一種基于油茶枝粉的蜜環(huán)菌培養(yǎng)基以及蜜環(huán)菌液體菌種制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種基于油茶枝粉的蜜環(huán)菌培養(yǎng)基，包括以下重量份組分：油茶枝粉、麩皮、可溶性淀粉、花椒籽提取物、納米級電氣石粉、細(xì)菌納米纖維素等。本發(fā)明采用主料油茶枝粉、麩皮、黃豆粉、可溶性淀粉等為培養(yǎng)基制備蜜環(huán)菌液體菌種，實(shí)現(xiàn)了油茶枝粉在蜜環(huán)菌液體菌種培養(yǎng)中的營養(yǎng)，有利于增強(qiáng)蜜環(huán)菌液體菌種的抗氧化性；加入了納米細(xì)菌纖維素，通過納米細(xì)菌纖維素改善液體培養(yǎng)基的均勻性、穩(wěn)定性，為液體菌種菌絲球的生長發(fā)育提供了良好的空間，使得菌絲球分布均勻，大小合適，可以滿足移栽需要，而無需進(jìn)一步的機(jī)械破碎；通過采用納米細(xì)菌纖維素對具有抑制雜菌功效的花椒提取的包埋處理，為菌絲球向子實(shí)體轉(zhuǎn)化替換了良好的生存空間。
【專利說明】
一種基于油茶枝粉的蜜環(huán)菌培養(yǎng)基以及蜜環(huán)菌液體菌種制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及液體菌種技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于油茶枝粉的蜜環(huán)菌培養(yǎng)基以及蜜環(huán)菌液體菌種制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蜜環(huán)菌生產(chǎn)過程中，液體菌種具有固體菌種所不可比擬的優(yōu)勢，液體菌種具有生產(chǎn)周期短，菌齡短而一致，純度高、活力強(qiáng)，接種簡便快捷，易實(shí)行工廠化、規(guī)?；?biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)在，越來越多的人都在研究和使用液體菌種，而液體菌種的推廣和使用也是實(shí)現(xiàn)食用菌工廠化、規(guī)模化、標(biāo)準(zhǔn)化的必然趨勢。但是液體菌種也存在著自身的缺陷和不足:
1、液體菌種萌發(fā)點(diǎn)多生長速度快，但是穿透力不強(qiáng)，培養(yǎng)料過粗菌絲不易吃透培養(yǎng)料，菌絲將沿著培養(yǎng)料表面快速生長，培養(yǎng)料內(nèi)部菌絲量很少，嚴(yán)重影響了菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的問題；
2、常規(guī)的液體菌種雖然解決了固體菌種存在的一些問題，能明顯縮短栽培周期、增強(qiáng)菌種活力和抗逆性、降低菌種污染率、使得菌種質(zhì)量整齊度提高，但仍存在例如發(fā)酵得到的液體菌種中菌球的密度、大小、均勻度等物理特性不是很理想等不足，如果用攪拌剪切的方法將菌球打碎，得到的菌種均勻度會更理想，但是，高速攪拌粉碎和打漿的剪切力對菌種傷害極大，對菌種整體的質(zhì)量影響較為嚴(yán)重。開發(fā)分布均勻且具有更小粒徑菌絲球的高質(zhì)量的液體菌種具有重要意義。公開號CN105309194A《食用菌微粒液體菌種生產(chǎn)新技術(shù)》提供了一種菌絲球粒徑在0.5mm的食用菌微粒液體菌種，采用的增加食用菌液體菌種培養(yǎng)液通氣量，使通氣量在1: 0.6—0.9V/V.min為適宜，同時在通氣發(fā)酵罐內(nèi)裝置攪拌器使培養(yǎng)液渦流運(yùn)動延長氣泡的運(yùn)動路線的技術(shù)操作方法，該生產(chǎn)微粒液體菌種的方法是從生產(chǎn)工藝上進(jìn)行改進(jìn)，并沒有液體菌種培養(yǎng)基方面進(jìn)行改進(jìn)，實(shí)施起來技術(shù)難度要求高;公開號CN105130516A《分子級生物培養(yǎng)基制作方法》提到了分子級生物培養(yǎng)基營養(yǎng)成分可以快速全面的被吸收，促進(jìn)液體菌種的生長，但是并沒有提到分子級生物培養(yǎng)基對液體菌種菌絲球直徑大小的影響。發(fā)展一種基于液體菌種培養(yǎng)基原材料成分改進(jìn)液體菌種菌絲球直徑改善食用菌菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的技術(shù)，具有重要的意義。
[0003]細(xì)菌納米纖維素是自然界的豐富的可再生產(chǎn)物之一，細(xì)菌納米纖維素是纖維素的物理最小結(jié)構(gòu)單元，是指直徑1-1OOnm之間的纖維，細(xì)菌納米纖維素質(zhì)輕，生物相容性好，可降解、可再生，反應(yīng)活性高，且具有楊氏模量高，聚合度高，潔凈度高，強(qiáng)度高，比表面積大等優(yōu)勢。將細(xì)菌納米纖維素作作為食用菌液體菌種培養(yǎng)基原材料，對食用菌液體菌種的菌絲球分布以及直徑具有一定的影響，進(jìn)而起到改善食用菌菌種質(zhì)量的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的就是為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷，提供一種基于油茶枝粉的蜜環(huán)菌培養(yǎng)基以及蜜環(huán)菌液體菌種制備方法。
[0005]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的: 一種基于油茶枝粉的蜜環(huán)菌培養(yǎng)基，包括以下重量份組分:油茶枝粉25-26、麩皮38-40、可溶性淀粉27-28、葡萄糖9-10、麥芽糖8-9、胰蛋白胨11-12、酵母膏9-10、芋酸4-5、胺鮮酯1-1.2、乙酸鈉1.2-1.3、碳酰二胺0.9-1、麥精1.2-1.3、花椒籽提取物2.2-2.3、七水硫酸鎂1.2-1.3、石膏0.6-0.7、磷酸二氫鉀0.5-0.6、過磷酸鈣0.7-0.8、納米級電氣石粉5.6-6、細(xì)菌納米纖維素6.2-6.5、適量的水。
[0006]—種采用上述的培養(yǎng)基制備蜜環(huán)菌液體菌種的方法，包括以下步驟:
(I )、將納米級電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用;將七水硫酸鎂、石膏、磷酸二氫鉀、過磷酸鈣的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將葡萄糖、麥芽糖、胰蛋白胨、酵母膏、胺鮮酯、乙酸鈉、碳酰二胺、麥精的總量和無菌水按20g/L混合攪拌溶解得溶液二;將油茶枝粉、麩皮、芋酸一起放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮3h，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液、可溶性淀粉的總量和無菌水按300g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98°C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶lOmin，得溶液三;將濾渣和一半的納米細(xì)菌纖維素混合攪拌均勻放入超微納米粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎處理20min，之后采用高溫膨化機(jī)處理15min得改性超微復(fù)合粉備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對該營養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；
(3)、將蜜環(huán)菌母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為pH5.4-5.5、接種量14%、溫度26-28°C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min、培養(yǎng)24-25h，得蜜環(huán)菌液體菌種一；
(4)、將剩余一半細(xì)菌納米纖維素、花椒籽提取物以及總重量I倍的無菌水混合攪拌均勻之后，采用噴霧干燥技術(shù)進(jìn)行包埋處理，得具有抑制雜菌功效的細(xì)菌納米纖維素備用;將剩余一半的液體培養(yǎng)基、具有抑制雜菌功效的細(xì)菌納米纖維素混合均勻，之后加入改性超微復(fù)合粉以及總重量3倍的無菌水，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的蜜環(huán)菌液體菌種一按50%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度24-25°C，搖床轉(zhuǎn)速190r/min、并鼓入無菌氧氣，培養(yǎng)50-55h即得。
[0007]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
本發(fā)明采用主料油茶枝粉、麩皮、黃豆粉、可溶性淀粉、葡萄糖、麥芽糖、胰蛋白胨配合營養(yǎng)物質(zhì)碳酰二胺、芋酸、酵母膏、胺鮮酯、花椒籽提取物、乙酸鈉、麥精等為培養(yǎng)基制備蜜環(huán)菌液體菌種，實(shí)現(xiàn)了油茶枝粉在蜜環(huán)菌液體菌種培養(yǎng)中的營養(yǎng)，有利于增強(qiáng)蜜環(huán)菌液體菌種的抗氧化性;采用的原材料價格成本低，可以實(shí)現(xiàn)了蜜環(huán)菌液體菌種的經(jīng)濟(jì)獲?。煌瑫r，在培養(yǎng)基的制備過程中，加入了納米細(xì)菌纖維素，通過納米細(xì)菌纖維素改善液體培養(yǎng)基的均勻性、穩(wěn)定性，為液體菌種菌絲球的生長發(fā)育提供了良好的空間，使得菌絲球分布均勻，大小合適，可以滿足移栽需要，而無需進(jìn)一步的機(jī)械破碎;另外，培養(yǎng)基中加入了納米電氣石粉，通過納米電氣石粉的輔助作用，可以耗能較少的實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)基的滅菌;再者;通過采用納米細(xì)菌纖維素對具有抑制雜菌功效的花椒提取的包埋處理，為菌絲球向子實(shí)體轉(zhuǎn)化替換了良好的生存空間。
【具體實(shí)施方式】
[0008]一種基于油茶枝粉的蜜環(huán)菌培養(yǎng)基，包括以下重量份組分:油茶枝粉25、麩皮38、可溶性淀粉27、葡萄糖9、麥芽糖8、胰蛋白胨11、酵母膏9、芋酸4、胺鮮酯1、乙酸鈉1.2、碳酰二胺0.9、麥精1.2、花椒籽提取物2.2、七水硫酸鎂1.2、石膏0.6、磷酸二氫鉀0.5、過磷酸鈣
0.7、納米級電氣石粉5.6、細(xì)菌納米纖維素6.2、適量的水。
[0009]—種采用上述的培養(yǎng)基制備蜜環(huán)菌液體菌種的方法，包括以下步驟:
(I )、將納米級電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用;將七水硫酸鎂、石膏、磷酸二氫鉀、過磷酸鈣的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將葡萄糖、麥芽糖、胰蛋白胨、酵母膏、胺鮮酯、乙酸鈉、碳酰二胺、麥精的總量和無菌水按20g/L混合攪拌溶解得溶液二;將油茶枝粉、麩皮、芋酸一起放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮3h，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液、可溶性淀粉的總量和無菌水按300g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98°C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶lOmin，得溶液三;將濾渣和一半的納米細(xì)菌纖維素混合攪拌均勻放入超微納米粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎處理20min，之后采用高溫膨化機(jī)處理15min得改性超微復(fù)合粉備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對該營養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；
(3)、將蜜環(huán)菌母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為pH5.4、接種量14%、溫度26°C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min、培養(yǎng)24h，得蜜環(huán)菌液體菌種一；
(4)、將剩余一半細(xì)菌納米纖維素、花椒籽提取物以及總重量I倍的無菌水混合攪拌均勻之后，采用噴霧干燥技術(shù)進(jìn)行包埋處理，得具有抑制雜菌功效的細(xì)菌納米纖維素備用;將剩余一半的液體培養(yǎng)基、具有抑制雜菌功效的細(xì)菌納米纖維素混合均勻，之后加入改性超微復(fù)合粉以及總重量3倍的無菌水，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的蜜環(huán)菌液體菌種一按50%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度24°C，搖床轉(zhuǎn)速190r/min、并鼓入無菌氧氣，培養(yǎng)50h即得。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種基于油茶枝粉的蜜環(huán)菌培養(yǎng)基，其特征在于，包括以下重量份組分:油茶枝粉25-26、麩皮38-40、可溶性淀粉27-28、葡萄糖9_10、麥芽糖8_9、胰蛋白胨11_12、酵母膏9-10、芋酸4-5、胺鮮酯1-1.2、乙酸鈉1.2-1.3、碳酰二胺0.9-1、麥精1.2-1.3、花椒籽提取物2.2-2.3、七水硫酸鎂1.2-1.3、石膏0.6-0.7、磷酸二氫鉀0.5-0.6、過磷酸鈣0.7-0.8、納米級電氣石粉5.6-6、細(xì)菌納米纖維素6.2-6.5、適量的水。2.—種采用權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基制備蜜環(huán)菌液體菌種的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)、將納米級電氣石粉和水按照0.1g/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用；將七水硫酸鎂、石膏、磷酸二氫鉀、過磷酸鈣的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將葡萄糖、麥芽糖、胰蛋白胨、酵母膏、胺鮮酯、乙酸鈉、碳酰二胺、麥精的總量和無菌水按20g/L混合攪拌溶解得溶液二;將油茶枝粉、麩皮、芋酸一起放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮3h，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液、可溶性淀粉的總量和無菌水按300g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98°C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶lOmin，得溶液三;將濾渣和一半的納米細(xì)菌纖維素混合攪拌均勻放入超微納米粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎處理20min，之后采用高溫膨化機(jī)處理15min得改性超微復(fù)合粉備用； (2)、將溶液三保持20°C、溶液二保持25°C、溶液一保持30°C，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對該營養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用； (3)、將蜜環(huán)菌母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為pH5.4-5.5、接種量14%、溫度26-28°C、搖床轉(zhuǎn)速190r/min、培養(yǎng)24-25h，得蜜環(huán)菌液體菌種一； (4)、將剩余一半細(xì)菌納米纖維素、花椒籽提取物以及總重量I倍的無菌水混合攪拌均勻之后，采用噴霧干燥技術(shù)進(jìn)行包埋處理，得具有抑制雜菌功效的細(xì)菌納米纖維素備用;將剩余一半的液體培養(yǎng)基、具有抑制雜菌功效的細(xì)菌納米纖維素混合均勻，之后加入改性超微復(fù)合粉以及總重量3倍的無菌水，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的蜜環(huán)菌液體菌種一按50%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度24-25°C，搖床轉(zhuǎn)速190r/min、并鼓入無菌氧氣，培養(yǎng)50-55h即得。
【文檔編號】C12N1/14GK106085882SQ201610552286
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年7月14日
【發(fā)明人】儲榮生
【申請人】安徽天明生態(tài)林農(nóng)科技開發(fā)有限公司