一種黎豆蛋白的提純方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種黎豆蛋白的提純方法，所述提取方法為：將脫皮的黎豆粉碎過篩網(wǎng)，將過篩后的原料按1∶15?25g/ml的料液比加入堿性溶液，在40?50℃條件下攪拌浸提8?12h,將浸提液進(jìn)行離心，收集上清液，向上清液中加入檸檬酸，再進(jìn)行離心收集沉淀，將得到的沉淀用蒸餾水進(jìn)行水洗，離心后進(jìn)行干燥，得到黎豆蛋白質(zhì)。本發(fā)明提供的黎豆蛋白提取方法不僅操作簡單，黎豆蛋白的得率高，蛋白變性率低，效率高，并且提取成本低廉，適合用于進(jìn)行黎豆蛋白的大規(guī)模提取。
【專利說明】
一種黎豆蛋白的提純方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及提取工藝技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種黎豆蛋白的提純方法。
【背景技術(shù)】
[0002]黎豆又名貓豆、狗爪豆、白黎豆、狗豆，是豆科黎豆屬植物的種子，為廣西特色藥食兩用資源植物。其原產(chǎn)地為南亞，在我國西南、華南海拔800?1400m石山地也有分布，廣西是最主要的產(chǎn)區(qū)。貓豆中含有天然左旋多巴，具有重要的應(yīng)用價(jià)值，除此之外，還含有大量的蛋白質(zhì)和淀粉。在我國，只有個(gè)別廠家將黎豆加工成粗飼料，或利用其部分淀粉加工成粉絲，其余部分被白白丟棄，造成浪費(fèi)并污染環(huán)境。
[0003]黎豆中蛋白質(zhì)十分豐富，與食用豆類相當(dāng)，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。開發(fā)和利用野生黎豆，可提高面粉廠的經(jīng)濟(jì)效益，合理利用資源，促進(jìn)糧油食品工業(yè)的發(fā)展。但目前對黎豆的開發(fā)利用主要集中在黎豆中左旋多巴等物質(zhì)的提取和利用方面，目前并沒有有關(guān)黎豆蛋白提取工藝的研究。
[0004]因此，現(xiàn)有技術(shù)還有待于進(jìn)一步改進(jìn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明在于提供一種黎豆蛋白的提純方法，旨在解決目前沒有行之有效的黎豆蛋白提取工藝。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
一種黎豆蛋白的提純方法，其中，所述方法為:
將脫皮的黎豆粉碎過篩網(wǎng)，將過篩后的原料按I: 15-25g/ml的料液比加入堿性溶液，在40-500C條件下攪拌浸提8-12h，將浸提液進(jìn)行離心，收集上清液，向上清液中加入檸檬酸，再進(jìn)行離心收集沉淀，將得到的沉淀用蒸餾水進(jìn)行水洗，離心后進(jìn)行干燥，得到黎豆蛋白質(zhì)。
[0007]所述的黎豆蛋白的提純方法，其中，其特征在于，所用堿液溶液的濃度為PHSS-10。
[0008]所述的黎豆蛋白的提純方法，其中，所用堿液為NaOH溶液或KOH溶液。
[0009]所述的黎豆蛋白的提純方法，其中，所述過篩后原料與NaOH溶液的料液比為1:20。
[0010]所述的黎豆蛋白的提純方法，其中，所述浸提液的離心速度為3500 -4500 r/min,離心時(shí)間為10_20min。
[0011]所述的黎豆蛋白的提純方法，其中，所述浸提在45°C條件下進(jìn)行。
[0012]所述的黎豆蛋白的提純方法，其中，所述浸提時(shí)間為10h。
[0013]所述的黎豆蛋白的提純方法，其中，加入檸檬酸直至溶液PH值為3-4.5。
[0014]所述的黎豆蛋白的提純方法，其中，將浸提得到的黎豆蛋白質(zhì)溶液在40-45°C下進(jìn)行真空干燥。
[0015]有益效果:本發(fā)明提供一種黎豆蛋白的提純方法，所述提取方法操作簡單，黎豆蛋白的得率高，蛋白變性率低，提取周期短，效率高，并且成本低廉，適合用于進(jìn)行黎豆蛋白的大規(guī)模提取。
【具體實(shí)施方式】
[0016]本發(fā)明提供一種黎豆蛋白的提純方法，為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及效果更加清楚、明確，以下對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0017]本發(fā)明提供一種黎豆蛋白的提純方法，其中，所述方法為:
一種黎豆蛋白的提純方法，其中，所述方法為:
首先將黎豆粉碎后過篩網(wǎng)。黎豆粉碎后，經(jīng)過篩網(wǎng)過篩的顆粒大小均勻，顆粒粒徑小，在后續(xù)提取步驟中，能極大提高與堿液的接觸面積，加快反應(yīng)速度，縮短蛋白提取時(shí)間及效率。
[0018]其次，將過篩后的原料按1:15-25g/ml的料液比加入堿性溶液，在40_50°C條件下攪拌浸提。
[0019]由于黎豆蛋白質(zhì)具有易溶于堿性溶液而難溶于酸性溶液，因此可采用堿性溶劑溶解黎豆蛋白質(zhì)，離心去除黎豆中其他雜質(zhì)。
[0020]隨著加入溶液的堿性提高，黎豆蛋白質(zhì)的溶解量越大，但是當(dāng)加入的堿性溶液PH值過高時(shí)，黎豆蛋白質(zhì)所帶電荷有所變化，溶解度逐漸降低。當(dāng)所用堿液溶液的濃度為PH為8-10時(shí)，黎豆蛋白質(zhì)的溶解度最高，蛋白質(zhì)提取量高。優(yōu)選地，當(dāng)所用堿液溶液的濃度為PH為9時(shí)，黎?蛋白質(zhì)的提取量最尚。
[0021 ] 常用的堿性溶液中，多采用NaOH溶液或KOH溶液，這兩種溶液的堿性較強(qiáng)。
[0022]由于料液比的增大，加速了黎豆中蛋白質(zhì)的溶解，但是當(dāng)料液比過大時(shí)，蛋白質(zhì)含量又有所下降。實(shí)驗(yàn)證明，當(dāng)料液比為1:15-1: 25進(jìn)行蛋白提取時(shí)，黎豆中蛋白質(zhì)的提取效率高。優(yōu)選地，當(dāng)料液比達(dá)到1:20時(shí)，浸提液中蛋白質(zhì)含量達(dá)到最大值。
[0023]由于堿液溫度的提高能有效提高黎豆中蛋白質(zhì)的萃取量，在40_50°C條件下，浸提得到黎豆蛋白質(zhì)含量最多。優(yōu)選地，所述浸提在45°C條件下進(jìn)行，此時(shí)不僅黎豆蛋白質(zhì)含量最高，蛋白變性也較少，保證了最高的蛋白提取率，此外也節(jié)約加熱所需的成本。
[0024]由于浸提時(shí)間越長，蛋白質(zhì)浸提量越多，但是蛋白質(zhì)浸提量增加越來越緩慢，并且易發(fā)生由于微生物感染使蛋白質(zhì)浸提液發(fā)生變質(zhì)。而在浸提時(shí)間為浸提8_12h時(shí)，不僅能有效避免微生物感染，并且蛋白質(zhì)浸提量高，也節(jié)約了時(shí)間成本，保證了提取效率。優(yōu)選地，當(dāng)浸提時(shí)間為10h，蛋白質(zhì)浸提效率最尚，提取量最尚。
[0025]最后，將浸提液進(jìn)行離心，向上清液中加入檸檬酸，再進(jìn)行離心收集沉淀，將得到的沉淀用蒸餾水進(jìn)行水洗，離心后進(jìn)行干燥，得到黎豆蛋白質(zhì)。
[0026]其中，加入檸檬酸直至溶液PH值為3-4.5，這時(shí)溶液中的黎豆蛋白溶解度很低，在溶液中沉淀出來，離心即可分離。優(yōu)選地，加入檸檬酸直至溶液PH值為4時(shí)，黎豆蛋白溶解度最低，蛋白提取量達(dá)到最尚。
[0027]所述浸提液的離心速度為3500-4500 r/min，離心時(shí)間為10_20min。在上述的離心速度下，能保證浸提液中黎豆淀粉剛好充分沉淀在離心管底部，有利于降低了黎豆蛋白中淀粉雜質(zhì)的含量，提高蛋白純度。離心10_20min，能保證剛好使浸提液中的淀粉充分沉淀，也避免過久的離心降低工作效率。優(yōu)選地，當(dāng)離心速度為4000 r/min，離心時(shí)間為15min，最終得到的蛋白提取量最大，效率最高。
[0028]將浸提得到的黎豆蛋白質(zhì)溶液在40-45°C下進(jìn)行真空干燥，在此溫度下，能保證在黎豆蛋白質(zhì)不變質(zhì)的前提下，黎豆蛋白質(zhì)進(jìn)行快速、充分地干燥。優(yōu)選地，將浸提得到的黎豆蛋白質(zhì)在42°C條件下進(jìn)行真空干燥時(shí)，得到黎豆蛋白質(zhì)品質(zhì)最高。
[0029]為了更詳盡的描述本發(fā)明的制備方法，以下列舉幾個(gè)實(shí)施例更進(jìn)一步的說明。
[0030]實(shí)施例1
本發(fā)明提供的黎豆蛋白的提純方法如下:
將脫皮黎豆粉碎后過100目篩網(wǎng);將過篩后的原料按為I: 20g/ml的料液比加入PH為9的NaOH溶液，在45°C條件下浸提1h后將浸提液進(jìn)行離心，離心速度為4000 r/min，離心時(shí)間為15min，收集上清液，向上清液中加入檸檬酸，使PH為4，再進(jìn)行離心收集黎豆蛋白質(zhì)沉淀，將得到的蛋白質(zhì)沉淀用蒸餾水進(jìn)行水洗，離心收集沉淀，在42°C下進(jìn)行真空干燥，得到黎豆蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黎豆蛋白質(zhì)提取含量為13.78%，提取率為68.55%。
[0031]實(shí)施例2
本發(fā)明提供的黎豆蛋白的提純方法如下:
將黎豆粉碎后過100目篩網(wǎng)；將過篩后的原料按為I: 15g/ml的料液比加入PH為8的NaOH溶液，在40 °C條件下浸提Sh后將浸提液進(jìn)行離心，離心速度為3500 r/min，離心時(shí)間為1min，收集上清液，向上清液中加入檸檬酸，使PH為3，再進(jìn)行離心收集黎豆蛋白質(zhì)沉淀，將得到的蛋白質(zhì)沉淀用蒸餾水進(jìn)行水洗，離心收集沉淀，在40°C下進(jìn)行真空干燥。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黎豆蛋白質(zhì)提取含量為12.96 %，提取率為65.81%。
[0032]實(shí)施例3
本發(fā)明提供的黎豆蛋白的提純方法如下:
將黎豆粉碎后過100目篩網(wǎng)；將過篩后的原料按為I: 25g/ml的料液比加入PH為10的NaOH溶液，在50°C條件下浸提12h后將浸提液進(jìn)行離心，離心速度為4500 r/min，離心時(shí)間為20min，收集上清液，向上清液中加入檸檬酸，使PH為4.5，再進(jìn)行離心收集黎豆蛋白質(zhì)沉淀，將得到的蛋白質(zhì)沉淀用蒸餾水進(jìn)行水洗，離心收集沉淀，在45 0C下進(jìn)行真空干燥。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黎豆蛋白質(zhì)提取含量為13.05%，提取率為66.72%。
[0033]本發(fā)明提供的黎豆蛋白的提純方法不僅操作簡單，黎豆蛋白的得率高，蛋白變性率低，提取周期短，效率高，并且成本低廉，是一種適合進(jìn)行黎豆蛋白的大規(guī)模提取的方法。
[0034]應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明的應(yīng)用不限于上述的舉例，對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說，可以根據(jù)上述說明加以改進(jìn)或變換，所有這些改進(jìn)和變換都應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種黎豆蛋白的提純方法，其特征在于，所述方法為: 將脫皮的黎豆粉碎過篩網(wǎng)，將過篩后的原料按1:15-25g/ml的料液比加入堿性溶液，在40-500C條件下攪拌浸提8-12h，將浸提液進(jìn)行離心，收集上清液，向上清液中加入檸檬酸，再進(jìn)行離心收集沉淀，將得到的沉淀用蒸餾水進(jìn)行水洗，離心后進(jìn)行干燥，得到黎豆蛋白質(zhì)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黎豆蛋白的提純方法，其特征在于，所用堿液溶液的濃度為PH為8-10。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的黎豆蛋白的提純方法，其特征在于，所用堿液為NaOH溶液或KOH溶液。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黎豆蛋白的提純方法，其特征在于，所述過篩后原料與NaOH溶液的料液比為1:20。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黎豆淀粉的提純方法，其特征在于，所述浸提液的離心速度為3500 -4500 r/min，離心時(shí)間為 10-20min。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黎豆蛋白的提純方法，其特征在于，所述浸提在45°C條件下進(jìn)行。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黎豆蛋白的提純方法，其特征在于，所述浸提時(shí)間為10h。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黎豆蛋白的提純方法，其特征在于，加入檸檬酸直至溶液PH值為3-4.5。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黎豆蛋白的提純方法，其特征在于，將浸提得到的黎豆蛋白質(zhì)溶液在40-45 0C下進(jìn)行真空干燥。
【文檔編號】C07K1/30GK106046114SQ201610356830
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月26日
【發(fā)明人】董華強(qiáng), 蔡智文
【申請人】佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院