一種雙小檗堿衍生物的制備方法和用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種雙小檗堿衍生物、制備方法及用途。所述的雙小檗堿衍生物具有如下結(jié)構(gòu)：本發(fā)明所涉及的雙小檗堿衍生物具有生物相容性好，水溶性好、靶向性強(qiáng)、毒性低的特點(diǎn)，且制備方法簡單易行，產(chǎn)率高，在抗炎方面有顯著地療效。
【專利說明】
一種雙小檗堿衍生物的制備方法和用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于有機(jī)合成和藥物領(lǐng)域，具體涉及一種用于治療炎癥類疾病的雙小檗堿 衍生物、制備方法和用途，特別是涉及通過將小檗紅堿與脂肪醛或芳香醛，在酸性條件下反 應(yīng)得到雙小檗堿衍生物，以及此雙小檗堿衍生物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 炎癥是指具有血管系統(tǒng)的活體組織對損傷因子所發(fā)生的防御反應(yīng)，能夠引起組織 損傷的因素都可能成為炎癥的原因，即致炎因子。常見的致炎因子包括：1.生物性因子;2. 物理性因子;3.化學(xué)性因子;4.異物;5.壞死組織;6.變態(tài)反應(yīng)。變質(zhì)、滲出和增生是炎癥的 三大基本病理變化，目前臨床上常見的炎癥疾病如關(guān)節(jié)炎、膿毒癥、潰瘍性結(jié)腸炎、哮喘、動 脈粥樣硬化等時刻威脅著人類健康，而用于治療這些疾病的抗炎藥物通常具有很強(qiáng)的副作 用，因此研究新的抗炎藥物已經(jīng)刻不容緩。
[0003] 小檗堿又名黃連素，可以從黃連、黃柏等植物的根莖中提取得到。近年來，隨著研 究的深入，科研人員發(fā)現(xiàn)小檗堿可以有效地抑制急慢性炎癥，其機(jī)制可能是小檗堿抑制白 細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的粘附 [1]，或局部組織中前列腺素的生成[2]。此外，小檗堿及其衍生物還可 以用于治療細(xì)菌感染 [3]、腫瘤[4]、調(diào)節(jié)脂代謝[5]和治療病毒感染[6]等。
[0004] 盡管小檗堿及其衍生物應(yīng)用廣泛，但是由于存在溶解性差和生物利用度低等問 題，導(dǎo)致其很難被有效地輸送至細(xì)胞內(nèi)和病患部位，目前市場上的各種片劑膠囊等制劑方 法均不能有效的克服小檗堿這些問題。因此，對小檗堿及其衍生物進(jìn)行深加工和綜合利用 成為小檗堿研究和開發(fā)中十分活躍的領(lǐng)域。
[0005] 本發(fā)明選擇脂肪醛或芳香醛作為連接基團(tuán)，將兩分子小檗堿輒合，從而得到一系 列新型的雙小檗堿衍生物。實驗證明，雙小檗堿衍生物具有良好的脂水分布系數(shù)和抗炎活 性:①改善脂水分布系數(shù)。由于小檗堿本身是帶正電荷的分子，其水溶性和脂溶性均不好， 利用2-吡啶甲醛將兩分子小檗堿相連成為雙小檗堿分子后，會具有很強(qiáng)的結(jié)構(gòu)對稱性，增 強(qiáng)了其疏水性，并且其親水性也得到了一定改善。②提高抗炎活性。相比于未修飾的小檗 堿，活性提高了數(shù)倍。 參考文獻(xiàn)
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【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種具有水溶性好、靶向性強(qiáng)、抗炎 活性高的雙小檗堿衍生物。
[0013] 本發(fā)明的第二個目的是提供一種雙小檗堿衍生物的制備方法。
[0014] 本發(fā)明的第三個目的是提供一種雙小檗堿衍生物作為抗炎藥物的用途。
[0015] 本發(fā)明的目的主要通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：
[0016] 一種雙小檗堿衍生物具有下述結(jié)構(gòu)：
[0017] UM
[0018] 其中，R = H或 CH3 或 C6H13 或 C7H15^

[0019] -種雙小檗堿衍生物的制備方法，其特征是將小檗紅堿與脂肪醛或芳香醛，在酸 性條件下反應(yīng)得到雙小檗堿衍生物，所述的雙小檗堿衍生物具有下述結(jié)構(gòu)：
[0020]
[0021]其中，R = H或 CH3 或 C6H13 或 C7H15g


[0022] 上述方法優(yōu)選的是將小檗紅堿500mg，溶解于lOmL無水冰醋酸，加入相應(yīng)比例的脂 肪醛或芳香醛，40-8(TC反應(yīng)8-10小時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物。
[0023] -種雙小檗堿衍生物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。
[0024] 本發(fā)明所涉及的雙小檗堿衍生物具有生物相容性好，水溶性好、靶向性強(qiáng)、毒性低 的特點(diǎn)，且制備方法簡單易行，產(chǎn)率高，在抗炎方面有顯著地療效。
【附圖說明】
[0025] 圖1為本發(fā)明實施例1小檗紅堿的合成路線。
[0026] 圖2為本發(fā)明實施例1小檗紅堿的高分辨質(zhì)譜圖。
[0027] 圖3為本發(fā)明實施例2中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0028] 圖4為本發(fā)明實施例2中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0029] 圖5為本發(fā)明實施例3中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0030] 圖6為本發(fā)明實施例3中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0031] 圖7為本發(fā)明實施例4中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0032] 圖8為本發(fā)明實施例4中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0033] 圖9為本發(fā)明實施例5中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0034] 圖10為本發(fā)明實施例5中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0035] 圖11為本發(fā)明實施例6中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0036] 圖12為本發(fā)明實施例6中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0037] 圖13為本發(fā)明實施例7中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0038] 圖14為本發(fā)明實施例7中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0039] 圖15為本發(fā)明實施例8中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0040] 圖16為本發(fā)明實施例8中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0041] 圖17為本發(fā)明實施例9中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0042] 圖18為本發(fā)明實施例9中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0043] 圖19為本發(fā)明實施例10中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0044] 圖20為本發(fā)明實施例10中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0045] 圖21為本發(fā)明實施例11中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0046] 圖22為本發(fā)明實施例11中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0047] 圖23為本發(fā)明實施例12中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0048]圖24為本發(fā)明實施例12中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0049] 圖25為本發(fā)明實施例13中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0050] 圖26為本發(fā)明實施例13中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0051] 圖27為本發(fā)明實施例14中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0052]圖28為本發(fā)明實施例14中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0053]圖29為本發(fā)明實施例15中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0054]圖30為本發(fā)明實施例15中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0055] 圖31為本發(fā)明實施例16中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0056] 圖32為本發(fā)明實施例16中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0057]圖33為本發(fā)明實施例17中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0058]圖34為本發(fā)明實施例17中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0059] 圖35為本發(fā)明實施例18中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0060] 圖36為本發(fā)明實施例18中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
[0061] 圖37為本發(fā)明實施例19中雙小檗堿衍生物的合成路線。
[0062]圖38為本發(fā)明實施例19中雙小檗堿衍生物的高分辨質(zhì)譜圖。
【具體實施方式】
[0063]下面通過實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，其目的僅在于更好的理解本發(fā)明的內(nèi)容 而非限制本發(fā)明的保護(hù)范圍：
[0064]實施例1小檗紅堿的合成
[0065] 將10g鹽酸小檗堿置于反應(yīng)瓶中，在真空條件下升溫至190°C，反應(yīng)20分鐘，冷卻至 室溫，得到深紅色固體粉末小檗紅堿9g，產(chǎn)率93.92%(合成路線見圖1，表征圖譜見圖2)。
[0066] 實施例2
[0067] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入37 %甲醛溶液95yL，70 °C反應(yīng)8小 時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物410mg，產(chǎn)率80.5%(合成路線見圖3， 表征圖譜見圖4)。
[0068] 實施例3
[0069] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入乙醛88yL，70 °C反應(yīng)8小時。反應(yīng) 完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物370mg，產(chǎn)率71.13%(合成路線見圖5,表征圖 譜見圖6)。
[0070] 實施例4
[0071] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入己醛125mg，70°C反應(yīng)8小時。反應(yīng) 完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物374mg，產(chǎn)率66.35%(合成路線見圖7,表征圖 譜見圖8)。
[0072] 實施例5
[0073] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入庚醛141mg，70°C反應(yīng)8小時。反應(yīng) 完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物413mg，產(chǎn)率71.88%(合成路線見圖9,表征圖 譜見圖10)。
[0074] 實施例6
[0075] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入苯甲醛80yL，70 °C反應(yīng)8小時。反 應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物322mg，產(chǎn)率56.66% (合成路線見圖11，表 征圖譜見圖12)。
[0076] 實施例7
[0077] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入對硝基苯甲醛188mg，80°C反應(yīng)8 小時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物355mg，產(chǎn)率58.85 % (合成路線見 圖13,表征圖譜見圖14)。
[0078] 實施例8
[0079] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入鄰硝基苯甲醛188mg，80°C反應(yīng)8 小時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物290mg，產(chǎn)率48.07 % (合成路線見 圖15,表征圖譜見圖16)。
[0080] 實施例9
[0081 ] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入2-吡啶甲醛147yL，40°C反應(yīng)10小 時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物192mg，產(chǎn)率33.74% (合成路線見圖 17,表征圖譜見圖18)。
[0082] 實施例10
[0083] 取500mg小檗紅堿，溶解于1 OmL無水冰醋酸，加入對氰基苯甲醛120mg，60 °C反應(yīng)8 小時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物289mg，產(chǎn)率49.17% (合成路線見 圖19,表征圖譜見圖20)。
[0084] 實施例11
[0085] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入吡咯-2-甲醛118mg，40 °C反應(yīng)10 小時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物346mg，產(chǎn)率61.81% (合成路線見 圖21，表征圖譜見圖22)。
[0086] 實施例12
[0087] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入噻吩-3-甲醛110yL，70°C反應(yīng)8小 時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物320mg，產(chǎn)率55.85% (合成路線見圖 23,表征圖譜見圖24)。
[0088] 實施例13
[0089] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入糠醛120yL，70°C反應(yīng)8小時。反應(yīng) 完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物488mg，產(chǎn)率55.93% (合成路線見圖25,表征 圖譜見圖26)。
[0090] 實施例14
[0091] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入4-咪唑甲醛112mg，70 °C反應(yīng)8小 時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物374mg，產(chǎn)率66.72% (合成路線見圖 27,表征圖譜見圖28)。
[0092] 實施例15
[0093] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入戊二醛80mg，70°C反應(yīng)8小時。反 應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物344mg，產(chǎn)率61.03 % (合成路線見圖29，表 征圖譜見圖30)。
[0094] 實施例16
[0095] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入對苯二甲醛110mg，70 °C反應(yīng)8小 時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物420mg，產(chǎn)率71.18% (合成路線見圖 31，表征圖譜見圖32)。
[0096] 實施例17
[0097] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入4，4 ' -聯(lián)苯二甲醛170mg，70 °C反 應(yīng)8小時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物379mg，產(chǎn)率58.39 % (合成路線 見圖33,表征圖譜見圖34)。
[0098] 實施例18
[0099] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入3-吡啶甲醛147yL，70 °C反應(yīng)8小 時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物388mg，產(chǎn)率78.45% (合成路線見圖 35,表征圖譜見圖36)。
[0100] 實施例19
[0101] 取500mg小檗紅堿，溶解于10mL無水冰醋酸，加入4-吡啶甲醛147yL，40 °C反應(yīng)8小 時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物99mg，產(chǎn)率17.40% (合成路線見圖 37,表征圖譜見圖38)。
[0102] 實施例20本發(fā)明實施例2-19所得的雙小檗堿衍生物的體外抗炎藥效學(xué)評價，包 括如下步驟：
[0103] (1)藥物的細(xì)胞毒性檢測
[0104] 用含10%FBS，100U/mL青霉素，100yg/mL鏈霉素的高糖DMEM培養(yǎng)小鼠 RAW264.7細(xì) 胞，將細(xì)胞接種于96孔板(5\105/111〇,37°(：、5^^02培養(yǎng)24小時，用不同濃度的化合物處理 20小時，然后加入10yL MTT(5mg/mL)孵育4小時，吸棄培養(yǎng)基，DMS0溶解結(jié)晶，酶標(biāo)儀測定 490nm的光密度值(0D)〇
[0105] (2)藥物的抗炎活性檢測小鼠 RAW264.7細(xì)胞接種于96孔板(5X 105/mL)，培養(yǎng)24小 時，用混有LPS(lmg/mL)的ΙΟμΜ的實施例2-19所得的雙小檗堿衍生物處理24小時。取細(xì)胞上 清液(50yL)，并加入相同體積的Griess試劑（1 %磺胺，0.1 %Ν-1-萘二胺二鹽酸鹽和2.5% Η3Ρ〇4,測定540nm的吸光度來確定亞硝酸鹽的含量，以小檗堿為陽性對照。
[0106] 表1雙小檗堿衍生物的NO抑制率
[0107]
[0108] 實驗結(jié)果表明，本發(fā)明的雙小檗堿衍生物具有較好的抗炎活性，實施例6，7，11， 13,14,16,18,19制備的雙小檗堿衍生物抗炎活性與小檗堿相差不大，但實施例17制備的雙 小檗堿衍生物的抗炎活性較為突出，N0抑制率達(dá)到30.93%。
【主權(quán)項】
1. 一種雙小檗堿衍生物，其特征是具有下述結(jié)構(gòu)：2. -種雙小檗堿衍生物的制備方法，其特征是將小檗紅堿與脂肪醛或芳香醛，在酸性 條件下反應(yīng)得到雙小檗堿衍生物，所述的雙小檗堿衍生物具有下述結(jié)構(gòu)：3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是包括如下步驟： 將小檗紅堿500mg，溶解于IOmL無水冰醋酸，加入相應(yīng)比例的脂肪醛或芳香醛，40-80 °C 反應(yīng)8-10小時。反應(yīng)完全后，硅膠柱層析分離得到雙小檗堿衍生物。4. 權(quán)利要求1所述的雙小檗堿衍生物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】C07D519/00GK106008560SQ201610335312
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月18日
【發(fā)明人】劉天軍, 楊寶晨, 陳龍, 劉娟, 洪閣
【申請人】中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所