述規(guī)格按所述劃痕擋板的截面積的大小和形狀進(jìn)行劃分。
[0212]在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
【主權(quán)項】
1.一種用于劃痕實(shí)驗的裝置，其特征在于，所述裝置包括: (a)用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板以及腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室； (b)細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)； 其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形； 并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，所述I為0.5— 10?11，所述(1為100-100(^111。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，所述第一支撐擋板和第二支撐擋板之間的夾角a以及所述第三支撐擋板和第四支撐擋板之間的夾角b為30-330度。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件與所述培養(yǎng)皿之間的吸附力大于所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的重力。5.一種用于劃痕實(shí)驗的耗材套裝，其特征在于，所述套裝包括: (a)第一容器，以及位于所述第一容器內(nèi)的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板與所述的腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室； (b)第二容器，以及位于所述第二容器內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)； 其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形，且所述I為0.5 — 10cm，所述d為ΙΟΟ-ΙΟΟΟμπι; 并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)； (C)任選的使用說明書。6.一種用于劃痕實(shí)驗的耗材套裝，其特征在于，所述套裝包括: (a)第一容器，以及位于所述第一容器內(nèi)的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板或腔室載玻片，其中所述的培養(yǎng)板與所述腔室載玻片具有一個或多個用于培養(yǎng)細(xì)胞的腔室，并且在每個培養(yǎng)細(xì)胞的腔室中預(yù)置有細(xì)胞培養(yǎng)插件，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件具有“工”字型結(jié)構(gòu)，并且具有平坦的底面，其中所述細(xì)胞培養(yǎng)插件設(shè)有至少一個用于形成劃痕空白區(qū)的劃痕擋板以及用于支撐所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的四個支撐擋板，其中第一支撐擋板和第二支撐擋板固定于所述劃痕擋板的一端，而第三支撐擋板和第四支撐擋板固定于所述劃痕擋板的另一端，從而形成“工”型結(jié)構(gòu)； 其中，所述的劃痕擋板的截面為長度I，寬度d的矩形，且所述I為0.5 — 10cm，所述d為ΙΟΟ-ΙΟΟΟμπι; 并且，當(dāng)所述細(xì)胞培養(yǎng)插件置于所述的培養(yǎng)皿或置于所述的腔室中，所述細(xì)胞培養(yǎng)插件的底面與所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述的腔室的培養(yǎng)面形成貼合接觸面，并且對應(yīng)于所述的劃痕擋板的貼合接觸面在劃痕實(shí)驗中形成劃痕空白區(qū)； (b)任選的使用說明書。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的耗材套裝，其特征在于，所述的耗材套裝還含有第二容器，以及位于所述第二容器內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)插件，其中所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件與所述第一容器中預(yù)置好的細(xì)胞培養(yǎng)插件的規(guī)格是相同的或不同的，所述規(guī)格按所述劃痕擋板的截面積的大小和形狀進(jìn)行劃分。8.一種非診斷性和非治療性的測定細(xì)胞迀移能力的方法，其特征在于，包括步驟: (a)提供權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件被放置于所述培養(yǎng)皿或所述培養(yǎng)板的腔室或所述腔室載玻片的腔室中，使得所述細(xì)胞培養(yǎng)插件貼合于所述培養(yǎng)皿的培養(yǎng)面或所述培養(yǎng)板、所述腔室載玻片的培養(yǎng)面； (b)向所述的裝置中添加適量的細(xì)胞懸液； (c)培養(yǎng)所述的細(xì)胞，直至所述細(xì)胞貼壁且鋪滿或基本鋪滿底部的培養(yǎng)面； (d)移除所述的細(xì)胞培養(yǎng)插件，從而形成劃痕空白區(qū)； (e)繼續(xù)培養(yǎng)所述的細(xì)胞，并觀察和分析所述細(xì)胞的迀移能力。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，在步驟(d)中，移除所述細(xì)胞培養(yǎng)插件后，形成平整的的劃痕空白區(qū)； 在步驟(e)中，在相同大小的所述腔室中用相同規(guī)格的所述細(xì)胞培養(yǎng)插件所形成的各劃痕空白區(qū)，進(jìn)行定性和/或定量和/或統(tǒng)計分析。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，在步驟(d)中，移除所述細(xì)胞培養(yǎng)插件后，形成平整的劃痕空白區(qū)，不破壞所述培養(yǎng)皿或所述培養(yǎng)板的腔室或所述腔室載玻片的腔室的底部培養(yǎng)表面，細(xì)胞可在所述培養(yǎng)表面貼壁生長、迀移運(yùn)動。
【文檔編號】C12Q1/02GK105838607SQ201610364871
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年5月27日
【發(fā)明人】王天哲, 王玉萍, 李彩紅
【申請人】上海臻和生物科技有限公司