一種用廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種用廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法，屬水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域。纖細(xì)角毛藻傳統(tǒng)培養(yǎng)方式耗電較高，受季節(jié)和水溫限制且易受病毒和細(xì)菌污染。與傳統(tǒng)技術(shù)相比，本發(fā)明優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)在：纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)成分更全面、均衡，纖細(xì)角毛藻生長(zhǎng)快，產(chǎn)量高，不受季節(jié)限制；采用廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻，堅(jiān)固耐用，洗刷方便，重復(fù)使用，操作方便，廢物利用，節(jié)約資金。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
_種用廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其涉及一種用廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]纖細(xì)角毛藻隸屬硅藻門(mén)，中心綱，盒形藻目，角毛藻科，角毛藻屬，是一種小型海洋浮游硅藻，細(xì)胞小，壁薄，多數(shù)單個(gè)生活。鄰近細(xì)胞的角毛相連，使群體成鏈狀。角毛長(zhǎng)度，常幾倍于細(xì)胞體本身。鏈端角毛的形態(tài)，常和其它角毛不同，短而粗。細(xì)胞行多次間接分裂后，鏈內(nèi)出現(xiàn)相異的角毛，于是就分成兩條鏈。色素體兩個(gè)或多個(gè)，有的種類(lèi)角毛里也有色素體，是分種特征之一。生殖方法有:形成復(fù)大孢子、體眠孢子和有性繁殖。在10-39°C環(huán)境下均能生長(zhǎng)繁殖，最適溫度為25-35°C，是一種沿岸性半咸水種類(lèi)。與其它常用的單胞藻相比，它繁殖快又更耐高溫。多不飽和脂肪酸的含量較高，在較好培養(yǎng)條件下，其二十碳五烯酸(EPA)占總脂肪酸含量的10.20%。在海洋浮游生物中占重要位置，是扇貝、牡蠣、貽貝、海膽、海參、對(duì)蝦、梭子蟹等幼體的良好餌料。
[0003]過(guò)去，楊彥豪等發(fā)明了一種牟氏角毛藻的培養(yǎng)基配方及全人工快速培養(yǎng)方法(申請(qǐng)?zhí)朇N201310420414.5)。培養(yǎng)基配方包括尿素0.1-0.38/1，碳酸氫鈉0.05-0.18/1，硅酸鈉水結(jié)晶0.1-0.5g/L，磷酸二氫鉀0.01-0.02g/L，EDTA3_5g/L，VBi l_5mg/L，VBi2 I.0-3yg/L，配方溶劑為海水;培養(yǎng)方法為對(duì)培養(yǎng)罐、海水消毒后，以海水為溶劑按照以上配方配培養(yǎng)基，將接藻種接入裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)罐中，密封后培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)進(jìn)行三基色燈光光照并充入經(jīng)過(guò)孔徑小于0.Ιμπι空氣濾芯過(guò)濾的空氣，培養(yǎng)3-5天后采收。該發(fā)明培養(yǎng)基配方營(yíng)養(yǎng)均衡、成本低，角毛藻生長(zhǎng)快速，操作過(guò)程簡(jiǎn)單，但耗電較高，受季節(jié)和水溫限制且易受病毒和細(xì)菌污染。
[0004]為了克服目前技術(shù)的不足，本發(fā)明公開(kāi)了一種用廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法，與傳統(tǒng)技術(shù)相比，本發(fā)明優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)在:纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)成分更全面、均衡，纖細(xì)角毛藻生長(zhǎng)快，產(chǎn)量高，不受季節(jié)限制；采用廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻，堅(jiān)固耐用，洗刷方便，重復(fù)使用，操作方便，廢物利用，節(jié)約資金。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了克服目前技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液，纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液由以下重量份數(shù)的配料組成:硝酸鈉0.02-0.05份，氯化銨0.01-0.03份，氯化鈉0.03-0.06份，磷酸二銨0.04-0.08份，過(guò)磷酸鈣0.1-0.3份，異丁叉環(huán)二脲0.002-0.004份，硅酸鈉0.2-0.4份，硫酸亞鐵0.00005-0.00008份，馬尿0.5-0.8份，硫酸鎂0.006-0.008份，氯化錳0.002-0.004份，氯化鈷0.07-0.09份，尼古丁酸0.05-0.08份，對(duì)氨安息香酸0.02-0.04份，肌醇0.005-0.007份，葉酸0.0004-0.0008份，維生素Bi 0.0003-0.0007份，維生素B12 0.0001-0.0003份，吲哚乙酸0.0003-0.0006份，煮沸冷卻后的磁化海水1000份。
[0006]所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出干后的綠色玻璃啤酒瓶，加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23±1°C，光強(qiáng)3500-40001ux，光照周期為L(zhǎng)12+D12，S卩12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26±1°C，光強(qiáng)6000-70001ux，光照周期為L(zhǎng)18+D6，S卩18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250 ± 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)。
[0007]所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出烘干后的綠色玻璃啤酒瓶;所述烘干后的綠色玻璃啤酒瓶再采用消毒劑消毒20分鐘，所述消毒劑為中草藥復(fù)合消毒劑;所述中草藥復(fù)合消毒劑組成成分(重量份數(shù)比):紅背菜2-4份，魚(yú)腥草6-9份，柴胡5-8份，連錢(qián)草7-12份，藿香10-15份，蒼術(shù)7-12份，地膚子8-15份，紫花地丁5-7份，麥冬3-6份，板藍(lán)根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心蓮5_8份，蒲公英2_6份，桑黃1_3份；
[0008]加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23 ± 10C ,光強(qiáng)3500-40001ux，光照周期為L(zhǎng)12+D12，即12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26 ± I °C，光強(qiáng)6000-70001UX，光照周期為L(zhǎng)18+D6，即18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250 ± 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)，即完成本發(fā)明的培養(yǎng)方法。
[0009]所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出烘干后的綠色玻璃啤酒瓶;所述烘干后的綠色玻璃啤酒瓶再采用消毒劑消毒20分鐘，所述消毒劑為中西藥復(fù)合消毒劑;所述中西藥復(fù)合消毒劑組成成分(重量份數(shù)比):紅背菜2-4份，魚(yú)腥草6-9份，柴胡5-8份，連錢(qián)草7-12份，藿香10-15份，蒼術(shù)7-12份，地膚子8-15份，紫花地丁5-7份，麥冬3-6份，板藍(lán)根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心蓮5_8份，蒲公英2_6份，桑黃1_3份，十二烷基苯磺酸鈉0.5-1份，乙醇0.5-1份，苯甲酸鈉0.5-1份，硫酸鋁0.5-1份，明礬0.5-1份；
[0010]加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23 ± 10C ,光強(qiáng)3500-40001ux，光照周期為L(zhǎng)12+D12，即12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26 ± I °C，光強(qiáng)6000-70001UX，光照周期為L(zhǎng)18+D6，即18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250 ± 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)，即完成本發(fā)明的培養(yǎng)方法。
【附圖說(shuō)明】
[0011]圖1用廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法圖；
[0012]其中附圖標(biāo)記為:I棉塞，2藻液。
【具體實(shí)施方式】
[0013]步用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液，纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液由以下重量份數(shù)的配料組成:硝酸鈉0.02-0.05份，氯化銨0.01-0.03份，氯化鈉0.03-0.06份，磷酸二銨0.04-0.08份，過(guò)磷酸鈣0.1-0.3份，異丁叉環(huán)二脲0.002-0.004份，硅酸鈉0.2-0.4份，硫酸亞鐵0.00005-0.00008份，馬尿0.5-0.8份，硫酸鎂0.006-0.008份，氯化錳0.002-0.004份，氯化鈷0.07-0.09份，尼古丁酸0.05-0.08份，對(duì)氨安息香酸0.02-0.04份，肌醇0.005-0.007份，葉酸0.0004-0.0008份，維生素Bi 0.0003-0.0007份，維生素B12 0.0001-0.0003份，吲哚乙酸0.0003-0.0006份，煮沸冷卻后的磁化海水1000份。
[0014]所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出干后的綠色玻璃啤酒瓶，加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23±1°C，光強(qiáng)3500-40001ux，光照周期為L(zhǎng)12+D12，S卩12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26±1°C，光強(qiáng)6000-70001ux，光照周期為L(zhǎng)18+D6，S卩18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250 ± 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)。
[0015]所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出烘干后的綠色玻璃啤酒瓶;所述烘干后的綠色玻璃啤酒瓶再采用消毒劑消毒20分鐘，所述消毒劑為中草藥復(fù)合消毒劑;所述中草藥復(fù)合消毒劑組成成分(重量份數(shù)比):紅背菜2-4份，魚(yú)腥草6-9份，柴胡5-8份，連錢(qián)草7-12份，藿香10-15份，蒼術(shù)7-12份，地膚子8-15份，紫花地丁5-7份，麥冬3-6份，板藍(lán)根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心蓮5_8份，蒲公英2_6份，桑黃1_3份；
[0016]加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23 ± 10C ,光強(qiáng)3500-40001ux，光照周期為L(zhǎng)12+D12，即12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26 ± I °C，光強(qiáng)6000-70001UX，光照周期為L(zhǎng)18+D6，即18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250 ± 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)，即完成本發(fā)明的培養(yǎng)方法。
[0017]所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出烘干后的綠色玻璃啤酒瓶;所述烘干后的綠色玻璃啤酒瓶再采用消毒劑消毒20分鐘，所述消毒劑為中西藥復(fù)合消毒劑;所述中西藥復(fù)合消毒劑組成成分(重量份數(shù)比):紅背菜2-4份，魚(yú)腥草6-9份，柴胡5-8份，連錢(qián)草7-12份，藿香10-15份，蒼術(shù)7-12份，地膚子8-15份，紫花地丁5-7份，麥冬3-6份，板藍(lán)根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心蓮5_8份，蒲公英2_6份，桑黃1_3份，十二烷基苯磺酸鈉0.5-1份，乙醇0.5-1份，苯甲酸鈉0.5-1份，硫酸鋁0.5-1份，明礬0.5-1份；
[0018]加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23 ± 10C ,光強(qiáng)3500-40001ux，光照周期為L(zhǎng)12+D12，即12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26 ± I °C，光強(qiáng)6000-70001UX，光照周期為L(zhǎng)18+D6，即18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250 ± 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)，即完成本發(fā)明的培養(yǎng)方法。
[0019]步驟I中所述馬尿制備方法取馬尿1000毫升，裝入三角燒瓶煮沸5分鐘后，冷卻備用。
[0020]步驟I中所述硝酸鈉，氯化銨，氯化鈉，磷酸二銨，過(guò)磷酸鈣，異丁叉環(huán)二脲，硅酸鈉，硫酸亞鐵，馬尿，硫酸鎂，氯化錳，氯化鈷，尼古丁酸，對(duì)氨安息香酸，肌醇，葉酸，維生素B1，維生素B12，吲哚乙酸化學(xué)藥品純度均需化學(xué)純級(jí)別。
[0021]步驟I中所述磁化水制作方法普通海水經(jīng)脫脂棉過(guò)濾，煮沸后，冷卻，流經(jīng)磁化水器后，即為磁化海水。磁化水器磁感應(yīng)強(qiáng)度為0.32T，流量為2.5t/h，流速為0.3m/s。
[0022]步驟2中啤酒瓶洗刷時(shí)要撕掉瓶外的標(biāo)簽并洗刷干凈，以免阻擋光照，影響藻類(lèi)進(jìn)行光合作用。
[0023]最后應(yīng)說(shuō)明的是:以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對(duì)其限制;盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解:其依然可以對(duì)前述實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換;而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明實(shí)施例技術(shù)方案的精神和范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液，其特征在于，纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液由以下重量份數(shù)的配料組成:硝酸鈉0.02-0.05份，氯化銨0.01-0.03份，氯化鈉0.03-0.06份，磷酸二銨0.04-0.08份，過(guò)磷酸鈣0.1-0.3份，異丁叉環(huán)二脲0.002-0.004份，硅酸鈉0.2-0.4份，硫酸亞鐵0.00005-0.00008份，馬尿0.5-0.8份，硫酸鎂0.006-0.008份，氯化錳0.002-0.004份，氯化鈷0.07-0.09份，尼古丁酸0.05-0.08份，對(duì)氨安息香酸0.02-0.04份，肌醇0.005-0.007份，葉酸0.0004-0.0008份，維生素B1.0003-0.0007份，維生素B120.0001-0.0003份，吲哚乙酸0.0003-0.0006份，煮沸冷卻后的磁化海水1000份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法，其特征在于:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出干后的綠色玻璃啤酒瓶，加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23± I (°C )，光強(qiáng)3500-4000(lux)，光照周期為L(zhǎng)12+D12，即12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26±1(°0，光強(qiáng)6000-700011^，光照周期為L(zhǎng)18+D6，S卩18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250±30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法，其特征在于:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出烘干后的綠色玻璃啤酒瓶;所述烘干后的綠色玻璃啤酒瓶再采用消毒劑消毒20分鐘，所述消毒劑為中草藥復(fù)合消毒劑;所述中草藥復(fù)合消毒劑組成成分(重量份數(shù)比):紅背菜2-4份，魚(yú)腥草6-9份，柴胡5-8份，連錢(qián)草7-12份，藿香10-15份，蒼術(shù)7-12份，地膚子8-15份，紫花地丁 5-7份，麥冬3-6份，板藍(lán)根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心蓮5_8份，蒲公英2-6份，桑黃1-3份； 加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23 ± 10C，光強(qiáng)3500-40001ux，光照周期為L(zhǎng)12+D12，即12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26 土 I °C，光強(qiáng)6000-70001ux，光照周期為L(zhǎng)18+D6，即18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250 ± 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)，即完成本發(fā)明的培養(yǎng)方法。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于廢舊啤酒瓶培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的培養(yǎng)液培養(yǎng)纖細(xì)角毛藻的方法，其特征在于:取一舊的但完好無(wú)損的綠色玻璃啤酒瓶，洗刷干凈，放在烘箱中80°C烘烤12小時(shí)，取出烘干后的綠色玻璃啤酒瓶;所述烘干后的綠色玻璃啤酒瓶再采用消毒劑消毒20分鐘，所述消毒劑為中西藥復(fù)合消毒劑;所述中西藥復(fù)合消毒劑組成成分(重量份數(shù)比):紅背菜2-4份，魚(yú)腥草6-9份，柴胡5-8份，連錢(qián)草7-12份，藿香10-15份，蒼術(shù)7-12份，地膚子8-15份，紫花地丁 5-7份，麥冬3-6份，板藍(lán)根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心蓮5_8份，蒲公英2-6份，桑黃1-3份，十二烷基苯磺酸鈉0.5-1份，乙醇0.5-1份，苯甲酸鈉0.5_1份，硫酸鋁0.5-1份，明礬0.5-1份； 加入步驟I所述纖細(xì)角毛藻培養(yǎng)液350毫升，輕輕搖勻，后取指數(shù)生長(zhǎng)期的純凈、無(wú)污染的纖細(xì)角毛藻藻種接種，接種密度6萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，后輕輕搖勻，用消毒棉塞塞住瓶口，放進(jìn)光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，共培養(yǎng)10天，培養(yǎng)的前5天，光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度23 ± 10C，光強(qiáng)3500-40001ux，光照周期為L(zhǎng)12+D12，即12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)的后5天光照培養(yǎng)箱設(shè)置溫度26 土 I °C，光強(qiáng)6000-70001ux，光照周期為L(zhǎng)18+D6，即18小時(shí)光照，6小時(shí)黑暗，循環(huán)往復(fù)，培養(yǎng)期間，每天手動(dòng)搖瓶6次，每次搖動(dòng)30秒，到第6天，添加步驟I所述的營(yíng)養(yǎng)液20毫升，以補(bǔ)充消耗掉的營(yíng)養(yǎng)鹽，到第7天，添加蒸餾水25毫升，以補(bǔ)充揮發(fā)掉的水分，到第10天，藻液細(xì)胞密度可達(dá)到250 ± 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/毫升，停止培養(yǎng)，將藻液倒出，把啤酒瓶洗刷干凈，加入步驟I所述新鮮培養(yǎng)液，進(jìn)入下一輪培養(yǎng)，即完成本發(fā)明的培養(yǎng)方法。
【文檔編號(hào)】C12R1/89GK105936877SQ201610123809
【公開(kāi)日】2016年9月14日
【申請(qǐng)日】2016年3月7日
【發(fā)明人】王培磊, 徐樹(shù)建, 劉金民, 劉笑天, 陳玉倩
【申請(qǐng)人】臨沂大學(xué)