一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物提取的技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，包括：步驟一，干燥；步驟二，粉碎；步驟三，配制酶溶液；步驟四，酶解；步驟五，超聲提?。徊襟E六，濃縮；步驟七，乙醚萃取和濃縮；步驟八，冷凍干燥。該從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有提取率高、提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)，其中，每千克的西蘭花能夠得到8mg~12mg的異硫氰酸芐酯粗品。另外，該從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有環(huán)保、能耗低、安全性好、工藝簡單、可操作性強(qiáng)和生產(chǎn)成本低的優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】
一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物提取的技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]西蘭花(Brassica oleracea L.var.botrytis L)，為十字花科、蕓薹屬I?2年生草本植物，富含蛋白質(zhì)、糖、脂肪、維生素和胡蘿卜素等，營養(yǎng)成份位居同類蔬菜之首，被譽(yù)為“蔬菜皇冠”，同時(shí)它含有異硫氰酸酯類化合物，因此還具有抗癌功效，其功效已被世界認(rèn)可，具有很高的藥用價(jià)值。
[0003]異硫氰酸酯是有R-N=C=S結(jié)構(gòu)通式的一類化合物。它廣泛存在于十字花科植物中，如:西藍(lán)花、花椰菜、芥藍(lán)等，代表物主要有:異硫氰酸芐酯、異硫氰酸丙烯基酯、蘿卜硫素等，具有有效的抗癌活性。近年來，國內(nèi)外研究表明，西藍(lán)花中含有異硫氰酸芐酯，且藥理活性廣泛，抗癌、抗炎活性已被認(rèn)證。
[0004]異硫氰酸芐酯是十字花科植物中次級代謝產(chǎn)物，在植物細(xì)胞中以前體形式存在，細(xì)胞破裂經(jīng)黑芥子酶催化得到。目前異硫氰酸芐酯主要有化學(xué)合成法和天然提取法，但化學(xué)合成法工藝復(fù)雜，設(shè)備及成本高，所用的化學(xué)物質(zhì)大都有毒，安全系數(shù)低，產(chǎn)品有一定的毒副作用。另外，現(xiàn)有技術(shù)中的天然提取法存在工藝復(fù)雜、提取時(shí)間長、提取率低的缺陷。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處而提供一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，該方法具有工藝簡單、提取時(shí)間短和提取率高的優(yōu)點(diǎn)。
[0006]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。
[0007]提供一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，它包括以下步驟:
步驟一，干燥:將西蘭花脫水處理，然后在一定溫度下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花； 步驟二，粉碎:將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎，得到西蘭花干粉；
步驟三，配制酶溶液:將黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C和EDTA加入到一定量的水中進(jìn)行溶解并混合均勻后，制得酶溶液；
步驟四，酶解:將步驟二得到的西蘭花干粉加入到步驟三的酶溶液中，攪拌均勻，在一定溫度下酶解一定時(shí)間后，得到酶解液；
步驟五，超聲提取:將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在一定溫度下進(jìn)行超聲波振蕩提取一定時(shí)間，然后靜置一定時(shí)間后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行濾去殘?jiān)?，得到濾液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液；
步驟六，濃縮:將步驟五制得的粗提液在一定溫度下進(jìn)行濃縮以除去乙醇，得到粗提水溶液；
步驟七，乙醚萃取和濃縮:將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在一定溫度下進(jìn)行濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物；
步驟八，冷凍干燥:將步驟七得到的膏狀粗提物進(jìn)行冷凍干燥至恒重，即制得異硫氰酸芐酯粗品。
[0008]上述技術(shù)方案中，所述步驟一干燥步驟，將西蘭花于70°080°C下進(jìn)行脫水Ih?3h，然后在50°065°C下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花。
[0009]上述技術(shù)方案中，所述步驟二粉碎步驟，將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎至40目?80目，得到西蘭花干粉。
[0010]上述技術(shù)方案中，所述步驟三配制酶溶液步驟中，所述黑芥子酶、所述纖維素酶、所述果膠酶、所述維生素C、所述EDTA和所述水之間的質(zhì)量比為4?6:1-3:1-3:1.5-4: 2-4:9?
12ο
[0011]上述技術(shù)方案中，所述步驟四酶解步驟中，所述西蘭花干粉與所述酶溶液的質(zhì)量體積比為I g/mL-4g/mL，所述酶解溫度為35 °C-75 °C,所述酶解時(shí)間為Ih?5h。
[0012]上述技術(shù)方案中，所述步驟五超聲提取步驟，將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在40°050°C下進(jìn)行超聲波振蕩提取0.5h~2.5h，然后靜置Smin?12min后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行過20目?40目篩以濾去殘?jiān)玫綖V液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液；
所述超聲波的功率為250W?450W。
[0013]上述技術(shù)方案中，所述步驟五超聲提取步驟中，所述酶解液與所述無水乙醇的體積比為I?2:3?5。
[0014]上述技術(shù)方案中，所述步驟六濃縮步驟，將步驟五制得的粗提液先在450C-550C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除去大部分的乙醇，再在60°c>7(rc下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除盡乙醇，得到粗提水溶液。
[0015]上述技術(shù)方案中，所述步驟七乙醚萃取和濃縮步驟，將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取2次?3次，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在45°C>55°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物；
所述粗提水溶液與所述乙醚的體積比為0.5-1.5:1-3。
[0016]上述技術(shù)方案中，所述步驟八冷凍干燥步驟中，所述冷凍溫度為-35°C>-45°C。
[0017]本發(fā)明的有益效果:
(I)本發(fā)明提供的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，由于以黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C和EDTA配制酶溶液，其中，纖維素酶、果膠酶用于破壞植物細(xì)胞壁，并使細(xì)胞內(nèi)的異硫氰酸芐酯的前體物質(zhì)更好地釋放，黑芥子酶與異硫氰酸芐酯的前體物質(zhì)充分接觸，以促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的相關(guān)酶促反應(yīng)，使異硫氰酸芐酯的前體物質(zhì)更好地向異硫氰酸芐酯轉(zhuǎn)化，進(jìn)而能提高異硫氰酸芐酯的提取率，增加產(chǎn)量，另外，維生素C和EDTA的作用都是用于提高黑芥子酶、纖維素酶和果膠酶的活力，以加快反應(yīng)速率。因此，該從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有提取率高、提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)，其中，每千克的西蘭花能夠得到8mg?12mg的異硫氰酸節(jié)酯粗品。
[0018](2)本發(fā)明提供的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，由于以無水乙醇作為溶劑，并以超聲波進(jìn)行提取，另外使用乙醚進(jìn)行萃取，其中，無水乙醇和乙醚均能夠通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮除去，因此，該從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有環(huán)保、能耗低、安全性好的優(yōu)點(diǎn)，并且，該方法具有工藝簡單、提取時(shí)間短、可操作性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。
[0019](3)本發(fā)明提供的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，由于是以日常蔬菜西蘭花作為原料，西蘭花價(jià)格便宜且資源豐富，因此，該從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有生產(chǎn)成本低，且能夠適用于大規(guī)模生產(chǎn)的特點(diǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0020]為了使本發(fā)明所解決的技術(shù)問題、技術(shù)方案及有益效果更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0021]其中，本發(fā)明提及的EDTA為乙二胺四乙酸。
[0022]實(shí)施例1。
[0023]本實(shí)施例的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，它包括以下步驟:
步驟一，干燥:將西蘭花于75 °C下進(jìn)行脫水2h，然后在55 °C下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花；
步驟二，粉碎:將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎至60目，得到西蘭花干粉；步驟三，配制酶溶液:將黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C和EDTA加入到一定量的水中進(jìn)行溶解并混合均勻后，制得酶溶液;本實(shí)施例中，黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C、EDTA和水之間的質(zhì)量比為5:2:2:2.8:2.92:10；
步驟四，酶解:將步驟二得到的西蘭花干粉加入到步驟三的酶溶液中，攪拌均勻，在450C下酶解3h后，得到酶解液;本實(shí)施例中，西蘭花干粉與酶溶液的質(zhì)量體積比為2g/mL;
步驟五，超聲提取:將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在45°C下進(jìn)行超聲波振蕩提取1.5h，然后靜置1min后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行過30目篩以濾去殘?jiān)?，得到濾液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液;本實(shí)施例中，超聲波的功率為300W，酶解液與無水乙醇的體積比為1.5:4;
步驟六，濃縮:將將步驟五制得的粗提液先在50°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除去大部分的乙醇，再在65°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除盡乙醇，得到粗提水溶液；
步驟七，乙醚萃取和濃縮:將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取2次，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在50°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物;本實(shí)施例中，粗提水溶液與乙醚的體積比為I: 2;
步驟八，冷凍干燥:將步驟七得到的膏狀粗提物進(jìn)行冷凍干燥至恒重，即制得異硫氰酸芐酯粗品。本實(shí)施例中，冷凍溫度為-40°C。
[0024]本實(shí)施例中，從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有工藝簡單、提取時(shí)間短、提取率高和可操作性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)施例中，每千克的西蘭花能夠得到1mg的異硫氰酸芐酯粗品O
[0025]實(shí)施例2。
[0026]本實(shí)施例的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，它包括以下步驟:
步驟一，干燥:將西蘭花于70 0C下進(jìn)行脫水3h，然后在50 0C下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花；
步驟二，粉碎:將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎至40目，得到西蘭花干粉； 步驟三，配制酶溶液:將黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C和EDTA加入到一定量的水中進(jìn)行溶解并混合均勻后，制得酶溶液;本實(shí)施例中，黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C、EDTA和水之間的質(zhì)量比為4:1:1:1.5:2:9；
步驟四，酶解:將步驟二得到的西蘭花干粉加入到步驟三的酶溶液中，攪拌均勻，在350C下酶解5h后，得到酶解液;本實(shí)施例中，西蘭花干粉與酶溶液的質(zhì)量體積比為lg/mL;
步驟五，超聲提取:將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在40°C下進(jìn)行超聲波振蕩提取2.5h，然后靜置Smin后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行過20目篩以濾去殘?jiān)玫綖V液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液;本實(shí)施例中，超聲波的功率為250W，酶解液與無水乙醇的體積比為1:3;
步驟六，濃縮:將將步驟五制得的粗提液先在45°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除去大部分的乙醇，再在60°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除盡乙醇，得到粗提水溶液；
步驟七，乙醚萃取和濃縮:將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取3次，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在45°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物;本實(shí)施例中，粗提水溶液與乙醚的體積比為0.5:1;
步驟八，冷凍干燥:將步驟七得到的膏狀粗提物進(jìn)行冷凍干燥至恒重，即制得異硫氰酸芐酯粗品。本實(shí)施例中，冷凍溫度為-35°C。
[0027]本實(shí)施例中，從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有工藝簡單、提取時(shí)間短、提取率高和可操作性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)施例中，每千克的西蘭花能夠得到Smg的異硫氰酸芐酯粗品O
[0028]實(shí)施例3。
[0029]本實(shí)施例的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，它包括以下步驟:
步驟一，干燥:將西蘭花于80 0C下進(jìn)行脫水Ih，然后在65 °C下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花；
步驟二，粉碎:將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎至80目，得到西蘭花干粉；步驟三，配制酶溶液:將黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C和EDTA加入到一定量的水中進(jìn)行溶解并混合均勻后，制得酶溶液;本實(shí)施例中，黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C、EDTA和水之間的質(zhì)量比為6:3:3:4:4:12;
步驟四，酶解:將步驟二得到的西蘭花干粉加入到步驟三的酶溶液中，攪拌均勻，在750C下酶解Ih后，得到酶解液;本實(shí)施例中，西蘭花干粉與酶溶液的質(zhì)量體積比為4g/mL;
步驟五，超聲提取:將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在50°C下進(jìn)行超聲波振蕩提取0.5h，然后靜置12min后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行過40目篩以濾去殘?jiān)?，得到濾液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液;本實(shí)施例中，超聲波的功率為450W，酶解液與無水乙醇的體積比為2:5;
步驟六，濃縮:將將步驟五制得的粗提液先在55°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除去大部分的乙醇，再在70°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除盡乙醇，得到粗提水溶液；
步驟七，乙醚萃取和濃縮:將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取3次，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在55°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物;本實(shí)施例中，粗提水溶液與乙醚的體積比為1.5:3；
步驟八，冷凍干燥:將步驟七得到的膏狀粗提物進(jìn)行冷凍干燥至恒重，即制得異硫氰酸芐酯粗品。本實(shí)施例中，冷凍溫度為-45°C。
[0030]本實(shí)施例中，從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有工藝簡單、提取時(shí)間短、提取率高和可操作性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)施例中，每千克的西蘭花能夠得到12mg的異硫氰酸芐酯粗品O
[0031]實(shí)施例4。
[0032]本實(shí)施例的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，它包括以下步驟:
步驟一，干燥:將西蘭花于73 °C下進(jìn)行脫水2.5h，然后在53 °C下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花；
步驟二，粉碎:將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎至50目，得到西蘭花干粉；步驟三，配制酶溶液:將黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C和EDTA加入到一定量的水中進(jìn)行溶解并混合均勻后，制得酶溶液;本實(shí)施例中，黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C、EDTA和水之間的質(zhì)量比為5:1:3:2:2:11；
步驟四，酶解:將步驟二得到的西蘭花干粉加入到步驟三的酶溶液中，攪拌均勻，在400C下酶解4h后，得到酶解液;本實(shí)施例中，西蘭花干粉與酶溶液的質(zhì)量體積比為1.5g/mL;
步驟五，超聲提取:將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在43°C下進(jìn)行超聲波振蕩提取2h，然后靜置9min后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行過25目篩以濾去殘?jiān)?，得到濾液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液;本實(shí)施例中，超聲波的功率為280W，酶解液與無水乙醇的體積比為1.2:3.5；
步驟六，濃縮:將將步驟五制得的粗提液先在48 °C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除去大部分的乙醇，再在63°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除盡乙醇，得到粗提水溶液；
步驟七，乙醚萃取和濃縮:將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取2次，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在48°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物;本實(shí)施例中，粗提水溶液與乙醚的體積比為0.8:1.5;
步驟八，冷凍干燥:將步驟七得到的膏狀粗提物進(jìn)行冷凍干燥至恒重，即制得異硫氰酸芐酯粗品。本實(shí)施例中，冷凍溫度為-38°C。
[0033]本實(shí)施例中，從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有工藝簡單、提取時(shí)間短、提取率高和可操作性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)施例中，每千克的西蘭花能夠得到9mg的異硫氰酸芐酯粗品O
[0034]實(shí)施例5。
[0035]本實(shí)施例的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，它包括以下步驟:
步驟一，干燥:將西蘭花于780C下進(jìn)行脫水1.5h，然后在600C下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花；
步驟二，粉碎:將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎至70目，得到西蘭花干粉；步驟三，配制酶溶液:將黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C和EDTA加入到一定量的水中進(jìn)行溶解并混合均勻后，制得酶溶液;本實(shí)施例中，黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C、EDTA和水之間的質(zhì)量比為4:1:3:1.5:3:9；
步驟四，酶解:將步驟二得到的西蘭花干粉加入到步驟三的酶溶液中，攪拌均勻，在600C下酶解2h后，得到酶解液;本實(shí)施例中，西蘭花干粉與酶溶液的質(zhì)量體積比為3g/mL;
步驟五，超聲提取:將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在48°C下進(jìn)行超聲波振蕩提取0.8，然后靜置Ilmin后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行過35目篩以濾去殘?jiān)?，得到濾液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液;本實(shí)施例中，超聲波的功率為400W，酶解液與無水乙醇的體積比為1.7:4.5;
步驟六，濃縮:將將步驟五制得的粗提液先在53°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除去大部分的乙醇，再在68°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除盡乙醇，得到粗提水溶液；
步驟七，乙醚萃取和濃縮:將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取2次，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在53°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物;本實(shí)施例中，粗提水溶液與乙醚的體積比為1.2:2.5；
步驟八，冷凍干燥:將步驟七得到的膏狀粗提物進(jìn)行冷凍干燥至恒重，即制得異硫氰酸芐酯粗品。本實(shí)施例中，冷凍溫度為-43°C。
[0036]本實(shí)施例中，從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法具有工藝簡單、提取時(shí)間短、提取率高和可操作性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)施例中，每千克的西蘭花能夠得到Ilmg的異硫氰酸芐酯粗品。
[0037]最后應(yīng)當(dāng)說明的是，以上實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:它包括以下步驟: 步驟一，干燥:將西蘭花脫水處理，然后在一定溫度下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花； 步驟二，粉碎:將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎，得到西蘭花干粉； 步驟三，配制酶溶液:將黑芥子酶、纖維素酶、果膠酶、維生素C和EDTA加入到一定量的水中進(jìn)行溶解并混合均勻后，制得酶溶液； 步驟四，酶解:將步驟二得到的西蘭花干粉加入到步驟三的酶溶液中，攪拌均勻，在一定溫度下酶解一定時(shí)間后，得到酶解液； 步驟五，超聲提取:將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在一定溫度下進(jìn)行超聲波振蕩提取一定時(shí)間，然后靜置一定時(shí)間后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行濾去殘?jiān)玫綖V液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液； 步驟六，濃縮:將步驟五制得的粗提液在一定溫度下進(jìn)行濃縮以除去乙醇，得到粗提水溶液； 步驟七，乙醚萃取和濃縮:將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在一定溫度下進(jìn)行濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物； 步驟八，冷凍干燥:將步驟七得到的膏狀粗提物進(jìn)行冷凍干燥至恒重，即制得異硫氰酸節(jié)酷粗品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟一干燥步驟，將西蘭花于70 °080°C下進(jìn)行脫水Ih?3h，然后在50 °C~65°C下烘干至恒重，得到干燥的西蘭花。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟二粉碎步驟，將步驟一得到的干燥的西蘭花進(jìn)行粉碎至40目?80目，得到西蘭花干粉。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟三配制酶溶液步驟中，所述黑芥子酶、所述纖維素酶、所述果膠酶、所述維生素C、所述EDTA和所述水之間的質(zhì)量比為4?6:1~3:1~3:1.5~4:2~4:9~12。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟四酶解步驟中，所述西蘭花干粉與所述酶溶液的質(zhì)量體積比為lg/mL?4g/mL，所述酶解溫度為35 °C-75 °C,所述酶解時(shí)間為Ih?5h。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟五超聲提取步驟，將步驟四得到的酶解液加入到無水乙醇中，然后在40°050°(:下進(jìn)行超聲波振蕩提取0.5h~2.5h，然后靜置Smin?12min后，得到提取物，再將所得到的提取物進(jìn)行過20目?40目篩以濾去殘?jiān)?，得到濾液，并將所得到的濾液進(jìn)行真空抽濾以除去雜質(zhì)，制得粗提液； 所述超聲波的功率為250W?450W。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟五超聲提取步驟中，所述酶解液與所述無水乙醇的體積比為I?2:3?5。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟六濃縮步驟，將步驟五制得的粗提液先在45°C>55°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除去大部分的乙醇，再在60°070°(:下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮以除盡乙醇，得到粗提水溶液。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟七乙醚萃取和濃縮步驟，將步驟六得到的粗提水溶液加入到乙醚中進(jìn)行萃取2次?3次，以除去水分，得到乙醚相，然后將乙醚相在45°C>55°C下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至膏狀，以除去乙醚，得到膏狀粗提物； 所述粗提水溶液與所述乙醚的體積比為0.5-1.5:1-3。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從西蘭花中提取異硫氰酸芐酯的方法，其特征在于:所述步驟八冷凍干燥步驟中，所述冷凍溫度為-35°C>-45°C。
【文檔編號】C12P13/00GK105886564SQ201610291701
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年5月5日
【發(fā)明人】李寶紅, 李福美, 彭新生, 王家平
【申請人】廣東醫(yī)學(xué)院