一種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物及其醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物及其醫(yī)藥用途，本發(fā)明提供的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物中含有鹽酸丙咪嗪和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，鹽酸丙咪嗪、化合物(Ⅰ)單獨(dú)作用時，可以調(diào)節(jié)血脂治療動脈粥樣硬化；鹽酸丙咪嗪和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時，作用效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療動脈粥樣硬化的藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【專利說明】
一種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物及其醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及鹽酸丙咪嗪的新用途，具體涉及鹽酸丙咪嗪的藥 物組合物及其醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 鹽酸丙咪嗪，適用于治療遲緩性的內(nèi)因性抑郁癥，反應(yīng)性抑郁癥及更年期抑郁癥， 還可用于兒童遺尿癥。鎮(zhèn)靜作用和抗膽堿均屬中等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，該藥物組合物中含鹽酸丙 咪嗪和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，鹽酸丙咪嗪和該天然產(chǎn)物可協(xié)同治療動脈粥樣硬化。
[0004] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0005] 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0007] -種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，包括鹽酸丙咪嗪、如權(quán)利要求1所述的化合物（I) 和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0008] 進(jìn)一步地，藥學(xué)上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、 崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體或潤滑劑。
[0009] 進(jìn)一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0010] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將黑種草子粉碎，用75~85% 乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇 萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物 用大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個柱體積，再用70%乙醇洗脫12個柱體積，收集70% 洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠 分離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d) 步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲 醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體 積百分濃度為72%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮 得到化合物(I)。
[0011] 進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)用80%乙醇熱回流提取，合并提取 液。
[0012] 進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0013]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯進(jìn)行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0014] 上述化合物(I)在制備治療動脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 上述鹽酸丙咪嗪的藥物組合物在制備治療動脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0017] 本發(fā)明提供的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物中含有鹽酸丙咪嗪和一種結(jié)構(gòu)新穎的天 然產(chǎn)物，鹽酸丙咪嗪、化合物（I)單獨(dú)作用時，可以調(diào)節(jié)血脂治療動脈粥樣硬化;鹽酸丙咪嗪 和化合物(I)聯(lián)合作用時，作用效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療動脈粥樣硬化的藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0019] 實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0020]分離方法：（a)將黑種草子(2kg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取（15LX3次），合并提 取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯(3L X 3次)和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個柱體積，再用70%乙醇洗脫 12個柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1 (10個柱體積）、45:1 (8個柱體積）、25:1 (10 個柱體積)和15:1 (8個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」4個組分；（d)步驟(c)中組分 4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1 (10個柱體積）、15:1 (8個柱體積)和1:1 (6個 柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (HPLC歸一化純度大于98% )。
[0021] 結(jié)構(gòu)確證:冊431-]\^顯示[]\?^]+為111/2 341.2128，結(jié)合核磁特征可得分子式為 C20H3Q〇3，不飽和度為6。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ρρπι，DMS〇-d 6，500MHz): H-1 (1 · 52，m)，H-1 (1.78，m)，H-2(2.27，m)，H-2(2.31，m)，H-5(1.17，br，d，J=10.5)，H-6(1.39，m)，H-6(1.43， m)，H-7(1.44，m)，Η-7(1·51，m)，H-9(1.49，m)，Η-11(4·21，br，dd，J=12.0,6.5)，H-12 (1.68，m)，H-12(1.82，ddd，J=13.0,9.0，1.5)，H-13(2.63，m)，H-14(1.01，dd，J = 12.0， 4.5)，H-14(2.15，br，d，J=12.0)，H-15(1.96，dd，J=12.8,2.0)，H-15(2.08，d，J=12.8)， H-17(4.72，br，s)，H-17(4.81，br，s)，H-18(3.19，d，J=11.4)，H-18(3.45，d，J=11.4)，H-19(l.ll，s)，H-20(0.82，s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) δ。(ppm，DMS〇-d6，12 5MHz): 40 · 5 (CH2，1 -C)， 34.2(CH2,2-C)，216.3(C，3-C)，50.8(C，4-C)，53.1(CH，5-C)，20.4(CH2,6-C)，42.1(CH2,7-C)，46.5(C，8-C)，61.2(CH，9-C)，40.7(C，10-C)，70.3(CH，n-C)，42.1(CH2，12-C)，44.0 (CH，13-C)，39.8(CH2，14-C)，49.2(CH2，15-C)，155.6(C，16-C)，102.7(CH2，17-C)，67.1 (CH2，18-C)，18.4(CH3，19-C)，16.3(CH3,20-C)。紅外光譜表明該化合物含有羥基和羰基 (3441cm- 1 和1748cm-q。1!!-匪 R 譜顯示了兩個甲基信號WH0.82(s，H3-20)和1.11(s，H3-19)]，一個烯屬亞甲基信號[6財(cái).72(1^，8，!1-17)和4.81(1^，8，!1-17)]，一個含氧亞甲基信 號[5!13.19((1，1=11.4泡，!1-18)和3.45((1，1=11.4泡，!1-18)]，一個含氧次甲基信號[3 財(cái).21(1^，(1(1，1=12.0,6.5他，!1-11)]。此外， 13(：-匪1?譜顯示出20個碳信號，包括兩個甲基， 九個亞甲基(一個烯烴亞甲基，一個含氧亞甲基），四個次甲基(一個含氧次甲基），以及五個 季碳(一個羰基碳，一個烯烴季碳KHMBC譜中H 2-17與C-13和C-15;H-14b〇H2.15)與07，(：-9，(：-12，(：-15和(：-16 ;以及!1-11與(：-9，(：-10和(：-13的相關(guān)性表明環(huán)外亞甲基位于(：-16/(：-17，C-11位連有一個羥基。此外，H2-18與C-3，C-4，C-5和C-19的相關(guān)性表明伯羥基位于C-18 位上。通過分析Η-11的親合常數(shù)(br，dd，J = 12.0，6.5Hz)可知C-l 1位的羥基為α構(gòu)型。綜合 氫譜、碳譜、HMBC譜和NOESY譜，以及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下 所示，立體構(gòu)型進(jìn)一步通過Ε⑶試驗(yàn)確定，理論值與實(shí)驗(yàn)值基本一致。
[0022]該化合物化學(xué)式及碳原子編號如下：
[0024] 實(shí)施例2:藥理作用
[0025]本實(shí)施例使用VD3和高脂飼料造動脈粥樣硬化(AS)大鼠模型，檢測動物血脂含量， 觀察藥物對動脈粥樣硬化的治療作用。
[0026] 1、材料與方法
[0027] 1.1動物
[0028] SD大鼠，雄性，50~55d，體質(zhì)量(200 ± 20)g，由廣東省醫(yī)學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供。
[0029] 1.2試劑與樣品
[0030] 鹽酸丙咪嗪購自中國藥品生物制品檢定所。化合物（I)自制，制備方法見實(shí)施例1。 復(fù)方丹參片:將藥片進(jìn)行研磨，加水溶解，制成混懸液。VD 3、膽酸鈉、膽固醇、丙基硫氧嘧啶： 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司。
[0031] 1.3儀器
[0032] 酶標(biāo)儀（iMARK，BI0-RAD )、顯微鏡（OLYMPUS，DSX500 )、烘干箱（南京萊布科技實(shí)業(yè) 有限公司，DZF-6020)
[0033] 1.4大鼠分組及模型制備
[0034]將60只雄性SD大鼠常規(guī)飼養(yǎng)1周后，觀察實(shí)驗(yàn)動物狀態(tài)穩(wěn)定，將其隨機(jī)分為6組，每 組10只，分別為空白對照組、模型對照組、陽性對照組(復(fù)方丹參片溶液，25.92mg/mL)和鹽 酸丙咪嗪組(80mg · kg^1)、化合物（I)組（80mg · kg^1)、鹽酸丙咪嗪與化合物（I)組合物組 【40mg · kg<鹽酸丙咪嗪+40mg · kg<化合物（I)】。各組按照體質(zhì)量進(jìn)行腹腔注射造模，其中 空白對照組注射生理鹽水，其余各組注射VD3。并于造模當(dāng)天除空白對照組外各組均給予高 脂飼料喂養(yǎng)。高脂飼料制作:將普通飼料粉碎成粉末狀，按照配方添加藥物:配方為:3 %膽 固醇，0.5%膽酸鈉，0.2%丙基硫氧嘧啶，5%白糖，10%豬油。加水調(diào)勻，制作成條形，放入 烘干箱中烘干。各組按體質(zhì)量灌胃給藥，空白對照組每天給予普通飼料喂養(yǎng)，灌胃給生理鹽 水;模型對照組給生理鹽水灌胃；其余藥物組相應(yīng)藥物灌胃，給藥時間為8周。
[0035] 1.5試驗(yàn)材料獲取
[0036] 8周后禁食24h，進(jìn)水8h，稱量動物體質(zhì)量，麻醉實(shí)驗(yàn)動物，心臟取血，取動脈及心臟 組織。離心血清，5min，5000r/min，取上清，放于-20°C備用。動脈及心臟組織置于甲醛固定 液中備用。
[0037] 1.6血脂含量檢測
[0038] ELISA法檢測血脂含量，按照說明書中步驟進(jìn)行操作，在酶標(biāo)儀上觀測結(jié)果。
[0039] 1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0040] 應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，結(jié)果以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差土s)表 不。
[0041 ] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0042] 2.1對AS模型大鼠血脂的影響
[0043]血清總膽固醇（TC)、高密度與低密度脂蛋白膽固醇(HDL-C與LDL-C)及三酰甘油 (TG)是動脈粥樣硬化性疾病4項(xiàng)基本指標(biāo)。
[0044] 與空白對照組比，模型對照組大鼠 TG、TC、LDL-C水平顯著升高(P<0.01)，HDL-C水 平顯著降低(p<0.01)，說明造模成功。與模型對照組比，陽性對照組大鼠 TG、TC、LDL-C水平 顯著降低(P<〇.〇l)，HDL_C水平顯著升高(P<0.01);與模型對照組比，鹽酸丙咪嗪組、化合 物（I)組大鼠 TG、TC、LDL-C水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05);與模型對照組相 比，鹽酸丙咪嗪與化合物（I)組合物組大鼠 TG、TC、LDL-C水平顯著降低(P< 0.01)，HDL-C水 平顯著升高(Ρ<〇.〇1)。結(jié)果見表1。
[0045] 表1對AS模型大鼠血脂的影響（? 土s，n = 10，mmol/L)
[0046]
[0047] 上述結(jié)果表明，鹽酸丙咪嗪、化合物（I)單獨(dú)作用時，可以調(diào)節(jié)血脂治療動脈粥樣 硬化;鹽酸丙咪嗪和化合物（I)聯(lián)合作用時，作用效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療動脈粥 樣硬化的藥物。
[0048]上述實(shí)施例的作用在于說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物α)，2. -種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，其特征在于:包括鹽酸丙咪嗪、如權(quán)利要求1所述的 化合物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，其特征在于:藥學(xué)上可以接受的載 體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載 體或潤滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片劑、 膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射 劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將黑 種草子粉碎，用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸 乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物； (b)步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個柱體積，再用70%乙醇洗 脫12個柱體積，收集70 %洗脫液，減壓濃縮得70 %乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70 %乙醇 洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯 度洗脫得到4個組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、 15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵 合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為72%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個柱體積 洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)用80%乙醇熱回 流提取，合并提取液。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為D101型 大孔吸附樹脂。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯進(jìn)行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療動脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。10. 權(quán)利要求2~4任一所述的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物在制備治療動脈粥樣硬化的藥 物中的應(yīng)用。
【文檔編號】C07C45/79GK105949044SQ201610372938
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年5月28日
【發(fā)明人】蔣靈錕
【申請人】蔣靈錕