一種水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu(Ⅱ)配合物及其合成與應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一類水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu(Ⅱ)配合物的合成與應(yīng)用，屬于化學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域。本發(fā)明將卟啉與酰腙有效的結(jié)合起來，合成一類水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu(Ⅱ)配合物，使二者的生物活性產(chǎn)生協(xié)同，更大程度的發(fā)揮其在抗癌活性方面的應(yīng)用；此外，本發(fā)明還將吡啶基陽離子引入到卟啉環(huán)上，大大增加了其水溶性，溶解性的增大克服了卟啉衍生物的一大缺陷，使其抗癌性能顯著增高。通過對其與ct?DNA的作用強(qiáng)度及體外抗腫瘤的研究，初步認(rèn)為本發(fā)明中合成的這類新型的水溶性酰腙類Schiff堿卟啉及其Cu(Ⅱ)配合物有較好的抗癌活性。
【專利說明】
一種水溶性酰腙類Sch i ff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物及其合成 與應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明提供了一類新型水溶性酰腙類Schiff堿卟啉及其金屬Cu(n)配合物的合 成;本發(fā)明還涉及該水溶性酰腙類Schiff堿卟啉及其金屬Cu( Π )配合物與ct-DNA的相互作 用及在體外抗腫瘤方面的應(yīng)用，屬于化學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 癌癥是世界上最致命的疾病之一，嚴(yán)重威脅人類健康，每年都有數(shù)以百萬的人死 于癌癥。因此，開發(fā)新的抗癌藥物至關(guān)重要，金屬配合物在眾多藥物中呈現(xiàn)出好的生物活 性，自順鉑問世后，其受到了廣泛的關(guān)注。開發(fā)新型有效的抗癌藥物是當(dāng)今世界十分迫切的 重要課題。撲啉類衍生物作為抗癌藥物發(fā)揮了重要作用，從最初的血卟啉到目前的各種功 能卟啉衍生物，很多卟啉類抗癌藥物已經(jīng)在世界范圍內(nèi)得到了廣泛的關(guān)注和研究。但同時(shí) 由于卟啉化合物具有較大的剛性空間構(gòu)型，使得其在水中的溶解度幾乎為零，這大大限制 了卟啉化合物的應(yīng)用。吡啶基、磺酸基、氨基、羧基等大極性基團(tuán)具有良好的水溶性，將卟啉 環(huán)與大極性基團(tuán)結(jié)合在一起，可以得到相應(yīng)的水溶性卟啉衍生物。因而水溶性卟啉的研究 引起人們的廣泛關(guān)注。
[0003] 酰腙作為一種特殊的schiff堿，具有較強(qiáng)的配位能力和廣泛的抗癌活性，已經(jīng)被 廣泛應(yīng)用于臨床治療。1988年，Mohan與其合作者合成了7個(gè)含有吡啶環(huán)的芳酰腙，并以它們 為配體合成了大量的過渡金屬配合物，對配體及配合物的抗腫瘤活性進(jìn)行了測試，結(jié)果表 明：配體均表現(xiàn)出明顯的生物活性，而配合物中Cu(PCPH)C1 2表現(xiàn)出比配體更強(qiáng)的活性。 KohLL.等人報(bào)道了水楊醛酰腙有很好的親脂性，能殺死白血病細(xì)胞毒素，水楊醛苯甲酰腙 能有效的抑制人和嚙齒動物許多DNA的合成和細(xì)胞的生長。2004年，西班牙學(xué)者報(bào)道異煙酰 腙與銅或鎳形成的配合物對白血病有較好的治療效果，可以抑制其DNA的合成。從這一系列 的報(bào)道可以看出，酰腙類化合物在抗癌方面有很好的生物活性。
[0004] 基于以上綜述，本發(fā)明將卟啉與酰腙有效的結(jié)合起來，合成一類水溶性酰腙類 Schiff堿卟啉及其Cu(n)配合物，使其更大程度的發(fā)揮在生物活性方面的應(yīng)用，尤其在抗 癌活性方面的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物； 本發(fā)明的另一目的是提供一種水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物的合成 方法； 本發(fā)明還有一個(gè)更重要的目的，就是提供該類水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π ) 配合物與ct-DNA的相互作用及在體外抗腫瘤方面的應(yīng)用。
[0006] ( - )水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物 本發(fā)明水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物的結(jié)構(gòu)為下式表示的結(jié)構(gòu)之一：
[0007] (二)水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物的合成 1、配合物Cu-Por 1、Cu-Por 2的合成，包括以下工藝步驟： (1)5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）Π 卜啉的合成 將對甲酸甲酯苯甲醛溶于丙酸中，再加入4-吡啶甲醛，加熱使之完全溶解;然后滴加吡 咯，混合均勻后，于140~145°C回流1.5~2h;反應(yīng)完成后，減壓蒸去大部分丙酸;加入甲醇洗 去反應(yīng)過程中生成的吡咯聚合物;室溫?cái)嚢?5~25min后，放置冰箱中冷凍，析出紫色沉淀， 抽濾，收集濾餅，柱層析，即得到紫色產(chǎn)物5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10，15,20-(4-吡啶基)撲 啉； 對甲酸甲酯苯甲醛、4-吡啶甲醛、啦咯以1:3:4的摩爾比投料。
[0008] (2)5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基)卟啉的合成 將5-(4-甲酸甲酯基）苯基-10,15，20-(4_吡啶基）卟啉溶解在三氯甲烷-乙醇混合液 中，加入水合肼，攪拌混合均勻，在70~80°C下回流20~24h，旋蒸濃縮，加入蒸餾水析出紫色 沉淀，抽濾，濾餅用甲醇洗滌，70~80°C下恒溫干燥，收集紫色產(chǎn)物，即得5-(4-肼羰基)苯基_ 10，15,20-(4_吡啶基)卟啉； 三氯甲烷-乙醇混合液中，三氯甲烷與乙醇的體積比為1:2~1:4;水合肼的加入量為5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基)撲啉摩爾量的5~10倍。
[0009] (3)5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉或的合 成 將5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基)Π 卜啉溶于三氯甲烷中；水楊醛或鄰香蘭素 溶于乙醇中；攪拌下將兩種溶液混合，再加入冰醋酸作為催化劑，在70~80 °C下回流20~24h; 反應(yīng)完成后，減壓蒸出溶劑，加入乙醚析出沉淀，抽濾，乙二醚洗滌，真空干燥，收集紫紅色 粉末，即為5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20- (4-吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-吡啶基)撲啉； 水楊醛或鄰香蘭素的加入量為5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4_吡啶基）Π 卜啉摩爾量 的4~5倍； 冰醋酸加入量為5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）撲啉摩爾量的0.06~0.1 倍。
[0010] (4)5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10，15,20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉 或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉 的合成 將5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉溶于DMF中，加入過 量的CH3I(其作用是將卟啉化合物中4-吡啶基上的氮甲基化，從而形成水溶性的吡啶鹽）， 氮?dú)獗Ｗo(hù)，40~50°C避光反應(yīng)2~3h;反應(yīng)完成后，加入丙酮或三氯甲烷，析出紫紅色沉淀， 洗滌，干燥，得到5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基）苯基)-10,15,20-(4-N-甲基吡啶基） 卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基吡啶基） 卟啉； CH3I的作用是將卟啉化合物中4-吡啶基上的氮甲基化，從而形成水溶性的吡啶鹽，其 加入量為5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基）苯基）-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基）肼羰基）苯基)-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉摩爾量的5~7 倍。
[0011] (5)配合物 Cu-Porl 或 Cu_Por2 的合成 將5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基吡啶基）撲啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉溶于 DMF;將C11CI26H2O溶于甲醇，攪拌下混合兩種溶液，50~60 °C下攪拌4~6h;反應(yīng)完成后離心，收 集上清液，旋蒸濃縮，加入CHC13,析出紫紅色固體，過濾，用甲醇洗滌，真空干燥，即得配合 物Cu-Porl或配合物Cu_Por2; CuC126H20的用量為5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基 吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基 吡啶基）卟啉摩爾量的8~12倍。
[0012] 2、配合物Cu-P〇r3的合成，包括以下工藝步驟： (1)5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）Π 卜啉的合成 將對甲酸甲酯苯甲醛溶于丙酸中，再加入4-吡啶甲醛，加熱使之完全溶解;然后滴加吡 咯，混合均勻后，于140~145°C回流1.5~2h;反應(yīng)完成后，減壓蒸去大部分丙酸;加入甲醇甲 醇洗去反應(yīng)過程中生成的吡咯聚合物;室溫?cái)嚢?5~25min后，放置冰箱中冷凍，析出紫色沉 淀，抽濾，收集濾餅，柱層析，即得到紫色產(chǎn)物5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4_吡啶 基)卟琳； 對甲酸甲酯苯甲醛、4-吡啶甲醛、啦咯以1:3:4的摩爾比投料。
[0013] (2)5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-啦啶基）撲啉的合成 將5-(4-甲酸甲酯基）苯基-10,15，20-(4_吡啶基）卟啉溶解在三氯甲烷-乙醇混合液 中，加入水合肼，攪拌混合均勻，在70~80°C下回流20~24h，旋蒸濃縮，加入蒸餾水析出紫色 沉淀，抽濾，濾餅用甲醇洗滌，70~80°C下恒溫干燥，收集紫色產(chǎn)物，即得5-(4-肼羰基)苯基_ 10，15,20-(4_吡啶基)卟啉； 三氯甲烷-乙醇混合液中，三氯甲烷與乙醇的體積比為1:2~1:4;水合肼的加入量為5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基)撲啉摩爾量的5~10倍。
[0014] (3)5- (4-肼羰基)苯基-10，15,20-(4-N-甲基吡啶基)卟啉的合成 將5- (4-肼羰基)苯基-10，15,20- (4-吡啶基)Π 卜啉溶于DMF中，加入過量的CH3I，氮?dú)?保護(hù)，40~50°C避光反應(yīng)2~3h;反應(yīng)完成后，加入丙酮或三氯甲烷析出紫色沉淀，三氯甲烷 洗滌，真空干燥，得到5- (4-肼羰基)苯基-10，15，20- (4-N-甲基吡啶基)Π 卜啉； 〇131的加入量為5-(4-肼羰基)苯基-10，15,20-(4-吡啶基)撲啉摩爾量的5~7倍。 [0015] (4)5- (4-(2-(啦啶-2-亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20- (4-N-甲基吡啶基）卟 啉的合成 將5-(4-肼羰基)苯基-10，15,20-(44-甲基吡啶基）撲啉溶于01^;將2-吡啶甲醛溶 于無水乙醇;將兩種溶液混合后，加入冰醋酸，70~75°C回流20~24h，反應(yīng)完成后，減壓蒸出 溶劑，加入乙醚析出沉淀，抽濾，重結(jié)晶，收集紫紅色沉淀粉末，即可得到5- (4-(2-(吡啶_ 2-亞甲基)肼羰基)苯基）-10，15,20- (4-N-甲基吡啶基)撲啉； 2-吡啶甲醛的用量為5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20- (4-N-甲基吡啶基）Π 卜啉摩爾量的 4~5倍;冰醋酸的用量為5-(4-肼羰基）苯基-10,15,20- (4-N-甲基吡啶基）Π 卜啉摩爾量的 0.06 ~0.1倍。
[0016] (5)配合物Cu_Por3的合成 將5- (4-(2-(吡啶-2-亞甲基)肼羰基)苯基)-10，15,20- (4-N-甲基吡啶基)撲啉溶于 DMF;將C11CI26H2O溶于甲醇，攪拌下混合兩種溶液，50~60°C下攪拌4~6h;反應(yīng)完成后離心， 收集上清液，旋蒸濃縮，加入CHC1 3,析出紫紅色固體，過濾，用甲醇洗滌，真空干燥，即得配 合物 Cu_Por3; 〇1〇126出0的用量為5-(4-(2-(吡啶-2-亞甲基)肼羰基)苯基)-10，15,20-(4-^甲基 吡啶基)卟啉摩爾量的8~12倍。
[0017 ] 配合物Cu-Por 1、Cu-Por 1、Cu-Por 3的合成路線如下式所示：
(三)水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物與DNA(ct-DNA)的相互作用 (1)緩沖溶液（5 111]\11^8-!1(：1/5〇111]\1恥(：14!1 = 7.2)的配置：稱取 0.6036 8 1^8 和2.922 g NaCl置于100 mL燒杯中，加入一定體積的蒸餾水使其完全溶解，轉(zhuǎn)置1000 mL 容量瓶中，定容，搖勾，用鹽酸調(diào)節(jié)至口^1 = 7.2即可。配合物與〇1：-0嫩相互作用的1]￥-'\^8 光譜、熒光光譜、圓二色光譜和粘度實(shí)驗(yàn)均在該緩沖溶液中進(jìn)行。
[0018] (2) DNA溶液的制備:稱取一定量的Ct-DNA (棉絮狀）溶于上述緩沖溶液中（約1 mg ct-DNA/ mL)，待其完全溶解后放入冰箱中，靜置過夜，抽濾，得到ct-DNA儲備液。 [0019] DNA濃度的確定：將配置好的ct-DNA儲備液稀釋100倍，測其在260 nm和280 nm 處的吸光度。若A26Q/A28Q在1.8~1.9之間，則說明ct-DNA儲備液基本上不含蛋白質(zhì)，無需再 做進(jìn)一步的處理。根據(jù)其在260 nm處的摩爾消光系數(shù)6600 if1 · cnf1來確定它的濃度。
[0020] (3)化合物與Ct-DNA相互作用 紫外-可見光譜滴定：以緩沖溶液作為空白，取適量的化合物母液到3 mL緩沖溶液中， 使其濃度為10-5Μ，測其在300~800 nm的紫外吸收光譜。每次加入相同體積1.0 mM的ct-DNA 儲備液，使ct-DNA的濃度不斷增加。每次加入后混勻，并培育5 min，然后測其在300~800 nm 吸光度，直至配合物的最大吸收峰強(qiáng)度不再變化，即可停止實(shí)驗(yàn)。圖1為本發(fā)明合成的水溶 性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物與小牛胸腺DNA(ct-DNA)相互作用的紫外滴定 圖。由圖1可知，隨著ct-DNA濃度的增大，在卟啉的Soret帶出現(xiàn)了明顯的減色效應(yīng)及相應(yīng)的 紅移，由此可初步推斷，本發(fā)明合成的配合物以插入綁定的模式與ct-DNA發(fā)生了相互作用。 通過對其結(jié)合常數(shù)Kb的計(jì)算，可以得出Kb Cu-P〇r3>KkU-P〇rl>Kk U-POT2。
[0021] 熒光光譜(EB競爭實(shí)驗(yàn)）：配備一定已知濃度的Ct-DNA和EB混合溶液放置冰箱過 夜。實(shí)驗(yàn)時(shí)，取3 mL配置好的EB-DNA混合溶液加入到樣品池中，以537 nm為激發(fā)波長，測其 在500~700 nm范圍內(nèi)的熒光光譜。每次往混合體系中加入相同體積卟啉化合物溶液，混合 均勻，作用5 min后，測其在500~700 nm波長范圍內(nèi)熒光光譜的變化。由于本發(fā)明合成的配 合物在溶液中不能發(fā)出熒光，因此不能直接用加入DNA的方法來測其熒光光譜的變化。所以 需要借助熒光探針來間接地探索其與ct-DNA的相互作用。在溶液中EB自身的熒光很弱， 一旦當(dāng)它嵌入到雙螺旋的DNA堿基對形成EB-DNA結(jié)合物時(shí)，便能產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光；如果將 能與ct-DNA發(fā)生相互作用的其它配合物小分子加入到EB-DNA體系中，該小分子會與 EB競爭而占據(jù)ct-DNA上的結(jié)合位點(diǎn)，使得EB-DNA體系的熒光強(qiáng)度下降。一般來說，當(dāng)配 合物與ct-DNA以外部結(jié)合的模式導(dǎo)致的熒光猝滅的程度比插入模式的程度要小。圖2為 本發(fā)明合成的水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物與小牛胸腺DNA(ct-DNA)焚光 猝滅光譜圖。其中虛線為EB的熒光強(qiáng)度，實(shí)線為在EB-DNA體系中加入本發(fā)明合成的配合物 后所測得的熒光強(qiáng)度。從圖2中可以看出，隨著配合物濃度的增大，熒光強(qiáng)度發(fā)生了不同程 度的降低。因此，可以初步認(rèn)為本發(fā)明合成的配合物與ct-DNA的結(jié)合模式類似于EB與ct-DNA 的結(jié)合方式。這與通過紫外滴定得到的結(jié)果相符合。通過對其猝滅常數(shù) Ksv 的計(jì)算，可以 Y守出 Ksv Cu-Por3〉Ksv Cu-Porl〉Ksv Cu-Por2〇
[0022] 誘導(dǎo)圓二色光譜：向比色皿中加3 mL緩沖溶液，測其在220~600 nm內(nèi)的ICD光譜圖 作為背景。取3 mLlOOpM的ct-DNA溶液置于比色皿中，在220~600 nm范圍內(nèi)掃描其⑶光譜； 加入卟啉溶液使其與ct-DNA的濃度的呈現(xiàn)一定比值，混勻，并作用5 min，記錄其在220~600 nm波長范圍內(nèi)ct-DNA與卟啉樣品作用后CD光譜的變化。圖3為本發(fā)明合成的配合物與小牛 胸腺DNA(ct-DNA)的誘導(dǎo)圓二色譜圖。由于卟啉及其ct-DNA在紫外可見光區(qū)內(nèi)無 ICD信號， 而當(dāng)兩者發(fā)生作用時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)在可見光區(qū)內(nèi)出現(xiàn)ICD信號。圖中實(shí)線為化合物本身的ICD 信號，虛線為加入不同類型化合物后所測得的ICD信號，因此可以認(rèn)為這是ct-DNA與本發(fā)明 中合成的化合物相互作用產(chǎn)生的結(jié)果。一般認(rèn)為產(chǎn)生負(fù)信號，可以初步推斷化合物與ct-DNA 發(fā)生了較強(qiáng)的相互作用 ，且作用越強(qiáng)，負(fù)信號越強(qiáng)。如圖 3 所示，本發(fā)明合成的配合物與 ct-DNA作用后均呈現(xiàn)負(fù)信號，其信號強(qiáng)弱大小為Cu-Por3>Cu-Porl>Cu-Por2。
[0023] 粘度的測定:30.0°C恒溫下，采用烏氏粘度計(jì)進(jìn)行測定。首先將15 mL緩沖溶液置 于烏氏粘度計(jì)中，測定其流經(jīng)毛細(xì)管所用的時(shí)間to;再將稀釋好的100μ Μ的ct-DNA儲備液 15 mL加入至烏氏粘度計(jì)中，測定其流經(jīng)毛細(xì)管所用的時(shí)間，隨后往此溶液中加入一定體積 的卟啉化合物，使其與ct-DNA的濃度的比值呈現(xiàn)一定的梯度，測量不同梯度時(shí)溶液流經(jīng)毛 細(xì)管所用的時(shí)間。利用公式n= (t-to) / to得出其相對粘度;其中to為緩沖溶液流經(jīng)毛細(xì)管 所需時(shí)間，t為含不同濃度配合物的DNA溶液流經(jīng)毛細(xì)管所需時(shí)間。所得到的相對粘度以(ri/ q〇)1/3對r (r =[配合物]/[DNA])作圖，可以觀察到配合物對DNA粘度的影響。其中no為未加 入配合物時(shí)DNA溶液的相對粘度。圖4為本發(fā)明合成的配合物與小牛胸腺DNA(ct-DNA)作用 后，ct-DNA粘度的變化情況。一般認(rèn)為，ct-DNA與化合物以插入綁定的模式結(jié)合后，其粘度 增大;如果是發(fā)生外部綁定或者是溝面結(jié)合，其粘度將不變或者減小。而從圖4中可以得出， 本發(fā)明合成的配合物與ct-DNA發(fā)生作用后，ct-DNA的粘度都呈現(xiàn)相應(yīng)的增大。所以，這也可 初步判定本發(fā)明合成的配合物與ct-DNA呈插入綁定的模式。從其斜率可以得出，化合物與 ct-DNA的綁定作用Cu-Por3>Cu-Porl>Cu-Por2。表1為本發(fā)明的化合物與ct-DNA作用所得的 理化數(shù)據(jù)總述。
[0024](四）水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物的體外抗腫瘤研究 (1)細(xì)胞培養(yǎng):用含10%胎牛血清的DMEM或者DCM-F12培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，并置于37 °C，5% C02飽和濕度培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞呈單層貼壁生長。用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況和貼壁形 態(tài)，取指數(shù)生長期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。
[0025] (2)MTT測試:將細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板(8 X103個(gè)/孔）中，待貼壁后分別加入不同 劑量的新型水溶性酰腙類Schiff堿卟啉及其Cu( Π )配合物，對照組加等體積的培養(yǎng)基，每 組6復(fù)孔。培養(yǎng)一定時(shí)間后，每孔加 MTT溶液(5 gl/1) 20yL，培養(yǎng)箱中孵育4 h后終止培養(yǎng)，吸 去上清，每孔加入150 yL的DMS0,置搖床上震蕩10 min后用酶標(biāo)儀(波長490nm)測定吸光度 值，計(jì)算細(xì)胞的生長存活率。細(xì)胞存活率按下列公式計(jì)算:細(xì)胞存活率％ =實(shí)驗(yàn)組A9Q/對照 組A9Q X 100%。用只加培養(yǎng)液而不加細(xì)胞的孔調(diào)零。
[0026]圖5是本發(fā)明配合物應(yīng)用于體外抗腫瘤，通過配合物與惡性腫瘤細(xì)胞A549及HepG2 的作用，用MTT法測該類化合物對惡性腫瘤細(xì)胞的抑制作用。從圖5中可以得出，隨著化合物 濃度的增大，作用時(shí)間的增長，對這兩種細(xì)胞的抑制作用增大。因此可以認(rèn)為該類配合物在 體外抗腫瘤中呈現(xiàn)時(shí)間依賴性，濃度依賴性。表2是本發(fā)明合成的配合物（Cu-Porl~Cu-Por3)應(yīng)用于體外抗腫瘤，與肺癌細(xì)胞(A549)及肝癌細(xì)胞(HepG2)作用不同時(shí)間所得半抑制 濃度(IC 5Q值）。
[0027] 綜上所述，本發(fā)明將卟啉與酰腙有效的結(jié)合起來，合成一類水溶性酰腙類Schiff 堿卟啉金屬Cu(n)配合物，使二者的生物活性產(chǎn)生協(xié)同，更大程度的發(fā)揮其在抗癌活性方 面的應(yīng)用;此外，本發(fā)明還將吡啶基陽離子引入到卟啉環(huán)上，大大增加了其水溶性，溶解性 的增大克服了卟啉衍生物的一大缺陷，使其抗癌性能顯著增高。通過對其與ct-DNA的作用 強(qiáng)度及體外抗腫瘤的研究，初步認(rèn)為本發(fā)明中合成的這類新型的水溶性酰腙類Schiff堿卟 啉金屬Cu( Π )配合物有較好的抗癌活性，因此可作為活性成分用于制備抗癌藥物。

【附圖說明】
[0028] 圖1為本發(fā)明配合物與小牛胸腺DNA作用的紫外滴定圖。
[0029] 圖2為本發(fā)明配合物與小牛胸腺DNA作用的熒光猝滅圖。
[0030] 圖3為本發(fā)明配合物與小牛胸腺DNA作用的誘導(dǎo)圓二色譜圖。
[0031] 圖4為本發(fā)明配合物與小牛胸腺DNA作用后，Ct-DNA粘度變化圖。
[0032]圖5為本發(fā)明配合物應(yīng)用于體外抗腫瘤的細(xì)胞存活率圖。
【具體實(shí)施方式】
[0033]下面通過具體實(shí)施例對本發(fā)明水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物的 合成與應(yīng)用作進(jìn)一步說明。
[0034] 實(shí)施例一、水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl的合成 (1)5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）Π 卜啉的合成 將對甲酸甲酯苯甲醛（1.6 g，0.01mol)溶于160mL丙酸中，攪拌使之完全溶解;快速加 入4-吡啶甲醛（2.7 ml，0.03mol)，加熱攪拌使其溶解;然后慢慢滴加新蒸吡咯（2.6 ml， 0.04111〇1)，攪拌混合均勻，140~145°(：回流1.5~21 1;反應(yīng)完成后，將丙酸減壓蒸至大概剩余 20mL為止;加入40~60mL甲醇。室溫?cái)嚢?0min左右，放置冰箱中冷凍(_18°C)過夜，析出紫色 沉淀，抽濾，用冷甲醇洗滌，收集濾餅，柱層析分離(硅膠為固定相，洗脫劑（甲醇:三氯甲烷= 2:98))，即可得到紫色產(chǎn)物5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20- (4-吡啶基）撲啉，產(chǎn)率為5% 左右。
[0035] 核磁數(shù)據(jù) JHNMR (400 MHz，CDC13) : -2.89(2H，s; NH)，4.12 (3H, s; 0CH3)， 8.16 (6Η, m; 3,5-PyH), 8.30 (2H,d; o'PhH), 8.47 (2H, d; m'PhH), 8.86(8H, m; β-Η), 9.06(6H, m; 2,6-PyH)〇
[0036] (2)5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基)Π卜啉的合成 將5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉（100mg，0.15mmol)溶解在三氯 甲烷-乙醇（5mL，v/v= 1: 2)混合溶液中，加入水合肼(0.125g，2.5 mmo 1)，70~80 °C下回流過 夜，旋蒸濃縮，加入蒸餾水析出紫色沉淀，抽濾，濾餅用甲醇洗滌，70~80 °C下恒溫干燥，收集 紫色產(chǎn)物5-( 4-肼羰基)苯基-10，15，20- (4-吡啶基)撲啉，產(chǎn)率大于90%。
[0037] 核磁數(shù)據(jù)^HNMR (600 MHz，CDC13) : -2.89(2H，s; NH)，8.16(8H，m; 3,5-PyH+ o'PhH)， 8.30 (2H，d; m'PhH)， 8.86 (8H， m; β-Η)， 9.06 (6H， m; 2,6-PyH)。
[0038] (3)5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基）苯基）-10，15,20-(4-吡啶基）卟啉的合 成 將5-(4-肼羰基）苯基-10，15,20-(4_吡啶基）卟啉（100mg，0.15 mmol)溶于三氯甲烷 中；將水楊醛(78yL，0.75mmo 1)溶于乙醇中；攪拌下混合兩種溶液;滴加幾滴(0.5 mL)冰醋 酸，在70~80°C下回流24h;反應(yīng)完成后，減壓蒸出溶劑，加入乙醚析出沉淀，抽濾，乙二醚洗 滌數(shù)次，真空干燥，收集紫紅色沉淀粉末，得到5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)_ 10，15,20-(4_吡啶基）卟啉，產(chǎn)率85%左右。
[0039] 核磁數(shù)據(jù)^HMIRHOOMHz, DMS〇-d6) : -3.02 (2H, s; NH), 7.52 (2H, m; mPhH), 7.64 (lH,d; pPhH), 7.78 (1H, d; oPhH), 7.96 (1H, s; N=CH), 8.29-8.40 (10H,d; 3,5-PyH + o'PhH+m'PhH),8.81~9.06 (14H, ?;βΗ+ 2,6PyH), 10.72 (lH,s; OH),12.54 (lH,s; NH)〇
[0040] (4)5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-N-甲基吡啶基)撲啉 將5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基）苯基）-10,15,20- (4-吡啶基）卟啉（100mg， 0.13mmol)溶于干的DMF(3mL)中，加入過量的CH3I (0.5mL，8mmo 1)，氮?dú)獗Ｗo(hù)，50°C避光反應(yīng) 3h;反應(yīng)完成后，加入丙酮或三氯甲烷，析出紫紅色沉淀，洗滌，干燥，得到產(chǎn)品5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10，15,20-(44-甲基吡啶基)卟啉，產(chǎn)率可達(dá)至1」90%以上。
[0041] 核磁數(shù)據(jù)分別為：1圓]\?(6001抱，0150-(16):-3.04(2!1，8;順），4.69(9!1，8 ;^ CH3),6.98 (2H,m;mPhH),7.34(lH,t；pPhH),7.63(lH,d;oPhH),8.40~8.43(4H,dd;o'PhH+ m,PhH),8.80(lH,s;N=CH),8.97~9.13(14H,m；eH+3,5PyH),9.45 (6H, d; 2,6-PyH), 11.30 (1H, s; OH), 12.48(1H, s; NH)〇
[0042] (5)配合物Cu-Pori的合成 將(0.10 mmol)5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10，15,20-(4-N-甲基吡啶 基）卟啉溶于DMF(3mL);將CuCl26H20(135 mg，1. Ommo 1)溶于甲醇（1 OmL)，將兩種溶液混合 后，在60 °C下攪拌反應(yīng)6h;反應(yīng)完成后，離心，收集上清液，旋蒸濃縮，加入CHC13析出紫紅色 固體，過濾，用甲醇洗滌數(shù)次，真空干燥，即得到金屬桶銅配合物Cu-Porl。
[0043] Cu-Porl: ^NMRCeOO MHz ,DMS〇-de): 4.52 (9H, br; N-CH3), 7.96 (1H, s; N= CH), 9.15 (6H, brs; 2,6-PyH). ESI-MS(m/z): 1088.96 [M+H]+(Calcd for[M]= 1089.1)。
[0044] 實(shí)施例二、水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl的合成 (1)5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）Π 卜啉的合成：同實(shí)施例一。
[0045] (2)5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基)撲啉的合成：同實(shí)施例一。
[0046] (3)5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-吡啶基） 卟啉的合成：用鄰香蘭素（114.5mg，0.75mmo 1)替代水楊醛，其它同實(shí)施例一。產(chǎn)率80%。核磁 數(shù)據(jù)^HNMRHOOMHz.DMSO-cb) : -3.03 (2H，s; NH)，3.85 (3H，s; OCH3) ,6.90 (lH，t; mPhH), 7.24 (2H,d; oPhH + pPhH), 7.96 (1H, s; N=CH), 8.27-8.40 (10H,d;3,5-PyH + o'PhH+m'PhH),8.91-9.04 (14H, ?;βΗ+ 2,6PyH), 10.27 (lH,s; OH),12.02 (lH,s; NH)〇
[0047] (4)5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基吡 啶基)卟啉的合成 將5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-吡啶基）撲啉 (10011^，0.12111111〇1)溶于干的01^(311110中，加入過量的〇131(0.511^，8111111〇1)，氮?dú)獗Ｗo(hù)，50 1€ 避光反應(yīng)3h。反應(yīng)完成后，加入丙酮或三氯甲烷，析出紫紅色沉淀，洗滌，干燥，得到產(chǎn)品5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉，產(chǎn) 率可達(dá)到90%以上。
[0048] 核磁數(shù)據(jù)為JHNMI^600 MHz,DMS〇-d6) : -3.04 (2H, s; NH), 3.84 (3H，s; 0CH3), 4.70 (9H, br; N-CH3), 6.91 (1H, t; mPhH), 7.08 (1H, d; pPhH), 7.25 (1H, d; oPhH), 8.40-8.44 (4H, dd; o'PhH+m'PhH),8.82 (lH,s; N=CH), 8.96-9.14 (14H, m;0H+3,5PyH),9.46 (6H, d; 2,6-PyH), 10.94 (lH,s; OH), 12.44 (lH,s; NH)〇
[0049] (5)配合物Cu_Por2的合成 將(0.10 111111〇1)5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10，15,20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉溶于DMF(3mL);將CuCl26H2〇(135mg，1.0mmol)溶于甲醇（10mL)，將兩種 溶液混合后，在60°C下攪拌反應(yīng)6h;反應(yīng)完成后，離心，收集上清液，旋蒸濃縮，加入CHC13析 出紫紅色固體，過濾，用甲醇洗滌數(shù)次，真空干燥，即得到金屬銅配合物Cu-P 〇r2。
[0050] Cu-Por2: ^NMRCeOO MHz,DMS〇-de): 4.51 (9H, s; N-CH3), 7.95 (1H, s; N= CH), 9.17 (6H, brs;2,6-PyH).ESI-MS (m/z): 1118.97[M+H]+(Calcdfor[M]=1119.1)〇 [00511實(shí)施例三、水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Por3的合成 (1)5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）Π 卜啉的合成：同實(shí)施例一。
[0052] (2)5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基)Π 卜啉的合成：同實(shí)施例一。
[0053] (3)5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-Ν-甲基吡啶基)卟啉的合成 將5-(4-肼羰基）苯基-10，15,20-(4_吡啶基）卟啉（100mg，0.15 mmol)溶于干的DMF (3mL)中，加入過量的CH3I (0.5mL，8mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)，50°C避光反應(yīng)3h。反應(yīng)完成后，加入丙 酮或三氯甲烷(50mL)析出紫色沉淀，三氯甲烷洗滌幾次，真空干燥，得到產(chǎn)品5-(4-肼羰基） 苯基-10，15,20-(4-N-甲基吡啶基)卟啉，產(chǎn)率90%以上。
[0054] 核磁數(shù)據(jù)：1!1匪1?(600 1泡，0150-(16):-3.04(2!1，8;冊），4.70(9!1，1^;^ CH3), 5.29 (2H, s; NH2), 8.40-8.44 (4H, dd; o'PhH+m'PhH), 8.96-9.14 (14Η,πι;βΗ+ 3,5PyH),9.46 (6Η, d; 2,6-PyH), 12.44 (lH,s; NH)〇
[0055] (4)5-(4-(2-(吡啶-2-亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-N-甲基吡啶基）撲啉 的合成 將5-(4-肼羰基)苯基-10，15,20-(44-甲基吡啶基）撲啉（1001^，0.09111111〇1)溶于干的 DMF(5mL)，將2-吡啶甲醛(45tiL，0.45mmol)溶于無水乙醇，混合兩種溶液，加入幾滴冰醋酸， 75°C回流24h，反應(yīng)完成后，減壓蒸出溶劑，加入乙醚析出沉淀，抽濾，重結(jié)晶，收集紫紅色粉 末，即得5-(4-(2-(吡啶-2-亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉，產(chǎn)率 78% 〇
[0056] 核磁數(shù)據(jù)：1!1匪1?(600 1〇^，0150-(16):-3.05(2!1，8;順），4.69(9!1，8;^ CH 3)， 7.38 (1Η， d; 3，-PyH), 7.47 (1Η， t; 4，-PyH), 7.68 (lH，d; 5，-PyH), 7.92 (lH，s; N=CH), 8.40~8.43 (4H, dd; o'PhH+m'PhH), 8.64 (1H, d; 2'-PyH), 8.97~ 9.13 (14H,m;0H+3,5PyH),9.45 (6H, d; 2,6-PyH), 12.44 (lH,s; NH) (5 )配合物Cu-Por 3的合成 將(0.10 mmol)5-(4-(2-(吡啶-2-亞甲基)肼羰基)苯基)-10，15,20-(4-N-甲基吡啶 基）卟啉溶于DMF(3mL);將CuCl26H2〇(135mg，1 .Ommol)溶于甲醇（10mL)，將兩種溶液混合后， 在60°C下攪拌反應(yīng)6h;反應(yīng)完成后，離心，收集上清液，旋蒸濃縮，加入CHC1 3析出紫紅色固 體，過濾，用甲醇洗滌數(shù)次，真空干燥，即得到金屬銅配合物Cu-Por3。
[0057] 核磁數(shù)據(jù)^HNMRWOO MHz，DMS〇-d6): 4.50 (9H, s; N-CH3)，8.13 (5H, s; N= CH + 2',3',4',δ'-ΡγΗ), 9.17 (6H, brs;2,6-PyH).ESI-MS (m/z): 1111.89 [M+H]+ (Calcdfor[M]=1112.0)〇
[0058] 實(shí)施例4、抗癌藥物的制備 分別以實(shí)施例1、2、3制備的水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl、 Cu-P〇r2、CU-P〇r3為活性成分，按照藥物學(xué)的常規(guī)工藝和輔料制備成內(nèi)服制劑或注射用制 劑。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物，其結(jié)構(gòu)式如下：2. 如權(quán)利要求1所述水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl或Cu-Por2 的合成，包括以下工藝步驟： (1) 5-(4-甲酸甲酯基）苯基-10,15，20-(4_吡啶基）卟啉的合成：將對甲酸甲酯苯甲醛 溶于丙酸中，再加入4-吡啶甲醛，加熱使之完全溶解;然后滴加吡咯，混合均勻后，于140~ 145 °C回流1.5~2h;反應(yīng)完成后，減壓蒸去大部分丙酸；加入甲醇洗去反應(yīng)過程中生成的吡 咯聚合物;室溫?cái)嚢?5~25min后，放置冰箱中冷凍，析出紫色沉淀，抽濾，收集濾餅，柱層析， 即得到紫色產(chǎn)物5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4_吡啶基)Π 卜啉； (2) 5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）Π 卜啉的合成:將5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10，15，20-(4-吡啶基）卟啉溶解在三氯甲烷-乙醇混合液中，加入水合肼，攪拌混合均勻，在 70~80 °C下回流20~24h，旋蒸濃縮，加入蒸餾水析出紫色沉淀，抽濾，濾餅用甲醇洗滌，70~80 °C下恒溫干燥，收集紫色產(chǎn)物，即得5-(4-肼羰基)苯基-10，15，20-(4-吡啶基)Π 卜啉； (3) 5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉或的合成： 將5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4_吡啶基）Π 卜啉溶于三氯甲烷中；水楊醛或鄰香蘭素溶于 乙醇中；攪拌下將兩種溶液混合，再加入冰醋酸作為催化劑，在70~80 °C下回流20~24h;反應(yīng) 完成后，減壓蒸出溶劑，加入乙醚析出沉淀，抽濾，乙二醚洗滌，真空干燥，收集紫紅色粉末， 即為5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基）苯基)-10,15,20- (4-吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10，15，20-( 4-吡啶基)撲啉； (4) 5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-N-甲基吡啶基）撲啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉的合 成:將5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基）苯基)-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉溶于DMF中，加入過 量的CH 3I，氮?dú)獗Ｗo(hù)，40~50 °C避光反應(yīng)2~3h;反應(yīng)完成后，加入丙酮或三氯甲烷，析出紫紅 色沉淀，洗滌，干燥，得到5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)餅幾基)苯基)-10，15，20-(4-N-甲基 吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20-(4-N-甲基 吡啶基)撲啉； (5) 配合物Cu-Porl或Cu-Por2的合成：將5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基）苯基）- 10，15,20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基)苯基)_ 10，15，20-(4-N-甲基吡啶基）Π 卜啉溶于DMF;將CuCl2 ' 6H20溶于甲醇，攪拌下混合兩種溶液， 50~60°C下攪拌4~6h;反應(yīng)完成后離心，收集上清液，旋蒸濃縮，加入CHC1 3,析出紫紅色固 體，過濾，用甲醇洗滌，真空干燥，即得配合物Cu-Por 1或配合物Cu-Por2。3. 如權(quán)利要求1所述水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl或Cu-Por2 的合成，其特征在于:步驟（1)中，對甲酸甲酯苯甲醛、4-吡啶甲醛、吡咯以1:3:4的摩爾比投 料。4. 如權(quán)利要求1所述水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl或Cu-Por2 的合成，其特征在于:步驟(2)的三氯甲烷-乙醇混合液中，三氯甲烷與乙醇的體積比為1:2~ 1:4;水合肼的加入量為5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）Π 卜啉摩爾量的5~10 倍。5. 如權(quán)利要求1所述水溶性酰腙類Schiff堿Ρ卜啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl或Cu-Por2 的合成，其特征在于:步驟(3)中，水楊醛或鄰香蘭素的加入量為5-(4-肼羰基)苯基-10,15， 20-(4-吡啶基）Π 卜啉摩爾量的4~5倍;冰醋酸加入量為5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡 啶基)Π 卜啉摩爾量的0.05~0.1倍。6. 如權(quán)利要求1所述水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl或Cu-Por2 的合成，其特征在于：步驟(4)中，CH3I的加入量為5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基）肼羰基）苯 基)-10,15,20-(4-吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基）苯基）_ 10，15,20-(4_吡啶基)卟啉摩爾量的5~7倍。7. 如權(quán)利要求1所述水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Porl或Cu-Por2 的合成，其特征在于:步驟(5沖，CuC12'6H20的用量為5-(4-(2-(2-羥基苯亞甲基)肼羰基） 苯基)-10,15,20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉或5-(4-(2-(2-羥基-3-甲氧基苯亞甲基)肼羰基） 苯基)-10，15,20-(4-N-甲基吡啶基)卟啉摩爾量的8~12倍。8. 如權(quán)利要求1所述水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物Cu-Por3的合成，包 括以下工藝步驟： (1) 5-(4-甲酸甲酯基）苯基-10,15，20-(4_吡啶基）卟啉的合成：將對甲酸甲酯苯甲醛 溶于丙酸中，再加入4-吡啶甲醛，加熱使之完全溶解;然后滴加吡咯，混合均勻后，于140~ 145 °C回流1.5~2h;反應(yīng)完成后，減壓蒸去大部分丙酸；加入甲醇洗去反應(yīng)過程中生成的吡 咯聚合物;室溫?cái)嚢?5~25min后，放置冰箱中冷凍，析出紫色沉淀，抽濾，收集濾餅，柱層析， 即得到紫色產(chǎn)物5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10,15,20-(4_吡啶基）Π 卜啉;對甲酸甲酯苯甲醛、 4-吡啶甲醛、吡咯以1:3:4的摩爾比投料； (2) 5-(4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基）Π 卜啉的合成:將5-(4-甲酸甲酯基)苯基-10，15，20-(4-吡啶基）卟啉溶解在三氯甲烷-乙醇混合液中，加入水合肼，攪拌混合均勻，在 70~80 °C下回流20~24h，旋蒸濃縮，加入蒸餾水析出紫色沉淀，抽濾，濾餅用甲醇洗滌，70~80 °C下恒溫干燥，收集紫色產(chǎn)物，即得5-(4-肼羰基)苯基-10，15,20-(4-吡啶基)撲啉;三氯甲 烷-乙醇混合液中，三氯甲烷與乙醇的體積比為1:2~1:4;水合肼的加入量為5-(4-甲酸甲酯 基)苯基-10,15,20-(4-吡啶基)撲啉摩爾量的5~10倍； (3) 5- (4-肼羰基)苯基-10,15,20-(4-N-甲基吡啶基）Π 卜啉的合成:將5- (4-肼羰基） 苯基-10，15,20-(4-吡啶基)撲啉溶于01^中，加入過量的〇131，氮?dú)獗Ｗo(hù)，40~50°(：避光反 應(yīng)2~3h;反應(yīng)完成后，加入丙酮或三氯甲烷析出紫色沉淀，三氯甲烷洗滌，真空干燥，得到 5-(4-肼羰基)苯基-10，15,20-(4-N-甲基吡啶基)Π 卜啉;CH3I的加入量為5- (4-肼羰基)苯 基-10,15,20- (4-吡啶基)撲啉摩爾量的5~7倍； (4) 5- (4-(2-(吡啶-2-亞甲基)肼羰基)苯基)-10,15，20- (4-N-甲基吡啶基）撲啉的 合成:將5-(4-肼羰基)苯基-10，15,20-(44-甲基吡啶基）撲啉溶于01^;將2-吡啶甲醛溶 于無水乙醇;將兩種溶液混合后，加入冰醋酸，70~75 °C回流20~24h，反應(yīng)完成后，減壓蒸出 溶劑，加入乙醚析出沉淀，抽濾，重結(jié)晶，收集紫紅色沉淀粉末，即可得到5- (4-(2-(吡啶_ 2-亞甲基)肼羰基)苯基）-10,15，20- (4-N-甲基吡啶基）卟啉;2-吡啶甲醛的用量為5-(4-肼羰基)苯基-10,15，20- (4-N-甲基吡啶基)撲啉摩爾量的4~5倍;冰醋酸的用量為5-(4-肼 羰基)苯基-10,15,20- (4-N-甲基吡啶基)撲啉摩爾量的0.06~0.1倍； (5) 配合物Cu-Por3的合成：將5- (4-(2-(吡啶-2-亞甲基）肼羰基）苯基）-10，15,20-(4-N-甲基吡啶基）卟啉溶于DMF;將CuCl2 ' 6H20溶于甲醇，攪拌下混合兩種溶液，50~60 °C下 攪拌4~6h;反應(yīng)完成后離心，收集上清液，旋蒸濃縮，加入CHC13,析出紫紅色固體，過濾，用 甲醇洗滌，真空干燥，即得配合物Cu-Por3; CuCl2 ' 6H20的用量為5- (4-(2-(啦啶-2-亞甲基） 肼羰基)苯基)-1〇，15,2〇-(44-甲基吡啶基)卟啉摩爾量的8~12倍。9. 如權(quán)利要求1所述水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物在制備抗癌藥物中 的應(yīng)用。10. 如權(quán)利要求9所述水溶性酰腙類Schiff堿卟啉金屬Cu( Π )配合物在制備抗癌藥物 中的應(yīng)用，其特征在于：以其為活性成分，按照藥物學(xué)的常規(guī)工藝和輔料制備成內(nèi)服制劑或 注射用制劑。
【文檔編號】C07D487/22GK105949222SQ201610376223
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年5月31日
【發(fā)明人】劉家成, 馮小霞, 張俊祥, 武彧
【申請人】西北師范大學(xué)