一種苯并呋喃型倍半萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種苯并呋喃型倍半萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。該化合物為首次報道，是一種結(jié)構(gòu)新穎的苯并呋喃型倍半萜類化合物，可以從干燥的蛇床子中提取、分離純化得到。體外試驗證明該化合物對前列腺癌細胞株P(guān)C3和DU145有抑制作用，且抑制作用具有濃度—時間依賴性關(guān)系，可以用來開發(fā)成治療前列腺癌的藥物。
【專利說明】
一種苯并呋喃型倍半萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從干燥的蛇床子中分離得到的一種苯并呋喃 型倍半萜類化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物蛇床子為一年生草本植物，高30~80cm。莖直立，有分枝，表面有縱溝紋，疏生 細柔毛。葉互生，2~3回羽頭細裂，最終裂片線狀披針形，先端尖銳;基生葉有長柄，柄基部 擴大成鞘狀。復(fù)傘形花序頂生或腋生;總苞片8~10,線形;花白色，花柱基短圓錐形，花柱細 長，反折。雙懸果寬橢圓形，果棱具翅?；ㄆ?~7月，果期6~8月。生于原野、田間、路旁、溪溝 邊等潮濕處。
[0003] 中藥蛇床子為傘形科(Umbelliferae)蛇床屬植物蛇床?c_ie_ri(L.) Cuss.的干燥成熟果實。蛇床子性溫，味辛苦，有小毒。外用燥濕殺蟲止癢，內(nèi)服溫腎壯陽，祛 風燥濕。用于治療陽痿，宮冷，寒痹腰痛，外治滴蟲性陰道炎，手、足癬感染等。國內(nèi)外關(guān)于蛇 床子藥理效應(yīng)的報道很多，涉及免疫、神經(jīng)、內(nèi)分泌、心血管、呼吸及生殖等系統(tǒng)，主要表現(xiàn) 為抗炎、抗過敏、中樞抑制、抗心律失常及抗腫瘤等作用。
[0004] 蛇床子主要含香豆素類化合物，此外還有色原酮類和苯并呋喃類化合物。蛇床子 揮發(fā)油中，相對含量較高的組分主要有倍半萜類，此外還有酯類和萜醇類化合物。大量研究 證明蛇床子的有效成分為香豆素類化合物，其中含量最高的兩種香豆素類化合物為蛇床子 素 (Osthole，0st)、歐前古月素（Imperatorin，Imp) 〇
[0005] 因此Ost及Imp經(jīng)常作為評價不同來源地的蛇床子藥材的質(zhì)量及含蛇床子中成藥 的質(zhì)控指標。由于〇st具有許多重要的藥理活性包括抗癌、抗增殖等活性，以及Imp具有抑制 癲癇發(fā)作、擴張血管、抑制心肌肥大、抑制腫瘤細胞增殖、抗微生物、影響藥物代謝酶活性等 多種藥理作用，而受到越來越多的關(guān)注。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種從干燥的蛇床子中分離得到的一種苯并呋喃型倍半萜 類化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的： 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I):
[0008] 所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將干燥的蛇床子粉碎，用70 ~80%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正 丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇 取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫8個柱體積，收集70% 洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分 離，依次用體積比為90:1、60 :1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分； (d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用 體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~14個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮 得到化合物(I)。
[0009] 進一步地，步驟(a)中，用75%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0010]進一步地，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0011] 藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物(I)和藥學(xué)上可接受的載體。
[0012] 所述的化合物(I)在制備治療前列腺癌的藥物中的應(yīng)用。
[0013] 所述的藥物組合物在制備治療前列腺癌的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0015] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對 人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0016] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【具體實施方式】
[0017] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0018] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0019] 實施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證 (a)干燥的蛇床子(6kg)粉碎，用75%乙醇熱回流提取(20LX 3次），合并提取液，濃縮至 無醇味(6L)，依次用石油醚(6LX3次）、乙酸乙酯(6LX3次)和水飽和的正丁醇(6LX3次)萃 取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(381g)和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中乙酸乙 酯萃取物用D101大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫8個柱體積， 收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物（125g) ; (c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物 用正相硅膠分離，依次用體積比為90:1 (8個柱體積）、60:1 (8個柱體積）、35:1 (8個柱體積）、 15:1(10個柱體積)和1:1(6個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟(c) 中組分4(27g)用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1(8個柱體積）、15:1(8個柱體 積)和5:1(6個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2(15g) 用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集 10~14個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I) (351mg)。
[0020] 結(jié)構(gòu)確證:淺黃色膠狀物，HRAPCHMS顯示[M+H]+為m/z 243.0974,結(jié)合核磁特征可 得分子式為CuHmOs，不飽和度為9。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ΡΡπι，CDC13，500MHz ) : H-1 (3.07， m)，H-l(3.45，m)，H-2(2.74，m，2H)，H-3(5.65，tJ=6.1Hz)，H-8(8.03，s)，H-12(7.69，s)，H-13(4.86，dj=4· 6Hz，2H)，H-14( 10.33，s)，H-15( 1.99, s)，13-OH( 1.72, tj=4· 8Hz);核磁共 振碳譜數(shù)據(jù) Sc(ppm，CDCl3，125MHz):27.5(CH2，l-C)，25.2(CH2,2-C)，117.6(CH，3-C)，128.9 (C，4-C)，119.3(C，5-C)，162.5(C，6-C)，124.8(C，7-C)，123.7(CH，8-C)，130.6(C，9-C)， 135.6(C，10-C)，121.7(C，11-C)，143.1(CH，12-C)，56.2(CH2，13-C)，192.9(CH，14-C)，21.8 (CH 3，15-C)。紅外波譜表明該化合物含有羥基(3376CHT1)，羰基（17250^1) ,-.(16650^1) 和芳香環(huán)（1613cm-1,1580m-1,1468cm- 1)基團。h-NMR譜顯示一個甲基質(zhì)子信號<8 1.99(3H， 8)，一組移向低場的羥甲基質(zhì)子信號6 4.86(2!1，(1，/=4.6抱），兩組亞甲基質(zhì)子信號(8 3.07 (1!1，111)、3.45(1!1，111)與2.74(2!1，111)，一個環(huán)內(nèi)烯烴質(zhì)子信號(8 5.65(1!^，/=6.1他），一個 環(huán)內(nèi)連氧烯烴質(zhì)子信號€7.69(1!1，8)，一個芳烴質(zhì)子信號 (8 8.03(1!1，8)，一個醛基質(zhì)子信 號杏 10.33(lH，s)，一個羥基質(zhì)子信號 <8 l·72(lH，t，l·/=4·8Hz)。13C-NMR、DEPT和HSQC譜中顯 示有15個碳信號，包括一個甲基21.8,三個亞甲基（一個連氧亞甲基）<? 27.5、25.2、 56.2，四個次甲基(一個含羰基碳，兩個烯烴碳與一個連氧烯烴碳）<?117.6、123.7、143.1、 192.9,以及七個季碳(七個烯烴碳）<? 128·9、119·3、162·5、124·8、130·6、135·6、121·7;以 上功能結(jié)構(gòu)再結(jié)合不飽和數(shù)表明該化合物為三環(huán)結(jié)構(gòu)。HMBC譜中，Η 2-13與C-7和C-12的相 關(guān)性表明C-11位連有一個羥甲基，Η-14與C-10和C-8的相關(guān)性表明C-9位連有一個醛基，Η 3-15與C-3與C-5的相關(guān)性可知甲基與C-4相連。此外，分析HMBC譜中Η-3與C-2和C-4，Η-8與C-7 和C-9,以及Η-12與C-6和C-11的相關(guān)性并結(jié)合 1H-1!! COSY譜中Η2-1/Η2-2/Η-3,以及Η-12/Η2-13/13-OH的相關(guān)性可以構(gòu)建出該化合物的連接方式，進而確證該化合物的結(jié)構(gòu)。綜合氫譜、 碳譜、HMBC譜和N0ESY譜，以及文獻關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下所示， 立體構(gòu)型進一步通過E⑶試驗確定，理論值與實驗值基本一致。
[0022]實施例2:化合物（I)藥理作用試驗 一、材料和儀器 前列腺癌細胞株P(guān)C3(ArCC-CRL-1435)、前列腺癌細胞株DU145(ATCC-HTB-81)?；衔?(I)自制，HPLC歸一化純度大于98%，用二甲基亞礬(DMSO)配制成濃度為1.Og/L的儲存液備 用。CCK-8試劑盒為日本同仁化學(xué)研究所產(chǎn)品。RPMI-1640培養(yǎng)基購自Gibco公司。胎牛血清 (FBS)購自Hyelone公司。青/鏈霉素為上海先鋒藥業(yè)產(chǎn)品。胰蛋白酶購自華美生物工程公 司。二甲基亞砜(DMS0)購自上海華舜生物工程公司。瓊脂(Agarose)、二硫蘇糖醇(DTT)、苯 甲基磺酞氟(PMSF)、四甲基乙二胺(TEMED)為Sigma公司產(chǎn)品。十二烷基磺酸鈉(SDs)、三氯 甲基烷基甲燒(Tris) Tris-Hcl、Tritonx-100為Promega公司產(chǎn)品。丙稀酞胺、過硫酸錢 (AP)購于蘇州化學(xué)試劑廠產(chǎn)品。
[0023] C02細胞培養(yǎng)箱(ShellLab)，倒置相差顯微鏡(Nikon)，超凈工作臺（蘇州凈化設(shè)備 廠），流式細胞儀（BD)，F(xiàn)039300A型酶標儀（Sunrise)，高壓蒸汽滅菌器（Hirayama HA-300MD)，低溫超速離心機(Kubota 3740)，萬向搖床(江蘇麒麟醫(yī)用儀器廠TS-92)，電泳儀 (Gibco公司），LXJ-n型離心機(上海醫(yī)用分析儀器廠），DK600型電熱恒溫水浴箱(上海精密 試驗設(shè)備公司），電子天平(METTLER TOLEDO)，臺式干燥箱（上海森信實驗儀器有限公司）， 紫外分光光度儀(Beckman)。
[0024]二、試驗方法 1、細胞培養(yǎng)與養(yǎng)護 1.1細胞培養(yǎng) 細胞株培養(yǎng)于腫瘤醫(yī)院中心實驗室。培養(yǎng)于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中，另 添加谷氨酞胺(2mmol/L)和抗生素（100U/青霉素和100mg/L鏈霉素），置37°C、飽和濕度、含 5%C0 2氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
[0025] 1.2細胞傳代 ①于倒置相差顯微鏡下觀察細胞長滿貼壁，即可傳代。傳代前用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外 線照射的超凈工作臺和雙手。②用吸管吸去培養(yǎng)瓶中的舊培養(yǎng)液，用PBS清洗3次。③加入 0.02% EDTA-0.25%胰蛋白酶液2mL進行消化，靜置約5分鐘，并不時在倒置相差顯微鏡下觀 察，當胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片時，加入適量含血清之新鮮培養(yǎng)基終止胰蛋白酶的 作用。④用滴管將已經(jīng)消化的細胞吹打成細胞懸液，吸入10mL離心管中平衡離心（1000轉(zhuǎn)/ 分)5分鐘。⑤棄去上清液，加入2mL培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液，1: 2~3分裝 入新培養(yǎng)瓶，添加培養(yǎng)液適量于孵箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
[0026] 2、細胞形態(tài)學(xué)觀察 倒置顯微鏡觀察：將對數(shù)生長期PC3和DU145細胞接種于6cm培養(yǎng)皿，培養(yǎng)24h后加入 10.0 mg X Γ1，化合物（I)處理24，48，72h后分別在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)改變并記 錄。
[0027] 3、細胞毒試驗(CCK-8法） ①培養(yǎng)瓶中的細胞消化成單細胞懸液，細胞計數(shù)后按照3X104個細胞/孔接種于96孔 板，每孔加0. lmL培養(yǎng)基，常規(guī)培養(yǎng)于37°C、含5%C02氣體的培養(yǎng)箱中。②試驗分組:設(shè)陰性對 照組（有細胞但不加藥，0.1%DMS0)，空白對照組（無細胞僅有培養(yǎng)液），化合物（I)分別 2 · 5mg/L，5 · 0mg/L，10 · 0 mg/L和20 · 0 mg/L共6組。③24小時后觀察細胞貼壁生長良好，分別 按上述試驗分組向96孔板內(nèi)加藥，每組設(shè)6-8個重復(fù)孔。④加藥后將96孔板移入37°C、含5% C02氣體的培養(yǎng)箱中繼續(xù)分別培養(yǎng)24、48和72小時。⑤每組試驗結(jié)束時每孔加入CCK-8 10μ L，37°C培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4小時后酶標儀檢測450每孔的吸光度(0D)值，測定波長為450nm， 參考波長為600nm。⑥按照以下公式計算出細胞存活率（cell viability)，然后繪制成圖 表，存活率為50%時的值即為IC5Q。細胞存活率(％)=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]X100%。其中As為試 驗孔，Ac為對照孔，Ab為空白孔。
[0028] 4、集落形成試驗 ①取對數(shù)生長期細胞，計數(shù)后以3 X 102個接種于6孔板，每孔加2mL培養(yǎng)基，常規(guī)培養(yǎng)于 37°C、含5%￡02氣體的培養(yǎng)箱中。②24h后觀察細胞貼壁生長良好，分別加入不同濃度（0， 2.5.5.0. 10.0.20.0mg/L)化合物（I)處理，每組設(shè)3個重復(fù)孔。③加藥后將6孔板移入37°C、 含5%C〇2氣體的培養(yǎng)箱中繼續(xù)14天。④10%甲醇固定，Giemsa染色，計算每孔集落數(shù)（多50個 細胞的計為一個集落）。⑤計算集落形成率:集落總數(shù)/接種細胞數(shù)X 100%。
[0029]三、結(jié)果及結(jié)論 1、化合物（I)氣對PC3和DU145細胞形態(tài)的影響 鏡下見對照組細胞貼壁生長，相鄰細胞融合成片，細胞呈類圓形或梭形，體積較大，排 列緊密，邊緣光滑，胞質(zhì)飽滿，核膜、核仁等結(jié)構(gòu)輪廓明顯，細胞生長迅速;經(jīng)10. 〇mg/L化合 物（I)處理后，細胞密度逐漸降低，生長速度明顯減慢至幾乎停滯，細胞逐漸脫落并漂浮于 培養(yǎng)液中。細胞體積縮小，胞膜皺縮，成小圓形或不規(guī)則形態(tài)，胞內(nèi)多見小顆粒狀物質(zhì)。藥物 作用時間越長，細胞形態(tài)學(xué)改變越明顯。
[0030] 2、細胞毒試驗 不同濃度化合物（I)對前列腺癌細胞株P(guān)C3和DU145的生長均有抑制作用。2.5，5.0， 10.0. 20.011^/1化合物（1)作用兩種細胞24,48和7211后的存活率如下表所示(表1及表2)。其 中，10.011^/1化合物（1)作用于？03和01]145細胞24,45,7211后的細胞存活率分別為56.2%， 42 · 5%，24 · 3%和50 · 8%，32 · 6%，20 · 7%; 2 · 5，5 · 0，10 ·0，20 ·Omg/L，化合物（I)作用兩種細胞 72h后的存活率分別為54 · 3%，37 · 7%，24 · 3%，13 · 2%和52 · 4%，32 · 8%，20 · 7%，11 · 2%。兩因素方 差分析示不同濃度與不同時間處理組之間差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P〈〇.05)，提示化合物（I) 對PC3和DU145的生長抑制作用呈時間濃度依賴。
[0031] 3、集落形成試驗 試驗顯示，對照組PC3和DU145的集落形成率分別為67.7和64%，而2.5，5.0，10.0， 20 ·Omg/L化合物（I)處理組分別為60 · 7%，51 · 3，39 · 3%，27 · 0%和49 · 7%，34·0%，27 · 7%，15 · 7% (見表3)。這進一步證實了化合物（I)對PC3和DU145細胞具有增殖抑制作用。
[0032]結(jié)論，本試驗中通過CCK-8法和集落形成試驗來驗證化合物（I)對前列腺癌細胞株 PC3和DU145的作用，且抑制作用具有濃度一一時間依賴性關(guān)系?；衔铮↖)可能成為晚期前 列腺癌治療中的一個具有潛力的選擇。
[0033]表1不同濃度化合物（I)作用于PC3后的細胞存活率
表2不同濃度化合物（I)作用于DU145后的細胞存活率
表3不同濃度化合物（I)作用下PC3和DU145的集落形成率
實施例3 片劑的制備:按實施例1方法先制得化合物(I)，以及利用有機酸如酒石酸、或檸檬酸或 甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按其與賦形劑重量比為1:7的比例 加入賦形劑，制粒壓片。
[0034] 實施例4 口服液的制備:按實施例1方法先制得化合物(I )，以及利用有機酸如酒石酸、或檸檬酸 或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按常規(guī)口服液制法制成口服液。
[0035] 實施例5 膠囊劑或顆粒劑的制備:按實施例1方法先制得化合物(I)，以及利用有機酸如酒石酸、 或檸檬酸或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按其與賦形劑重量比 為1:9的比例加入賦形劑，制成膠囊或顆粒劑。
[0036] 實施例6 注射液的制備:按實施例1方法先制得化合物(I )，以及利用有機酸如酒石酸、或檸檬酸 或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按常規(guī)加注射用水，精濾，灌封 滅菌制成注射液。
[0037] 實施例7 無菌粉針的制備:按實施例1方法先制得化合物(I)，以及利用有機酸如酒石酸、或檸檬 酸或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，將其溶于無菌注射用水中，攪 拌使溶，用無菌抽濾漏斗過濾，再無菌精濾，分裝于安瓿中，低溫冷凍干燥后無菌熔封得粉 針劑。
[0038] 上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和保護范圍。
【主權(quán)項】
1. 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物α):2. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于包含以下操作步驟：（a)將干燥 的蛇床子粉碎，用70~80%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸 乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物； (b)步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫 8個柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃 縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為90:1、60:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到5個組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1、15:1 和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的 反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~14個柱體積洗脫液， 洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)中，用75%乙醇熱 回流提取，合并提取液。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為D101型 大孔吸附樹脂。5. -種藥物組合物，其特征在于：其中含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的化合物（I) 和藥學(xué)上可接受的載體。6. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療前列腺癌的藥物中的應(yīng)用。7. 權(quán)利要求5所述的藥物組合物在制備治療前列腺癌的藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P35/00GK105949154SQ201610320540
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年5月16日
【發(fā)明人】徐珍
【申請人】蘇州畢諾佳醫(yī)藥技術(shù)有限公司