一類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑及其制備方法與應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一類氨基甲酸酯?查爾酮類膽堿酯酶抑制劑及其制備方法與應(yīng)用，屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明的膽堿酯酶抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式（I）所示，其中A、B、V、X、Y、Z如本發(fā)明中所定義。本發(fā)明的氨基甲酸酯?查爾酮類膽堿酯酶抑制劑具有較強的乙酰膽堿酯酶酶抑制劑活性、丁酰膽堿酯酶抑制活性和選擇性抑制丁酰膽堿酯酶活性，較低的神經(jīng)毒性，可應(yīng)用于制備治療和預(yù)防由膽堿酯酶引起的疾病的藥物。
【專利說明】
一類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑及其制備方法與 應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑 及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 阿爾茨海默癥簡稱AD，是一種以行進性記憶和認知功能障礙為特征的神經(jīng)退行性 疾病。AD的病理變化，包括膽堿能系統(tǒng)功能障礙、聚集的淀粉樣蛋白（0-amyloid，AP)的沉 積、Tau蛋白過度磷酸化等。雖然已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多因素與AD發(fā)病相關(guān)，但其病因和發(fā)病機制尚 未完全清楚。目前臨床上用于治療AD的藥物多屬于針對單一靶點治療藥物，一類是以提高 腦內(nèi)膽堿水平為目的的乙酰膽堿酯酶抑制劑，有他克林(Tacrine)、多奈哌齊(Donepezi 1)、 利斯的明（Rivastigmine)和加蘭他敏(Galanthamine)。另一類是NMDA受體詰抗劑美金剛 (Memantine)〇
[0003] 研究發(fā)現(xiàn)，提高腦內(nèi)ACh水平，患者的記憶力、認知力就能得到改善，在另一方面， 乙酰膽堿酯酶(AChE)和丁酰膽堿酯酶(BuChE)這兩種ACh水解酶的活性決定了乙酰膽堿的 水平。臨床表明，人的大腦中的乙酰膽堿酯酶(AChE)和丁酰膽堿酯酶(BuChE)水平存在著動 態(tài)變化。在正常大腦和AD患者早期的大腦中，乙酰膽堿酯酶(AChE)含量很高，起到主要的 ACh水解作用。但隨著病情的發(fā)展，患者腦中乙酰膽堿酯酶(AChE)水平越來越低，丁酰膽堿 酯酶(BuChE)水平越來越高，從而決定著腦中ACh水平。以提高腦內(nèi)膽堿水平為目的的乙酰 膽堿酯酶抑制劑雖然能夠提高患者的認知能力和日常行為能力，暫緩AD癥狀，但是只對治 療輕中度的AD有效果，且不能從根本上改善疾病狀態(tài)或終止疾病的進程。
[0004] 具有氨基甲酸酯結(jié)構(gòu)的化合物具有潛在的膽堿酯酶抑制活性，通過改變基團添加 策略可以改善其對乙酰膽堿酯酶(AChE)和丁酰膽堿酯酶(BuChE)選擇抑制性。而天然產(chǎn)物 查爾酮及其衍生物結(jié)構(gòu)則具有很強的抗AP聚集作用。所以合成同時具有氨基甲酸酯基團和 查爾酮結(jié)構(gòu)的小分子化合物是一個可行性很高的策略。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿 酯酶抑制劑及其制備方法與應(yīng)用，人膽堿酯酶抑制實驗證明，本發(fā)明的化合物可作為乙酰 膽堿酯酶抑制劑、丁酰膽堿酯酶抑制劑和選擇性丁酰膽堿酯酶抑制劑。
[0006] 本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)。
[0007] -類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑，該抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式（I)所 示：
[0009]其中，
[0010] A為R^NCOO-或-H，心為甲基，R2為甲基或乙基；
[0011 ] B為R3R4NC00-、-H或-OH，R3、R4為甲基、乙基或異丙基；
[0012 ] V為R5R6NC00-、-H或-OH，抱為甲基，R6為甲基或乙基；
[0013 ] X為RyRsNCOO-或-H，R7為甲基，Rs為甲基或乙基；
[0014] Y為R9R1()NC00-、-H或-OH，R9為甲基，R1()為甲基或乙基；
[0015] Z 為 RnR12NC00-、-H、-OH 或-〇CH3，Rn 為甲基，R12 為甲基或乙基。
[0016]本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，優(yōu)選為：
[0017] 所述A為fofcNCOO^RA甲基，R2為甲基或乙基，進一步優(yōu)選為乙基；
[0018] B、V、X、Y為氫；
[0019] Z為羥基或甲氧基，進一步優(yōu)選為羥基。
[0020] 本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0021] 所述B為R3R4NC00-或-OH，R3、R4為甲基、乙基或異丙基；
[0022] A、V為氫；
[0023] X 為RyRsNCOO-或-H，R7、Rs為甲基或乙基；
[0024] Y 為 R9R1()NC00-或-H，R9、R1()為甲基或乙基；
[0025] Z 為 RnR12NC00-、-H、-OH 或-〇CH3，Rn、R12 為甲基或乙基。
[0026]本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0027] 所述B為R3R4NC00-，R3、R4為甲基、乙基或異丙基；
[0028] A、V為氫；
[0029] X 為RyRsNCOO-或-H，R7、Rs為甲基或乙基；
[0030] Y為-H;
[0031] Z為-OH或-0CH3。
[0032] 本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0033] 所述 B 為-OH;
[0034] A、V、X為氫；
[0035] Y為R9R1()NC00-或-H，優(yōu)選為R9R1()NC00-，R 9為甲基，R1()為甲基或乙基； [0036] Z為RnR12NC00-或-H，優(yōu)選為-H，Rn為甲基，R 12為甲基或乙基；
[0037] Y^Z〇
[0038] 本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0039] 所述B為R3R4NC00-，R3為甲基，R4為甲基或乙基；
[0040] A、V為氫；
[0041 ] X為RyRsNCOO-或-H，R7為甲基，Rs為甲基或乙基；
[0042] Y為-H;
[0043] Z為-OH或-〇CH3。
[0044]本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0045] 所述B為R3R4NC00-，R3 = R4為乙基或異丙基；
[0046] A、V為氫；
[0047] X、Y*_H;
[0048] Z為-OH或-OCH3。
[0049] 本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0050] 所述B為R3R4NC00-，R3為甲基，R4為甲基或乙基；
[0051] A、V為氫；
[0052] X為R7R8NCOO-，R7為甲基，Rs為甲基或乙基；
[0053] Y為-H;
[0054] Z 為-OH。
[0055] 本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0056] 所述B為R3R4NC00-，R3為甲基，R4為甲基或乙基；
[0057] A、V為氫；
[0058] X為-H;
[0059] Y為-H;
[0060] Z 為-OH 或-〇CH3。
[0061 ]本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0062] 所述V為R5R6NC00-或-OH，抱為甲基，R 6為甲基或乙基；
[0063] A、B、X為-H;
[0064] Y 為 R9R1()NC00-或-H，R9、R1()為甲基或乙基；
[0065] Z 為 RnR12NC00-、-H、-OH 或-〇CH3，Rn 為甲基，R12 為甲基或乙基。
[0066]本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0067] 所述V為R5R6NC00-，抱為甲基，R6為甲基或乙基，優(yōu)選為乙基；
[0068] A、B、X、Y為-H;
[0069] Z 為-OH 或-0CH3,優(yōu)選為-0CH3。
[0070] 本發(fā)明化學(xué)結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示化合物，也優(yōu)選為：
[0071] 所述 V 為-OH;
[0072] A、B、X為-H;
[0073] Y為R9R1()NC00-或-H，R9為甲基，R 1()為甲基或乙基；
[0074] Z表示RnR12NC00-或_H，Rn為甲基，R12為甲基或乙基；
[0075] Y^Z〇
[0076] 本發(fā)明的氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑為通式（I)的化合物或其藥學(xué)上 可接受的鹽及藥學(xué)上可接受的載體。
[0077] 本發(fā)明的氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑包括以下物質(zhì)：
[0078] (E)-5-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?_1，3_亞苯基雙(二甲基氨基甲酸酯）
[0079] (E)-5-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?_1，3_亞苯基雙（乙基（甲基)氨基甲酸酯）
[0080] (E)-3-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯
[0081] (E)-3-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0082] (E)-4-(3_(4-羥基苯基)丙烯酰基)苯基二甲基氨基甲酸酯 [0083] (E)-4-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸
[0084] (E)-2-(3-(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯 [0085] (E)-2-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0086] (E)-3-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯酰基)苯基二甲基氨基甲酸酯
[0087] (E)-4-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯 [0088] (E)-3-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯酰基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0089] (E)-4-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0090] (E)-4-(3-(3-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0091] (E)-4-(3-(3-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基二甲基氨基甲酸酯
[0092] (E)-3-(3-(3-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基二甲基氨基甲酸酯 [0093] (E)-3-(3_(3-羥基苯基)_3_氧代丙基-1-烯-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0094] (E)-3-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基二甲基氨基甲酸酯
[0095] (E)-3-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0096] (E)-4-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基二甲基氨基甲酸酯 [0097] (E)-4-(3_(4-羥基苯基)_3_氧代丙基-1-烯-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0098] (E)-3-(3_(4-羥基苯基)丙烯酰基)苯基二甲基氨基甲酸酯
[0099] (E)-3-(3-(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯
[0100] (E)-3-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯酰基)苯基二異丙基氨基甲酸叔丁酯
[0101] (E)-3-(3-(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二異丙基氨基甲酸叔丁酯。
[0102] 該抑制劑還可以為通式（I)化合物的鹽酸鹽、氫嗅酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸 鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、萘磺酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、丙酮酸鹽、乙酸鹽、馬 來酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、水楊酸鹽、苯基乙酸鹽、杏仁酸鹽、堿性金屬陽離子鹽、堿土金 屬陽離子鹽或按陽離子鹽。優(yōu)選為硫酸鹽和鹽酸鹽。
[0103] 本發(fā)明通式（I)所示化合物作為乙酰膽堿酯酶抑制劑、丁酰膽堿酯酶抑制劑和選 擇性丁酰膽堿酯酶抑制劑的用途。由實驗數(shù)據(jù)可以得知通式（I)所示化合物具有乙酰膽堿 酯酶抑制劑、丁酰膽堿酯酶抑制劑和選擇性丁酰膽堿酯酶抑制劑的活性，其中以下化合物 活性相對較強：
[0104] (E)-3-(3-(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯
[0105] (E)-3-(3-(3-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基二甲基氨基甲酸酯
[0106] (E)-3-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基二甲基氨基甲酸酯
[0107] (E)-3-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0108] (E)-3-(3-(3-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0109] (E)-3-(3-(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯
[0110] (E)-3-(3-(4-甲氧基苯基)丙烯酰基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0111] (E)-3-(3-(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0112] (E)-4-(3-(3-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基二甲基氨基甲酸酯
[0113] (E)-4-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基二甲基氨基甲酸酯
[0114] (E)-4-(3-(3-羥基苯基)-3_氧代丙基-1-烯-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0115] (E)-2-(3-(4-羥基苯基)丙烯酰基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0116] (E)-4-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0117] (E)-4-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯
[0118] 以上所述的一類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑的制備方法，合成路線如 下所示：
[0119] (l)(E)-3-(4-羥基苯基)-1_苯基丙-2-烯-1-酮類衍生物(化合物1-8)的合成路 線。
[0121] (E)-3-(4-甲氧基苯基)-1_苯基丙-2-烯-1-酮類衍生物(化合物9-12,22,23)的合 成路線。
[0123] (E)-3_(4-羥基苯基)_1_苯基丙-2-烯-1-酮類衍生物(化合物21，24)的合成路線。
[0125] (4)化合物13-20的合成路線。
[0127] 以上所述的一類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑的制備方法，步驟如下：
[0128] 1)使用苯環(huán)上不同位置取代的羥基苯乙酮(包括2'-羥基苯乙酮、3'-羥基苯乙酮、 4'-羥基苯乙酮、2,4_二羥基苯乙酮、3,5_二羥基苯乙酮、2,5_二羥基苯乙酮等在苯環(huán)上有 單羥基或者二羥基取代的苯乙酮)與對應(yīng)的氨基甲酰氯(包括二甲氨基甲酰氯、N-甲基-N-乙基氨基甲酰氯、二乙氨基甲酰氯、二異丙基氨基甲酰氯)進行反應(yīng)，合成了中間體M1-M10;
[0129] 2)使用苯環(huán)上不同位置取代的羥基苯甲醛(包括2-羥基苯甲醛、3-羥基苯甲醛、4-羥基苯甲醛)和對應(yīng)的氨基甲酰氯酰(包括二甲氨基甲酰氯、N-甲基-N-乙基氨基甲酰氯、二 乙氨基甲酰氯、二異丙基氨基甲酰氯)進行反應(yīng)，合成中間體Ml 1 -Ml 4;
[0130] 3)中間體M1-M14和相應(yīng)的芳香醛(包括2-羥基苯甲醛、3-羥基苯甲醛、4-羥基苯甲 醛、對甲氧基苯甲醛、3-甲氧基苯甲醛等苯環(huán)上有羥基或甲氧基取代的苯甲醛)或者苯環(huán)上 不同位置取代的羥基苯乙酮(包括2'-羥基苯乙酮、3'-羥基苯乙酮、4'-羥基苯乙酮、2,4_二 羥基苯乙酮、3,5_二羥基苯乙酮、2,5_二羥基苯乙酮等在苯環(huán)上有單羥基或者二羥基取代 的苯乙酮)在酸(Lewis酸)或者堿(Lewis堿)催化下進行羥醛縮合反應(yīng)，得到氨基甲酸酯-查 爾酮類膽堿酯酶抑制劑。
[0131] 本發(fā)明化合物都可以用上述或類似上述的制備方法制備得到，根據(jù)取代基的不同 和取代基位置的不同選用相應(yīng)的原料即可。
[0132] 以上所述一類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑作為乙酰膽堿酯酶抑制劑、 丁酰膽堿酯酶抑制劑和選擇性丁酰膽堿酯酶抑制劑。
[0133] 以上所述的一類氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑應(yīng)用于制備治療和預(yù)防由 膽堿酯酶引起的疾病的藥物。
[0134] 以上所述由膽堿酯酶引起的疾病為神經(jīng)退行性疾病，如阿爾茨海默癥及其它與衰 老相關(guān)的疾病。
[0135] 本實驗發(fā)明化合物AChE和AChE抑制活性測試方法為El lman法。
[0136] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點與技術(shù)效果：
[0137] 本發(fā)明的氨基甲酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑具有較強的乙酰膽堿酯酶酶抑制 劑活性、丁酰膽堿酯酶抑制活性和選擇性抑制丁酰膽堿酯酶活性，較低的神經(jīng)毒性，可應(yīng)用 于制備治療和預(yù)防由膽堿酯酶引起的疾病的藥物。
【具體實施方式】
[0138] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步地說明，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
[0139] 本發(fā)明通式(I)所述的化合物及其中間體的合成路線如下所示：
[0140] (l)(E)-3-(4-羥基苯基)-1_苯基丙-2-烯-1-酮類衍生物(化合物1-8)的合成路 線。
[0142] (E)-3-(4-甲氧基苯基)-1_苯基丙-2-烯-1-酮類衍生物(化合物9-12,22,23)的合 成路線。
[0144] (E)-3-(4-羥基苯基)-1_苯基丙-2-烯-1-酮類衍生物(化合物21，24)的合成路線。
[0146] (4)化合物13-20的合成路線。
[0148] 實施例1
[0149] 中間體(M1-M10)的制備：
[0150] 5-乙?；?1，3-亞苯基雙(二甲基氨基甲酸酯）(M1)
[0151] 5-乙酰基-1，3-亞苯基二（乙基（甲基)氨基甲酸酯）(M2)
[0152] 3-乙酰基二甲基氨基甲酸酯(M3)
[0153] 3-乙?；一谆?氨基甲酸酯(M4)
[0154] 4-乙酰二甲基氨基甲酸酯(M5)
[0155] 4-乙酰乙基（甲基)氨基甲酸酯(M6)的
[0156] 2-乙酰二甲基氨基甲酸酯(M7)
[0157] 2-乙酰乙基（甲基)氨基甲酸酯(M8)
[0158] 3-乙酰苯基二甲基氨基甲酸酯(M9)
[0159] 3-乙?；惐被姿狨?M10)
[0160] M1-M10通用合成步驟：將相應(yīng)不同位置取代的（0.0 44mol)羥基苯乙酮、 (0 ? 785eq，0 ? 035mol )K2C03/1 ? 5H20、（0 ? 215eq，0 ? 009mol)無水K2CO3和（0 ? 144eq，0 ? 0063mol) 吡啶在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，加熱到70 °C ;將（1.5eq，0.066mo 1)氨基甲酰氯在適量乙 酸乙酯中攪拌均勻，逐滴加入上述溶液中，70°C反應(yīng)(反應(yīng)時間由TLC板監(jiān)測決定），反應(yīng)結(jié) 束后，加入與反應(yīng)液等體積的水，70 °C攪拌1.5h;冷卻至室溫，萃取收集有機相，用2wt %硫 酸和水先后洗滌各兩次后用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮，得到產(chǎn)物M1-M10,產(chǎn)率85% ~98%〇
[0161] 實施例2
[0162] 中間體(M11-M14)的制備：
[0163] 4-甲?；交谆被姿狨?Mil)
[0164] 4-甲酰基乙基（甲基)氨基甲酸酯(M12)
[0165] 3-甲?；交谆被姿狨?M13)
[0166] 3-甲?；一谆?氨基甲酸酯(M14)
[0167] Mil-Ml 4通用合成步驟：將相應(yīng)不同位置取代的（0.044mol)羥基苯甲醛、 (0 ? 785eq，0 ? 035mol )K2C03/1 ? 5H20、（0 ? 215eq，0 ? 009mol)無水K2CO3和（0 ? 144eq，0 ? 0063mol) 吡啶在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，加熱到70 °C ;將（1.5eq，0.066mo 1)氨基甲酰氯在適量乙 酸乙酯中攪拌均勻，逐滴加入上述溶液中，70°C反應(yīng)(反應(yīng)時間由TLC板監(jiān)測決定），反應(yīng)結(jié) 束后，加入與反應(yīng)液等體積的水，70 °C攪拌1.5h;冷卻至室溫，萃取收集有機相，用2wt %硫 酸和水先后洗滌各兩次后用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮，得到產(chǎn)物M11-M14,產(chǎn)率90% ~95%〇
[0168] 實施例3
[0169] 中間體(幻-卜。-羥基苯基甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(化學(xué)結(jié)構(gòu)式N1所 示化合物）的合成：
[0170] 室溫條件下，將(0.4425g，2mmol)中間體M4溶解在5ml甲醇中攪拌均勻，向其中滴 入8wt % K0H溶液4ml，將（0.2440g，3.6mmo 1)對甲氧基苯甲醛溶解在甲醇中滴入上述溶液 中，室溫攪拌72h，真空濃縮除去溶劑，加入90ml二氯甲烷和90ml水，收集有機相，水洗三次， 無水硫酸鎂干燥過夜、抽濾、濃縮、干燥得棕色油狀物，經(jīng)柱層析(石油醚：乙酸乙酯= 15:1 ~6:1)得淡黃色固體產(chǎn)物N1 233 ? 7mg，產(chǎn)率45 ? 9% J? P ? 126 ? 5-128 ? 3°C ? 1H NMR(400MHz， DMS0)89.76(s,1H) ,7.84(d,J = 8.7Hz,2H),7.70(s,2H) ,7.60(d,J = 7.7Hz,lH) ,7.44(s, 1H)，7.36(t，J=7.9Hz，1H)，7.08-6.97(m，3H)，3.83(s，3H)?13C 匪R(101MHz，DMS0)S 189.42,161.81,158.16,144.30,139.76,131.23,130.25,127.77,120.52,120.14,119.93， 115.02,114.88,55.84.HRMS:calcd for CieHuOs,[M+Na] +,m/z 277.0835；found,m/z 277.0835。
[0171] 實施例4
[0172] 中間體(W-i-G-羥基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)丙- 2-烯-丨-酮(化學(xué)結(jié)構(gòu)式呢所 示化合物）的合成：
[0173] 室溫條件下，將(0.4150g，2mmol)中間體M6溶解在5ml甲醇中攪拌均勻，向其中滴 入8wt % K0H溶液4ml，將（0.293g，2.4mmo 1)對甲氧基苯甲醛溶解在甲醇中，滴入上述溶液 中，室溫攪拌120h，真空濃縮除去溶劑，加入90ml二氯甲烷和90ml水，收集有機相，水洗三 次，無水硫酸鎂干燥過夜、抽濾、濃縮、干燥得棕色油狀物，經(jīng)柱層析(石油醚：乙酸乙酯=9: 1 ~6:1)得淡黃色固體產(chǎn)物N2 180mg，產(chǎn)率35 ? 4% J? P ? 181 ? 5-183 ? 4°C ? 1H NMR(400MHz， DMS0)810.35(s,1H) ,8.05(d,J = 8.7Hz,2H) ,7.82(d,J = 8.7Hz,2H) ,7.77(d,J = 15.5Hz, 1H) ,7.65(d,J= 15.5Hz, 1H), 7.01 (d,J = 8.8Hz,2H) ,6.89(d ,J = 8.7Hz , 2H), 3.82(s , 3H) ?13C 匪R(101MHz，DMS0)Sl87.50，162.48，161.58，143.16，131.51，131.01，129.81, 127.99,120.02,115.79,114.82,55.80.HRMS:calcd for CieHwOs,[M+Na]+,m/z 277.0835； found,m/z 277.0836。
[0174] 實施例5
[0175] 產(chǎn)物(E)-5-(3_(4-羥基苯基)丙烯酰基)-l，3_亞苯基雙(二甲基氨基甲酸酯）（化 學(xué)結(jié)構(gòu)式1所示化合物)的合成：
[0176] 室溫條件下，將(0.598g，2mmol)中間體Ml和(0.293g，2.4mmol)對羥基苯甲醛溶解 在10ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸8滴，室溫攪拌24h，真空濃縮除去溶劑，加入 90ml二氯甲烷和90ml水，收集有機相，無水硫酸鎂干燥、抽濾、濃縮、干燥得黃色油狀液體， 經(jīng)柱層析(石油醚：乙酸乙酯= 9:1~3:1)得黃色固體產(chǎn)物102mg，產(chǎn)率12.8% J.P. 170-172 。(："H 匪R(400MHz，DMS0)Sl0.12(s，lH)，7.78(d，J = 8.7Hz，2H)，7.76(d，J = 2.2Hz，2H)， 7.72(s,2H) ,7.26 (s,lH) ,6.84 (d,J = 8.6Hz,2H) ,3.01 (d,J = 56.5Hz, 12H) ,13C NMR (101MHz,DMS0)8187.90,161.05,154.05,152.28,145.97,139.64,131.79,126.29,120.66, 118.63,117.97,116.14,36.92,36.50.HRMS:calcd for C21H22N2O6,[M+H]+,m/z 399.1551； found,m/z 399.1555。
[0177] 實施例6
[0178] 產(chǎn)物(E)-5-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?-l，3_亞苯基雙（乙基（甲基)氨基甲酸酯） (化學(xué)結(jié)構(gòu)式2所示化合物)的合成：
[0179] 室溫條件下，將(0.645g，2mmo 1)中間體M2和(0.293g，2.4mmo 1)對羥基苯甲醛溶解 在10ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸13滴，室溫攪拌72h，真空濃縮除去溶劑，加入 90ml二氯甲烷和90ml水，收集有機相，無水硫酸鎂干燥、抽濾、濃縮、干燥，經(jīng)柱層析(石油 醚：乙酸乙酯= 10:1~3.5:1)得黃色固體產(chǎn)物194.7mg，產(chǎn)率 NMR(400MHz,DMS0)8l0.14(s,lH),7.73(ddd ,J = 30.1,12.5,7.1Hz,6H),7.27(t ,J = 2.1Hz, 1H) ,6.85(d,J = 8.6Hz,2H) ,3.46(dd,J=13.8,6.8Hz,2H),3.37-3.30(m,2H) ,2.99(d,J = 52.8Hz,6H) ,1.22(t,J = 7.0Hz，3H) ,1.12(t,J = 7.0Hz,3H) .13C 匪R(101MHz,DMS0)S 187.72,160.83,157.75,153.68,152.34,145.84,139.89,131.79,129.79,126.17,120.89， 119.07,118.38,116.26,115.67,44.04,34.42,34.07,13.52,12.71.HRMS:calcd for C23H26N2O6, [M+H] + ,m/z427.1864 ； found ,m/z 427.1864〇
[0180] 實施例7
[0181] 產(chǎn)物(E)-3-(3-(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式3所 示化合物）的合成：
[0182] 室溫條件下，將(0.415g，2mmol，）中間體M3和（0.293g，2.4mmol)對羥基苯甲醛溶 解在10ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸10滴，室溫攪拌50h，真空濃縮除去溶劑，加入 90ml二氯甲烷和90ml水，收集有機相，無水硫酸鎂干燥、抽濾、濃縮、干燥得黃色固體，經(jīng)柱 層析(石油醚：乙酸乙酯= 8:1~3:1)得淡黃色固體產(chǎn)物66.5mg，產(chǎn)率9HP.153-155°C NMR(400MHz,DMS0)8l0.10(s,lH) ,7.99(d ,J = 7.9Hz , 1H) ,7.88-7.84(m, 1H), 7.76(d ,J = 8.7Hz,2H) ,7.71(d,J = l. 1Hz , 2H), 7.57 (t, J = 7.9Hz , 1H), 7.41 (ddd , J = 8.0,2.3 , 0.9Hz,lH) ,6.84(d,J = 8.6Hz,2H),3.08(d,J = 9.3Hz,3H) ,2.93(d,J = 4.2Hz,3H).13C NMR (101MHz,DMS0)8188.48,160.73,154.36,152.10,145.41,139.61,131.64,130.09,126.91, 126.20,125.59,122.18,118.69,116.28,36.81,36.61.HRMS:calcd for C18H17NO4,[M+H] + , m/z312.1230;found,m/z 312.1235。
[0183] 實施例8
[0184] 產(chǎn)物(E)-3-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式 4所示化合物)的合成：
[0185] 室溫條件下，將(0 ? 4425g，2mmol)中間體M4和(0 ? 2928g，2 ? 4mmol)對羥基苯甲醛溶 解在15ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸10滴，室溫攪拌120h，真空濃縮除去溶劑，加 入90ml二氯甲烷和90ml水，收集有機相，無水硫酸鎂干燥、抽濾、濃縮、干燥得黃色固體，經(jīng) 柱層析(石油醚：乙酸乙酯= 6:1~4:1)得淡黃色固體產(chǎn)物100mg，產(chǎn)率12.8% J.P. 118.9-121.5°C.1HMMR(400MHz，DMS0)Sl0.10(s，lH)，7.99(d，J = 7.7Hz，lH)，7.84(s，lH)，7.76 (d ,J = 8.5Hz,2H) ,7.71(s,2H),7.57(t ,J = 7.9Hz,lH) ,7.41 (d ,J = 7.9Hz , 1H) ,6.84(d ,J = 8.5Hz，2H)，3.47(d，J = 6.8Hz，lH)，2.99(d，J = 56.4Hz，3H)，1.26-1.09(m，4H) .13C 匪R (101MHz，DMS0)Sl88.31,160.79,153.92,152.06,145.41,139.62,132.95,131.64,130.08， 126.89,126.19,125.59,122.11,118.69,116.28,44.00,34.40,34.07,13.55,12.73.HRMS: calcd for C19H19NO4, [M+Na] + ,m/z 348.1206；found,m/z 348.1213〇
[0186] 實施例9
[0187] 產(chǎn)物(E)-4-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式5所 示化合物）的合成：
[0188] 室溫條件下，將(0.621g，3mmol)中間體M5和(0.4396g，3.6mmol)對羥基苯甲酸溶 解在10ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸13滴，室溫攪拌1周，真空濃縮除去溶劑，加入 90ml二氯甲烷和90ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥過夜、抽濾、濃縮、干燥得棕 色油狀，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯= 10:1~4:1)得黃色固體產(chǎn)物170mg，產(chǎn)率30%。 M.P. 188.5-170.3°C NMR(400MHz ,DMS0)8l0. l〇(s, 1H) ,8.17(d ,J = 8.6Hz , 2H), 7.76(d, J = 3.3Hz,4H) ,7.73(d ,J = 3.3Hz,2H) ,7.70(s,lH) ,7.29(t ,J = 8.7Hz,2H) ,6.86(t ,J = 12.lHz，2H)，3.07(s，3H)，2.94(s，3H).13C 匪R(101MHz，DMS0)Sl88.26，160.61，155.29, 153.87,144.91,135.27,131.48,130.29,126.25,122.39,118.83,116.28,36.81， 36.63.HRMS:calcd for C18H17NO4, [M+Na] + ,334.1055；found,m/z 334.1053〇
[0189] 實施例10
[0190] 產(chǎn)物（（E)-4-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu) 式6所示化合物)的合成：
[0191 ] 室溫條件下，將(0.664g，3mmol)中間體M6和(0.4553g，3.6mmol)對羥基苯甲酸溶 解在12ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸12滴，室溫攪拌1周，真空濃縮除去溶劑，加入 90ml二氯甲烷和90ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥過夜、抽濾、濃縮、干燥得黃 色油狀物，經(jīng)柱層析(石油醚：乙酸乙酯= 10:1~4:1)得黃色固體產(chǎn)物350mg，產(chǎn)率59.7%。 M.P. 145.9-146.5°C NMR(400MHz ,DMSO)8l〇. l〇(s, 1H) ,8.17(d ,J = 8.6Hz , 2H), 7.76(d, J = 2.8Hz,4H) ,7.73(d,J = 4.0Hz,2H) ,7.68(d,J=15.5Hz,lH) ,7.30(d,J = 8.5Hz,2H), 6.84(d,J = 8.6Hz,2H),3.50-3.34(m,2H),2.99(d,J = 50.0Hz,3H) ,1.23-1.09(m,3H) ,13C MMR(101MHz，DMS0)Sl88.30，160.61，155.28，153.40，144.92，135.25，131.48，130.29， 126.25,122.38,118.82,116.28,44.04,34.41,34.11,13.53,12.69.HRMS:calcd for Ci9Hi9N〇4，[M+H] +，m/z 326.1387;found,m/z 326.1388。
[0192] 實施例11
[0193] 產(chǎn)物（(E)-2-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式7所 示化合物）的合成：
[0194] 室溫條件下，將(0.6221 g，3mmo 1)中間體M7和(0.4553g，3.6mmo 1)對羥基苯甲醛溶 解在10ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸5滴，70°C攪拌24h，真空濃縮除去溶劑，加入 90ml乙酸乙酯和90ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得黃色 油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯=6 :1)得黃色油狀產(chǎn)物124mg，產(chǎn)率11.1 %。4匪R (400MHz，DMS0)Sl0.13(s，lH)，7.66(dd，J = 7.6，1.6Hz，lH)，7.58(dd，J=10.7,5.0Hz，3H), 7.47-7.32(m,2H) ,7.23(s,lH), 7.11 (d,J= 15.9Hz, 1H) ,6.82(d ,J = 8.6Hz ,2H) ,2.92(s, 3H),2.77(s,3H).13C NMR(101MHz,DMS0)8l91.34,160.78,157.77,153.97,149.48,145.05, 131.15,129.80,125.99,125.78,124.19,122.63,119.23,116.37,36.70,36.45.HRMS: calcd for Ci8Hi7N〇4，[M+Na] + ,m/z 334.1050;found,m/z 334.1055。
[0195] 實施例12
[0196] 產(chǎn)物(E)-2-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式 8所示化合物)的合成：
[0197] 室溫條件下，將(0.6671g，3mmol，）中間體M8和(0.4356g，3.6mmol)對羥基苯甲酸 溶解在10ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸10滴，70 °C攪拌24h，真空濃縮除去溶劑，加 入90ml乙酸乙酯和90ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得黃 色油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯=6 :1)得淡黃色固體產(chǎn)物183.7mg，產(chǎn)率15.7 %。 M.P. 109.5-111.6°C.1H NMR(400MHz,DMS0)8l0.12(s,lH),7.64(t,J = 7.6Hz,lH),7.58(d, J = 8.1Hz,3H) ,7.43(d,J=15.9Hz,lH) ,7.36(t,J = 7.3Hz,lH) ,7.24(d,J = 8.0Hz,lH), 7.09(dd,J=15.9,8.9Hz,lH) ,6.82(d,J = 8.6Hz,2H) ,3.34-3.28(m,lH) ,3.17(q,J = 7.0Hz,lH),2.84(d,J = 47.8Hz,3H),0.98(dt,J = 55.8,7.0Hz,3H).13C NMR( 151MHz,DMS0) 8191.23,160.70,153.50,149.49,145.18,145.02,133.66,132.60,131.18,129.83, 125.97,124.09,122.57,116.27,43.81,34.24,33.94,13.28,12.50.HRMS:calcd for C19H19NO4, [M+Na ]+, m/z348.1206 ； found, m/z 348.1207 〇
[0198] 實施例13
[0199] 產(chǎn)物(E)-3-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯酰基)苯基二甲基氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式9 所示化合物)的合成：
[0200] 室溫條件下，將（0.128,0.47111111〇1)中間體價、（0.0618,0.369111111〇1)1(2〇)3/1.51120、 (0.02 8,0.101111111〇1)無水1(:^03和4滴吡啶在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，加熱到70°(：;將 (0.1g，0.705mmol)二甲氨基甲酰氯在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，逐滴加入上述溶液中，70 °C反應(yīng)22h，反應(yīng)結(jié)束后，加入與反應(yīng)液等體積的水，70°C攪拌1.5h;冷卻至室溫，萃取收集 有機相，用2wt%硫酸和水先后洗滌各兩次后用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮，得到淡黃 色固體產(chǎn)物15011^，產(chǎn)率98%。]\^.60-62°(：.111匪1?(4001〇^，01^0)58.01((1，了 = 7.8抱，11〇， 7.87(t,J = 11.6Hz,3H) ,7.81-7.70(m,2H) ,7.58(t,J = 7.9Hz,lH) ,7.42(dd,J = 8.0, 1,5Hz,lH),7.03(d,J=8.7Hz,2H),3.83(s,3H),3.09(s,3H),2.94(s,3H).13C NMR (101MHz,DMS0)8188.57,161.99,154.35,152.12,144.92,139.48,131.42,130.11,127.72, 127?03，125?67，122?23，119?74，114?86，55?85，36?81，36?60?HRMS:calcd for C19H19NO4， [M+H] + ,m/z326.1387；found,m/z 326.1387 〇
[0201] 實施例14
[0202] 產(chǎn)物(E)-4-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式10 所示化合物)的合成：
[0203] 室溫條件下，將（0.12g,0.47mmo 1)中間體N2、（0? 061 g，0? 369? mmo 1)K2CO3/1 ? 5H20、 (0.028,0.101111111〇1)無水1(:^0 3和4滴吡啶在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，加熱到70°(：;將 (0.1g，0.705mmol)二甲氨基甲酰氯在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，逐滴加入上述溶液中，70 °C反應(yīng)22h，反應(yīng)結(jié)束后，加入與反應(yīng)液等體積的水，70°C攪拌1.5h;冷卻至室溫，萃取收集 有機相，用2wt%硫酸和水先后洗滌各兩次后用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮，得到淡黃 色固體產(chǎn)物llOmg，產(chǎn)率72.4% U. 110.2-112.1°C ? 4 匪R(400MHz，DMS0)S8? 19(d，J = 8.6Hz,2H) ,7.85(dd,J = 9.7,6.1Hz,4H) ,7.83-7.79(m,0H),7.74(t,J = 9.7Hz,0H) ,7.31 (d,J = 8.6Hz,2H) ,7.02(t,J = 7.2Hz,2H) ,3.83(d,J = 2.9Hz,3H) ,3.07(s,3H) ,2.94(s, 3H).13C 匪R(101MHz，DMS0)Sl88.30，161.85，155.38，153.86，144.42，135.15，131.28, 130?37，127?78，122?42，119?88，114?87，55?85，36?81，36?64?HRMS:calcd for C19H19NO4， [M+Na]+,m/z 348.1206；found,m/z 348.1206〇
[0204] 實施例15
[0205] 產(chǎn)物(E)-3-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu) 式11所示化合物)的合成：
[0206] 室溫條件下，將（0.128,0.47111111〇1)中間體價、（0.0618,0.369111111〇1)1(2〇)3/1.51120、 (0.02 8,0.101111111〇1)無水1(:^03和4滴吡啶在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，加熱到70°(：;將 (0.1g，0.705mmol)N-甲基-N-乙基甲酰氯在適量乙酸乙酯中攪拌均勾，逐滴加入上述溶液 中，70°C反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后，加入與反應(yīng)液等體積的水，70°C攪拌1.5h;冷卻至室溫，萃取 收集有機相，用2wt%硫酸和水先后洗滌各兩次后用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮，得到 黃色油狀液體產(chǎn)物 159.5mg，產(chǎn)率81.5%</H MMR(400MHz，DMS0)S8.01(d，J = 7.8Hz，lH)， 7.87(t,J=11.3Hz,5H),7.80(s,0H),7.75(d,J=15.5Hz,0H),7.58(t,J = 7.9Hz,lH) ,7.42 (d,J = 8.0Hz,lH) ,7.03(d,J = 8.7Hz,2H) ,3.83(s,3H) ,3.53-3.34(m,lH) ,3.00(d,J = 56.7Hz,3H),1.23-l.ll(m,4H),13C NMR(101MHz,DMS0)8l88.57,161.94,153.89,152.08, 144.92,139.49,131.43,130.12,127.72,127.07,125.68,122.17,119.75,114.87,55.86, 44.00,34.41,34.07,13.54,12.73.HRMS:calcd for C20H21NO4,[M+Na]+,m/z 362.1363； found,m/z 362.1365。
[0207] 實施例16
[0208] 產(chǎn)物(E)-4-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu) 式12所示化合物)的合成：
[0209] 室溫條件下，將（0 ? 09g，0 ? 35mmo 1)中間體N2、（0 ? 061 g，0 ? 369mmo 1)K2CO3/1 ? 5H20、 (0.028,0.101111111〇1)無水1(:^0 3和4滴吡啶在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，加熱到70°(：;將 (0.1g，0.705mmol)N-甲基-N-乙基甲酰氯在適量乙酸乙酯中攪拌均勾，逐滴加入上述溶液 中，70°C反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后，加入與反應(yīng)液等體積的水，70°C攪拌1.5h;冷卻至室溫，萃取 收集有機相，用2wt%硫酸和水先后洗滌各兩次后用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮，得到 黃色油狀液體產(chǎn)物 130mg，產(chǎn)率81.5% </H NMR(400MHz，DMS0)S8.19(d，J = 8.7Hz，2H)， 7.90-7.83(m,2H) ,7.81 (s,lH), 7.73(d,J= 15.5Hz, 1H) ,7.30(t ,J = 9.6Hz , 2H), 7.03(d ,J = 8.8Hz,2H),3.52-3.40(m,lH),3.35(d ,J = 7.1Hz,lH),3.06-2.90(m,3H),1.23-1.10(m, 3H).13C 匪R(101MHz，DMS0)Sl88.30，161.85，155.36，153.51，144.43，135.14，131.28, 130.38,127.79,122.41,119.88,114.87,55.84,44.04,34.41,34.11,13.53,12.69.HRMS: calcd for C20H21NO4, [M+H] + ,m/z 340.1543；found,m/z 340.1548〇
[0210] 實施例17
[0211] 產(chǎn)物(E)-4-(3-(3-羥基苯基)-3-氧代丙基-1-稀-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸 酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式13所示化合物)的合成：
[0212] 室溫條件下，將（〇.7728g，4mmol)中間體M12和（0.5446g，4mmol)3-羥基苯乙酮溶 解在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸20滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加入 100ml乙酸乙酯和150ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得黃 色油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯=6: 1)得黃綠色固體產(chǎn)物120mg，產(chǎn)率9 %。 M.P.117.9-199.6°C.1HMMR(400MHz，DMS0)S9.82(d，J = 9.3Hz，lH)，7.91(d，J = 8.6Hz， 2H)，7.83(d，J= 15.6Hz，lH)，7.72(d，J= 15.6Hz，1H)，7.64(d，J = 7.7Hz，lH)，7.46(d，J = 1.9Hz，lH)，7.38(t，J = 7.9Hz，lH)，7.21(d，J = 8.4Hz，2H)，7.06(dd，J = 7.9,2.2Hz，1H)， 3.44(dd,J= 14.1,7.0Hz, 1H) ,3.31 (d,J = 7.0Hz,lH),2.97(d,J = 49.5Hz,3H) ,1.23-1.08 (m，3H).13C NMR(101MHz，DMS0)Sl89.01，157.71，153.25，152.99，142.96，139.01，131.61, 129.90,129.79,122.28,121.89,120.24,119.54,114.60,43.50,33.89,33.57,13.03, 12.21.HRMS:calcd for C19H19NO4,[M+H]+,m/z 326.1387；found,m/z 326.1390〇 [0213] 實施例18
[0214] 產(chǎn)物(E)-4-(3-(3-羥基苯基)-3-氧代丙基-丨-烯-丨-基）苯基二甲基氨基甲酸酯 (化學(xué)結(jié)構(gòu)式14所示化合物)的合成：
[0215] 室溫條件下，將（〇 ? 9274g，4 ? 8mmol)中間體Ml 1和（0 ? 5446g，4mmol )3_羥基苯乙酬 溶解在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸20滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加 入11 Oml乙酸乙酯和180ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得 黃色油狀物，經(jīng)柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10:1~6:1)得黃色固體產(chǎn)物99.7mg，產(chǎn)率9%。 M.P.144.2-146.1°C NMR(400MHz,DMSO)89.80(s,1H),7.88(s,1H),7.70(d,J=15.9Hz, 4H) ,7.48(s,2H),7.38(t ,J = 7.9Hz,lH) ,7.21(dd ,J = 7.8,2.0Hz,lH) ,7.07(dd ,J = 8.1, 2.4Hz，1H)，3.09(s，3H)，2.94(s，3H).13CMMR(101MHz，DMS0)S189.48，158.21，154.12， 153.49,143.48,139.49,132.14,130.43,130.31,122.81,122.36,120.76,120.07,115.08， 36.79.36.61. HRMS:calcd for C18H17NO4,[M+Na]+,m/z 334.1050；found,m/z 334.1056〇 [0216] 實施例19
[0217] 產(chǎn)物(E)-3-(3-(3-羥基苯基)-3-氧代丙基-丨-烯-丨-基）苯基二甲基氨基甲酸酯 (化學(xué)結(jié)構(gòu)式15所示化合物)的合成：
[0218] 室溫條件下，將（0 ? 9274g，4 ? 8mmol)中間體M13和（0 ? 5446g，4mmol )3_羥基苯乙酬 溶解在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸20滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加 入110ml乙酸乙酯和180ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得 黃色油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯=10 :1~6 :1)得黃色油狀液體產(chǎn)物98mg，產(chǎn)率 9%〇^ NMR(400MHz,DMS0)89.83(s,1H), 7.90(d,J= 15.6Hz, 1H) ,7.71 (d ,J= 16.2Hz ,4H), 7.48(s,2H),7.38(t,J = 7.9Hz,lH) ,7.21(d,J = 7.8Hz,lH) ,7.11-7.02(m, 1H),3.54-3.37 (m，2H)，2.99(d，J = 54.8Hz，3H)，1.23-1 ? 12(m，4H) .13C 匪R(101MHz，DMS0)5189.52， 158.22,154.43,152.28,143.31,139.37,136.54,130.31,130.17,126.78,124.66,123.49， 121.96.120.86.120.15.115.15.36.81.36.61. HRMS:calcd for C18H17NO4,[M+Na] +,m/ z334.1050;found,m/z 334.1056。
[0219] 實施例20
[0220] 產(chǎn)物(E)-3-(3-(3-羥基苯基)-3-氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸 酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式16所示化合物)的合成：
[0221 ] 室溫條件下，將（0 ? 9947g，4 ? 8mmol)中間體M14和（0 ? 5446g，4mmol )3_羥基苯乙酬 溶解在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸20滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加 入110ml乙酸乙酯和180ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得 黃色油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯= 10:1~6:1)得黃色固體產(chǎn)物94.5mg，產(chǎn)率 7.6%〇1.?.90.1-91.9〇0.^ NMR(400MHz,DMS0)89.81(s,lH),7.91(d,J = 8.6Hz,2H),7.84 (d,J=15.6Hz,lH) ,7.72(d,J=15.6Hz,lH) ,7.64(d,J = 7.7Hz,lH) ,7.49-7.45(m,lH), 7.38(t ,J = 7.9Hz,lH),7.22(d ,J = 8.6Hz,2H),7.08-7.05(m,lH),3.06(s,4H),2.92(d ,J = 8.1Hz，4H).13C 匪R(101MHz，DMS0)Sl89.48，158.22，153.96，152.22，143.36，139.34, 136.53,130.32,130.17,126.85,124.70,123.41,122.00,120.87,120.19,115.13,43.97, 34.39,34.06,13.55,12.76.HRMS:calcd for C19H19NO4,[M+Na]+,m/z 348.1206；found,m/z 348.1206。
[0222] 實施例21
[0223] 產(chǎn)物(E)-3-(3-(4-羥基苯基)-3-氧代丙基-丨-烯-丨-基）苯基二甲基氨基甲酸酯 (化學(xué)結(jié)構(gòu)式17所示化合物)的合成：
[0224] 室溫條件下，將(0.9274g，4.8mmo 1)中間體M13和(0.5446g，4mmol )4_羥基苯乙酬 溶解在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸20滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加 入11 Oml乙酸乙酯和180ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得 黃色油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯=10 :1~6 :1)得黃綠色固體產(chǎn)物160mg，產(chǎn)率 12.8%〇1.?.164.7-166.5〇0.^ NMR(400MHz ,DMSO)8l〇. 44(s, 1H) ,8.10(d ,J = 8.7Hz , 2H), 7.95(d,J=15.6Hz,lH) ,7.71(d,J=14.0Hz,2H) ,7.45(t,J = 7.9Hz,lH) ,7.19(d,J = 5.6Hz，lH)，6.90(d，J = 8.6Hz，2H)，3.08(s，3H)，2.94(s，3H) .13C 匪R(101MHz，DMS0)S 187.46,162.76,154.45,152.24,142.25,136.75,131.77,130.13,129.49,126.75,124.45， 123.32，121.80，115.85,36.78,36.59.HRMS:calcd for Ci8Hi7N〇4，[M+Na]+，m/z 334.1050; found，m/z334.1055。
[0225] 實施例22
[0226] 產(chǎn)物(E)-3-(3-(4-羥基苯基)-3-氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸 酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式18所示化合物)的合成：
[0227] 室溫條件下，將(0 ? 9947g，4 ? 8mmo 1)中間體M14和(0 ? 5446g，4mmol )4_羥基苯乙酬 溶解在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸20滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加 入110ml乙酸乙酯和180ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得 黃色油狀物，經(jīng)柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10 :1~6:1)得淡綠色固體產(chǎn)物107.5mg，產(chǎn)率 8.3%〇1.?.149.5-151.3〇0.^ NMR(400MHz ,DMSO)8l〇. 43(s , 1H), 8.10(d ,J = 8.7Hz , 2H), 7.95(d ,J=15.6Hz,lH),7.74-7.64(m,3H),7.45(t ,J = 7.9Hz,lH),7.19(d ,J = 7.6Hz,lH), 6.90(d ,J = 8.7Hz,2H),3.46(d ,J = 7.2Hz,lH),3.35(s,lH),3.07-2.90(m,3H),1.13(t ,J = 7.1Hz，3H).13C 匪R(101MHz，DMS0)Sl87.48，162.76，154.09，152.21，142.27，136.76, 131.77,130.13,129.49,126.73,124.51,123.32,121.81,115.85,43.97,34.38,34.06, 13.56,12.76.HRMS:calcd for C19H19NO4,[M+Na]+,m/z 348.1206；found,m/z 348.1209〇
[0228] 實施例23
[0229] 產(chǎn)物(E)-4-(3-(4-羥基苯基)-3-氧代丙基-丨-烯-丨-基）苯基二甲基氨基甲酸酯 (化學(xué)結(jié)構(gòu)式19所示化合物)的合成：
[0230] 室溫條件下，將(0.7728g，4mmol)中間體Mil和(0.5446g，4mmol)4_羥基苯乙酮溶 解在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸15滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加入 110ml二氯甲烷和180ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得黃 色油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯=10 :1~4 :1)得淡綠色固體產(chǎn)物289.4mg，產(chǎn)率 23%。]\^.154.2-155.8°(： "H 匪R(400MHz，DMS0)Sl0.43(s，lH)，8.09(d，J = 8.6Hz，2H)， 7.98-7.82(m,3H),7.69(d ,J = 15.6Hz, 1H), 7.21 (d,J = 8.5Hz,2H), 6.91 (d,J = 8.6Hz,2H), 3.06(s,3H),2.93(s,3H).13C NMR(101MHz,DMS0)8l87.87,162.66,154.15,153.29,142.35, 132.36,131.64,130.22,129.67,122.75,122.33,115.85,36.80,36.61.HRMS:calcd for Ci8Hi7N〇4,[M+Na] + ,m/z 334.1050；found,m/z 334.1053〇
[0231] 實施例24
[0232] 產(chǎn)物(E)-4-(3-(4-羥基苯基)-3-氧代丙基-丨-烯-丨-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸 酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式20所示化合物)的合成：
[0233] 室溫條件下，將(0.8289g ,4mmol)中間體M12和(0.5446g ,4mmol )4_羥基苯乙酮溶 解在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸15滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加入 110ml二氯甲烷和180ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得黃 色油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯=10 :1~4 :1)得黃綠色固體產(chǎn)物193.6mg，產(chǎn)率 14.9XU. 150.5-152.0°C ? 4 匪R(400MHz，DMSO)Sl〇.43(s，1H)，8.07(t，J= 13.0Hz, 2H),7.88(dd ,J=15.6,10.6Hz,3H),7.69(d ,J=15.5Hz,lH),7.21(d ,J = 8.1Hz,2H),7.06-6.82(m，2H)，3.63-3.14(m，3H)，2.95(dd，J=46.9，17.1Hz，3H)，1.30-0.96(m，4H). 13C NMR (101MHz，DMS0)Sl87.54,162.66,153.90,153.28,142.36,132.35,131.64,130.22,129.63， 122 ? 75，122?32，115?85，34?40，34?09，13?54，12?73?HRMS:calcd for C19H19NO4，[M+Na] +， m/z348.1206；found,m/z 348.1209〇
[0234] 實施例25
[0235] 產(chǎn)物(E)-3-(3_(4-羥基苯基)丙烯酰基)苯基二甲基氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式21所 示化合物）的合成：
[0236] 室溫條件下，將(0.9385g，4mmol)中間體M9和(0.4885g，4mmol)對羥基苯甲醛溶解 在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸15滴，70 °C攪拌48h，真空濃縮除去溶劑，加入 105ml乙酸乙酯和180ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥2h、抽濾、濃縮、干燥得黃 色油狀物，經(jīng)柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10:1~4:1)得棕色固體產(chǎn)物216.4mg，產(chǎn)率16 %。 M.P. 110.5-111.9°C NMR(400MHz,DMS0)8l0.13(s,lH),8.01(d,J = 7.8Hz,lH),7.84(s, 1H) ,7.74(dd,J = 23.9,12.5Hz,4H) ,7.63-7.53(m,lH),7.41(dd,J = 8.0,1.7Hz,lH),6.85 (d,J = 8.5Hz,2H) ,3.45(dd,J = 13.3,6.4Hz,2H),3.33(dd,J=13.9,6.9Hz,2H),1.23(dd,J = 15.1,8.4Hz,3H),1.15(dd,J=14.8,7.9Hz,3H).13C NMR( 101MHz,DMS0)8l88.56,160.76, 153.66,152.06,145.44,139.65,131.67,130.11,126.95,126.22,125.62,122.07,118.73， 116.30,42.25,42.00,14.67,13.74.HRMS:calcd for C20H21NO4, [M+H] + ,m/z 340.1543； found,m/z 340.1546。
[0237] 實施例26
[0238] 產(chǎn)物(E)-3-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基甲酸酯(化學(xué)結(jié)構(gòu)式22 所示化合物)的合成：
[0239] 室溫條件下，將(0 ? 05g，0 ? 20mmol)中間體N1、（0 ? 03g，0 ? 157mmol)K2C03/1 ? 5H20、 (0.028,0.101111111〇1)無水1( :^03和3滴吡啶在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，加熱到70°(：;將 (0.05g，0.3mmol)二乙氨基甲酰氯在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，逐滴加入上述溶液中，70°C 反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后，加入與反應(yīng)液等體積的水，70°C攪拌1.5h;冷卻至室溫，萃取收集有 機相，用2wt%硫酸和水先后洗滌各兩次后用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮，得到黃色油 狀液體產(chǎn)物47mg，產(chǎn)率67% </H Mffi(400MHz，DMS0)S8.03(d，J = 7.7Hz，lH)，7.89(d，J = 8.6Hz,5H),7.85(s,0H),7.81(s,0H),7.76(d,J=15.5Hz,0H),7.58(t,J = 7.9Hz,lH) ,7.43 (d,J = 7.9Hz,lH) ,7.03(d,J = 8.6Hz,2H),3.84(s,3H),3.45(dd,J = 13.1,6.2Hz,2H) ,3.26 (dd,J=16.2,7.5Hz,2H),1.25(d,J = 6.9Hz,6H) ,1.14(t,J = 7.1Hz,1H).13C NMR(151MHz, DMS0)8188.61,161.97,153.65,152.08,144.95,139.52,131.45,130.14,127.74,127.07, 125.71,122.12,119.77,114.88,55.87,42.24,13.54.HRMS:calcd for C21H23NO4,[M+H] +, m/z354.1700;found,m/z 354.1700。
[0240] 實施例27
[0241] 產(chǎn)物(E)-3-(3_(4-甲氧基苯基)丙烯?；?苯基二異丙基氨基甲酸叔丁酯(化學(xué)結(jié) 構(gòu)式23所示化合物)的合成：
[0242] 室溫條件下，將（〇.l〇g，〇.4mmol)中間體Nl、（0.10g，0.785mmol)K2C03/1.5H2〇、 (0.01 g，0.215mmo 1)無水K2⑶3和5滴吡啶在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，加熱到70 °C ;將 (0.98g，0.60mmol)二異丙基氨基甲酰氯在適量乙酸乙酯中攪拌均勻，逐滴加入上述溶液 中，70 °C反應(yīng)24h，反應(yīng)結(jié)束后，加入與反應(yīng)液等體積的水，70 °C攪拌2h;冷卻至室溫，萃取收 集有機相，用2wt%硫酸和水先后洗滌各兩次后用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮，得到棕 色油狀液體產(chǎn)物 140mg，產(chǎn)率91.7% </H MMR(400MHz，DMS0)S8.04(d，J = 7.8Hz，lH) ,7.89 (d，J = 8.8Hz，5H)，7.83(d，J= 15.5Hz，2H)，7.76(d，J= 15.5Hz，1H)，7.58(t，J = 7.9Hz， 1H)，7.40(dd，J = 8.0，1.6Hz，lH)，7.03(d，J = 8.8Hz，2H)，4.03(dt，J = 13.3,6.8Hz，2H)， 3.83(s，3H)，1.28(d，J = 20.4Hz，14H) .13C 匪R(101MHz，DMS0)Sl88.68，161.97，153.05， 151.96,144.95,139.55,131.46,130.15,127.73,127.03,125.66,121.93,119.82,114.89， 55.87,46.76,21.76,20.65.HRMS:calcd for C23H27NO4, [M+H] + ,m/z 382.2013；found,m/z 382.2011。
[0243] 實施例28
[0244] 產(chǎn)物(E)-3-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二異丙基氨基甲酸叔丁酯(化學(xué)結(jié)構(gòu) 式24所示化合物）的合成：
[0245] 室溫條件下，將（1.053g，4mmol)中間體M10和(0.58g，4.8mmol)對羥基苯甲醛溶解 在20ml乙醇中攪拌均勻，向其中滴加濃鹽酸20滴，70°C攪拌42h，真空濃縮除去溶劑，加入 105ml乙酸乙酯和100ml水，收集有機相，水洗2次，無水硫酸鎂干燥過夜、抽濾、濃縮、干燥得 黃色油狀物，經(jīng)柱層析（石油醚：乙酸乙酯= 10:1~6:1)得黃色固體產(chǎn)物115. lmg，產(chǎn)率 7.8%〇1.?.153.1-155.1〇0.^ NMR(400MHz,DMS0)8l0.14(s,lH),8.02(d,J = 7.8Hz,lH), 7.74(dd,J = 24.2,12.6Hz,5H) ,7.63-7.49(m,lH),7.39(dd,J = 8.0,1.6Hz,lH),6.85(d,J = 8.6Hz,2H) ,4.01 (dq,J= 13.3,6.6Hz,2H) ,1.25(t ,J = 21.9Hz, 13H) ,13C NMR(101MHz, DMS0)8188.63,160.76,153.06,151.95,145.45,139.67,131.68,130.13,126.92,126.20, 125?58，121?88，118?75，116?30，46?75，21?72，20?60?HRMS:calcd for C22H25NO4，[M+H] +， m/z 368.1856;found，m/z 368.1860。
[0246] 實施例29
[0247] 乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶抑制劑篩選方法和結(jié)果：
[0248] ^?實驗試劑
[0249] 人乙酰膽堿酯酶（仙11^11八(：1^)(3161^，(：1682)、人丁酰膽堿酯酶（111111^118(：1^) (3161^，84186)、5,5-二硫雙硝基苯甲酸（01呢）（3161^，08130)、碘化硫代乙酰膽堿(厶1'〇 (3161^，45751)、碘化硫代丁酰膽堿(81'〇(3161^，83252)、磷酸鹽緩沖液(0.0811似 2冊〇4和 0.02M NaH2P〇4，PH 8.0)
[0250] 1.2?實驗儀器
[0251 ] Thermo Varioskan flash全波長掃描式多功能讀數(shù)儀
[0252] 1.3?實驗方法
[0253] AChE和BuChE抑制活性測試方法為Ellman法。將化合物溶解于DMS0中，用磷酸鹽緩 沖液(0.08M Na2HP04和0.02M NaH2P04，PH 8.0)稀釋至所需濃度，控制所配置溶液中的DMS0 含量低于lvol %。在96孔板中依次加入測試化合物10iU，磷酸鹽緩沖液40微升，乙酰膽堿酯 酶溶液50yl (含量0.004U)，混勻后37°C孵育15min，加入80ul磷酸鹽緩沖液，10yl的10mM 5， 5-二硫雙硝基苯甲酸(DTNB)，10yl的lOmM硫代乙酰膽堿(ATC)，立即在412nm波長檢測吸光 度值，以lmin為間隔連續(xù)檢測5min;計算5min內(nèi)吸光度每分鐘變化的平均值，對比正常對照 和加入化合物后的平均值，計算化合物對膽堿酯酶的抑制作用。丁酰膽堿酯酶的測定方法 與乙酰膽堿酯酶類似，將所用的人乙酰膽堿酯酶換為人丁酰膽堿酯酶50yl(含量0.002U)， 同時替換底物碘代乙酰膽堿為硫代碘化乙酰膽堿10mM。抑制率（％ ) = (1-加化合物組吸光 度每分變化平均值/不加化合物組吸光度每分變化平均值)* 100 % ;化合物的半數(shù)抑制濃度 (IC5Q)由六個化合物濃度及其對應(yīng)的抑制率在Graphpad prism中計算求得。每個實驗重復(fù) 三次，實驗結(jié)果表達為平均值土 SEM(標準差）。
[0254] 1.4?測試結(jié)果
[0255] 本發(fā)明通式(I)所示化合物結(jié)構(gòu)對乙酰膽堿酯酶(AChE)和丁酰膽堿酯酶(BChE)的 抑制率(測試濃度：1 X 10-5mo 1 /L)如表1所示。
[0256] 表 1


[0260] 優(yōu)選化合物的IC5Q值如表2所示。
[0261] 表2

[0264] 注:nt表示未測試。
[0265] 由表1和表2的活性數(shù)據(jù)我們可以得出以下結(jié)論:具有化學(xué)結(jié)構(gòu)通式（I)的化合物 具有乙酰膽堿酯酶酶抑制劑活性和丁酰膽堿酯酶抑制活性。
[0266] 其中化學(xué)結(jié)構(gòu)式3所示化合物(E)-3-(3_(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基二甲基氨基 甲酸酯和化學(xué)結(jié)構(gòu)式9所示化合物(E)-3-(3-(4-甲氧基苯基)丙烯酰基)苯基二甲基氨基甲 酸酯同時具有較強的乙酰膽堿酯酶抑制活性和丁酰膽堿酯酶抑制活性。
[0267] 其中化學(xué)結(jié)構(gòu)式4、8、11、12、13、15、16、17、18、19、20所示化合物(￡)-3-(3-(4-羥 基苯基)丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯、（E)-2-(3-(4-羥基苯基)丙烯?；?苯基乙 基（甲基)氨基甲酸酯、（E)-3-(3-(4-甲氧基苯基）丙烯?；?苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯、 (E)-4-(3-(4-甲氧基苯基）丙烯?；┍交一谆┌被姿狨ァⅲ‥)-4-(3-(3-羥基苯 基)_3_氧代丙基-1-烯-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯、（E)-3-(3-(3-羥基苯基)-3_氧 代丙基-1-烯-1-基)苯基二甲基氨基甲酸酯、（E)-3-(3-(3-羥基苯基)-3_氧代丙基-1-烯- 1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯、（E)-3-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-1-烯-1-基)苯基 二甲基氨基甲酸酯、（E)-3-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-1-烯-1-基）苯基乙基（甲基)氨 基甲酸酯、（E)-4-(3-(4-羥基苯基)-3_氧代丙基-1-烯-1-基)苯基二甲基氨基甲酸酯、（E)- 4-(3-(4_羥基苯基)-3_氧代丙基-1-烯-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸酯具有較強的選擇 性抑制丁酰膽堿酯酶的作用。
[0268] 具有同時抑制乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶作用的化合物中化學(xué)結(jié)構(gòu)式3所示化 合物(E)-3-(3-(4-羥基苯基)丙烯酰基)苯基二甲基氨基甲酸酯的活性最強。
[0269] 具有選擇性抑制丁酰膽堿酯酶的化合物中化學(xué)結(jié)構(gòu)式15所示化合物(E)-3_(3-(3-羥基苯基)_3_氧代丙基-1-烯-1-基)苯基二甲基氨基甲酸酯的活性最強。
[0270] 實施例30
[0271 ]細胞毒性測試方法和結(jié)果
[0272] 細胞毒測試方法
[0273] (1)溶液配制：
[0274] 1.PBS緩沖溶液：取PBS(NaCl 8g、KCl 0.4g、Na2HP〇4 1.44g、KH2P〇4 0.24g)粉末 (由Jetway公司購置），用超純水定容至1L，120°C高壓滅菌20min，4°C冰箱中保存。
[0275] 2 .MTT溶液：用PBS溶液配制成2.5g/L，用0.22yM濾膜過濾除菌，并分裝為5ml/管，_ 20 °C冰箱中避光保存。
[0276] 3.化合物:用DMS0配制成5mM母液，臨用時用培養(yǎng)基稀釋至相應(yīng)濃度。
[0277] (1)神經(jīng)細胞SH-SY5Y的培養(yǎng)：
[0278] DMEM培養(yǎng)基中含有10wt %胎牛血清，100U/mL青霉素和100μg/ml鏈霉素。細胞置于 溫度為37°C、濕度飽和、環(huán)境為5 %⑶2和95 %空氣的培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)，2-3天傳代一次。 (2)細胞存活率的測定：
[0279] 1、取對數(shù)生長期細胞，以0.25wt %胰酶消化后，完全培養(yǎng)基重新懸浮，顯微鏡下血 球計數(shù)板計數(shù)并調(diào)整細胞濃度為5\104(^118/1^，接種于96孔細胞培養(yǎng)板，100此/孔，培養(yǎng) 16-18h，使細胞貼壁，空白對照只加培養(yǎng)基不接種細胞。
[0280] 2、吸去原培養(yǎng)基，加入用培養(yǎng)基稀釋后的濃度為100yM，50yM，25yM，12.5yM，6.25y M的待測化合物，每孔100此，設(shè)3個復(fù)孔?？瞻准皩φ战M加入培養(yǎng)基代替，置于37°C、5vol% C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h。實驗終止前4h加入含5mg/mL MTT的培養(yǎng)基至樣品組和對照組，100yL/ 孔，繼續(xù)培養(yǎng)4h。
[0281] 3、棄去上清液，加DMS0 120此/孔，振蕩使生成物Formazan充分溶解，在酶標儀上 測定各孔吸光度值(0D值），測定波長490nm。各樣品中的細胞存活率以下列公式計算:細胞 存活率（％ ) = (0D樣品-0D空白）/(0D對照-0D空白）X 100%
[0282] 細胞毒測試實驗結(jié)果
[0283] 我們采用MTT法通過神經(jīng)細胞SH-SY5Y的細胞存活率實驗來初步測試13個具有較 好BuChE抑制效果的化合物的神經(jīng)細胞毒性，測試結(jié)果詳見表3。
[0284] 表 3
[0286]化學(xué)結(jié)構(gòu)式3所示化合物為膽堿酯酶抑制活性最好的先導(dǎo)化合物，在12.5iiM和25y M給藥濃度下，SH-SY5Y細胞存活率分別為96.55%和94.62%，不具有顯著抑制性，好于利斯 的明；在50and lOOiiM高濃度下顯著抑制細胞存活，表現(xiàn)出了較大毒性，與利斯的明大致相 當?？偟膩碚f，相比上市藥物利斯的明，化學(xué)結(jié)構(gòu)式3所示化合物具有相似的膽堿酯酶抑制 活性，更低的神經(jīng)毒性。其余的12個化合物的神經(jīng)毒性也相對較低。因此，本發(fā)明的氨基甲 酸酯-查爾酮類膽堿酯酶抑制劑可應(yīng)用于制備治療和預(yù)防由膽堿酯酶引起的疾病的藥物， 該藥物用于治療與預(yù)防神經(jīng)退行性疾病，如阿爾茨海默癥及其它與衰老相關(guān)的疾病。
【主權(quán)項】
1. 一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑，其特征在于，該抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式 如式(I)所示：其中， A為R1R2NCOO-或-H，Ri為甲基，R2為甲基或乙基； B為化R4NC00-、-H或-OH，R3、R4為甲基、乙基或異丙基； V為化RsNCOO-、-H或-OH，Rs為甲基，R6為甲基或乙基； X為化RsNCOO-或-H，化為甲基，Rs為甲基或乙基； Y為IfeRioNCOO-、-H或-OH，R9為甲基，Rio為甲基或乙基； Z為RiiRuNCOO-、-H、-OH或-0C出，Rii為甲基，Ri2為甲基或乙基。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑，其特征在于，所 述A為R1R2NCOO-，其中化為甲基，R2為甲基或乙基； B、V、X、Y為氨； Z為徑基或甲氧基。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑，其特征在于，所 述B為R3R4NCOO-或-OH，其中化、R4為甲基、乙基或異丙基； A、V為氨； X為化RsNCOO-或-H，R?、Rs為甲基或乙基； Y為化RioNCOO-或-H，R9、Rio為甲基或乙基； Z為化iRuNCOO-、-H、-OH或-0C出，Rii、Ri2為甲基或乙基。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑，其特征在于，所 述V為RsRsNCOO-或-OH，其中化為甲基，R6為甲基或乙基； A、B、X為-H; Y為化RioNCOO-或-H，R9、Rio為甲基或乙基； Z為RiiRuNCOO-、-H、-OH或-0C出，Rii為甲基，Ri2為甲基或乙基。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑，其特征在于，該 抑制劑為W下任意一種物質(zhì)： 巧)-5-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)-1,3-亞苯基雙(二甲基氨基甲酸醋）、 巧)-5-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)-1,3-亞苯基雙（乙基（甲基)氨基甲酸醋）、 巧)-3-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-4-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-4-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-2-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-2-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(4-甲氧基苯基)丙締酷基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-4-(3-(4-甲氧基苯基)丙締酷基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(4-甲氧基苯基)丙締酷基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-4-(3-(4-甲氧基苯基)丙締酷基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-4-(3-(3-?基苯基)-3-氧代丙基-1-締-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-4-(3-(3-?基苯基)-3-氧代丙基-1-締-1-基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(3-?基苯基)-3-氧代丙基-1-締-1-基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(3-?基苯基)-3-氧代丙基-1-締-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(4-?基苯基)-3-氧代丙基-1-締-1-基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(4-?基苯基)-3-氧代丙基-1-締-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-4-(3-(4-?基苯基)-3-氧代丙基-1-締-1-基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-4-(3-(4-?基苯基)-3-氧代丙基-1-締-1-基)苯基乙基（甲基)氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(4-甲氧基苯基)丙締酷基)苯基二甲基氨基甲酸醋、 巧)-3-(3-(4-甲氧基苯基)丙締酷基)苯基二異丙基氨基甲酸叔下醋和 巧)-3-(3-(4-?基苯基)丙締酷基)苯基二異丙基氨基甲酸叔下醋。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑，其特征在于，該 抑制劑為通式(I)化合物的鹽酸鹽、氨嗅酸鹽、硫酸鹽、憐酸鹽、甲橫酸鹽、苯橫酸鹽、對甲苯 橫酸鹽、糞橫酸鹽、巧樣酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、丙酬酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、班巧酸鹽、富 馬酸鹽、水楊酸鹽、苯基乙酸鹽、杏仁酸鹽、堿性金屬陽離子鹽、堿±金屬陽離子鹽或錠陽離 ^丈h J ΠΤΤ. 〇7. 制備權(quán)利要求1所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑的方法，其特征在 于，合成路線如下所示： (1)巧)-3-(4-徑基苯基)-1-苯基丙-2-締-1-酬類衍生物的合成路線(E)-3-(4-甲氧基苯基)-1-苯基丙-2-締-1-酬類衍生物的合成路線8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑的制備方法，其特 征在于，步驟如下： 1) 使用苯環(huán)上不同位置取代的徑基苯乙酬與氨基甲酯氯進行反應(yīng)，合成了中間體M1- M10； 2) 使用苯環(huán)上不同位置取代的徑基苯甲醒和氨基甲酯氯進行反應(yīng)，合成中間體M11- M14； 3) 將中間體M1-M14和苯環(huán)上有徑基或甲氧基取代的苯甲醒或者苯環(huán)上有單徑基或者 二徑基取代的苯乙酬在酸或者堿催化下進行徑醒縮合反應(yīng)，得到氨基甲酸醋-查爾酬類膽 堿醋酶抑制劑。9. 權(quán)利要求1所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑的應(yīng)用，其特征在于， 所述氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑作為乙酷膽堿醋酶抑制劑、下酷膽堿醋酶抑制 劑和選擇性下酷膽堿醋酶抑制劑。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的一類氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑的應(yīng)用，其特征 在于，所述氨基甲酸醋-查爾酬類膽堿醋酶抑制劑應(yīng)用于制備治療和預(yù)防由膽堿醋酶引起 的疾病的藥物。
【文檔編號】C07C271/44GK105968031SQ201610322636
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月15日
【發(fā)明人】王領(lǐng), 譚文, 田藝廣
【申請人】華南理工大學(xué)