一種植物乳桿菌凍干粉及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種植物乳桿菌凍干粉及其制備方法，屬于生物菌制品的生產(chǎn)領(lǐng)域。所述凍干粉包括分離乳清蛋白，山梨醇，菊粉，抗壞血酸鈉和植物乳桿菌，WPI的含量為50g/L～150g/L，山梨醇的含量為20g/L～60g/L，菊粉的含量為20g/L～60g/L，抗壞血酸鈉的含量為10g/L～30g/L。本發(fā)明的凍干保護(hù)劑較常規(guī)保護(hù)劑顯著提高了植物乳桿菌的存活率，其制備的植物乳桿菌凍干粉中，植物乳桿菌CCFM 8610、植物乳桿菌CCFM 8661等植物乳桿菌的凍干存活率達(dá)到100％。
【專利說(shuō)明】
-種植物乳桿菌凍干粉及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種植物乳桿菌凍干粉及其制備方法，屬于生物菌制品的生產(chǎn)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物乳桿菌因其優(yōu)越的發(fā)酵性能和多樣的功能性，得到廣泛的關(guān)注，并被深入研 究和開發(fā)。目前，植物乳桿菌已被廣泛地應(yīng)用到營(yíng)養(yǎng)保健、發(fā)酵食品、生物醫(yī)藥、飼料、畜牧 養(yǎng)殖等行業(yè)中。泡菜直投式發(fā)酵劑、乳酸菌片劑、活性乳酸菌飲料等植物乳桿菌制品深受廣 大消費(fèi)者的喜愛。但是植物乳桿菌對(duì)外界環(huán)境抗性低，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)技術(shù)不完善導(dǎo)致菌粉細(xì)胞 存活率低，確保植物乳桿菌無(wú)損失是提高植物乳桿菌活性制品生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)。
[0003] 菌粉便于儲(chǔ)藏和運(yùn)輸，并有利于后期產(chǎn)品的加工，乳酸菌的生產(chǎn)多W菌粉的形式 呈現(xiàn)。目前真空冷凍干燥是生產(chǎn)菌粉最有效的干燥技術(shù)，其可W很好的保持菌體的生理生 化特性和生物活性。乳酸菌預(yù)凍成固體后，水分不經(jīng)過(guò)液相，在真空和低溫條件下直接升 華。但是不加任何保護(hù)的菌體直接凍干，必然引起機(jī)械損傷，細(xì)胞膜的流動(dòng)性和通透性變 化，動(dòng)態(tài)平衡的破壞，細(xì)胞會(huì)被殺死。因此，凍干乳酸菌時(shí)會(huì)添加凍干保護(hù)劑提高菌體的存 活率。目前凍干保護(hù)劑主要包括蛋白質(zhì)，有機(jī)聚合物(聚薦糖、徑乙基纖維素、菊粉等），糖類 (乳糖、薦糖、海藻糖等)和其他成分(如糖醇、維生素 C、谷氨酸鋼、甘油等）。其中蛋白質(zhì)或聚 合物能夠在冷凍過(guò)程形成無(wú)定形結(jié)構(gòu)，可W減少化學(xué)損傷。但是不同的蛋白因其性質(zhì)不同， 保護(hù)效果亦不同，篩選保護(hù)效果好的蛋白質(zhì)是提高凍干存活率的先決條件。糖類被認(rèn)為具 有通過(guò)氨鍵替代穩(wěn)定脂質(zhì)膜和蛋白的效果，同時(shí)也可W通過(guò)玻璃化過(guò)程形成無(wú)定形的非晶 結(jié)構(gòu)。脫脂乳、薦糖和海藻糖因其較好的保護(hù)效果，是經(jīng)常被使用的凍干保護(hù)劑。
[0004] 雖然目前廣泛使用的保護(hù)劑在凍干乳酸菌時(shí)已具有較好效果，但是在凍干植物乳 桿菌時(shí)存活率均較低。大量研究也表明不同的菌株需要的保護(hù)劑不同，保護(hù)劑的使用量也 不同。運(yùn)與菌株的特異性和菌體的大小有關(guān)系。因此一種更有效的保護(hù)植物乳桿菌的的保 護(hù)劑配方及制備策略是提高植物乳桿菌生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服現(xiàn)有保護(hù)劑對(duì)植物乳桿菌較差的凍干保護(hù)效 果，提供一種適合于植物乳桿菌的保護(hù)劑配方及制備策略。
[0006] 本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種凍干保護(hù)劑，成分包括WPI，山梨醇，菊粉，抗壞 血酸鋼;所述WPI的含量為50g/L~150g/L，山梨醇的含量為20g/L~60g/L，菊粉的含量為 20g/L~60g/L，抗壞血酸鋼的含量為lOg/L~30g/L。
[0007] 在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述的乳酸菌的凍干保護(hù)劑的組成為:WPI 60g/L， 山梨醇40g/L，菊粉40g/L，抗壞血酸鋼20g/L。
[000引本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種植物乳桿菌凍干粉，是由所述凍干保護(hù)劑和植物 乳桿菌活性成分制成。
[0009]在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述乳酸菌包括:植物乳桿菌CCFM 8610,植物乳桿 菌CCFM 8661，植物乳桿菌ATCC 14917中的至少一種。
[0010] 在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述植物乳桿菌CCFM 8610已于2012年5月3日在北 京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì) 普通微生物中屯、保藏，其保藏號(hào)為CGMCC No. 6077，并在申請(qǐng)?zhí)枮?01210046323.5，【公開日】 為2012年12月19日的專利中公開;所述植物乳桿菌CCFM 8661已于2011年11月29日在中國(guó) 微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物菌種保藏中屯、保藏，其保藏號(hào)為CGMCC No. 5494，并 于2012年07月18日在申請(qǐng)?zhí)枮?01210046323.5的專利中公開。
[0011] 本發(fā)明的第=個(gè)目的是提供所述植物乳桿菌凍干粉的制備方法，包括收集菌體、 配制保護(hù)劑、凍干和菌體的收集和保藏。
[0012] 在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述收集菌體是收集培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期的植物 乳桿菌，離屯、獲得菌泥。
[0013] 在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述配制保護(hù)劑是配制成濃度為lOOg/L~300g/L的 WPI溶液，濃度均為80g/L~240g/L的菊粉和山梨醇混合溶液，濃度為40g/L~120g/L的抗壞 血酸溶液，滅菌后將上述保護(hù)劑溶液W2:1:1的體積比在無(wú)菌環(huán)境下混勻，制備成凍干保護(hù) 劑。
[0014] 在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述凍干是將收集的植物乳桿菌菌泥與凍干保護(hù)劑 溶液充分混勻，預(yù)凍、一次干燥，再二次干燥。
[0015] 在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述菌粉的收集和保藏是收集菌粉至無(wú)菌真空包裝 袋，然后用真空包裝機(jī)進(jìn)行真空封裝
[0016] 在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，所述植物乳桿菌凍干粉的制備方法為：
[0017] (1)收集菌體:收集培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期的乳酸菌，在4°C條件離屯、10~20分鐘， 離屯、條件為3000~8000g。棄上清液，加入無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水，震蕩混勻洗涂菌體，然后 在相同的條件下離屯、，得到菌泥。將菌泥置于4°C環(huán)境下，用于凍干菌粉的制備。
[0018] (2)配制保護(hù)劑:稱取一定質(zhì)量的WPI，完全溶解于一定量的純化水中，配制成濃度 為lOOg/L~300g/L的WPI溶液，己氏殺菌;然后稱取一定質(zhì)量的菊粉和山梨醇，配制成兩者 濃度均為80g/L~240g/L的混合溶液，115°C高溫滅菌20分鐘;40g/L~120g/L的抗壞血酸鋼 膜濾除菌;滅菌后將將上述保護(hù)劑溶液W2:1:1的體積比在無(wú)菌環(huán)境下混勻，制成此發(fā)明的 凍干保護(hù)劑。
[0019] (3)凍干:將收集的植物乳桿菌菌泥與凍干保護(hù)劑溶液充分混勻，菌懸液倒入凍干 托盤(或培養(yǎng)皿或西林瓶），液面厚度0.5~1.0cm，然后放入真空冷凍干燥機(jī)凍干箱，按照W 下凍干工藝進(jìn)行真空冷凍干燥：
[0020] (a)預(yù)凍:將產(chǎn)品溫度降至4°C，保持30~60分鐘，再降溫至-40°C，保持4~6小時(shí)。
[0021] (b) -次干燥:預(yù)凍完成后，將冷阱溫度降至-40°CW下，開真空累，在凍干箱壓力 低于200mTorr(26.6Pa)后，W0.3°C/min的升溫速率將產(chǎn)品溫度升至-20°C，保持20~30小 時(shí)。
[0022] (C)二次干燥:一次干燥完成后，W凍干機(jī)最快升溫速率將產(chǎn)品溫度升至20°C，保 持10~20小時(shí)，產(chǎn)品無(wú)水分揮發(fā)后結(jié)束凍干過(guò)程。
[0023] (4)菌粉的收集和保藏:凍干結(jié)束后，收集菌粉至無(wú)菌真空包裝袋，然后用真空包 裝機(jī)進(jìn)行真空封裝;真空包裝后的菌粉可根據(jù)需要保存在溫度不超過(guò)2(TC的任意環(huán)境中， 低溫保藏效果更好。
[0024] 有益效果:本發(fā)明的凍干保護(hù)劑較常規(guī)保護(hù)劑能夠顯著提高植物乳桿菌的凍干存 活率，制備的植物乳桿菌凍干粉中，植物乳桿菌的凍干存活率達(dá)到100%。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 實(shí)施例1凍干保護(hù)劑的制備
[00%]稱取一定質(zhì)量的WPI，完全溶解于一定量的純化水中，配制成濃度為lOOg/L~ 300g/L的WPI溶液，己氏殺菌；然后稱取一定質(zhì)量的菊粉和山梨醇，配制成兩者濃度均為 80g/L~240g/L的溶液，115°C高溫滅菌20分鐘;40g/L~120g/L的抗壞血酸鋼膜濾除菌。滅 菌后將各保護(hù)劑溶液W2:1:1的體積比在無(wú)菌環(huán)境下混勻，獲得凍干保護(hù)劑。
[0027] 實(shí)施例2植物乳桿菌CCFM 8610凍干菌粉的制備
[00%] (1)凍干保護(hù)劑組成:WPI 60g/L，山梨醇40g/L，菊粉40g/L，抗壞血酸鋼20g/l;常 規(guī)凍干保護(hù)劑組成:脫脂乳120g/L，薦糖20g/L，海藻糖20g/L。
[0029] (2川欠集菌體:菌株培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期后，8000g離屯、，棄上清液，用pH 7.0的 生理鹽水洗涂?jī)纱危詈箅x屯、棄上清液得到濕菌體。
[0030] (3)凍干:取濕菌體0.5旨，1.0旨，1.5旨，2.0旨分別加入10血本發(fā)明保護(hù)劑和常規(guī)保護(hù) 劑，充分混勻后，進(jìn)行真空冷凍干燥，冷凍干燥步驟為：
[0031] 將收集的植物乳桿菌菌泥與凍干保護(hù)劑溶液充分混勻，菌懸液倒入凍干托盤(或 培養(yǎng)皿或西林瓶），液面厚度0.5~1.0cm，然后放入真空冷凍干燥機(jī)凍干箱，按照W下凍干 工藝進(jìn)行真空冷凍干燥：
[0032] a)預(yù)凍:將產(chǎn)品溫度降至4°C，保持30~60分鐘，再降溫至-40°C，保持4~6小時(shí)。
[0033] b)-次干燥:預(yù)凍完成后，將冷阱溫度降至-40°CW下，開真空累，在凍干箱壓力低 于200mTorr(26.6Pa)后，W0.3°C/min的升溫速率將產(chǎn)品溫度升至-20°C，保持20~30小時(shí)。
[0034] C)二次干燥:一次干燥完成后，W凍干機(jī)最快升溫速率將產(chǎn)品溫度升至20°C，保持 10~20小時(shí)，產(chǎn)品無(wú)水分揮發(fā)后結(jié)束凍干過(guò)程。
[0035] (4)凍干完成后，凍干菌粉用無(wú)菌蒸饋水復(fù)溶至凍干前體積，測(cè)定活菌濃度，計(jì)算 凍干存活率，結(jié)果如表1所示。
[0036] 表1植物乳桿菌CCFM 8610在兩種保護(hù)劑中的凍干存活率
[nm7l
[0038]凍干完成后，常規(guī)保護(hù)劑的保護(hù)效果顯著低于本發(fā)明保護(hù)劑，植物乳桿菌CCFM 8610在常規(guī)保護(hù)劑的中凍干存活率均低于70%，在菌泥比例增加時(shí)，存活率更低。而本發(fā)明 保護(hù)劑顯著提高凍干存活率，菌泥添加量低于1.5g/10mL保護(hù)劑時(shí)，凍干存活率達(dá)到100%， 植物乳桿菌CCFM 8610凍干菌粉的活菌含量達(dá)到2.0~4.5 X l〇iic化/g。
[0039] 實(shí)施例2植物乳桿菌CCFM 8661凍干菌粉的制備
[0040] (1)凍干保護(hù)劑組成:WPI 60g/L，山梨醇40g/L，菊粉40g/L，抗壞血酸鋼20g/l;常 規(guī)凍干保護(hù)劑組成:脫脂乳120g/L，薦糖20g/L，海藻糖20g/L。
[0041 ] (2川欠集菌體:菌株培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期后，8000g離屯、，棄上清液，用pH 7.0的 生理鹽水洗涂?jī)纱危詈箅x屯、棄上清液得到濕菌體。
[0042] (3)凍干:取濕菌體0.5邑，1.0邑，1.5邑，2.0邑分別加入10血本發(fā)明保護(hù)劑和常規(guī)保護(hù) 劑，充分混勻后，進(jìn)行真空冷凍干燥，冷凍干燥步驟為：
[0043] 將收集的植物乳桿菌菌泥與凍干保護(hù)劑溶液充分混勻，菌懸液倒入凍干托盤(或 培養(yǎng)皿或西林瓶），液面厚度0.5~1.0cm，然后放入真空冷凍干燥機(jī)凍干箱，按照W下凍干 工藝進(jìn)行真空冷凍干燥：
[0044] a)預(yù)凍:將產(chǎn)品溫度降至4°C，保持30~60分鐘，再降溫至-40°C，保持4~6小時(shí)。
[0045] b)-次干燥:預(yù)凍完成后，將冷阱溫度降至-40°CW下，開真空累，在凍干箱壓力低 于200mTorr(26.6Pa)后，W0.3°C/min的升溫速率將產(chǎn)品溫度升至-20°C，保持20~30小時(shí)。
[0046] C)二次干燥:一次干燥完成后，W凍干機(jī)最快升溫速率將產(chǎn)品溫度升至20°C，保持 10~20小時(shí)，產(chǎn)品無(wú)水分揮發(fā)后結(jié)束凍干過(guò)程。
[0047] (4)凍干完成后，凍干菌粉用無(wú)菌蒸饋水復(fù)溶至凍干前體積，立即測(cè)定pH值和活菌 濃度，計(jì)算凍干存活率，結(jié)果如表2所示。
[004引表2植物乳桿菌CCFM 8661在兩種保護(hù)劑中的凍干存活率
[0049]
[0050] 凍干完成后，常規(guī)保護(hù)劑的保護(hù)效果顯著低于本發(fā)明保護(hù)劑，植物乳桿菌CCFM 8661在常規(guī)保護(hù)劑的中凍干存活率均低于60%，在菌泥比例增加時(shí)，存活率更低。而本發(fā)明 保護(hù)劑顯著提高凍干存活率，菌泥添加量低于2 . Og/lOmL保護(hù)劑時(shí)，凍干存活率均可達(dá)到 100%，植物乳桿菌CCFM 8661凍干菌粉的活菌含量達(dá)到2.0~5.5Xl〇iic化/g。
[0051 ]實(shí)施例3植物乳桿菌ATCC 14917凍干菌粉的制備
[0052] (1)本發(fā)明的凍干保護(hù)劑組成:WPI 60g/L，山梨醇40g/L，菊粉40g/L，抗壞血酸鋼 20g/l;常規(guī)凍干保護(hù)劑組成:脫脂乳120g/L，薦糖20g/L，海藻糖20g/L。
[0053] (2)菌株培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期后，8000g離屯、，棄上清液，用抑7.0的生理鹽水洗 涂?jī)纱?，最后離屯、棄上清液得到濕菌體。
[0054] (3)凍干:取濕菌體0.5g，1. Og，1.5g，2. Og分別加入lOmL本發(fā)明保護(hù)劑和常規(guī)保護(hù) 劑，充分混勻后，進(jìn)行真空冷凍干燥，冷凍干燥步驟為：
[0055] 將收集的植物乳桿菌菌泥與凍干保護(hù)劑溶液充分混勻，菌懸液倒入凍干托盤(或 培養(yǎng)皿或西林瓶），液面厚度0.5~1.0cm，然后放入真空冷凍干燥機(jī)凍干箱，按照W下凍干 工藝進(jìn)行真空冷凍干燥：
[0化6] a)預(yù)凍:將產(chǎn)品溫度降至4°C，保持30~60分鐘，再降溫至-40°C，保持4~6小時(shí)。
[0057] b)-次干燥:預(yù)凍完成后，將冷阱溫度降至-40°CW下，開真空累，在凍干箱壓力低 于200mTorr(26.6Pa)后，W0.3°C/min的升溫速率將產(chǎn)品溫度升至-20°C，保持20~30小時(shí)。
[0058] (4)凍干完成后，凍干菌粉用無(wú)菌蒸饋水復(fù)溶至凍干前體積，測(cè)定活菌濃度，計(jì)算 凍干存活率，結(jié)果如表3所示。
[0059] 表3植物乳桿菌ATCC 14917在兩種保護(hù)劑中的凍干存活率
[0060]
[0061] 凍干完成后，常規(guī)保護(hù)劑的保護(hù)效果顯著低于本發(fā)明保護(hù)劑，植物乳桿菌CCFM 8610在常規(guī)保護(hù)劑的中凍干存活率均低于70%，在菌泥比例增加時(shí)，存活率更低。而本發(fā)明 保護(hù)劑顯著提高凍干存活率，菌泥添加量為0.1~1.5g/10mL保護(hù)劑時(shí)，凍干存活率達(dá)到 100%，植物乳桿菌CCFM 8610凍干菌粉的活菌含量達(dá)到2.0~4.5Xl〇iicfu/g;菌泥添加量 為1.5~3g/mL保護(hù)劑時(shí)，凍干粉中植物乳桿菌存活率達(dá)70% W上。
[0062] 采用組成為乳清分離蛋白WPI 50g/L~150g/L，山梨醇20g/L~60g/L，菊粉20g/L ~60g/L，抗壞血酸鋼lOg/L~30g/L的凍干保護(hù)劑按上述方法制備的植物乳桿菌凍干粉凍 干存活率均為70 % W上。
[0063] 雖然本發(fā)明已W較佳實(shí)施例公開如上，但其并非用W限定本發(fā)明，任何熟悉此技 術(shù)的人，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，都可做各種的改動(dòng)與修飾，因此本發(fā)明的保護(hù)范 圍應(yīng)該W權(quán)利要求書所界定的為準(zhǔn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種植物乳桿菌凍干保護(hù)劑，其特征在于，成分包括乳清分離蛋白，山梨醇，菊粉，抗 壞血酸鈉;含量分別為乳清分離蛋白WPI 50g/L~150g/L，山梨醇20g//L~60g/L，菊粉20g/L ~60g/L，抗壞血酸鈉10g/L~30g/L。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的凍干保護(hù)劑，其特征在于，所述的植物乳桿菌凍干保護(hù)劑的組 成為:WPI 60g/L，山梨醇40g/L，菊粉40g/L，抗壞血酸鈉20g/L。3. -種植物乳桿菌凍干粉，其特征在于，由權(quán)利要求1或2所述凍干保護(hù)劑和植物乳桿 菌活性成分制成。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的凍干保護(hù)劑，其特征在于，含有植物乳桿菌CCFM 8610，植物乳 桿菌CCFM 8661，植物乳桿菌ATCC 14917中的至少一種。5. 權(quán)利要求3所述植物乳桿菌凍干粉的制備方法，其特征在于，包括收集濕菌體、配制 保護(hù)劑、凍干和菌體的收集和保藏。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述植物乳桿菌凍干粉的制備方法，其特征在于，收集濕菌體是收集 培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期的植物乳桿菌，離心獲得菌泥。7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物乳桿菌凍干粉的制備方法，其特征在于，所述配制保護(hù)劑 是配制濃度為l〇〇g/L~300g/L的WPI溶液，濃度均為80g/L~240g/L的菊粉和山梨醇混合溶 液，濃度為40 g//L~120g/L的抗壞血酸溶液，滅菌后將上述保護(hù)劑溶液以2:1:1的體積比在 無(wú)菌環(huán)境下混勻，制備成凍干保護(hù)劑。8. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物乳桿菌凍干粉的制備方法，其特征在于，所述凍干是將收 集的濕菌體與凍干保護(hù)劑溶液以0.1~3g: 10mL的比例充分混勻，預(yù)凍，一次干燥，二次干 燥。9. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物乳桿菌凍干粉的制備方法，其特征在于，所述菌體的收集 和保藏是收集菌粉至無(wú)菌真空包裝袋，然后用真空包裝機(jī)進(jìn)行真空封裝。10. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物乳桿菌凍干粉的制備方法，其特征在于，具體步驟為： (1) 收集濕菌體：收集培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末期的乳酸菌，在4°C，3000~8000g離心5-lOmin;加入無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水洗滌菌體，離心，得到菌泥;將菌泥置于4°C環(huán)境下，用于 凍干菌粉的制備； (2) 配制保護(hù)劑:稱取WPI，配制成濃度為100g/L~300g/L的WPI溶液;稱取菊粉和山梨 醇，配制成濃度均為80g/L~240g/L的混合溶液;配制40g/L~120g/L的抗壞血酸鈉溶液;將 各保護(hù)劑溶液分別滅菌后在無(wú)菌環(huán)境下混勻，制成凍干保護(hù)劑； (3) 凍干:將收集的植物乳桿菌菌泥與凍干保護(hù)劑溶液充分混勻，倒入凍干容器，液面 厚度0.5~1.0cm，然后放入真空冷凍干燥機(jī)凍干箱，按照以下凍干工藝進(jìn)行真空冷凍干燥： (a)預(yù)凍:將產(chǎn)品溫度降至4°C，保持30~60min，再降溫至-40°C，保持4~6h;(b)-次干燥： 預(yù)凍完成后，將冷肼溫度降至_40°C以下，打開真空栗，在凍干箱壓力低于26.6Pa后，以0.3 °C/min的升溫速率將產(chǎn)品溫度升至-20°C，保持20~30h;(c)二次干燥:一次干燥完成后，以 凍干機(jī)最快升溫速率將產(chǎn)品溫度升至20°C，保持10~20h，至產(chǎn)品無(wú)水分揮發(fā)； (4) 菌粉的收集和保藏：凍干結(jié)束后，收集菌粉至無(wú)菌真空包裝袋，然后用真空包裝機(jī) 進(jìn)行真空封裝;真空包裝后的菌粉可根據(jù)需要保存在溫度不超過(guò)20°C的任意環(huán)境中，低溫 保藏效果更好。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK106047709SQ201610666406
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年8月12日 公開號(hào)201610666406.2, CN 106047709 A, CN 106047709A, CN 201610666406, CN-A-106047709, CN106047709 A, CN106047709A, CN201610666406, CN201610666406.2
【發(fā)明人】陳衛(wèi), 崔樹茂, 翟齊嘯, 趙建新, 田豐偉, 王剛, 張灝
【申請(qǐng)人】江南大學(xué)