一種兩親性四臂星型聚合物及基于其的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)和制備方法與應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物醫(yī)用高分子聚合物材料技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種兩親性四臂星型聚合物及基于其的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)和制備方法與應(yīng)用。該聚合物具體如下式(一)所示結(jié)構(gòu)：其中，x＝10～30，y＝5～20，z＝5～20。本發(fā)明還提供了一種基于上述兩親性四臂星型聚合物的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)。本發(fā)明聚合物在pH 6.5和催化劑苯胺的條件下，殼層交聯(lián)位點(diǎn)的醛基官能團(tuán)和交聯(lián)劑3,3’?二硫代雙(丙酸二酰肼)反應(yīng)，形成含有二硫鍵和酰腙鍵的可逆交聯(lián)結(jié)構(gòu)，具有良好的穩(wěn)定性和顯著提高的抵抗稀釋能力，將其應(yīng)用于負(fù)載水難溶性藥物中，可實(shí)現(xiàn)不同環(huán)境中對(duì)水難溶性藥物的可控、快速釋放，實(shí)現(xiàn)藥物的高效遞釋，提高癌癥的治療效率。
【專利說明】
一種兩親性四臂星型聚合物及基于其的殼層可逆交聯(lián)膠束系 統(tǒng)和制備方法與應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)用高分子聚合物材料技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種兩親性四臂星型 聚合物及基于其的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)和制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，癌癥已經(jīng)成為威脅人們健康的幾大因素之一。傳統(tǒng)治療癌癥和腫瘤的方法 有物理放射療法和化學(xué)療法，化療的重點(diǎn)在于抗癌藥物的遞送和釋放。隨著納米科技的發(fā) 展，納米藥物遞釋系統(tǒng)為抗癌藥物的遞釋提供了極大的便利，在癌癥的治療領(lǐng)域發(fā)揮著越 來越大的作用。納米藥物遞釋系統(tǒng)主要包括納米顆粒、囊泡、水凝膠、膠束等，多樣的載體系 統(tǒng)為癌癥治療提供了新手段，不僅降低了藥物在遞送過程中的損失和對(duì)人體正常組織造成 的毒副作用，而且提高了藥物的利用率和癌癥治療效率。
[0003] 聚合物膠束是一種具有潛在應(yīng)用價(jià)值的納米藥物遞釋系統(tǒng)。膠束結(jié)構(gòu)由親水殼層 和疏水核構(gòu)成，適合于利用增強(qiáng)滲透與保留效應(yīng)(EPR)被動(dòng)靶向運(yùn)輸疏水藥物到達(dá)并富集 于腫瘤組織部位。另外，膠束有著極低的臨界膠束濃度，可以有效增溶和穩(wěn)定疏水性藥物。 然而，聚合物膠束存在熱力學(xué)-動(dòng)力學(xué)平衡，注射入血液中后，可能會(huì)因?yàn)檠旱南♂尪?得膠束不穩(wěn)定或解體，進(jìn)而導(dǎo)致藥物突釋，對(duì)人體正常組織產(chǎn)生較大的毒副作用，這極大的 限制了聚合物膠束在癌癥治療方面的應(yīng)用。對(duì)膠束的殼(核)結(jié)構(gòu)進(jìn)行交聯(lián)能明顯的增強(qiáng)膠 束結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，抑制小分子抗癌藥物擴(kuò)散，從而有效減少膠束內(nèi)核藥物的突釋現(xiàn)象。然 而，當(dāng)膠束到達(dá)腫瘤組織處時(shí)，這種不可逆的化學(xué)鍵合交聯(lián)結(jié)構(gòu)卻會(huì)阻礙內(nèi)核藥物的釋放， 降低治療效果?？赡娼宦?lián)膠束則可以很好的解決上述問題，即將酰腙、亞胺、二硫鍵等可逆 化學(xué)鍵引入交聯(lián)結(jié)構(gòu)，交聯(lián)膠束在正常生理環(huán)境中保持良好的穩(wěn)定性，而進(jìn)入腫瘤組織處 則快速響應(yīng)弱酸性及高谷胱甘肽(GSH)濃度的強(qiáng)還原性微環(huán)境而去交聯(lián)化，實(shí)現(xiàn)內(nèi)核藥物 的快速釋放。McCormick報(bào)道了亞胺鍵可逆交聯(lián)的三嵌段聚合物mPEO-PAPMA-PNIPAM膠束， 并以醋酸潑尼松龍為疏水模型藥物，比較了不同pH下(pH 7.4和pH 5.5)載藥交聯(lián)膠束的釋 藥行為，發(fā)現(xiàn)pH 5.5條件下藥物釋放速率明顯高于pH 7.4時(shí)的釋放速率，實(shí)現(xiàn)了可逆交聯(lián) 膠束負(fù)載藥物的可控釋放(Macromolecules ,2011,44,1327) c^Zhang制備了一種殼層交聯(lián)聚 肽PEG-PCys-Pphe膠束，該膠束采用二硫鍵進(jìn)行可逆交聯(lián)，在2μΜ GSH條件下藥物釋放速率 十分緩慢，但在1 〇μΜ GSH濃度下，則快速釋放內(nèi)核中的藥物(Polym. Chem.，2012，3，1084-1090)〇
[0004] 星型聚合物拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)和聚合物膠束相似，其水力半徑小，自組裝形成的膠束結(jié)構(gòu) 也更穩(wěn)定，因此，作為化療藥物的納米容器方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)?；谛切屯?fù)浣Y(jié)構(gòu)的聚合 物膠束可以高效負(fù)載抗癌藥物，進(jìn)行可逆交聯(lián)化后，在血液等正常生理環(huán)境中保持穩(wěn)定，而 在腫瘤等特異微環(huán)境中則能快速去交聯(lián)化，實(shí)現(xiàn)藥物的可控釋放，因此是一種極具價(jià)值的 納米藥物遞釋載體。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種兩親性四 臂星型聚合物。
[0006] 本發(fā)明聚合物的結(jié)構(gòu)為：[聚己內(nèi)酯-b-聚（甲基丙烯酸單甲氧基聚乙二醇酯-CO-(對(duì)-(甲基丙烯酸氧基乙氧基)苯甲醛））]4。
[0007] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種上述兩親性四臂星型聚合物的制備方法。
[0008] 本發(fā)明方法首先用對(duì)-(羥基乙氧基)苯甲醛與甲基丙烯酰氯反應(yīng)合成醛基官能化 單體對(duì)-(甲基丙烯氧基乙氧基)苯甲醛。采用開環(huán)聚合(R0P)在四臂季戊四醇上聚合 ￡-己內(nèi) 酯得到四臂聚合物四臂聚己內(nèi)酯(4-AS-PCL)，用?；瘎⑵淠┒缩；玫酱蠓肿右l(fā)劑4-AS-PCL-Br;然后用該大分子引發(fā)劑引發(fā)醛基官能化單體MAEBA和親水性大分子PEGMA進(jìn)行 電子轉(zhuǎn)移活化再生原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)(ARGET ATRP)共聚聚合，最終得到親水嵌段含 有官能團(tuán)的聚合物[聚己內(nèi)酯-b-聚（甲基丙烯酸單甲氧基聚乙二醇酯-co-(對(duì)_(甲基丙烯 酸氧基乙氧基）苯甲醛））]4，SP4-AS-PCL-P(PEGMA-co-MAEBA)。
[0009] 本發(fā)明另一目的在于提供一種基于上述星型聚合物的聚合物膠束系統(tǒng)。
[0010] 本發(fā)明的兩親性四臂星型嵌段共聚物，溶于溶劑中可制備得到內(nèi)層季戊四醇連接 的疏水嵌段、外殼含有醛基官能化位點(diǎn)的親水嵌段的納米聚合物膠束系統(tǒng)。
[0011] 本發(fā)明再一目的在于提供一種基于上述聚合物膠束系統(tǒng)的殼層可逆交聯(lián)膠束系 統(tǒng)。
[0012] 本發(fā)明的兩親性四臂星型聚合物中，親水嵌段結(jié)構(gòu)中含有醛基官能團(tuán)，可作為殼 層可逆交聯(lián)的位點(diǎn)。在pH 6.5和催化劑苯胺的條件下，殼層交聯(lián)位點(diǎn)的醛基官能團(tuán)和小分 子雙官能團(tuán)交聯(lián)劑3，3'_二硫代雙(丙酸二酰肼）(DTP)反應(yīng)，形成含有二硫鍵和酰腙鍵的可 逆交聯(lián)結(jié)構(gòu)，最終形成殼層可逆交聯(lián)的聚合物膠束。
[0013] 本發(fā)明再一目的在于提供上述殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)在負(fù)載水難溶性藥物中的 應(yīng)用，特別是水難溶性抗癌藥物(如喜樹堿)的負(fù)載。
[0014] 在正常生理組織條件(pH 7.4,如血液中）下，本發(fā)明的殼層可逆交聯(lián)膠束保持良 好的穩(wěn)定性，抵抗稀釋的能力得到提高，同時(shí)，膠束中交聯(lián)結(jié)構(gòu)保持完整，交聯(lián)結(jié)構(gòu)可以很 好的抑制被包載藥物的擴(kuò)散作用，大大降低膠束內(nèi)核藥物在此環(huán)境中的突釋現(xiàn)象。在腫瘤 組織細(xì)胞內(nèi)弱酸性和強(qiáng)還原性條件(pH 5.0，10mM GSH)下，殼層可逆交聯(lián)結(jié)構(gòu)智能響應(yīng)，膠 束快速去交聯(lián)化，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)被包載藥物的快速、可控釋放。這種殼層可逆交聯(lián)的星型聚合物 膠束納米載體可以有效提高膠束系統(tǒng)對(duì)抗癌藥物負(fù)載及遞釋效率，更有效的實(shí)現(xiàn)它在癌癥 化療領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值。
[0015] 本發(fā)明的目的通過下述方案實(shí)現(xiàn)：
[0016] 一種兩親性四臂星型聚合物，化學(xué)命名為[聚己內(nèi)酯-b-聚（甲基丙烯酸單甲氧基 聚乙二醇酯-co-(對(duì)-(甲基丙烯酸氧基乙氧基)苯甲醛））]4,命名為4-AS-PCL-P(PEGMA-c〇-MAEBA)，具體如下式(一)所示結(jié)構(gòu)：
[0017]
[0018] 其中，x = 10 ~30，y = 5 ~20，z = 5 ~20。
[0019] 優(yōu)選地，本發(fā)明的兩親性四臂星型聚合物的數(shù)均分子量為24336~48744g/mol。
[0020] 本發(fā)明提供了一種上述兩親性四臂星型聚合物的制備方法，包括以下步驟：
[0021] (1)制備醛基官能化單體對(duì)_(甲基丙烯氧基乙氧基)苯甲醛(MAEBA):將對(duì)-(2-羥 基乙氧基）苯甲醛和三乙胺(TEA)溶于溶劑中，冰浴條件下加入甲基丙烯酰氯，冰浴反應(yīng)后 恢復(fù)室溫繼續(xù)反應(yīng)，得到醛基官能化單體對(duì)_(甲基丙烯氧基乙氧基)苯甲醛(MAEBA)。
[0022] (2)制備含聚己內(nèi)酯聚合物(4-AS-PCL):將季戊四醇、ε-己內(nèi)酯（ε-CL)和催化劑混 合，加熱反應(yīng)，得到聚合物(4-AS-PCL)。
[0023] (3)制備大分子引發(fā)劑(4-AS-PCL-Br):將步驟(2)所得的聚合物溶于溶劑中，冰浴 條件下加入2-溴異丁酰溴(BIBB)和三乙胺(TEA)后，冰浴反應(yīng)結(jié)束后恢復(fù)室溫繼續(xù)反應(yīng)，得 到大分子引發(fā)劑(4-AS-PCL-Br)。
[0024] (4)制備兩親性四臂星型聚合物4-AS-PCL-P(PEGMA-c〇-MAEBA):將步驟(3)所制得 的大分子引發(fā)劑、步驟（1)所制得的醛基官能化單體MAEBA、甲基丙烯酸單甲氧基聚乙二醇 酯(PEGMA)和催化劑溶于溶劑中，加入配體1，1，4，7，10，10-六甲基三乙烯四胺(HMTETA)，混 合均勻后加入還原劑加熱反應(yīng)，得到兩親性四臂星型聚合物4-AS-PCL-P(PEGMA-c〇-MAEBA)〇
[0025]所述步驟(1)中反應(yīng)物的摩爾份數(shù)配方如下：
[0026] 對(duì)-(2-羥基乙氧基)苯甲醛 1份
[0027] 三乙胺 1~3份
[0028] 甲基丙烯酰氯 1~3份；
[0029] 所述步驟(2)中反應(yīng)物的摩爾份數(shù)配方如下：
[0030] 季戊四醇 1份
[0031] ε-己內(nèi)酯 40~80份
[0032] 催化劑 0.03~0.09份；
[0033]所述步驟(3)中反應(yīng)物的摩爾份數(shù)配方如下：
[0034] 4-AS-PCL 1 份
[0035] 三乙胺 16~48份
[0036] 2-溴異丁酰溴 16~32份；
[0037] 所述步驟(4)中反應(yīng)物的摩爾份數(shù)配方如下： 大分子引發(fā)劑4-AS-PCL-Br 1份 MAEBA 20~60 份 PEGMA 20 ~60 份
[0038] HMTETA 2~3 份 催化劑 2~3份 還原劑 0.1~0.2份。
[0039] 步驟(1)中所述的冰浴反應(yīng)的時(shí)間優(yōu)選指反應(yīng)1~5h，室溫繼續(xù)反應(yīng)的時(shí)間優(yōu)選指 反應(yīng)12~24h。
[0040] 步驟(1)中所述的溶劑是用于提供溶液反應(yīng)環(huán)境，可以為本領(lǐng)域常用有機(jī)溶劑，如 二氯甲烷。
[0041 ]步驟⑵中所述的加熱反應(yīng)優(yōu)選指加熱到90~130°C反應(yīng)16~48h。
[0042] 步驟(2)中所述的催化劑為常用催化劑即可，如Sn(0ct)2,其用量為催化量即可。
[0043] 步驟(3)中所述的冰浴反應(yīng)的時(shí)間優(yōu)選指反應(yīng)3~7h，室溫繼續(xù)反應(yīng)的時(shí)間優(yōu)選指 反應(yīng)12~36h。
[0044] 步驟(3)中所述的溶劑是用于提供溶液反應(yīng)環(huán)境，為本領(lǐng)域常用有機(jī)溶劑即可，如 四氫呋喃。
[0045]步驟(4)中所述的加熱反應(yīng)優(yōu)選指加熱到60~90°C反應(yīng)24~48h。
[0046] 步驟(4)中所述的催化劑為常用催化劑即可，如二價(jià)銅催化劑CuBr2,用量是催化 量即可。
[0047] 步驟(4)中所述的溶劑為常用溶劑即可，如甲苯。
[0048] 步驟(4)中所述的還原劑為常用還原劑即可，如Sn(0ct)2,用量和配體的用量相同 即可。
[0049] 優(yōu)選地，步驟（1)反應(yīng)完成后，將反應(yīng)體系純化、干燥，最后得到純化后的產(chǎn)物。所 述的純化是指將反應(yīng)體系倒入分液漏斗，分別用去離子水和NaCl溶液萃取，然后所得有機(jī) 相用MgS0 4干燥后過濾，所得濾液通過旋蒸濃縮，得到粗產(chǎn)物，然后通過硅膠柱層析，最后將 洗脫液旋蒸濃縮得到純化后產(chǎn)物。
[0050] 步驟(2)反應(yīng)完成后，優(yōu)選地將反應(yīng)體系冷卻、純化、干燥，得到純化后的產(chǎn)物。所 述的純化是指旋蒸除去溶劑，然后用四氫呋喃溶解產(chǎn)物，最后加入10倍體積的〇°C混合溶劑 甲醇/水(體積比1/1)沉淀。
[0051] 步驟(3)反應(yīng)完成后，優(yōu)選地將反應(yīng)體系純化、干燥，最后得到純化后的產(chǎn)物。所述 的純化優(yōu)選地指將反應(yīng)后的溶液體系經(jīng)過中性氧化鋁層析柱除去三乙胺鹽，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 除去大部分溶劑，再用10倍體積的〇°C混合溶劑甲醇/水(體積比1/1)沉淀。
[0052]步驟(4)反應(yīng)完成后，優(yōu)選地將反應(yīng)體系冷卻、純化、干燥，最后得到純化后的產(chǎn) 物。所述的純化優(yōu)選地指向反應(yīng)體系中加入適量四氫呋喃，然后將溶液體系經(jīng)過中性氧化 鋁層析柱除去催化劑，接著旋蒸濃縮后加入到十倍體積的o°c乙醚中沉淀。
[0053] 優(yōu)選地，上述各反應(yīng)均在惰性氣體保護(hù)和無水條件下進(jìn)行。
[0054] 本發(fā)明還提供了一種基于上述兩親性四臂星型聚合物的聚合物膠束系統(tǒng)。將上述 兩親性四臂星型聚合物溶于溶劑中，即可得到聚合物膠束系統(tǒng)，其內(nèi)層為季戊四醇連接的 疏水嵌段、外殼含有醛基官能化位點(diǎn)的親水嵌段。
[0055] 本發(fā)明還提供了一種基于上述聚合物膠束系統(tǒng)的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)。本發(fā)明 的兩親性四臂星型聚合物中，親水嵌段結(jié)構(gòu)中含有醛基官能團(tuán)，可作為殼層可逆交聯(lián)的位 點(diǎn)。在pH 6.5和催化劑苯胺的條件下，殼層交聯(lián)位點(diǎn)的醛基官能團(tuán)和小分子雙官能團(tuán)交聯(lián) 劑3，3 二硫代雙(丙酸二酰肼）（DTP)反應(yīng)，形成含有二硫鍵和酰腙鍵的可逆交聯(lián)結(jié)構(gòu)，最 終形成殼層可逆交聯(lián)的聚合物膠束。將兩親性四臂星型聚合物溶于溶劑中，調(diào)節(jié)pH 6.5,加 入催化劑，即可獲得殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)。上述的催化劑優(yōu)選地為常見的苯胺。
[0056] 本發(fā)明還提供了一種基于上述兩親性四臂星型聚合物的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng) 在負(fù)載水難溶性藥物中的應(yīng)用，包括以下步驟:分別將水難溶性藥物和兩親性四臂星型聚 合物溶于同種溶劑中，攪拌，待聚合物完全溶解后，將兩溶液混合，攪拌6~8h，透析，調(diào)節(jié)pH 至6.5，加入催化劑，再加入交聯(lián)劑，攪拌反應(yīng)，透析，得到負(fù)載水難溶性藥物殼層可逆交聯(lián) 膠束系統(tǒng)。
[0057]所述攪拌反應(yīng)優(yōu)選攪拌反應(yīng)24h。
[0058]上述的催化劑優(yōu)選地為常見的苯胺。
[0059]上述的交聯(lián)劑優(yōu)選地為常見的小分子雙官能團(tuán)交聯(lián)劑，如3,3'_二硫代雙(丙酸二 酰肼）（DTP)。
[0060]所述的溶劑可為常見有機(jī)溶劑，如二甲基亞砜。
[0061 ]上述的負(fù)載水難溶性藥物可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)可以有效降低在正常組織(pH 7.4) 處的藥物釋放，而在腫瘤細(xì)胞內(nèi)弱酸性（pH 5.0)和較高還原劑谷胱甘肽(GSH)濃度（~ 10mM)條件下實(shí)現(xiàn)快速、可控釋放。
[0062] 本發(fā)明的機(jī)理為：
[0063]本發(fā)明利用季戊四醇連接疏水嵌段聚己內(nèi)酯（PCL)，然后對(duì)醛基官能化單體 MAEBA、甲基丙烯酸單甲氧基聚乙二醇酯(PEGMA)進(jìn)行共聚，得到兩親性四臂星型聚合物，將 其溶解于溶劑中，得到了內(nèi)層為季戊四醇連接的疏水嵌段、外殼為醛基官能化的親水嵌段 的納米級(jí)聚合物膠束。季戊四醇價(jià)格便宜易得，無毒，具有很好的生物相容性;PCL作為疏水 嵌段，在生物體內(nèi)可降解，用于包載水難溶性的抗癌藥物;PEGMA和MAEBA的共聚物P(PEGMA-co-MAEBA)則作為親水的外殼，MAEBA側(cè)鏈提供了醛基官能團(tuán)，PEGMA側(cè)鏈提供親水性，共聚 物無毒，用于提供保護(hù)層以保持膠束的穩(wěn)定性。廣譜抗癌藥物喜樹堿(CPT)，被包載進(jìn)聚合 物膠束，穩(wěn)定的載藥膠束系統(tǒng)，在催化劑苯胺催化下，交聯(lián)劑3,3'_二硫代雙(丙酸二酰肼） 和親水嵌段中的醛基官能團(tuán)反應(yīng)生成腙鍵，膠束的殼層交聯(lián)化，得到載藥交聯(lián)膠束系統(tǒng)。包 載CPT的交聯(lián)膠束在正常組織(pH 7.4)處保持穩(wěn)定，交聯(lián)結(jié)構(gòu)可以很好的抑制藥物的擴(kuò)散 和釋放;而在腫瘤細(xì)胞內(nèi)弱酸性(pH 5.0)和較高還原劑谷胱甘肽(GSH)濃度(~10mM)條件 下，交聯(lián)膠束快速去交聯(lián)化，實(shí)現(xiàn)快速、可控釋放。這種兩親性四臂星型聚合物膠束載藥體 系可以有效的控制藥物釋放，提尚藥物的治療效率。
[0064]本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，具有如下的優(yōu)點(diǎn)及有益效果：
[0065] (1)本發(fā)明的制備方法簡(jiǎn)單，操作易行，反應(yīng)條件溫和，星型聚合物各嵌段聚合度 和分子量易于調(diào)控，可用于制備負(fù)載水難溶性藥物膠束系統(tǒng)，滿足不同藥物的釋放要求。
[0066] (2)本發(fā)明制備得到的兩親性四臂星型聚合物膠束系統(tǒng)，對(duì)水難溶性藥物的包載 能力增強(qiáng)。
[0067] (3)本發(fā)明制備得到的兩親性四臂星型聚合物可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)，可以在不同環(huán) 境中實(shí)現(xiàn)對(duì)水難溶性藥物的可控、快速釋放，實(shí)現(xiàn)藥物的尚效遞釋，提尚癌癥的治療效率， 為高效載藥體系的制備提供有價(jià)值的制備技術(shù)。
【附圖說明】
[0068]圖1為實(shí)施例1中醛基官能化單體對(duì)_(甲基丙烯氧基乙氧基）苯甲醛(MAEBA)的核 磁氫譜。
[0069]圖2為實(shí)施例1中醛基官能化單體對(duì)-(甲基丙烯氧基乙氧基）苯甲醛(MAEBA)的核 磁碳譜。
[0070] 圖3為實(shí)施例3中化合物的核磁氫譜，其中，A為4-AS-PCL，B為大分子引發(fā)劑4-AS-PCL-Br，C為兩親性四臂星型聚合物4-AS-PCL-P(PEGMA-co-MAEBA)。
[0071] 圖4為實(shí)施例3中化合物的紅外譜圖，其中，A為4-AS-PCL，B為大分子引發(fā)劑4-AS-PCL-Br，C為兩親性四臂星型聚合物4-AS-PCL-P(PEGMA-co-MAEBA)。
[0072] 圖5為實(shí)施例3中化合物的GPC洗脫曲線。
[0073]圖6為實(shí)施例6中兩親性四臂星型聚合物空白非交聯(lián)膠束的DLS圖。
[0074]圖7為實(shí)施例7中兩親性四臂星型聚合物載藥非交聯(lián)膠束的DLS圖。
[0075]圖8為實(shí)施例8中兩親性四臂星型聚合物載藥交聯(lián)膠束的DLS圖。
[0076]圖9為實(shí)施例8中兩親性四臂星型聚合物載藥交聯(lián)膠束的TEM圖。
[0077] 圖10為實(shí)施例9中負(fù)載喜樹堿交聯(lián)膠束系統(tǒng)的體外釋放曲線。
[0078] 圖11為實(shí)施例10中四臂星型空白非交聯(lián)膠束和空白交聯(lián)膠束的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)圖。
[0079] 圖12為實(shí)施例10中四臂星型載藥非交聯(lián)膠束、載藥交聯(lián)膠束的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)圖。
[0080] 圖13為實(shí)施例8中四臂星型聚合物載藥交聯(lián)膠束的制備原理圖。
【具體實(shí)施方式】
[0081] 下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限 于此。
[0082] 下列實(shí)施例中的試劑均可從商業(yè)渠道獲得。
[0083] 實(shí)施例1:醛基官能化單體MAEBA
[0084]取150mL的干凈的三口燒瓶，加入攪拌子，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，依次加入對(duì)-(2-羥基乙 氧基)苯甲醛(3.8g，23mmo 1)、三乙胺(2.33g，23mmo 1)和75mL二氯甲烷，冰浴，然后緩慢滴入 含有甲基丙烯酰氯（7.2g，69mmol)的25mL二氯甲烷，攪拌lh后恢復(fù)至室溫，繼續(xù)攪拌反應(yīng) 24h后倒入分液漏斗中，加入H 20( 100mL)萃取，然后用NaCl (0.5M，100mL)溶液沖洗有機(jī)相兩 次，再用無水硫酸鎂干燥，過濾，旋蒸除去溶劑，得到的粗品過硅膠柱層析純化(淋洗液為正 己烷/乙酸乙酯4:1，R f值0.4)，最后收集目標(biāo)濾液，旋蒸除去溶劑得到白色固體。合成反應(yīng) 式見公式(1)。利用核磁對(duì)分子結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行分析，見圖1和圖2。
[0085]
[0086] 實(shí)施例2:醛基官能化單體MAEBA
[0087] 取150mL的干凈的三口燒瓶，加入攪拌子，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，依次加入對(duì)_(2-羥基乙 氧基)苯甲醛(3.8g，23mmo 1)、三乙胺(6.99g，69mmo 1)和75mL二氯甲烷，冰浴，然后緩慢滴入 含有甲基丙烯酰氯（2.4g，23mmol)的25mL二氯甲烷，攪拌5h后恢復(fù)至室溫，繼續(xù)攪拌反應(yīng) 12h后倒入分液漏斗中，加入H 20(100mL)萃取，然后用NaCl(0.5M，100mL)溶液沖洗有機(jī)相兩 次，再用無水硫酸鎂干燥，過濾，旋蒸除去溶劑，得到的粗品過硅膠柱層析純化(淋洗液為正 己烷/乙酸乙酯4:1，R f值0.4)，最后收集目標(biāo)濾液，旋蒸除去溶劑得到白色固體。
[0088] 實(shí)施例3:兩親性四臂星形聚合物(4-AS-PCL-P(PEGMA-co-MAEBA))的制備（x:y :z = 12:9:9)
[0089] (1)制備含聚己內(nèi)酯聚合物4-AS-PCL
[0090]取50mL的干燥反應(yīng)瓶，放入攪拌子，然后將反應(yīng)瓶用酒精燈烘烤5min，將引發(fā)劑季 戊四醇（136mg，lmmol)加入反應(yīng)瓶中，用橡皮塞密封。抽真空-通氬氣三次，在氬氣保護(hù)下加 入單體e-CL(5.47g，48mmol)，用液氮進(jìn)行三次冷凍-抽氣-升溫循環(huán)后，在氬氣保護(hù)下置于 130°C油浴中加熱20min，加入Sn(0ct) 2(llmg)，反應(yīng)16h后用液氮終止反應(yīng)。加入50mL THF 溶解聚合物，用500mL冷甲醇/水（1:1)沉淀，45 °C、35mb真空干燥。合成反應(yīng)式見公式(2)。利 用核磁、紅外和GPC對(duì)分子結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行分析，結(jié)果見圖3、圖4和圖5，M n = 5608g/mo 1，Mw/ Mn=1.37"
[0091；
[0092] (2)制備大分子引發(fā)劑(4-AS-PCL-Br)
[0093] 取250mL三口燒瓶，加入攪拌子，稱取一定量的4-AS-PCL( 2 · 24g，0 · 4mmol)加入反 應(yīng)瓶，加入溶劑THF(lOOmL)后通氬氣lOmin，密封燒瓶后將TEA( 1.12mL，6.4mmol)注入燒瓶 中，冰水浴冷卻至〇°C，然后用注射器將2-溴異丁酰溴（1.58mL，12.8mmol)逐滴加入燒瓶中。 在0°C反應(yīng)5h后升溫至室溫，繼續(xù)攪拌反應(yīng)36h。將反應(yīng)液過氧化鋁層析柱除去季胺鹽，然后 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分溶劑，用500mL冷甲醇/水(1:1體積比)沉淀兩次后真空干燥。合成反應(yīng) 式見公式（3)。利用核磁、GPC和紅外對(duì)分子結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行分析，見圖3、圖4和圖5，M n = 6204g/mol，Mw/Mn=1.41。
[0094]
[0095] (3)制備兩親性四臂星型聚合物4-AS-PCL-P(PEGMA-c〇-MAEBA)
[0096] 取50mL干燥茄形瓶裝入攪拌子，烘烤5min干燥，然后稱取引發(fā)劑4-AS-PCL-Br (1 · 19g，0.2mmol)和CuBr2(8.93mg，0.04mmol)置于前形瓶中，用反口橡皮塞封口，抽真空-通氬氣三次。用注射器依次將溶劑甲苯（18mL)、單體PEGMA(3 · 6g，7 · 2mmol)和MAEBA( 1 · 69g， 7.2mmol)、配體HMTETA( 109yL，0.4mmol)加入瓶中，攪拌lOmin使催化劑配合物形成。將還原 劑Sn(0ct)2( 195yL，0.6mmol)溶于甲苯（2mL)，然后加入上述反應(yīng)瓶中，攪拌5min后轉(zhuǎn)入80 °(：油浴中攪拌反應(yīng)24h。反應(yīng)完成后冷卻至室溫，加入40mL THF并攪拌使其溶解，然后用中 性氧化鋁柱子過濾除去催化劑（以THF作洗脫劑）。得到的反應(yīng)液濃縮后緩慢加入到十倍量 (300mL)冷乙醚中沉淀。45°C、35mb下真空干燥24h。合成反應(yīng)式見公式(4)。利用核磁、GPC和 紅外對(duì)分子結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行分析，見圖3、圖4和圖5，M n=32275g/mol，Mw/Mn=1.47。
[0097；
[0098] 實(shí)施例4:兩親性四臂星形聚合物(4-AS-PCL-P(PEGMA-co-MAEBA))的制備(x:y :z = 10:15:15)
[0099] (1)制備含聚己內(nèi)酯聚合物4-AS-PCL
[0100]取50mL的干燥反應(yīng)瓶，放入攪拌子，然后將反應(yīng)瓶用酒精燈烘烤5min，將引發(fā)劑季 戊四醇（136mg，lmmol)加入反應(yīng)瓶中，用橡皮塞密封。抽真空-通氬氣三次，在氬氣保護(hù)下加 入單體e-CL(4.56g，40mmol)，用液氮進(jìn)行三次冷凍-抽氣-升溫循環(huán)后，在氬氣保護(hù)下置于 110°C油浴中加熱20min，加入Sn(0ct) 2(33mg)，反應(yīng)36h后用液氮終止反應(yīng)。加入50mL THF 溶解聚合物，用500mL冷甲醇/水（1:1)沉淀，45 °C、35mb真空干燥。合成反應(yīng)式見公式(2)。利 用核磁、紅外和GPC對(duì)分子結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行分析，結(jié)果見圖3、圖4和圖5，M n = 4696g/mo 1，Mw/ Μη=1 ·53〇
[0101] (2)制備大分子引發(fā)劑(4-AS-PCL-Br)
[0102] 取250mL三口燒瓶，加入攪拌子，稱取一定量的4-AS-PCL(l ·88g，0 ·4mmol)加入反 應(yīng)瓶，加入溶劑THF(lOOmL)后通氬氣lOmin，密封燒瓶后將TEA( 1.68mL，9.6mmol)注入燒瓶 中，冰水浴冷卻至〇°C，然后用注射器將2-溴異丁酰溴（1.19mL，9.6mmol)逐滴加入燒瓶中。 在0°C反應(yīng)3h后升溫至室溫，繼續(xù)攪拌反應(yīng)36h。將反應(yīng)液過氧化鋁層析柱除去季胺鹽，然后 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分溶劑，用500mL冷甲醇/水（1:1體積比）沉淀兩次后真空干燥。^ = 5292g/mol，Mw/Mn = 1 · 44。
[0103] (3)制備兩親性四臂星型聚合物4-AS-PCL-P(PEGMA-c〇-MAEBA)
[0104] 取50mL干燥茄形瓶裝入攪拌子，烘烤5min干燥，然后稱取引發(fā)劑4-AS-PCL-Br (1 · 06g，0 · 2mmol)和CuBr2(4 · 47mg，0 · 02mmol)置于前形瓶中，用反口橡皮塞封口，抽真空-通氬氣三次。用注射器依次將溶劑甲苯（18mL)、單體PEGMA(6g，12mmolWPMAEBA(2.82g， 12mmol)、配體HMTETA(109yL，0.4mmol)加入瓶中，攪拌lOmin使催化劑配合物形成。將還原 劑5]1(0(31:)2(13(^1^，0.41]11]1〇1)溶于甲苯（21111^)，然后加入上述反應(yīng)瓶中，攪拌5111；[11后轉(zhuǎn)入60 °(：油浴中攪拌反應(yīng)48h。反應(yīng)完成后冷卻至室溫，加入40mL THF并攪拌使其溶解，然后用中 性氧化鋁柱子過濾除去催化劑（以THF作洗脫劑）。得到的反應(yīng)液濃縮后緩慢加入到十倍量 (300mL)冷乙醚中沉淀。45°C、35mb下真空干燥24h。產(chǎn)率98%，M n = 48744g/mol，MW/Mn = 1.570
[0105] 實(shí)施例5:兩親性四臂星形聚合物(4-AS-PCL-P(PEGMA-c〇-MAEBA))的制備(x:y:z = 20:5:5)
[0106] (1)制備含聚己內(nèi)酯聚合物4-AS-PCL
[0107]取50mL的干燥反應(yīng)瓶，放入攪拌子，然后將反應(yīng)瓶用酒精燈烘烤5min，將引發(fā)劑季 戊四醇（136mg，lmmol)加入反應(yīng)瓶中，用橡皮塞密封。抽真空-通氬氣三次，在氬氣保護(hù)下加 入單體e-CL(9.12g，SOmmol)，用液氮進(jìn)行三次冷凍-抽氣-升溫循環(huán)后，在氬氣保護(hù)下置于 90 °C油浴中加熱20min，加入Sn (Oct) 2 (22mg)，反應(yīng)48h后用液氮終止反應(yīng)。加入50mL THF溶 解聚合物，用500mL冷甲醇/水（1:1)沉淀，45 °C、35mb真空干燥。合成反應(yīng)式見公式(2)。利用 核磁、紅外和GPC對(duì)分子結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行分析，結(jié)果見圖3、圖4和圖5，M n = 9256g/mo 1，MW/Mn = 1·38〇
[0108] (2)制備大分子引發(fā)劑(4-AS-PCL-Br)
[0109] 取250mL三口燒瓶，加入攪拌子，稱取一定量的4-AS-PCL(3 · 70g，0 · 4mmol)加入反 應(yīng)瓶，加入溶劑THF(lOOmL)后通氬氣lOmin，密封燒瓶后將TEA( 3.36mL，19.2mmo 1)注入燒瓶 中，冰水浴冷卻至〇°C，然后用注射器將2-溴異丁酰溴(0.79mL，6.4mmol)逐滴加入燒瓶中。 在0°C反應(yīng)7h后升溫至室溫，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12h。將反應(yīng)液過氧化鋁層析柱除去季胺鹽，然后 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分溶劑，用500mL冷甲醇/水（1:1體積比）沉淀兩次后真空干燥。利用核 磁、GPC和紅外對(duì)分子結(jié)構(gòu)和組成進(jìn)行分析，見圖3、圖4和圖5，M n=9852g/mol，MW/Mn= 1.41。
[0110] (3)制備兩親性四臂星型聚合物4-AS-PCL-P(PEGMA-c〇-MAEBA)
[0111] 取50mL干燥茄形瓶裝入攪拌子，烘烤5min干燥，然后稱取引發(fā)劑4-AS-PCL-Br (1.97g，0.2mmol)和CuBr2(8.93mg，0.04mmol)置于前形瓶中，用反口橡皮塞封口，抽真空-通氬氣三次。用注射器依次將溶劑甲苯（18mL)、單體TOGMA (2g，4mmo 1)和MAEBA (0.93g， 4mmol)、配體HMTETA( 164yL，0.6mmol)加入瓶中，攪拌lOmin使催化劑配合物形成。將還原劑 Sn(0ct)2(130yL，0.4mmol)溶于甲苯（2mL)，然后加入上述反應(yīng)瓶中，攪拌5min后轉(zhuǎn)入90°C 油浴中攪拌反應(yīng)36h。反應(yīng)完成后冷卻至室溫，加入40mLTHF并攪拌使其溶解，然后用中性氧 化鋁柱子過濾除去催化劑（以THF作洗脫劑）。得到的反應(yīng)液濃縮后緩慢加入到十倍量 (300mL)冷乙醚中沉淀。45°C、35mb下真空干燥24h。產(chǎn)率98%，Mn=24336g/mol，Mw/M n = 1.37〇
[0112] 實(shí)施例6:四臂星形聚合物空白膠束的制備
[0113] 采用透析法制備聚合物膠束。將30mg聚合物加入30mL DMS0中，攪拌6h使其溶解后 轉(zhuǎn)入透析袋中，用去離子水(pH 7.4)透析24h除去DMS0,前12h每2h更換一次去離子水，隨后 每6h更換一次。透析液經(jīng)0.45mm過濾器過濾凍干后，得白色粉末狀固體即為空白聚合物膠 束。
[0114] 實(shí)施例7:四臂星型聚合物載藥非交聯(lián)膠束的制備
[0115] 30mg聚合物和5mg CPT加入30mL DMS0中，攪拌6h使其溶解后轉(zhuǎn)入透析袋中，用去 離子水(pH 7.4)透析24h除去DMS0，前12h每2h更換一次去離子水，隨后每6h更換一次。透析 液經(jīng)0.45_過濾器過濾凍干后，得白色粉末狀固體即為聚合物載藥非交聯(lián)膠束。
[0116] 實(shí)施例8:四臂星型聚合物載藥交聯(lián)膠束的制備
[0117]將實(shí)施例7得到的四臂星型聚合物載藥非交聯(lián)膠束溶液用醋酸調(diào)節(jié)pH至pH 6.5， 加入10mM苯胺催化劑，再加入小分子交聯(lián)劑DTTP(交聯(lián)劑/MAEBA摩爾比1:2)，室溫下攪拌 24h，再裝入透析袋中，用去離子水(pH 7.4)透析24h，前12h每2h更換一次去離子水，隨后每 6h更換一次。透析液經(jīng)0.45mm過濾器過濾凍干后，得白色粉末狀固體即為聚合物載藥交聯(lián) 膠束，反應(yīng)原理見圖13。
[0118] 采用動(dòng)態(tài)光散射法(DLS)測(cè)定載藥交聯(lián)膠束的粒徑、分布和zeta電位。載藥交聯(lián)膠 束的粒徑Dh為230nm(如圖8)，PDI為0.277， Zeta電位為-15.3mV。透射電鏡(TEM)測(cè)定載藥交 聯(lián)膠束的粒徑為90nm左右(如圖9)。采用紫外可見光譜法檢測(cè)載藥膠束，計(jì)算得到的載藥量 為7.2%，包封率為43.2%。
[0119] 實(shí)施例9:載藥膠束的體外釋放
[0120] CPT在不同pH及GSH濃度條件下的體外釋放曲線采用藥物溶出儀測(cè)試得到，釋放實(shí) 驗(yàn)中用二硫蘇糖醇(DTT)來替代GSH作為還原劑。具體步驟如下:稱取3mg實(shí)施例8制備的載 藥交聯(lián)膠束分散于5mL緩沖溶液中，即PBS(pH 7.4+0mM DTT)、PBS(pH 7.4+10mM DTT)、醋酸 緩沖液(pH 5.0+0mM DTT)、醋酸緩沖液(pH 5.0+10mM DTT)。分別將上述溶液轉(zhuǎn)入透析袋 中，并置于47mL上述對(duì)應(yīng)的緩沖液中，置于藥物溶出儀中，37°C，lOOrpm轉(zhuǎn)速下進(jìn)行體外釋 放實(shí)驗(yàn)，定時(shí)取樣4mL進(jìn)行紫外分析，并同時(shí)補(bǔ)加4mL新鮮緩沖液。用紫外分光光度法測(cè)定不 同時(shí)間釋放液中CPT濃度，繪制體外釋放曲線，如圖10所示。
[0121] 由圖10可知，在正常的生理環(huán)境(pH7.4)條件下，交聯(lián)膠束的藥物釋放速率非常 慢，l〇h累積釋放量?jī)H為12.5%，108h藥物累計(jì)釋放量?jī)H為27.2%。在弱酸性和較高DTT濃度 的腫瘤細(xì)胞內(nèi)微環(huán)境(pH 5.0+10mM DTT)中，由于交聯(lián)膠束的交聯(lián)結(jié)構(gòu)快速去交聯(lián)化，10h 內(nèi)藥物累計(jì)釋放量達(dá)到45.6%，108h藥物累計(jì)釋放量為71.5%。
[0122] 實(shí)施例10:細(xì)胞毒性測(cè)試
[0123]以HepG2細(xì)胞（購自American Type Culture Collection(ATCC))為例，取96孔平 底組織培養(yǎng)板，將四周孔板中分別加入100yL培養(yǎng)基作為空白組，其他孔中以1 X104細(xì)胞/ 孔的細(xì)胞濃度將1 〇〇yL細(xì)胞培養(yǎng)基接種于孔板中，將96孔板放置到37 °C，飽和濕度，5 %⑶2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，在此過程中細(xì)胞粘附在96孔板的底部并開始恢復(fù)增長。
[0124] 隨后將空白膠束(實(shí)施例6產(chǎn)物）、CPT載藥非交聯(lián)膠束(實(shí)施例7產(chǎn)物）、CPT載藥交 聯(lián)膠束(實(shí)施例8產(chǎn)物）以及游離CPT用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋成不同濃度梯度，在吸去96孔板中從 第2列至第11列所有孔中的細(xì)胞培養(yǎng)基后，分別加入100yL以上不同濃度溶液，作為實(shí)驗(yàn)組， 在第11列中加入新鮮的細(xì)胞培養(yǎng)液l〇〇yL，作為空白對(duì)照組。每個(gè)濃度平行六次。
[0125] 培養(yǎng)48h后，吸去所有含有細(xì)胞的孔中的上層清液，加入200yL PBS溶液潤洗細(xì)胞， 然后吸去PBS。從第2列到第11列，分別向每個(gè)孔中加入20yLMTT溶液和180yL新鮮培養(yǎng)基，再 將96孔板放置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h。
[0126] 吸走未還原的MTT溶液和培養(yǎng)基，每個(gè)孔用200yL的roS洗一遍，并吸走roS。從第2 列到第11列，向每個(gè)孔中加入200yL DMS0，溶解MTT結(jié)晶。將96孔板放置于37°C搖床中振蕩 15min，然后利用酶標(biāo)儀測(cè)定570nm處每個(gè)孔的吸光度0D570。細(xì)胞活性的計(jì)算公式如下：
[0127] Cell viability( % ) = (0Dtest/0Dc〇ntr〇i) X 100% )
[0128] 圖11是空白非交聯(lián)膠束和空白交聯(lián)膠束的細(xì)胞毒性測(cè)試結(jié)果。當(dāng)空白膠束的濃度 從0增大到400mg/L時(shí)，細(xì)胞存活率仍分別有84%和86 %，表明聚合物空白膠束對(duì)HepG2細(xì)胞 無明顯細(xì)胞毒性，交聯(lián)過程對(duì)空白膠束的細(xì)胞毒性也沒有顯著影響。
[0129] 圖12是喜樹堿載藥非交聯(lián)膠束、喜樹堿載藥交聯(lián)膠束和游離喜樹堿的細(xì)胞毒性測(cè) 試結(jié)果。低濃度(0. lmg/L)的載藥非交聯(lián)膠束和載藥交聯(lián)膠束就有癌細(xì)胞致死效果;在高濃 度(20mg/L)時(shí)，喜樹堿載藥膠束和游離喜樹堿細(xì)胞毒性相近，有超過80 %的HepG2細(xì)胞被殺 死，說明被載喜樹堿仍具有良好的抗癌活性。
[0130] 上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的 限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化， 均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種兩親性四臂星型聚合物，其特征在于化學(xué)命名為[聚己內(nèi)醋-b-聚（甲基丙締酸 單甲氧基聚乙二醇醋-C0-(對(duì)-(甲基丙締酸氧基乙氧基)苯甲醒））]4,具體如下式(一)所示 結(jié)構(gòu)：其中，x= 10~30，y = 5~20, Z = 5~20。2. -種權(quán)利要求1所述的兩親性四臂星型聚合物的制備方法，其特征在于包括W下步 驟： (1) 制備醒基官能化單體對(duì)-(甲基丙締氧基乙氧基）苯甲醒:將對(duì)-(2-徑基乙氧基）苯 甲醒和Ξ乙胺溶于溶劑中，冰浴條件下加入甲基丙締酷氯，冰浴反應(yīng)后恢復(fù)室溫繼續(xù)反應(yīng)， 得到醒基官能化單體對(duì)-(甲基丙締氧基乙氧基)苯甲醒； (2) 制備含聚己內(nèi)醋聚合物:將季戊四醇、ε-己內(nèi)醋和催化劑混合，加熱反應(yīng)，得到聚合 物； (3) 制備大分子引發(fā)劑:將步驟(2)所得的聚合物溶于溶劑中，冰浴條件下加入2-漠異 下酷漠和Ξ乙胺后，冰浴反應(yīng)結(jié)束后恢復(fù)室溫繼續(xù)反應(yīng)，得到大分子引發(fā)劑； (4) 制備兩親性四臂星型聚合物:將步驟(3)所制得的大分子引發(fā)劑、步驟(1)所制得的 醒基官能化單體對(duì)-(甲基丙締氧基乙氧基）苯甲醒、甲基丙締酸單甲氧基聚乙二醇醋和催 化劑溶于溶劑中，加入配體1，1，4,7，10,10-六甲基Ξ乙締四胺，混合均勻后加入還原劑加 熱反應(yīng)，得到兩親性四臂星型聚合物。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的兩親性四臂星型聚合物的制備方法，其特征在于： 所述步驟(1)中反應(yīng)物的摩爾份數(shù)配方如下： 對(duì)-(2-徑基乙氧基)苯甲醒1份 Ξ乙胺 1~3份 甲基丙締酷氯 1~3份； 所述步驟(2)中反應(yīng)物的摩爾份數(shù)配方如下： 季戊四醇 1份 ε-己內(nèi)醋 40~80份 催化劑 0.03~0.09份； 所述步驟(3)中反應(yīng)物的摩爾份數(shù)配方如下： 聚合物 1份 Ξ乙胺 16~48份 2-漠異下酷漠 16~32份； 所述步驟(4)中反應(yīng)物的摩爾份數(shù)配方如下： 大分子引發(fā)劑 1份 對(duì)-巧基兩婦氧基乙氧萄苯甲酸 20~60份 甲基兩帰酸單甲氧基聚乙二醇酷 20~60份 1，1，4, 7, 10, 10-六甲基蘭藝帰圃胺 2~3份 催化劑 2~3憤 還原奔J 0.1~化2憤。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的兩親性四臂星型聚合物的制備方法，其特征在于：步驟（1)中 所述的冰浴反應(yīng)的時(shí)間為反應(yīng)1~化，所述室溫繼續(xù)反應(yīng)的時(shí)間為反應(yīng)12~24h; 步驟(2)中所述的加熱反應(yīng)指加熱到90~130°C反應(yīng)16~48h; 步驟(3)中所述的冰浴反應(yīng)的時(shí)間為反應(yīng)3~7h，所述室溫繼續(xù)反應(yīng)的時(shí)間為反應(yīng)12~ 36h; 步驟(4)中所述的加熱反應(yīng)指加熱到60~90 °C反應(yīng)24~48h。5. -種聚合物膠束系統(tǒng)，其特征在于通過將權(quán)利要求1所述的兩親性四臂星型聚合物 溶于溶劑中得到。6. -種基于權(quán)利要求5所述的聚合物膠束系統(tǒng)的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)，其特征在于通過將權(quán)利要求1所述的 兩親性四臂星型聚合物溶于溶劑中，調(diào)節(jié)pH 6.5,加入催化劑，即可獲得殼層可逆交聯(lián)膠束 系統(tǒng)。8. 權(quán)利要求6所述的殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)在負(fù)載水難溶性藥物中的應(yīng)用。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于包括W下步驟:分別將水難溶性藥物和權(quán)利 要求1所述的兩親性四臂星型聚合物溶于同種溶劑中，攬拌，待聚合物完全溶解后，將兩溶 液混合，攬拌6~化，透析，調(diào)節(jié)pH至6.5，加入催化劑，再加入交聯(lián)劑，攬拌反應(yīng)，透析，得到 負(fù)載水難溶性藥物殼層可逆交聯(lián)膠束系統(tǒng)。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于:所述的交聯(lián)劑為3,3'-二硫代雙(丙酸二 酷阱)。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK106084156SQ201610397053
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月7日 公開號(hào)201610397053.0, CN 106084156 A, CN 106084156A, CN 201610397053, CN-A-106084156, CN106084156 A, CN106084156A, CN201610397053, CN201610397053.0
【發(fā)明人】章莉娟, 熊迪, 姚娜, 鐘曼麗
【申請(qǐng)人】華南理工大學(xué)