一系列具有抗菌活性的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及天然藥物及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一系列具有抗菌活性的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物及其制備方法和應(yīng)用，所述的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物具有如下結(jié)構(gòu)：其中，R1為氧代、含有1?8個碳原子的脂肪?；?、鹵素取代含有1?8個碳原子的脂肪?；?、含有1?12個碳原子的芳香酰基或鹵素取代芳香?；?；R2為含有1?8個碳原子的烷基，3?8個碳原子的環(huán)烷基，含有5?12個碳原子的芳香環(huán)或鹵代芳香環(huán)、5?12個碳原子芳雜環(huán)或鹵代芳雜環(huán)，所述的芳雜環(huán)中包含1?3個N、O、或S的雜原子。
【專利說明】
一系列具有抗菌活性的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及天然藥物及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一系列螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍 生物。本發(fā)明公開了這些化合物的制備方法及在制備抗菌藥物中應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物結(jié)構(gòu)復(fù)雜而新穎，活性優(yōu)良。但對其生物活性研究 主要集中在抗腫瘤方向，其他相關(guān)領(lǐng)域幾乎沒有報道。
[0003] 本發(fā)明以冬凌草甲素為先導(dǎo)化合物，設(shè)計并合成了螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生 物，并測試了合成衍生物在抗菌方面的生物活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明要解決的技術(shù)問題是尋找抗菌活性好的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物及其 藥學(xué)上可接受的鹽，并進(jìn)一步提供一種藥物組合物。
[0005] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：
[0006] 本發(fā)明所述的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽具有如下的 結(jié)構(gòu)通式：
[0008] 其中，心為氧代、含有1-8個碳原子的脂肪酰基、鹵素取代含有1-8個碳原子的脂肪 ?；?、含有6-12個碳原子的芳香?；螓u素取代芳香?；?R 2為含有1-8個碳原子的烷基， 3-8個碳原子的環(huán)烷基，含有5-12個碳原子的芳香環(huán)或鹵代芳香環(huán)、5-12個碳原子芳雜環(huán)或 鹵代芳雜環(huán)，所述的芳雜環(huán)中包含1 -3個N、0、或S的雜原子。
[0009] 優(yōu)選地，辦為氧代、含有1-8個碳原子的脂肪?；?、鹵素取代含有1-8個碳原子的脂 肪?；?R2為含有1-8個碳原子的烷基，3-8個碳原子的環(huán)烷基，含有6個碳原子的芳香環(huán)或 鹵代芳香環(huán)、5-12個碳原子芳雜環(huán)或鹵代芳雜環(huán)，所述的芳雜環(huán)中包含1-3個N原子。
[0010] 更優(yōu)選地，Ri為氧代或乙醜基;R2為甲基、4_氣苯基、3_氣苯基、2_氣苯基、2，3，4，5_ 四氟苯基或4-三氟甲基苯基。
[0011]本發(fā)明還具體公開了結(jié)構(gòu)如下所示的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物及其藥學(xué)上 可接受的鹽：
[0013] 所涉及的化合物名稱為：
[0014] ent-l，6,7,15-四氧代-7,20-內(nèi)酯-140-0-乙?；?6,7-開環(huán)-16-貝殼杉烯(4a)
[0015] 6拉-1，6,7，15-四氧代-7,20-內(nèi)酯-1你-0-(4-氟苯甲?；?-6,7-開環(huán)-16-貝殼杉 稀(4b)
[0016] 6拉-1，6,7，15-四氧代-7,20-內(nèi)酯-1你-0-(3-氟苯甲酰基)-6,7-開環(huán)-16-貝殼杉 稀(4c)
[0017] 6拉-1，6,7，15-四氧代-7,20-內(nèi)酯-1你-0-(2-氟苯甲?；?-6,7-開環(huán)-16-貝殼杉 稀(4d)
[0018] 6帥-1，6,7，15-四氧代-7,2〇-內(nèi)酯-140-〇-(2,3,4,5-四氟苯甲酰基)-6,7-開環(huán)-16-貝殼杉烯(4e)
[0019] ent-la-〇-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-1你-0-(4_三氟甲基苯甲?；?-6， 7-開環(huán)-16-貝殼杉烯(4f)
[0020] ent-la-0-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-0-乙?；?6，7-開環(huán)-16-貝殼 杉稀(9a)
[0021] ent-la-〇-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(4-氟苯甲?；6，7-開 環(huán)-16-貝殼杉烯(9b)
[0022] ent-la-〇-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(3-氟苯甲酰基）_6，7-開 環(huán)-16-貝殼杉烯(9c)
[0023] ent-la-〇-乙酰基-6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(2-氟苯甲酰基）_6，7-開 環(huán)-16-貝殼杉烯(9d)
[0024] ent-la-〇-乙酰基-6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-1你-0-(2，3，4，5-四氟苯甲?；?_ 6,7-開環(huán)-16-貝殼杉烯(9e)
[0025] ent-la-〇-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(4-氟苯甲?；6，7-開 環(huán)-16-貝殼杉烯(9f)
[0026]本發(fā)明的衍生物可用下列方法制備得到：
[0028]制備得到的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽具有如下的結(jié) 構(gòu)通式：
[0030] 其中，心為氧代、含有1-8個碳原子的脂肪?；Ⅺu素取代含有1-8個碳原子的脂肪 ?；?、含有1-12個碳原子的芳香?；螓u素取代芳香?；?R 2為含有1-8個碳原子的烷基， 3-8個碳原子的環(huán)烷基，含有5-12個碳原子的芳香環(huán)或鹵代芳香環(huán)、5-12個碳原子芳雜環(huán)或 鹵代芳雜環(huán)，所述的芳雜環(huán)中包含1 -3個N、0、或S的雜原子。
[0031] 優(yōu)選地，辦為氧代、含有1-8個碳原子的脂肪酰基、鹵素取代含有1-8個碳原子的脂 肪酰基;R2為含有1-8個碳原子的烷基，3-8個碳原子的環(huán)烷基，含有6個碳原子的芳香環(huán)或 鹵代芳香環(huán)、5-12個碳原子芳雜環(huán)或鹵代芳雜環(huán)，所述的芳雜環(huán)中包含1-3個N原子。
[0032] 更優(yōu)選地，為氧代或乙?；?辦為甲基、4-氟苯基、3-氟苯基、2-氟苯基、2，3，4，5- 四氟苯基或4-三氟甲基苯基。
[0033]冬凌草甲素（1)用瓊斯試劑選擇性地將1-位羥基氧化為酮羰基得到化合物(2)，將 化合物2溶解于四氫呋喃中，加入碳酸鈉和四乙酸鉛，室溫攪拌。TLC監(jiān)測反應(yīng)，約lOmin，反 應(yīng)完全，過濾，蒸除四氫呋喃，加入水并用二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)層，再用飽和食鹽水 洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，得到1-位羰基螺內(nèi)酯型6，7-開環(huán)冬凌草甲素(3 )，粗 產(chǎn)物不用經(jīng)過柱層析可直接用于下一步衍生化反應(yīng)。將螺內(nèi)酯型化合物(3)與不同的酸（乙 酸、4-氟苯甲酸、3-氟苯甲酸、2-氟苯甲酸、2,3，4,5-四氟苯甲酸或4-三氟甲基苯甲酸)在 DMAP，EDCI作用下，反應(yīng)生成1-位羰基螺內(nèi)酯型6,7_開環(huán)冬凌草甲素14-位衍生物4a-f。由 冬凌草甲素（1)出發(fā)，經(jīng)過7,14-位丙酮叉保護(hù)(5)，1_位乙?；?6)，再脫丙酮叉保護(hù)，得到 1-0-乙?；璨菁姿丶疵嗬?7)，將其溶解于四氫呋喃中，加入碳酸鈉和四乙酸鉛， 室溫攪拌，TLC監(jiān)測反應(yīng)。約lOmin，反應(yīng)完全，過濾，蒸除四氫呋喃，加入水并用二氯甲烷萃 取三次，合并有機(jī)層，再用飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，濃縮，得到1 _ 位乙酰氧基螺內(nèi)酯型6,7_開環(huán)冬凌草甲素(8)，粗產(chǎn)物不用經(jīng)過柱層析可直接用于下一步 衍生化反應(yīng)。將螺內(nèi)酯型化合物(8)與不同的酸在DMAP、EDCI作用下，反應(yīng)生成1-位乙酰氧 基螺內(nèi)酯型6,7-開環(huán)冬凌草甲素14-位衍生物9a-f。
[0034]所述的酸為：乙酸、4-氟苯甲酸、3-氟苯甲酸、2-氟苯甲酸、2,3,4,5-四氟苯甲酸、 4_三氟甲基苯甲酸。
[0035]藥理試驗證明，本發(fā)明的螺內(nèi)酯型對映貝殼杉烷衍生物具有很好的抗菌作用，可 以用于進(jìn)一步制備抗菌藥物。
【具體實施方式】：
[0036] 實施例1
[0037] ent-l，6,7,15-四氧代-7,20-內(nèi)酯-140-0-乙?；?6,7-開環(huán)-16-貝殼杉烯(4a)
[0038]將冬凌草甲素72mg(0.2mmol)溶解于丙酮中，加入瓊斯試劑氧化，至不再產(chǎn)生新的 斑點，過濾蒸干溶劑，得1 -位氧化冬凌草甲素2。將1 OOmg化合物2 (0.28mmo 1)溶于約20ml四 氫咲喃中，加入240mg的Na2C〇3(2 ? 26mmol)和425mg的四乙酸鉛（lmmol)，室溫攪拌反應(yīng)約 10min，TLC監(jiān)測反應(yīng)，待反應(yīng)完全，過濾，收集濾液。減壓蒸除四氫呋喃，加入約15ml水，用二 氯甲烷萃取三次，每次l〇ml，合并有機(jī)相，再用飽和食鹽水洗兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾、 濃縮，硅膠柱層析(二氯甲烷：甲醇= 300:1)，得到淡黃色固體3。將72mgl-位氧化螺內(nèi)酯型 冬凌草甲素衍生物3(0.2mmol)溶于10ml無水二氯甲烷中，加入相應(yīng)的酸(0.3mmol)、EDCI (931^，0.6臟〇1)、催化量的01^ 3，室溫攪拌1211。11(：監(jiān)測反應(yīng)，待反應(yīng)完全或不繼續(xù)進(jìn)行時， 停止反應(yīng)。水洗后分液，有機(jī)相用飽和食鹽水洗，再用無水硫酸鈉干燥、過濾、濃縮，硅膠柱 層析（二氯甲烷：甲醇=500:1至100:1)，得到目標(biāo)化合物，產(chǎn)率69 % : mp ? 96-97 °C ; IR(KBr) umax 3440，2962，2025，1771，1732，1648，1463，1373，1176cm-1; 4 匪R(CDC13，300MHz)，S (ppm):9.85(lH，s，-CH0)，6.21(1H，s，17-CH2)，5.72(lH，s，14-CH)，5.62(1H，s，17-CH2)， 4.95,4.73(each lH，dd，JA=jB= 11.7Hz，20-CH2)，3.14(lH，d，J = 9.3Hz，13-CH) ;ESI MS m/z:420.2[M+NH4] +，403.1[M+H]+，437.5[M+Cl] -;HR-MS(ESI，M+H)m/z:calcd for C22H27O7: 403.1751,found 403.1762〇 [0039] 實施例2
[0040] 6拉-1，6,7，15-四氧代-7,20-內(nèi)酯-1你-0-(4-氟苯甲?；?-6,7-開環(huán)-16-貝殼杉 稀(4b)
[0041]白色粉末狀固體，產(chǎn)率 12% :mp.244-246°C;IR(KBr)umax 2963，1763，1724，1604， 1505,1283,1261,1151,1093,1050,1016,854,802,761，686,612cm-1 NMR(CDC13， 500MHz),8(ppm):9.90(lH,s,-CH0),7.97(2H,m,Ar-H),7.07(2H,m,Ar-H),6.31(1H,s,17-CH 2) ,6.16(1H,s,14-CH) ,5.63(1H,s,17-CH2) ,4.88,4.50(each 1H, dd ,Ja=Jb= 12.5Hz , 20-CH2)，3.34(lH，d，J = 7.5Hz，13-CH);13C NMR(CDC13，125MHz)，S(ppm) :210.12,204.03, 198.11,166.15,163.87,147.10,132.05,127.31,125.90,120.98,115.72,74.61,67.41， 60?70，59?92，52?20，45?23，41?53，36?56，33?21，30?34，29?16，23?90，17?94;ESI MS m/z: 483 ? 1 [M+H] +，500 ? 1 [M+NH4] +;HR-MS(ESI，M+H)m/z : calcd for C27H28FO7:483 ? 1814，found 483.1811。
[0042] 實施例3
[0043] ent-l，6,7，15-四氧代-7,20-內(nèi)酯-140-〇-(3-氟苯甲?；?-6,7-開環(huán)-16-貝殼杉 稀(4c)
[0044] 白色粉末狀固體，產(chǎn)率 14% :mp.ll8-120°C;IR(KBr)Umax 2961,1763,1725,1591， 1486,1448,1384,1286,1269,1201 JOgSJSlcm-1;1!!匪 R(CDC13,500MHz)，S(ppm) :9.88 (lH,s,-CH0),7.73(lH,m,Ar-H),7.61(lH,m,Ar-H),7.37(lH,m,Ar-H),7.23(lH,m,Ar-H), 6.32(1H,s,17-CH 2),6.18(1H,s,14-CH),5.65(1H,s,17-CH2),4.88,4.51(each lH,dd,Ja= jB=12.5Hz,20-CH2),3.33(lH,d,J = 7.5Hz,13-CH),2.64(lH,m,12-CH2),2.53(lH,m,12-CH2)，2.46(2H，m，ll-CH 2)，1.86(lH，m，9-CH)，1.80(2H，m，2-CH2)，1.72(2H，m，3-CH2) ,1.48 (lH，m，5-CH2)，1.27(3H，s，18-CH3)，1.25(3H，s，19-CH3) ;MS ESI m/z:483.2[M+H]+，500.2 [M+NH4] +，505.2[M+Na] +，521 ? 1[M+K] + ;HR-MS(ESI，M+H)m/z:calcd for C27H28FO7: 483.1814,found483.1803〇
[0045] 實施例4
[0046] 6拉-1，6,7，15-四氧代-7,20-內(nèi)酯-1你-0-(2-氟苯甲?；?-6,7-開環(huán)-16-貝殼杉 稀(4d)
[0047]白色粉末狀固體，產(chǎn)率 13 % :mp ? 206-208°C ; IR(KBr )umax 2924，2853，1701，1686， 1655,1615,1561,1466,1384,1257,1090,775,649cm-1 匪R(CDC1 3,500MHz)，S(ppm): 9.87(lH,s,-CH0),7.85(lH,m,Ar-H),7.50(lH,m,Ar-H),7.15(lH,m,Ar-H),7.07(lH,m,Ar-H),6.29(lH,s,17-CH2),6.19(lH,s,14-CH),5.62(lH,s,17-CH2),4.90,4.50(each lH,dd, Ja = Jb=12.3Hz,20-CH2) ,3.33(lH,d,J = 7.5Hz,13-CH),2.64(lH,m,12-CH2) ,2.53(lH,m, 12-CH2)，2.46(2H,m，ll-CH2)，1.89(lH,m，9-CH) ,1.86(2H，m，2-CH2)，1.68(2H，m，3-CH2)， 1.48(lH，m，5-CH2)，1.26(3H，s，18-CH3)，1.25(3H，s，19-CH3) ;13C 匪R(CDC13,125MHz)，S (ppm):210.16,204.13,198.13,166.07,163.66,162.76,160.81,147.08,131.68,125.35, 121.23,120.61,115.64,74.90,67.44,60.58,59.93,52.23,45.26,41.49,36.46,33.26, 30?14,29?19,23?93,17?94;ESI MS m/z:483?1[M+H]+, 500 ? 3[M+NH4] + ;HR-MS(ESI,M+H)m/ z:calcd for C27H28F〇7:483.1814，found 483.1807。
[0048] 實施例5
[0049] ent-l，6，7，15-四氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)-6，7-開環(huán)- 16- 貝殼杉烯(4e)
[0050] 白色粉末狀固體，產(chǎn)率31 % :mp.82-84°C ;IR(KBr)umax 2961,2924,2852,1728， 1629,1528,1488,1375,1286,1261,1219,1098,1036,921,875,800，689cm-S 1!! NMR(CDC13， 300MHz)，S(ppm):9.87(lH，s，-CH0)，7.52(lH，m，Ar-H)，6.30(1H，s，17-CH2)，5.65(1H，s， 17- CH2),4.90,4.58(each lH,dd ,Ja=Jb=12.0Hz,2〇-CH2) ,3.28(lH,d ,J = 6.9Hz, 13-CH), 2.64(lH,m,12-CH2) ,2.53( lH,m, 12-CH2),2.46(2H,m, II-CH2), 1.87( lH,m,9-CH), 1.77(2H, m，2-CH2)，1.53(2H，m，3-CH2)，1.29(lH，m，5-CH2)，1.26(3H，s，18-CH3)，1.22(3H，s，19-CH 3); MS ESI m/z:537.1[M+H] + ；HR-MS(ESI,M+H)m/z:calcd for C27H25F4O7: 537 . 1531, found537.1520〇
[0051 ] 實施例6
[0052] ent-la-〇-乙酰基-6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(4-三氟甲基苯甲?；?_6， 7-開環(huán)-16-貝殼杉烯(4f)
[0053] 將100mg冬凌草甲素1 (0.27mmol)溶于3ml無水丙酮中，加入0.4ml的2，2-二甲氧基 丙烷和催化量的對甲基苯磺酸，在氮氣保護(hù)條件下，回流反應(yīng)約lh，反應(yīng)液冷卻至室溫后， 加入10ml飽和NaHC0 3溶液，用二氯甲烷萃取三次，每次10ml，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水洗 兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾、濃縮，硅膠柱層析(石油醚:丙酮=3:1 )，得5白色固體94mg。將 80mg化合物5(0.20mmol)溶于約10ml無水二氯甲烷中，加入0.3ml乙酸酐和催化量的DMAP， 室溫條件下攪拌反應(yīng)lh，TLC監(jiān)測反應(yīng)，待反應(yīng)完全，停止反應(yīng)。用飽和食鹽水洗，分液，有機(jī) 相用無水硫酸鈉干燥，過濾、濃縮，粗品6直接用于下一步反應(yīng)。將80mg化合物6 (0.2mmo 1)溶 解于15ml四氫呋喃中，加入15ml的10%鹽酸水溶液，室溫攪拌lh。蒸除四氫呋喃，用二氯甲 烷萃取三次，每次約1 〇ml，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗有機(jī)相兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾、 濃縮，硅膠柱層析(石油醚：丙酮= 2:1)，得白色固體7。將100mg的1-位乙?；璨菁姿?(0.28mmo1 )溶于約20ml四氛咲喃中，加入240mg的Na2C〇3(2 ? 26mmol)和425mg四乙酸鉛 (lmmol)，室溫攪拌10min，TLC監(jiān)測反應(yīng)，待反應(yīng)完全，過濾，收集濾液。減壓蒸除四氫呋喃， 加入約15ml水，二氯甲烷萃取三次，每次10ml，合并有機(jī)相。再用飽和食鹽水洗兩次，無水硫 酸鈉干燥，過濾、濃縮，硅膠柱層析（二氯甲烷：甲醇= 300:1)，得到96mg淡黃色粉末8。將 80mg 9 (0 ? 2mmol)溶于10ml無水二氯甲燒中，加入相應(yīng)的酸（0 ? 3mmol)、EDCI (93mg， 0.6mmol )、催化量的DMAP，室溫攪拌12h。TLC監(jiān)測反應(yīng)，待反應(yīng)完全或不繼續(xù)進(jìn)行時，停止反 應(yīng)。水洗后分液，有機(jī)相用飽和食鹽水洗，再用無水硫酸鈉干燥、過濾、濃縮，硅膠柱層析(二 氯甲烷：甲醇=500:1至100:1 )，得到目標(biāo)化合物。白色粉末狀固體，產(chǎn)率37 % :mp. 252-254 °C ；IR(KBr)umax 2968,1761,1732,1710,1412,1383,1325,1291,1261,1281,1127,1101, 1065,1051，1018,768,701cm-S 1!! NMR(CDC13,500MHz)，S(ppm) :9.85(lH，s，-CH0) ,8.04 (lH,d,J = 8.1Hz,Ar-H) ,7.80(lH,d,J = 8.1Hz,Ar-H) ,7.65(lH,d,J = 8.1Hz,Ar-H) ,7.17 (lH,d,J = 8. lHz,Ar-H) ,6.29(1H,s,17-CH2) ,6.22(lH,s,14-CH) ,5.61(1H,s,17-CH2), 4.88,4.50(each lH,dd ,Ja=Jb= 12.5Hz , 2〇-CH2), 3.32( lH,d ,J = 7.5Hz , 13-CH), 2.62( 1H, m，12-CH2)，2.10(lH，m，12-CH2)，1.91(2H，m，n-CH2)，1.72(lH，m，9-CH)，1.69(2H，m，2-CH2)，1.57(2H，m，3-CH 2)，1.27(lH，m，5-CH2)，1.25(3H，s，18-CH3)，1.24(3H，s，19-CH 3);13C 匪 R(CDC13,125MHz)，S(ppm):210.14,204.16,198.08,166.10,163.78,133.12,132.76， 130.14,129.95,125.81,121.32,75.00,67.45,60.49,59.97,52.29,45.32,41.49,36.52， 33?27，30?36，29?27，23?85，17?94;ESI MS m/z:533?1[M+H] +，550? 3[M+NH4] + ;HR-MS(ESI，M +H)m/z:calcd for C28H28F3O7:533.1782,found 533.1784。
[0054] 實施例7
[0055] ent-la-0-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-0-乙?；?6，7-開環(huán)-16-貝殼 杉稀(9a)
[0056] 白色粉末狀固體，產(chǎn)率69% :mp.l28-130°C;IR(KBr)umax 3441,2956,2025,1746， 1455，1372，1239cm-1;咕 NMR(CDC13，300MHz)，S(ppm): 9 ? 79( 1H，d，J = 4 ? 2Hz，-CH0)，6 ? 25 (1H，s，17-CH2)，5.90(1H，s，14-CH)，5.63(1H，s，17-CH2)，5.22,5.12(each lH，dd，JA=jB= 12.3Hz，20-CH2)，4.66(lH，m，l-CH)，3.09(lH，d，J=9.0Hz，13-CH)，2.04(3H，s，-CH 3)，1.17 (3H，s，-CH3)，1.09(3H，s，-CH3)，1.03(3H，s，-CH 3);ESI MS m/z:464.3[M+NH4] +，447.2[M+H ]+;HR-MS(ESI，M+H)m/z:calcd for C34H32〇8:447.2013，found 447.2019。
[0057] 實施例8
[0058] ent-la-〇-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(4-氟苯甲?；6，7-開 環(huán)-16-貝殼杉烯(9b)
[0059] 白色粉末狀固體，產(chǎn)率 18% NMR(CDCl3,500MHz)，S(ppm):9.81 (lH，s，-CH0)，7.95(2H，m，Ar-H)，7.06(2H，m，Ar-H)，6.30(lH，s，17-CH2)，6.15(lH，s，14-CH)，5.63(1H，s，17-CH2)，5.09,4.86(each lH，dd，jA = jB=12.0Hz，20-CH2)，3.26(lH，d，J = 8.0Hz,13-CH)；ESI MS m/z : 527.2[M+H] + ；HR-MS(ESI ,M+H)m/z : calcd for C29H32FO8： 527.2076,found 527.2053。
[0060] 實施例9
[0061 ] ent-la-〇-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(3-氟苯甲?；6，7-開 環(huán)-16-貝殼杉烯(9c)
[0062] 白色粉末狀固體，產(chǎn)率 19% zmp.lie-inr^H NMR(CDCl3,500MHz)，S(ppm):9.78 (lH,s,-CH0),7.70(lH,m,Ar-H),7.64(lH,m,Ar-H),7.33(lH,m,Ar-H),7.25(lH,m,Ar-H), 6.33(1H,s,17-CH 2),6.17(1H,s,14-CH),5.62(1H,s,17-CH2),5.07,4.87(each lH,dd,Ja= Jb=12.5Hz,20-CH2),3.23(1H,cI ,J = 7.0Hz,13-CH)；MS ESI m/z : 527.2[M+H] + ；HR-MS(ESI, M+H)m/z:calcd for C29H32FO8：527.2076,found 527.2066〇
[0063] 實施例10
[0064] ent-la-〇-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(2-氟苯甲酰基）_6，7-開 環(huán)-16-貝殼杉烯(9d)
[0065] 白色粉末狀固體，產(chǎn)率 17% :mp ? 203-204°C ;Mffi(CDCl3，500MHz)，S(ppm):9 ? 82 (lH,s,-CH0),7.79(lH,m,Ar-H),7.53(lH,m,Ar-H),7.12(lH,m,Ar-H),7.11(lH,m,Ar-H), 6.29(1H,s,17-CH 2),6.19(1H,s,14-CH),5.64(1H,s,17-CH2),4.98,4.85(each lH,dd,Ja= Jb=12.0Hz,20-CH2),3.26(1H,cI ,J = 7.5Hz,13-CH)；ESI MS m/z : 527.2[M+H] + ；HR-MS(ESI, M+H)m/z:calcd for C29H32FO8:527.2076,found 527.2075。
[0066] 實施例11
[0067] ent-la-〇-乙酰基-6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)_ 6,7-開環(huán)-16-貝殼杉烯(9e)
[0068] 白色粉末狀固體，產(chǎn)率27% :mp ? 108-110°C ;NMR(CDC13，500MHz)，S(ppm):9 ? 80 (lH，s，-CH0)，7.49(lH，m，Ar-H)，6.31(lH，s，17-CH2)，5.64(lH，s，17-CH2)，5.17,4.98(each lH,dd,Ja=Jb= 12.5Hz,2O-CH2),3.25(lH,d,J = 7.0Hz,13-CH)；MS ESI m/z:581.2[M+H] + ； HR-MS(ESI，M+H)m/z:calcd for C29H29F4〇8:581.1793,found 581.1788。
[0069] 實施例12
[0070] ent-la-〇-乙?；?6，7，15-三氧代-7，20-內(nèi)酯-140-〇_(4-三氟甲基苯甲?；?_6， 7-開環(huán)-16-貝殼杉烯(9f)
[0071]淡黃色粉末狀固體，產(chǎn)率28 % : mp ? 226-228°C ; IR(KBr )uMX 2927，2855，1729， 1466,1412,1375,1326,1278,1129,1066,863,772cm-1 匪R(CDC1 3,300MHz)，S(ppm): 9.79(lH，s，-CH0)，8.06(2H，m，Ar-H)，7.67(2H，m，Ar-H)，6.32(1H，s，17-CH2)，5.98(1H，s， 14-CH)，5.66(1H，s，17-CH2)，5.14,4.76(each lH，dd，JA=Jb= 12.0Hz，20-CH2)，3.13(lH， d，J = 8.4Hz，13-CH)，1.26(3H，s，18-CH3)，1.22(3H，s，19-CH3); 13C 匪R(CDC13,75MHz)，S (ppm):202.36,170.44,131.35,128.71,121,78,74.55,73.29,66.39,62.59,45.78,42.29, 39 ? 45，32 ? 90，29 ? 68，21 ? 43，17 ? 46 ;MS ESI m/z: 577 ? 1 [M+H] + ;HR-MS(ESI，M+NH4)m/z : calcd for C3QH35F3NO8:577.2044, found 577.2059。
[0072] 實施例13:
[0073]下面是本發(fā)明部分化合物的藥理實驗結(jié)果：
[0074]實驗設(shè)備與試劑
[0075]儀器超凈工作臺（蘇凈集團(tuán)安泰公司）
[0076]滅菌鍋（日本株式會社平山制作所）
[0077] 恒溫培養(yǎng)箱（Thermo electron Corporation)
[0078] 恒溫培養(yǎng)震蕩器(上海智城分析儀器制造有限公司）
[0079]磁力攪拌器(北京欣維爾）
[0080]試劑均購置于禹王和萊博試劑公司
[0081 ]菌株枯草芽抱桿菌Bacillus subtilis(CMCC 63501 )，金黃色
[0082]葡萄球菌Staphylococcus aureus(ATCC 29213)
[0083]實驗方法
[0084]體外抑菌活性實驗方法
[0085]分別配制枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的菌懸液，首先菌種活化傳代培養(yǎng)至F2 代，用滅菌蒸餾水和培養(yǎng)基稀釋菌懸液分別至IX 107CFU/mL，備用。氯霉素用作陽性對照 藥，將待測化合物和陽性對照藥均配置成lmg/mL濃度，無菌條件下，將不同濃度藥物及菌懸 液依次加入96孔板中，同時設(shè)立陽性對照組和溶媒空白對照組，之后置37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 18-24h，觀察有無菌落生長，以未見細(xì)菌生長的最低藥物濃度為最低抑菌濃度(MIC)。
[0086]實驗結(jié)果
[0087] 表1實施例對2種菌株抑制活性的MIC值(μg/ml)

【主權(quán)項】
1. 通式(I)所示的螺內(nèi)醋型對映貝殼杉燒衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽：其中，Ri為氧代、含有1-8個碳原子的脂肪酷基、面素取代含有1-8個碳原子的脂肪酷基、 含有6-12個碳原子的芳香酷基或面素取代芳香酷基;R2為含有1-8個碳原子的烷基，3-8個 碳原子的環(huán)烷基，含有5-12個碳原子的芳香環(huán)或面代芳香環(huán)、5-12個碳原子芳雜環(huán)或面代 芳雜環(huán)，所述的芳雜環(huán)中包含1-3個N、0、或S的雜原子。2. 權(quán)利要求1所述的螺內(nèi)醋型對映貝殼杉燒衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽： 其中，Ri為氧代、含有1-8個碳原子的脂肪酷基、面素取代含有1-8個碳原子的脂肪酷基； R2為含有1-8個碳原子的烷基，3-8個碳原子的環(huán)烷基，含有6個碳原子的芳香環(huán)或面代芳香 環(huán)、5-12個碳原子芳雜環(huán)或面代芳雜環(huán)，所述的芳雜環(huán)中包含1-3個N原子。3. 權(quán)利要求1或2所述的螺內(nèi)醋型對映貝殼杉燒衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽： 其中，虹為氧代或乙酷基瓜為甲基、4-氣苯基、3-氣苯基、2-氣苯基、2，3，4，5-四氣苯基 或4-Ξ氣甲基苯基。4. 如下螺內(nèi)醋型對映貝殼杉燒衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽：5. -種藥物組合物，含有治療有效量的權(quán)利要求1-4中任何一項所述的的衍生物及其 藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體。6. 權(quán)利要求1-4任何一項所述的衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗菌藥物中的應(yīng) 用。7. 權(quán)利要求5所述的藥物組合物在制備抗菌藥物中的應(yīng)用。8.如權(quán)利要求6或7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的抗菌藥物中的菌為枯草芽抱桿菌 或金黃色葡萄球菌。
【文檔編號】A61P31/04GK105968081SQ201610330149
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月18日
【發(fā)明人】李達(dá)翃, 徐進(jìn)宜, 華會明, 徐盛濤, 李占林
【申請人】沈陽藥科大學(xué)