一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法，屬于植物提取技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明將預處理油橄欖葉粉末通過粳米和糯米發(fā)酵液進行提取，并加入纖維素酶以及果膠酶，使得油橄欖葉粉末中有效成份進一步釋放，之后經(jīng)過離心分離，旋蒸濃縮并干燥，從而得到從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法。實例證明，本發(fā)明操作簡單易行，原料簡單易得，利用粳米和糯米發(fā)酵液代替有機溶解，使得得到的橄欖苦苷中無任何有機溶劑殘留物，安全健康，最終使得從油橄欖葉中提取得到的橄欖苦苷純度高達85％以上，得率達到90％以上，可廣泛可用于食品、藥品的生產(chǎn)，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】
一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明公開了一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法，屬于植物提取技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]橄欖苦苷是一種裂環(huán)環(huán)烯醚萜苷類化合物，在至少25種木犀科植物中存在。橄欖苦苷又是一個具有較強生物活性的化合物，文獻報道其具有顯著的抗真菌、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗癌和降血糖等多種生物活性，另外，橄欖苦苷還具有抗心律失常和解痙作用，是一種作用效果較好的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑;橄欖苦苷還能夠激活胃蛋白酶并降低其他霉的活性;橄欖苦苷還能減少肝細胞中由離子誘導的脂質(zhì)過氧化作用產(chǎn)生的丙醛酸。
[0003]橄欖苦苷具有以下的功效:1、可以阻止細胞和病毒的生長，并刺激免疫系統(tǒng)中重要細胞的活性，以抵抗感染;2、對膀胱和微菌感染也極為有效;3、它有抗氧化能力，能減輕低密度脂蛋白的氧化程度，預防冠心病，動脈樣硬化的發(fā)生;4、保持健康的血壓和膽固醇水平，有舒緩血管平滑肌，降低血壓的能力。
[0004]橄欖苦苷使用具有廣闊的前景，具體包括:1、制藥，用于制造治療病毒、細菌、寄生蟲和吸血蟲等所引起的疾病的新藥，和治療感冒的新藥;2、護膚品，用于護膚品中可以促進肌膚原蛋白再生，自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
[0005]提取方法主要有熱提取、超聲波輔助提取、微波輔助提取等。這些方法均存在一定的技術(shù)缺陷，例如耗能大、耗材多、提取溫度高導致橄欖苦苷易分解等。
[0006]另外，采用現(xiàn)有的提取方法從油橄欖葉中提取橄欖苦苷，提取物中橄欖苦苷的含量一般在10?40%，提取效果不佳，提取物中的橄欖苦苷含量較低，且橄欖葉的利用度不高;且在提取的過程中，有機溶劑消耗大，有些溶解帶有毒性，使得得到的產(chǎn)品中有機溶劑殘留量大，不能夠廣泛應用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題:針對目前傳統(tǒng)方法在提取橄欖苦苷的過程中，有機溶劑消耗大，使得得到的產(chǎn)物中含有大量有機溶劑殘留物，不能夠廣泛應用，另外提取物中橄欖苦苷的含量較低，提取效果不佳的現(xiàn)狀，提供了一種將預處理油橄欖葉粉末通過粳米和糯米發(fā)酵液進行提取，并加入纖維素酶以及果膠酶，使得油橄欖葉粉末中有效成份充分釋放，之后經(jīng)過離心分離，旋蒸濃縮并干燥，從而得到從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法。該方法操作簡單易行，原料簡單易得，利用粳米和糯米發(fā)酵液代替有機溶解，使得得到的橄欖苦苷中無任何有機溶劑殘留物，安全健康，最終使得從油橄欖葉中提取得到的橄欖苦苷純度高達85%以上，得率達到90%以上，可廣泛可用于食品、藥品的生產(chǎn)，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0008]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
(I)稱取300?500g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌3?5次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理3?5min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨5?lOmin，收集研磨所得物料，將其轉(zhuǎn)入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至60?70kPa真空度，保壓10?20min，得預處理油橄欖葉粉末，備用；
(2)依次稱取0.8?1.0kg粳米和3?5kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌3?5次，再將其轉(zhuǎn)入蒸籠中，在90?95°C條件下蒸煮60?80min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至45 ?55°C;
(3)將冷卻后的粳米和糯米轉(zhuǎn)入盛有4?6L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入15?30g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌10?20min后，將發(fā)酵罐密封，并在發(fā)酵罐周圍鋪設(shè)I?3層草稻草，密封發(fā)酵8?10個月，收集上清液；
(4)在反應爸中，依次加入600?800mL上述上清液，60?80g步驟(I)備用預處理油橄欖葉粉末，2?3g纖維素酶和2?3g果膠酶，加熱升溫至37?45°C，啟動攪拌器，以600?800r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應3?5h，再將其轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀，以200?400W功率超聲處理40?60min ；
(5)待超聲處理結(jié)束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，于75?85°C下，旋蒸濃縮3?4h，得濃縮液，再將其轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，在60?80 °C干燥16?24h，即得橄欖苦苷。
[0009]本發(fā)明的應用方法是:將本發(fā)明制得的橄欖苦苷放入護膚乳液中，其中每100?20011^乳液中加入5?1(^，充分混合均勻，使用時，取3?5mL混合液涂抹臉部，建議每天早晚潔面后涂抹，堅持使用10?15天，可明顯感覺皮膚細膩彈性，長期使用可以促進肌膚原蛋白再生，可自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
[0010]本發(fā)明的有益效果是:
(1)本發(fā)明方法獨特新穎，在操作過程中，利用液氮冷卻橄欖葉，使得細胞中水瞬間凝結(jié)成冰，通過研磨施壓使橄欖葉細胞壁破裂，細胞中有效成分得以釋放；
(2)本發(fā)明中利用低溫降低水解酶活性，保護油橄欖葉中有效成份不易水解，另外研磨后立即減壓，使冰升華，去除水份，并加入纖維素酶和果膠酶，使其中有效成份更加得到釋放，提尚提取率；
(3 )本發(fā)明最終得到的橄欖苦苷中無任何有機溶劑殘留物，安全健康，純度高達85 %以上，得率達到90%以上，可廣泛可用于食品、藥品的生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0011]首先稱取300?500g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌3?5次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理3?5min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨5?lOmin，收集研磨所得物料，將其轉(zhuǎn)入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至60?70kPa真空度，保壓10?20min，得預處理油橄欖葉粉末，備用；隨后依次稱取0.8?1.0kg粳米和3?5kg儒米，人工混勻后，用去離子水洗滌3?5次，再將其轉(zhuǎn)入蒸籠中，在90?950C條件下蒸煮60?80min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至45?55°C ;之后將冷卻后的粳米和糯米轉(zhuǎn)入盛有4?6L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入15?30g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌10?20min后，將發(fā)酵罐密封，并在發(fā)酵罐周圍鋪設(shè)I?3層草稻草，密封發(fā)酵8?10個月，收集上清液;接下來在反應釜中，依次加入600?800mL上述上清液，60?80g上述備用預處理油橄欖葉粉末，2?3g纖維素酶和2?3g果膠酶，加熱升溫至37?45°C，啟動攪拌器，以600?800r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應3?5h，再將其轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀，以200?400W功率超聲處理40?60min ；最后待超聲處理結(jié)束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，于75?85°C下，旋蒸濃縮3?4h，得濃縮液，再將其轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，在60?80°C干燥16?24h，即得橄欖苦苷。
[0012]實例I
首先稱取300g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌3次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理3min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨5min，收集研磨所得物料，將其轉(zhuǎn)入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至60kPa真空度，保壓lOmin，得預處理油橄欖葉粉末，備用;隨后依次稱取0.8kg粳米和3kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌3次，再將其轉(zhuǎn)入蒸籠中，在90°C條件下蒸煮60min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至45°C;之后將冷卻后的粳米和糯米轉(zhuǎn)入盛有4L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入15g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌1min后，將發(fā)酵罐密封，并在發(fā)酵罐周圍鋪設(shè)I層草稻草，密封發(fā)酵8個月，收集上清液;接下來在反應爸中，依次加入600mL上述上清液，60g上述備用預處理油橄欖葉粉末，2g纖維素酶和2g果膠酶，加熱升溫至37 °C，啟動攪拌器，以600r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應3h，再將其轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀，以200W功率超聲處理40min;最后待超聲處理結(jié)束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，于75°C下，旋蒸濃縮3h，得濃縮液，再將其轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，在60°C干燥16h，即得橄欖苦苷。
[0013]本實例操作簡單易行，將本發(fā)明制得的橄欖苦苷放入護膚乳液中，其中每10mL乳液中加入5g，充分混合均勻，使用時，取3mL混合液涂抹臉部，建議每天早晚潔面后涂抹，堅持使用10天，可明顯感覺皮膚細膩彈性，長期使用可以促進肌膚原蛋白再生，可自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
[0014]實例2
首先稱取400g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌4次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理4min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨Smin，收集研磨所得物料，將其轉(zhuǎn)入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至65kPa真空度，保壓15min，得預處理油橄欖葉粉末，備用;隨后依次稱取0.9kg粳米和4kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌4次，再將其轉(zhuǎn)入蒸籠中，在93°C條件下蒸煮70min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至50°C;之后將冷卻后的粳米和糯米轉(zhuǎn)入盛有5L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入25g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌15min后，將發(fā)酵罐密封，并在發(fā)酵罐周圍鋪設(shè)2層草稻草，密封發(fā)酵9個月，收集上清液;接下來在反應爸中，依次加入700mL上述上清液，70g上述備用預處理油橄欖葉粉末，2.5g纖維素酶和2.5g果膠酶，加熱升溫至42°C，啟動攪拌器，以700r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應4h，再將其轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀，以300W功率超聲處理50min;最后待超聲處理結(jié)束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，于80°C下，旋蒸濃縮3.5h，得濃縮液，再將其轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，在70 °C干燥22h，即得橄欖苦苷。
[0015]本實例操作簡單易行，將本發(fā)明制得的橄欖苦苷放入護膚乳液中，其中每150mL乳液中加入Sg，充分混合均勻，使用時，取4mL混合液涂抹臉部，建議每天早晚潔面后涂抹，堅持使用13天，可明顯感覺皮膚細膩彈性，長期使用可以促進肌膚原蛋白再生，可自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
[0016]實例3
首先稱取500g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌5次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理5min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨1min，收集研磨所得物料，將其轉(zhuǎn)入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至70kPa真空度，保壓20min，得預處理油橄欖葉粉末，備用;隨后依次稱取1.0kg粳米和5kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌5次，再將其轉(zhuǎn)入蒸籠中，在95°C條件下蒸煮80min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至55°C;之后將冷卻后的粳米和糯米轉(zhuǎn)入盛有6L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入30g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌20min后，將發(fā)酵罐密封，并在發(fā)酵罐周圍鋪設(shè)3層草稻草，密封發(fā)酵10個月，收集上清液;接下來在反應爸中，依次加入800mL上述上清液，80g上述備用預處理油橄欖葉粉末，3g纖維素酶和3g果膠酶，加熱升溫至45 °C，啟動攪拌器，以800r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應5h，再將其轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀，以400W功率超聲處理60min;最后待超聲處理結(jié)束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，于85°C下，旋蒸濃縮4h，得濃縮液，再將其轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，在80°C干燥24h，即得橄欖苦苷。
[0017]本實例操作簡單易行，將本發(fā)明制得的橄欖苦苷放入護膚乳液中，其中每200mL乳液中加入10g，充分混合均勻，使用時，取5mL混合液涂抹臉部，建議每天早晚潔面后涂抹，堅持使用15天，可明顯感覺皮膚細膩彈性，長期使用可以促進肌膚原蛋白再生，可自然抵御由氧化而導致肌膚的破壞。
【主權(quán)項】
1.一種從油橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法，其特征在于具體操作步驟為: (I)稱取300?500g新鮮油橄欖葉，用去離子水洗滌3?5次，去除表面殘留污物后，用液氮冷卻處理3?5min，迅速取出，立即將其平鋪于石磨磨盤上，研磨5?lOmin，收集研磨所得物料，將其轉(zhuǎn)入密閉容器中，在室溫條件下，減壓至60?70kPa真空度，保壓10?20min，得預處理油橄欖葉粉末，備用； (2)依次稱取0.8?1.0kg粳米和3?5kg糯米，人工混勻后，用去離子水洗滌3?5次，再將其轉(zhuǎn)入蒸籠中，在90?95°C條件下蒸煮60?80min，隨后將其平鋪于竹席上，自然冷卻至.45 ?55°C; (3)將冷卻后的粳米和糯米轉(zhuǎn)入盛有4?6L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入15?30g釀酒酵母粉，用消毒的木棍攪拌10?20min后，將發(fā)酵罐密封，并在發(fā)酵罐周圍鋪設(shè)I?3層草稻草，密封發(fā)酵8?10個月，收集上清液； (4)在反應爸中，依次加入600?800mL上述上清液，60?80g步驟(I)備用預處理油橄欖葉粉末，2?3g纖維素酶和2?3g果膠酶，加熱升溫至37?45°C，啟動攪拌器，以600?800r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應3?5h，再將其轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀，以200?400W功率超聲處理40?60min ； (5)待超聲處理結(jié)束，離心分離，收集上清液，將其置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中，于75?85°C下，旋蒸濃縮3?4h，得濃縮液，再將其轉(zhuǎn)入真空干燥箱中，在60?80 °C干燥16?24h，即得橄欖苦苷。
【文檔編號】A23L33/105GK106046078SQ201610484367
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月28日
【發(fā)明人】郭舒洋, 張明, 許博偉
【申請人】郭舒洋