一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法及其應(yīng)用。該方法包括如下步驟：蓮子心藥材浸泡于甲醇和/或乙醇的水溶液中進(jìn)行超聲或閃式提取，得提取物；提取液濃縮，酸提堿沉，離心，通過大孔吸附樹脂柱吸附、醇的水溶液洗脫等方法，得到一種甲基蓮心堿粗品，純度70％以上。本發(fā)明生產(chǎn)成本低，操作簡單易行，設(shè)備投入小，綠色環(huán)保，適合工業(yè)化生產(chǎn)應(yīng)用。
【專利說明】
一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于天然藥材提取物的深加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從蓮子心中提取甲 基蓮心堿的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著社會人口的老齡化，老年癡呆癥與腦血管疾病、惡性腫瘤已被列為三大老年 人疾病。老年癡呆(Alzheimer Disease，簡稱AD)是一種病因不明的原發(fā)性腦部退行性疾 病，是老年人的多發(fā)病和常見病。1907年Alois Alzheimer首先描述此病，目前病因尚不明 確，臨床以進(jìn)行性記憶和后天獲得的知識喪失和生活能力最終喪失為特征。AD發(fā)病率約占 癡呆病人的40%-60%，病理特征主要為皮質(zhì)神經(jīng)元纖維纏結(jié)(Neurof ibri 1 lary tangles， NFTs)和神經(jīng)炎性斑（Senile plaques，SP)的出現(xiàn)及大量神經(jīng)元的死亡。據(jù)統(tǒng)計，當(dāng)今世界 約有5000多萬老年人患有不同程度的癡呆。AD在確診后平均生存期為7-8年。西方國家這類 病人每年需花費約1.5萬美元，我國雖沒有這方面的統(tǒng)計，估計每年總花費約200億人民幣。 由此可見，AD已是家庭和社會的沉重負(fù)擔(dān)，不僅是一個重大的醫(yī)學(xué)問題，而且是一個嚴(yán)重的 社會問題。近十年AD的研究取得了很大進(jìn)展，國外分析家預(yù)測在未來十年內(nèi)AD患者將會增 加到20%左右，AD藥品市場的增長速度將有較大幅度的上升。
[0003] 因此，研究開發(fā)治療或預(yù)防老年癡呆等神經(jīng)退化性疾病和高血壓等心腦血管疾病 的藥物具有巨大的市場前景。
[0004] 蓮子心（lotus plumula)為睡蓮科植物蓮NelumbonuciferaGaertn.成熟種子中間 的綠色胚根，主要分布于中國江西廣昌、南豐白舍鎮(zhèn)、浙江西湖、福建建寧、江蘇太湖等地； 性味苦、寒，去熱止血，治心煩，口渴，平和五臟之氣。研究表明蓮子心中含有蓮心堿、異蓮心 堿、甲基蓮心堿、荷葉堿、前荷葉堿、牛角花素、去甲烏藥堿等生物堿類化合物，該類化合物 具有較強的降低血壓，擴(kuò)張血管，降脂，抗氧化，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、清除自由基抗炎以及癌癥增 敏等藥理作用。但是目前甲基蓮心堿的提取方法復(fù)雜，收率低，純度低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種方法易行，操作簡便，成本低廉，甲基蓮心堿提取率和 純度較高的從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的 方法，包括如下工藝步驟：
[0007] 1)提取:于蓮子心中加入體積百分濃度為40%~90%的含醇水溶液，料液比為1:
[0008] 10~20,經(jīng)超聲或閃式提取，過濾，濾液減壓回收至無醇味，用水混懸，得到蓮子心
[0009] 提取液；
[0010] 2)酸提:用酸調(diào)節(jié)蓮子心提取液的pH至2~5,離心，取上清液；
[0011] 3)堿沉:用堿調(diào)節(jié)上清液的pH至7~10,取沉淀部分，減壓蒸餾得濃縮提取液，加入 水或含醇水溶液至溶解，過濾，取濾液；
[0012] 4)吸附：將濾液上樣于填充有吸附材料的吸附柱吸附；所述的吸附材料為大孔吸 附樹脂；
[0013] 5)洗脫:用體積百分濃度為10 %~70 %的含醇水溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液減 壓蒸餾回收醇，得產(chǎn)物。
[0014] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，所述的含醇水溶液中所用的醇為 乙醇或甲醇。
[0015] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，超聲或閃式提取的時間為2~ 3min〇
[0016] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，步驟4)中，所述濾液的pH為9。
[0017] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，步驟4)中，上樣的濾液中，藥物與 大孔吸附樹脂的質(zhì)量比為〇. 4~1.2:1。
[0018] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，所述的大孔吸附樹脂是D101大孔 吸附樹脂、AB-8大孔吸附樹脂或HPD-600大孔吸附樹脂。
[0019]上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，洗脫流速為1~2.5BV/h。
[0020] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點和效果：
[0021] 1.本發(fā)明，甲基蓮心堿的制備不用有毒的有機(jī)溶劑，不污染環(huán)境，耗時少，效率高， 提取工藝簡單，成本低廉，可進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，并達(dá)到了環(huán)保的要求。
[0022] 2.本發(fā)明，乙醇可以回收重復(fù)使用，大孔吸附樹脂也可以處理后再應(yīng)用，降低了生 產(chǎn)成本，便于推廣，因此，在國內(nèi)外市場上有強勁的競爭力。
[0023] 3.本發(fā)明，蓮子心取自天然資源，蓮子心中提取的甲基蓮心堿毒副作用較小，安全 可靠，具有多種生物活性，其強烈的神經(jīng)元細(xì)胞保護(hù)作用和降壓作用，對治療或預(yù)防老年癡 呆等神經(jīng)退化性疾病和高血壓等心腦血管疾病十分有益。蓮子心在我國自然資源十分豐 富，從蓮子心中提取甲基蓮心堿用于新藥研制，是有效利用自然資源的一項有力措施。 [0024] 4.采用本發(fā)明的方法，甲基蓮心堿提取率可達(dá)0.61 %，純度可達(dá)50~90%。
[0025] 5.本發(fā)明，簡化了提取純化步驟與時間，可達(dá)到高效率的生產(chǎn)，很大程度的縮短了 生產(chǎn)周期，增加了有效產(chǎn)物的收率百分比，減少了藥材的成本損耗，達(dá)到了資源最大化利用 的目的。
【附圖說明】
[0026] 圖1是制備的甲基蓮心堿的液相譜圖。
【具體實施方式】
[0027] 實施例1 一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法
[0028] 大孔吸附樹脂的預(yù)處理：取D101大孔吸附樹脂，用95%乙醇浸泡24h，使其充分膨 脹，濕法裝入吸附柱后，用95%乙醇液洗至流出液加適量純水無白色渾濁現(xiàn)象，再用去離子 水洗凈乙醇，直至流出液無醇味無渾濁為止。
[0029]方法如下：
[0030] 1)提取:稱取蓮子心干燥藥材10g，加入180ml濃度為60% (v/v)的乙醇水溶液，閃 式提取三次，每次2~3min，過濾，合并三次提取濾液，濾液減壓回收至無乙醇味，用水混懸， 得到蓮子心提取液；
[0031] 2)酸提:用HC1溶液調(diào)節(jié)蓮子心提取液的pH至3,離心，取上清液；
[0032] 3)堿沉:用NaOH溶液調(diào)節(jié)上清液的pH至9，取沉淀部分，減壓蒸餾得濃縮提取液。取 290mg濃縮提取液溶解于20mL蒸餾水中，完全溶解后，過濾，濾液加水配置濃度為14.5mg/mL 的溶液；
[0033] 4)吸附：將濃度為14.5mg/mL的溶液上樣于填充有D101大孔吸附樹脂的吸附柱進(jìn) 行吸附;上樣量為，樹脂(g):濾液中藥物(g) = 1: 〇. 4~1.2，上樣液的pH為3~11;
[0034] 5)洗脫：用濃度為10%~70% (v/v)的乙醇水溶液洗脫，洗脫液用量為5BV，洗脫流 速為1~2.5BV/h，收集洗脫液，洗脫液減壓蒸餾回收乙醇，得含有甲基蓮心堿的產(chǎn)物。
[0035]含有甲基蓮心堿的產(chǎn)物用甲醇復(fù)溶，點薄層板并使用碘化鉍鉀顯色，確認(rèn)顯橘色 斑點后，取少量使用孔徑為0.22μπι的微孔濾膜將其過濾，使用Agilentl200儀器利用HPLC測 定產(chǎn)物中甲基蓮心堿的純度，純度為90%。
[0036](一)洗脫溶劑對產(chǎn)率的影響
[0037]方法同上，改變洗脫溶劑中乙醇水比例，上樣液pH為9,上樣液中，樹脂(g):濾液中 藥物(g) = 1: . 4，洗脫流速為2Bv/h，結(jié)果如表1。
[0038]表1
[0040](二)上樣液pH對產(chǎn)率的影響
[00411方法同上，改變上樣液pH，使用60 % (v/v)的乙醇水溶液洗脫，上樣液中，樹脂(g): 濾液中藥物(g) = 1:0.4，洗脫流速為2Bv/h，結(jié)果如表2
[0042]表 2
[0044](三)上樣量對產(chǎn)率純度的影響
[0045] 方法同上，改變上樣量樹脂（g):濾液中藥物(g)，使用60 % (v/v)的乙醇水溶液洗 脫，上樣液pH調(diào)整為9，洗脫流速為2Bv/h，結(jié)果如表3。
[0046] 表 3
[0048] (四）洗脫流速對產(chǎn)率純度的影響
[0049] 方法同上，改變洗脫流速，使用60 % (v/v)的乙醇洗脫，上樣液pH調(diào)整為9，上樣量 為樹脂(g):濾液中藥物(g) = 1:0.4,結(jié)果如表4。
[0050] 表 4
【主權(quán)項】
1. 一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于，包括如下步驟： 1) 提取:于蓮子心中加入體積百分濃度為40 %~90 %的含醇水溶液，料液比為1:10~ 20,經(jīng)超聲或閃式提取，過濾，濾液減壓回收至無醇味，用水混懸，得到蓮子心提取液； 2) 酸提:用酸調(diào)節(jié)蓮子心提取液的pH至2~5,離心，取上清液； 3) 堿沉:用堿調(diào)節(jié)上清液的pH至7~10,取沉淀部分，減壓蒸餾得濃縮提取液，加入水或 含醇水溶液至溶解，過濾，取濾液； 4) 吸附：將濾液上樣于填充有吸附材料的吸附柱吸附；所述的吸附材料為大孔吸附樹 脂； 5) 洗脫：用體積百分濃度為10 %~70 %的含醇水溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓蒸 餾回收醇，得產(chǎn)物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:所述的 含醇水溶液中所用的醇為乙醇或甲醇。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:超聲或 閃式提取的時間為2~3min。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:步驟4) 中，所述濾液的pH為9。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:步驟4) 中，上樣的濾液中，藥物與大孔吸附樹脂的質(zhì)量比為0.4~1.2:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:所述的 大孔吸附樹脂是DlOl大孔吸附樹脂、AB-8大孔吸附樹脂或HPD-600大孔吸附樹脂。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:洗脫流 速為1~2.5BV/h。8. 按照權(quán)利要求1-7任一所述的方法提取的甲基蓮心堿在制備治療或預(yù)防老年癡呆藥 物中的應(yīng)用。
【文檔編號】C07D217/20GK105949121SQ201610388847
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月2日
【發(fā)明人】陳長蘭, 呂晶, 孫嬋, 于夏, 孟雪蓮, 劉玥辰, 陳皓月, 劉武, 蔡明星, 馮樂言
【申請人】遼寧大學(xué)