一種用于評估皮膚防曬情況的引物和探針及試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于評估皮膚防曬情況的引物和探針及試劑盒。所述引物和探針的序列SEQ ID NO:1?4，和SEQ ID NO:5?8，和SEQ ID NO:9?12，和SEQ ID NO:13?16；其中SEQ ID NO:3?4,7?8,11?12,15?16的5’端和3’端分別連接不同熒光標記。還公開了利用基因檢測輔助客戶選擇正確美容方法的方法。了解皮膚曬斑、雀斑和色素積淀的內(nèi)因和外因，為其提供個性化美容健康解決方案，使防曬美容產(chǎn)品效果最大化。
【專利說明】
一種用于評估皮膚防曬情況的引物和探針及試劑盒
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及美容領(lǐng)域，尤其涉及一種用于評估皮膚防曬情況的引物和探針及試劑 盒。
【背景技術(shù)】
[0002] SNP(單核苷酸多態(tài)性)是指在基因組上單個核苷酸的變異，包括轉(zhuǎn)換、顛換、缺失 和插入，是一種最常見的遺傳標記，在人群中的攜帶頻率大于1%，廣泛應(yīng)用于人類疾病診 斷、藥物個體化使用、生物學(xué)基礎(chǔ)研究等領(lǐng)域。隨著對不同SNP位點研究的深入，通過多個 SNP位點的組合檢測以及后續(xù)的數(shù)據(jù)分析，可以針對不同人群的基因信息制定個性化健康 解決方案。
[0003] 人體的皮膚外觀受到內(nèi)因和外因的影響，外因包括紫外線、環(huán)境污染、不當美容產(chǎn) 品使用等，內(nèi)因則體現(xiàn)在與皮膚相關(guān)的生化變化，包括蛋白活性、荷爾蒙水平等，這些變化 大多是由遺傳基因決定的?，F(xiàn)階段的皮膚保養(yǎng)方法多是根據(jù)外因采取的，如使用防曬霜、保 濕劑等，然而這些無針對性的保養(yǎng)方法大多效果甚微，治標不治本。隨著生活水平的提高， 對于提高皮膚光滑和緊固度的需求越來越大，結(jié)合內(nèi)外因進行針對性美容護膚將比傳統(tǒng)方 法更具優(yōu)勢，因此準確了解內(nèi)因顯得至關(guān)重要。
[0004] 皮膚曬斑和雀斑產(chǎn)生受到多個基因影響，每個基因又存在多個SNP位點，這些位點 會影響相關(guān)基因的酶活性。通過相關(guān)基因的SNP位點檢測可以評測不同個體的皮膚防曬能 力，還可以評估相關(guān)防曬產(chǎn)品是否適用于檢測者，使產(chǎn)品效果達到最大化，在此基礎(chǔ)上結(jié)合 日常生活習(xí)慣調(diào)整，使防曬效果進一步提升。對于這種檢測方法，選取準確的位點組合以及 后續(xù)數(shù)據(jù)分析尤為重要。國內(nèi)外已有專利報道利用SNP位點基因型判斷美容產(chǎn)品適用皮膚 類型，但仍存在著易感SNP位點選取不準確、檢測結(jié)果未能量化綜合分析問題。當前未見結(jié) 合不同基因 SNP位點組合檢測和量化算法評估皮膚防曬能力的報道。
[0005] 中國實用新型專利201320009798.7公開了一種基因芯片，利用該基因芯片檢測美 白和老化相關(guān)基因 SNP位點，美白基因的SNP位點包括SLC45A2(re35391 )、KITLG (rs642742)、ASIP(rsl015362)、TYR(rsl042602)、0CA2(rsl800414)、DCT(rs2031526)、MClR (rs885479)，老化基因的SNP包括MMPl(rsl799750)、TIMPl(rs4898)、SIRT6(rsl07251)、 S0D2(rs4880)、NQ01(rsl800566)、TNFA(rsl800629)、EPHX(rsl051740)，但該專利采用的基 因芯片方法較繁瑣，難以適用大量檢測。中國發(fā)明專利申請201180056031.3篩選到了一組 與皮膚老化相關(guān)的基因（LPL、ADIP0Q、PLN等），并根據(jù)該組基因篩選到一種抗老化新材料， 該專利中未提及基因相關(guān)SNP位點。中國專利申請201080044917.1提供了一種利用天然反 義多核苷酸或化合物調(diào)控FLG基因表達，從而達到預(yù)防或治療與FLG相關(guān)的疾病。
[0006] 美國專利US200812286033通過單萜類物質(zhì)誘導(dǎo)相關(guān)基因表達以達到改善皺紋的 效果。美國專利US200912512368通過含有異戊烯異黃酮的化妝品誘導(dǎo)ELN和C0L3A1基因的 表達，達到了改善皮膚外觀的效果。美國專利US201514618080和US201313932565通過在皮 膚防曬位置使用朝鮮薊提取物和橄欖油提取物，使包括ELN和C0L3A1在內(nèi)的相關(guān)基因受到 調(diào)控上調(diào)表達，從而達到改善防曬皮膚的功效。
[0007] 以上專利/專利申請均利用外來物質(zhì)調(diào)控體內(nèi)基因的表達，但每個個體的基因中 卻存在差異SNP位點，這種方法難以達到個性化保養(yǎng)或治療。英國專利GB20110021917檢測 了與美容產(chǎn)品成分生物學(xué)途徑相關(guān)的靶基因 SNP位點，進而判斷該產(chǎn)品是否適用于使用者， 該專利涉及的 SNP 位點有 MMP-l(rsl799750)、NQ01(rsl800566)、GSTPl(rsl695)、hGPXl (rsl0504)〇

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種用于評估皮膚防曬情況的引物和探針。
[0009] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種用于評估皮膚防曬情況的引物和探針，其特征 在于，所述序列如SEQIDN0:1-4，和SEQIDN0:5-8，和SEQIDN0:9-12，和SEQIDN0:13-16;其中SEQ ID NO:3-4,7-8,11-12,15-16的5'端和3'端分別連接不同熒光標記。
[0010] 本發(fā)明提供一種用于評估皮膚防曬情況的試劑盒，其特征在于，含有所述的引物 和探針。
[0011] 本發(fā)明提供一種利用基因檢測輔助客戶選擇正確美容方法的方法，其特征在于， 使用所述的引物和探針，或使用所述的試劑盒。
[0012] 進一步，步驟為：
[0013] 1)使用所述的引物和探針或所述的試劑盒對客戶進行SNP位點檢測；
[0014] 2)根據(jù)易感SNP位點組合計算出客戶的皮膚防曬能力值;所述易感SNP位點組合為 MC1R rs2228479、MClR rs885479、ASIP rsl015362、0CA2rsl800414;
[0015] 3)結(jié)合1)的SNP位點檢測結(jié)果及2)的皮膚防曬能力值，進行結(jié)果判斷。
[0016]進一步，所述步驟1)為，
[0017] 提取待檢測個體的DNA樣本；
[0018] 采用所述引物和探針或所述試劑盒進行PCR擴增;優(yōu)選的，PCR擴增的反應(yīng)程序為 50Γ2π?η，95Γ?0π?η，95Γ?58、60-(：1π?η 循環(huán) 40 次。
[0019]進一步，所述步驟2)為，
[0020]根據(jù)已知易感SNP位點組合的各個位點基因型的致病風(fēng)險比值比計算出皮膚曬 斑、雀斑產(chǎn)生個體綜合風(fēng)險比值比〇R(C)，計算方程式為
[0021] 通過已知中國人群不同年齡段皮膚防曬產(chǎn)生平均風(fēng)險比值odds(D)，計算出檢測 個體的皮膚防曬產(chǎn)生風(fēng)險值比值odds(X)，計算式為odds(X) =0R(C) X odds(D);計算出綜

[0022] 根據(jù)已知正?；蛐腿巳猴L(fēng)險值F(N)，計算出個體皮膚防曬能力值：
[0023] 進一步，所述步驟3)的結(jié)果判斷為，
[0024] 1)若個體皮膚防曬能力值低于100%，則表示該個體的皮膚防曬能力低于該年齡 段人群的正常值，防曬能力差，屬于不易防曬的體質(zhì);值越低，防曬能力越差；
[0025] 2)若個體皮膚防曬能力值等于100%，則表示該個體的皮膚防曬能力與該年齡段 人群的正常值一樣，防曬能力一般；
[0026] 3)若個體皮膚防曬能力值高于100%，則表示該個體的皮膚防曬能力高于該年齡 段人群的正常值，防曬能力較好，屬于易防曬的體質(zhì);值越高，防曬能力越好；
[0027] 同時；
[0028] 若基因 MC1R的SNP位點rs2228479為A/G，表明攜帶雜合突變，皮膚防曬能力變差， 容易受到紫外線的損傷，使得大量黑色素沉積表皮層中，日久會加速皮膚衰老;若為A/A，表 明攜帶純合突變，皮膚防曬能力變差，容易受到紫外線的損傷，使得大量黑色素沉積表皮層 中，日久會加速皮膚衰老;若為G/G，則為正?；蛐?；
[0029] 若基因 MC1R的SNP位點rs885479為A/G，表明攜帶雜合突變，產(chǎn)生曬斑和雀斑的風(fēng) 險更高;若為A/A，表明攜帶純合突變，產(chǎn)生曬斑和雀斑的風(fēng)險更高;若為G/G，則為正?；?型；
[0030] 若基因 ASIP的SNP位點rsl015362為C/T，表明攜帶雜合突變，對陽光敏感，會增加 雀斑和曬斑風(fēng)險;若為T/T，表明攜帶純合突變，產(chǎn)生曬斑和雀斑的風(fēng)險更低;若為C/C，則為 正常基因型，但由于攜帶C，對陽光敏感，會增加雀斑和曬斑風(fēng)險；
[0031] 若基因0CA2的SNP位點rsl800414為C/T，表明攜帶雜合突變，良性突變，黑色素積 累風(fēng)險更低;若為C/C，表明攜帶純合突變，良性突變，黑色素積累風(fēng)險更低;若為T/T，則為 正?；蛐?。
[0032] 本發(fā)明（1)篩選出一組可經(jīng)過多篇文獻驗證，且分子機制清晰，可用于全面準確評 估皮膚防曬能力的SNP位點組合；（2)采用特異性強、靈敏度高的TaqMan-MGB探針檢測方法 進行檢測，可同時檢測多個樣本；（3)通過算法精確量化曬斑、雀斑產(chǎn)生風(fēng)險以評估皮膚防 曬能力，為檢測者提供個性化的皮膚防曬方案。
[0033]本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:結(jié)合分子機制研究、文獻檢索和臨床數(shù)據(jù)篩選，得到一 組與皮膚曬斑、雀斑相關(guān)的易感SNP位點組合，所述組合位點分別為MClR(rs2228479、 rs885479)、ASIP(rsl015362)、0CA2(rsl800414)，所述組合的位點信息見表1，該組合位點 可以準確評估不同個體的皮膚防曬能力。
[0034] 表1易感SNP位點信息表
[0036]為了檢測所述位點，根據(jù)引物和熒光探針最優(yōu)原則設(shè)計檢測所需的引物和探針， 所述引物及熒光探針如下(下劃線為SNP位點）：
[0037] MClR(rs2228479)引物及熒光探針序列：
[0042] MClR(rs885479)引物及熒光探針序列：
[0057]所述位點檢測方法具體步驟如下：
[0058] 1、人體唾液樣本采集。采用無創(chuàng)唾液自動流出采集方式，在唾液采集前30min需用 飲用水清理口腔中雜物，采集2mL唾液存放于唾液保存液以供檢測。
[0059] 2、人體全基因組DNA提取。采用碘化鉀法，參考具體步驟為：取0 . lmL唾液于1.5mL 離心管中，加入500yL 0.01mol/L PBS溶液反復(fù)吹打，lOOOOrpm離心5min;去上清，沉淀加入 50yL 5mol/LKI溶液，震蕩混勻，再加入 100yL 0·9%NaCl溶液、150yL酚/氯仿（25:24,V/V) 混合液，震蕩30s，lOOOOrpm離心5min;取200yL上清，加入200yL異丙醇，混勾，lOOOOrpm離心 5min;去上清，沉淀加入lmL無水乙醇洗滌，lOOOOrpm離心5min;棄無水乙醇，沉淀在超凈臺 中吹干，加 50yL TE緩沖液溶解，-20°C保存?zhèn)溆谩?br>[0060] 3、PCR反應(yīng)體系及反應(yīng)程序。10yL反應(yīng)體系含TaqMarf8>Universal PCR Master Mix (Applied Biosystems，美國應(yīng)用生物技術(shù)有限公司）5yL、DNA模板lyL、熒光探針(每個SNP 位點的檢測對應(yīng)探針混合在一起）（2.5μΜ)和引物混合液(每個SNP位點的檢測對應(yīng)引物混 合在一起）1.5yL、ddH 20 2.5yL。反應(yīng)程序為501€2111丨11，95°(：10111丨11，95°(：158、60°(：1111丨11循環(huán) 40次。檢測儀器為StepOnePlus實時焚光定量PCR儀(Applied Biosystems，美國應(yīng)用生物技 術(shù)有限公司）。
[0061] 4、實驗結(jié)果分析。米用StepOnePlus? Software v2.3(Applied Biosystems，美國 應(yīng)用生物技術(shù)有限公司)進行分析，根據(jù)不同的熒光信號，得出對應(yīng)SNP位點的基因型。 [0062]皮膚防曬能力量化方法如下：
[0063] 1、皮膚曬斑、雀斑產(chǎn)生個體綜合風(fēng)險比值比計算。已知檢測所得的各個位點基因 型的曬斑、雀斑風(fēng)險比值比為分別為OR^ORr-Oia文獻查詢得知，結(jié)果見表3)，可以計算 出皮膚曬斑、雀斑產(chǎn)生個體綜合風(fēng)險比值比〇R(C)，計算方程式如下：
[0065] 2、通過步驟1計算出的皮膚曬斑、雀斑產(chǎn)生個體綜合風(fēng)險比值比0R(C)，通過文獻 或其它統(tǒng)計途徑可以獲得中國人群不同年齡段皮膚曬斑、雀斑產(chǎn)生平均風(fēng)險比值odds(D) (已知中國人群不同年齡段皮膚防曬產(chǎn)生平均風(fēng)險比值odds(D)分別為:20-35歲：0.06,36- 45歲：0.15,46-55歲：0.47)，通過比值比計算公式可以計算出檢測個體的皮膚曬斑、雀斑產(chǎn) 生風(fēng)險值比值〇dds(X)，計算方程式如下：
[0067] 3、通過步驟2計算出的個體皮膚曬斑、雀斑產(chǎn)生風(fēng)險比值odds(X)，即可以通過風(fēng) 險值推算公式可以計算出綜合風(fēng)險值F(X)，計算方程式如下：
[0069] 4、通過步驟3計算得到的綜合風(fēng)險值可以評估不同個體的皮膚防曬能力，已知正 ?；蛐腿巳猴L(fēng)險值F(N)(已知正常基因型人群風(fēng)險值F(N)分別為：20-35歲：5.67%，36_ 45歲：13.04%，46-55歲：31.97%)，可以計算出個體皮膚防曬能力值V，計算方程式如下：
[0071 ]檢測結(jié)果個性化分析及解決方案：
[0072]根據(jù)防曬能力量化計算結(jié)果，結(jié)合相關(guān)位點的功能及分子機制，判斷皮膚問題的 可能性，評估檢測者可以使用含有何種成分的美容產(chǎn)品，并為其調(diào)整有利于護膚的日常生 活飲食習(xí)慣。相關(guān)基因的分子機制如下：如果MC1R攜帶突變，雀斑和曬斑產(chǎn)生風(fēng)險降低； ASIP攜帶突變，雀斑和曬斑產(chǎn)生風(fēng)險降低;0CA2攜帶突變，易產(chǎn)生黑色素。
[0073] 有益效果：
[0074] 可以充分了解皮膚曬斑、雀斑和色素積淀的內(nèi)因和外因，為用戶提供個性化美容 健康解決方案，使防曬美容產(chǎn)品使用效果最大化。此外，還可以為檢測者調(diào)整有利于護膚的 日常生活飲食習(xí)慣。
【具體實施方式】
[0075] 下面詳細描述本發(fā)明的實施例，所述實施例的示例在旨在用于解釋本發(fā)明，而不 能理解為對本發(fā)明的限制。實施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描 述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以 通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0076]實施例1:引物和探針設(shè)計
[0077] 1、設(shè)計并合成以下引物和探針，合成單位:Applied Biosystems，美國應(yīng)用生物技 術(shù)有限公司。
[0078] MClR(rs2228479)引物及熒光探針序列：
[0079] 正向引物CACCATCGCCAAGAACCGGAA SEQ ID N0:1；
[0080] 反向引物AGCTGCAGGTGATCACGTC SEQ ID NO:2;
[0081] 熒光探針FAM-AGCAAC^TGCTGGAGACGGCC-MGB SEQ ID NO:3;
[0082] 熒光探針VIC-AGCAACgTGCTGGAGACGGCC-MGB SEQ ID NO:4;
[0083] MClR(rs885479)引物及熒光探針序列：
[0084] 正向引物ACATCTCCATCTTCTACGCACT SEQ ID NO:5;
[0085] 反向引物CCATGAGCACCAGCATAGCC SEQ ID NO:6;
[0086] 熒光探針FAM-CCTGCCGCGGGCGCGGC4AGCCG-MGB SEQ ID NO:7;
[0087] 熒光探針VIC-CCTGCCGCGGGCGCGGCgAGCCG-MGB SEQ ID N0:8；
[0088] ASIP(rsl015362)引物及熒光探針序列：
[0089] 正向引物CAGGTAGAATGTACTAACCCCT SEQ ID NO:9;
[0090] 反向引物TGAACAAATAGTCCCGACCAG SEQ ID NO: 10；
[0091] 熒光探針FAM-CTGAAACAGT4TGAGATGTTT-MGB SEQ ID NO: 11；
[0092] 熒光探針VIC-CTGAAACAGI^TGAGATGITT-MGB SEQ ID NO: 12；
[0093] 0CA2(rsl800414)引物及熒光探針序列：
[0094] 正向引物TTGTAACACAGTACTTTGCCAT SEQ ID NO: 13；
[0095] 反向引物CATTTGGCGAGCAGAATCCC SEQ ID NO: 14；
[0096] 熒光探針FAM-CTCTCTTACAGC^TAGGATAT-MGB SEQ ID NO: 15；
[0097] 熒光探針VIC-CTCTCTTACAGCgTAGGATAT-MGB SEQ ID NO: 16；
[0098] 2、SNP位點檢測
[0099] 1)、人體唾液樣本采集。采用無創(chuàng)唾液自動流出采集方式，在唾液采集前30min需 用飲用水清理口腔中雜物，采集2mL唾液存放于唾液保存液以供檢測。
[0100] 2)、人體全基因組DNA提取。采用碘化鉀法，參考具體步驟為:取0. lmL唾液于1.5mL 離心管中，加入500yL 0.01mol/L PBS溶液反復(fù)吹打，lOOOOrpm離心5min;去上清，沉淀加入 50yL 5mol/LKI溶液，震蕩混勻，再加入 100yL 0·9%NaCl溶液、150yL酚/氯仿（25:24,V/V) 混合液，震蕩30s，lOOOOrpm離心5min;取200yL上清，加入200yL異丙醇，混勾，lOOOOrpm離心 5min;去上清，沉淀加入lmL無水乙醇洗滌，lOOOOrpm離心5min;棄無水乙醇，沉淀在超凈臺 中吹干，加50yL TE緩沖液溶解，-20°C保存?zhèn)溆谩?br>[0101] 3)、PCR反應(yīng)體系及反應(yīng)程序。10yL反應(yīng)體系含TaqMan?Universal PCR Master Mix(Applied Biosystems，美國應(yīng)用生物技術(shù)有限公司）5yL、DNA模板lyL、熒光探針(每個 SNP位點的檢測對應(yīng)探針混合在一起）（2.5μΜ)和引物混合液(每個SNP位點的檢測對應(yīng)引物 混合在一起）1.5yL、ddH 20 2.5yL。反應(yīng)程序為50°C2min，95°C10min，95°C15s、60°Clmin循 環(huán)40次。檢測儀器為StepOnePlus實時焚光定量PCR儀(Applied Biosystems，美國應(yīng)用生物 技術(shù)有限公司）。
[0102] 4)、檢測程序運行結(jié)束后，米用Step0nePlus?Softwarev2 · 3(AppliedBiosystems， 美國應(yīng)用生物技術(shù)有限公司)對檢測結(jié)果進行分析，得出對應(yīng)SNP的基因型(見表2)。
[0103] 表2 SNP位點檢測結(jié)果表
[0105] 3、防曬能力量化評估及個性化解決方案
[0106] 1)、曬斑、雀斑產(chǎn)生綜合風(fēng)險值計算。通過文獻查詢得知，不同位點的比值比如表3 所示。
[0107] 表3相關(guān)位點基因型的風(fēng)險比值比(0R)
[0110] (1)皮膚曬斑、雀斑產(chǎn)生個體綜合風(fēng)險比值比計算。不同位點的OR值如表3所示，則
[0111] (2)通過步驟（1)計算出皮膚曬斑、雀斑產(chǎn)生個體綜合風(fēng)險比值比0R(C)，綜合文獻 和調(diào)查數(shù)據(jù)得知中國人群女性20-35年齡段皮膚雀斑和曬斑產(chǎn)生的比值odds (D)約為0.06 (本實施例的檢測樣本屬于該年齡段，故選擇該年齡段的數(shù)據(jù)），通過比值比計算公式可以 計算出檢測個體的皮膚雀斑和曬斑產(chǎn)生風(fēng)險值比值odds(X) =0R(C) X odds(D) = 1.54 X 0.06 = 0.092〇
[0112] (3)通過步驟（2)計算出的檢測個體風(fēng)險比值odds (X)，綜合風(fēng)險值
[0113] (4)已知正?；蛐腿巳猴L(fēng)險值F(N)為5.67%，可以計算出皮膚防曬能力值
[0114] 2)、檢測結(jié)果綜合分析。該檢測者的皮膚防曬能力值為67%，遺傳的皮膚防曬能力 較差。同時結(jié)合相關(guān)基因的分子機制，由表2可知該檢測個體中的ASIP、0CA2攜帶易感位點 有益純合突變，會降低曬斑、雀斑產(chǎn)生風(fēng)險;MC1R攜帶易感位點雜合突變，會增加曬斑、雀斑 產(chǎn)生風(fēng)險。因此，由MC1R雜合突變帶來的不利影響大于ASIP和0CA2的有益突變，在日常護膚 中要注意使用可抵消MC1R不利影響的護膚方法。
[0115] 3)、個性化解決方案:該個體防曬能力較一般人差，MC1R的突變使得皮膚更易遭到 紫外線的損害，特別要注意皮膚黑色素的沉淀。為了抵消遺傳基因帶來的不利影響，應(yīng)特別 注意防曬，選擇適宜自己防曬系數(shù)的防曬用品。多吃魚可以提高皮膚防曬能力(魚中富含的 Omega-3不飽和脂肪酸能夠保護皮膚DNA病變而受到侵襲）；維生素 C具有美白的功效，能有 效地防止肌膚氧化，幫助肌膚抵御紫外線侵害，避免黑斑、雀斑產(chǎn)生;強化肌膚應(yīng)對日光傷 害的能力，可以搭配維生素 C和維生素 E。
[0116] 盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例 性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明的原理和宗旨 的情況下在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述實施例進行變化、修改、替換和變型。
【主權(quán)項】
1. 一種用于評估皮膚防曬情況的引物和探針，其特征在于，所述序列如SEQ ID N0:1-4，和SEQIDN0:5-8，和SEQIDN0:9-12，和SEQIDN0:13-16;其中SEQIDN0:3-4,7-8， 11-12,15-16的5'端和3'端分別連接不同熒光標記。2. -種用于評估皮膚防曬情況的試劑盒，其特征在于，含有權(quán)利要求1所述的引物和探 針。3. -種利用基因檢測輔助客戶選擇正確美容方法的方法，其特征在于，使用權(quán)利要求1 的引物和探針，或使用權(quán)利要求2的試劑盒。4. 權(quán)利要求3所述利用基因檢測輔助客戶選擇正確美容方法的方法，其特征在于，步驟 為： 1) 使用權(quán)利要求1的引物和探針或權(quán)利要求2的試劑盒對客戶進行SNP位點檢測； 2) 根據(jù)易感SNP位點組合計算出客戶的皮膚防曬能力值;所述易感SNP位點組合為MClR rs2228479、MClR rs885479、ASIP rsl015362、0CA2rsl800414; 3) 結(jié)合1)的SNP位點檢測結(jié)果及2)的皮膚防曬能力值，進行結(jié)果判斷。5. 權(quán)利要求4所述利用基因檢測輔助客戶選擇正確美容方法的方法，其特征在于，所述 步驟1)為， 提取客戶的DNA樣本； 采用權(quán)利要求1所述引物和探針或權(quán)利要求2所述試劑盒進行PCR擴增;優(yōu)選的，PCR擴 增的反應(yīng)程序為 501€2111丨11，95°(：10111丨11，95°(：158、60°(：1111丨11循環(huán)40次。6. 權(quán)利要求4所述利用基因檢測輔助客戶選擇正確美容方法的方法，其特征在于，所述 步驟2)為， 根據(jù)已知易感SNP位點組合的各個位點基因型的致病風(fēng)險比值比計算出皮膚曬斑、雀 斑產(chǎn)生個體綜合風(fēng)險比值比OR(C)，計算方程式為通過已知中國人群不同年齡段皮膚防曬產(chǎn)生平均風(fēng)險比值Odds(D)，計算出檢測個體 的皮膚防曬產(chǎn)生風(fēng)險值比值odds(X)，計算式為odds(X) =OR(C) Xodds(D);計算出綜合風(fēng) 險值：根據(jù)已知正?；蛐腿巳猴L(fēng)險值F(N)，計算出個體皮膚防曬能力值7. 權(quán)利要求4所述利用基因檢測輔助客戶選擇正確美容方法的方法，其特征在于，所述 步驟3)的結(jié)果判斷為， 1) 若個體皮膚防曬能力值低于100%，則表示該個體的皮膚防曬能力低于該年齡段人 群的正常值，防曬能力差，屬于不易防曬的體質(zhì);值越低，防曬能力越差； 2) 若個體皮膚防曬能力值等于100%，則表示該個體的皮膚防曬能力與該年齡段人群 的正常值一樣，防曬能力一般； 3) 若個體皮膚防曬能力值高于100%，則表示該個體的皮膚防曬能力高于該年齡段人 群的正常值，防曬能力較好，屬于易防曬的體質(zhì);值越高，防曬能力越好； 同時； 若基因 MClR的SNP位點rs2228479為A/G，表明攜帶雜合突變，皮膚防曬能力變差，容易 受到紫外線的損傷，使得大量黑色素沉積表皮層中，日久會加速皮膚衰老;若為A/A，表明攜 帶純合突變，皮膚防曬能力變差，容易受到紫外線的損傷，使得大量黑色素沉積表皮層中， 日久會加速皮膚衰老;若為G/G，則為正常基因型； 若基因 MClR的SNP位點rs885479為A/G，表明攜帶雜合突變，產(chǎn)生曬斑和雀斑的風(fēng)險更 高;若為A/A，表明攜帶純合突變，產(chǎn)生曬斑和雀斑的風(fēng)險更高;若為G/G，則為正?；蛐?； 若基因 ASIP的SNP位點rsl015362為C/T，表明攜帶雜合突變，對陽光敏感，會增加雀斑 和曬斑風(fēng)險;若為T/T，表明攜帶純合突變，產(chǎn)生曬斑和雀斑的風(fēng)險更低;若為C/C，則為正常 基因型，但由于攜帶C，對陽光敏感，會增加雀斑和曬斑風(fēng)險； 若基因0CA2的SNP位點rsl800414為C/T，表明攜帶雜合突變，良性突變，黑色素積累風(fēng) 險更低;若為C/C，表明攜帶純合突變，良性突變，黑色素積累風(fēng)險更低;若為T/T，則為正常 基因型。
【文檔編號】C12Q1/68GK105886646SQ201610367704
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年5月27日
【發(fā)明人】紀志梁, 王毛陽, 劉曉瑜, 楊志云
【申請人】福建愛我健康生物科技有限公司