體液增菌培養(yǎng)瓶的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種體液增菌培養(yǎng)瓶，包括瓶體、瓶塞、瓶蓋、傳感器、液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶瓶體為圓柱形，傳感器貼于瓶底內部底部，瓶塞和瓶蓋起到密封和機械保護作用，體液增菌培養(yǎng)瓶的密封空間為負壓的無菌環(huán)境，體液增菌培養(yǎng)瓶的瓶體為雙層塑料瓶體，一層為具有強度支撐的塑料材料，另一層為具有氣體屏障作用的塑料材料。雙層的塑料材質解決易破碎的安全風險、透氣的影響。傳感器中的高分子硅橡膠材料在高溫條件下固化，能大大縮短傳感器的制備時間和固化時間，進而縮短整個生產過程的時間。遮光劑使傳感器不透明，采集光信號不受到干擾，進而提高自動化檢測設備的靈敏度。
【專利說明】
體液増菌培養(yǎng)瓶
技術領域
[0001] 本實用新型涉及臨床微生物檢測技術領域，具體說，是一種體液增菌培養(yǎng)瓶。
【背景技術】
[0002] 體液培養(yǎng)是用于檢測人體樣本中有無微生物存在的一種微生物學檢測方法，包括 血培養(yǎng)、痰培養(yǎng)、尿培養(yǎng)以及其他體液(胸水、腹水、腦脊液等)培養(yǎng)。對于快速檢測臨床上嚴 重危及患者生命的敗血癥、菌血癥，患者體液中是否有微生物生長以明確診斷有十分重要 的作用，是臨床有效治療的關鍵。所以體液或類似物中致病微生物的檢測應當在盡可能短 的時間內進行。近年來，隨著科技進步，微生物學、計算機學和工程學的結合，已經創(chuàng)造出許 多自動化的培養(yǎng)系統(tǒng)。
[0003] 自動化的體液微生物培養(yǎng)一般包括兩部分，自動化檢測設備和體液增菌培養(yǎng)瓶。 自動化檢測設備提供特定培養(yǎng)環(huán)境的孵育箱和檢測系統(tǒng)，體液增菌培養(yǎng)基提供微生物的生 長環(huán)境和供檢測的傳感器。將體液樣本接種到體液增菌培養(yǎng)瓶內，在自動化體液培養(yǎng)儀中 進行微生物培養(yǎng)，檢測系統(tǒng)通過體液增菌培養(yǎng)瓶中傳感器產生的變化，自動檢測，給出培養(yǎng) 結果，提供給臨床診斷的依據。
[0004] 現有的培養(yǎng)瓶多為血液培養(yǎng)瓶，專利號2004200480078中描述一種血液培養(yǎng)瓶，該 瓶不具有負壓，不易于臨床樣本的注入，使用不慎時會造成污染，并且使用玻璃瓶體，具有 安全風險，不慎跌落時會導致破碎，使使用者暴露在碎玻璃，并有感染的可能。另一種使用 塑料材質，例如聚碳酸酯，這種材料的瓶體可以解決安全風險，但是其具有透氣性，會導致 培養(yǎng)瓶內的負壓變化，在有效使用期間不能保證順利注入樣本。另一方面如果外界氣體進 入到培養(yǎng)瓶內，會導致培養(yǎng)瓶內內置氣體成分改變，而影響微生物的生長，例如厭氧培養(yǎng)瓶 內進入空氣之后，會導致厭氧菌無法生長，而造成臨床誤判。
[0005] 培養(yǎng)瓶底部的傳感器由高分子聚合物和指示劑組成，現有技術中傳感器的透過性 由分子大小決定，如專利號2012105834227中描述的，高分子半透膜能阻擋分子量300以上 的物質，實際液體培養(yǎng)基中存在小分子，水、氫離子等，這些小分子如果透過半透膜都會對 傳感器產生影響，引起顏色變化，而本質不是微生物生長產生的變化。并且依據現有技術中 描述的傳感器具有透光性，而自動化檢測設備使用的檢測原理為光電檢測原理，采集光信 號，然后轉化為電信號傳輸到控制系統(tǒng)中，此時如果傳感器具有透光性，將影響光信號的采 集。
[0006] 另外，在現有技術中，傳感器的制備和固化所耗費的時間都較長，一般在24小時-48小時，嚴重影響了生產效率。 【實用新型內容】
[0007] 本實用新型所要解決的技術問題是，提供一種雙層的塑料材質的體液增菌培養(yǎng) 瓶，不易破碎，不透氣性，透明，熱穩(wěn)定性好，制造工藝簡單，減少生產過程步驟，降低生產成 本。
[0008] 為了解決上述技術問題，本實用新型采用的技術方案是:一種體液增菌培養(yǎng)瓶，包 括瓶體、瓶塞、瓶蓋、傳感器、液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶瓶體為圓柱形，傳感器貼于瓶底內部底部， 瓶塞和瓶蓋起到密封和機械保護作用，體液增菌培養(yǎng)瓶的密封空間為負壓的無菌環(huán)境，體 液增菌培養(yǎng)瓶的瓶體為雙層塑料瓶體，一層為具有強度支撐的塑料材料，另一層為具有氣 體屏障作用的塑料材料。
[0009] 所述具有強度支撐的塑料材料為尼龍、聚碳酸酯PC或聚丙烯PP，所述雙層瓶體的 外層或內層為具有氣體屏障作用的塑料材料，所述具有氣體屏障作用的塑料材料為聚萘二 甲酸乙二醇酯、聚對苯二甲酸乙二酯、聚酯或聚氯乙烯。
[0010] 所述體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器為選擇性半透膜，其能透過非極性分子而阻擋極性 分子，保證二氧化碳能夠透過半透膜而阻擋培養(yǎng)基中的其他分子和/或離子。
[0011] 所述體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器為高分子硅橡膠材料聚甲基硅氧烷及其固化劑。
[0012] 所述體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器含有遮光劑、酸堿指示劑和熒光指示劑，酸堿指示 劑能根據培養(yǎng)基中微生物生長產生的二氧化碳而發(fā)生顏色變化，熒光指示劑指示劑能根據 培養(yǎng)基中微生物生長產生的二氧化碳而發(fā)生熒光反應。
[0013] 所述的酸堿指示劑為溴百里酚藍、溴甲酚紫、溴甲酚綠或二甲苯酚藍;所述熒光指 示劑為熒光素、副玫瑰紅、磺基羅丹明B、羅丹明B、酸性品紅、茜素紅或酸性紅;所述遮光劑 為鋅白、鈦白、鋅鋇白或鈦鋇白。
[0014]所述傳感器材料配方為： 高分子硅橡膠材料 7 0%-9 0% 高分子娃橡膠材料的固化剣 7%~9% 酸堿指示劑 0/1%-1賴
[0015] 遮光劑 1%-9% 熒光指示劑 ：0/1%-1賴 其他 1%-9%
[0016] 以上百分比為體積百分比，其中酸堿指示劑為質量百分比濃度0.1%-10%的水溶 液，遮光劑為質量百分比濃度10 %-80 %的懸濁水溶液，熒光指示劑為質量百分比濃度0.1-10 %的水溶液，其他成分為水和/或乙醇。
[0017] 優(yōu)選，所述傳感器材料配方為： Sylgard 184硅橡膠基本組分 70%-9_ Sylgard 184石圭橡股的固化刻 7%-9% 溴百里酚藍 0. 1?/。-10%
[0018] 辭白 0. 羅丹明 B 0. 1 ?/〇-!0% 其他 1%-9%
[0019] 以上百分比為體積百分比，其中溴百里酚藍為質量百分比濃度〇.1%-1〇%的溴百 里酚藍水溶液，鋅白為質量百分比濃度10 % -80 %的鋅白懸濁水溶液，羅丹明B為質量百分 比濃度0.1 -10 %的羅丹明B水溶液，其他成分為水和/或乙醇。
[0020] 所述液體培養(yǎng)基包括胰酶大豆肉湯、腦心浸液、酵母提取物、糖類，并含有對微生 物起修復作用的維生素 B族和/或維生素 K族和/或維生素 E族。
[0021] 所述液體培養(yǎng)基還包括促進厭氧微生物生長的枸櫞酸鈉、硫乙醇酸鈉、檸檬酸鈉、 檸檬酸鐵、亞硫酸鈉、L-半胱氨酸鹽酸鹽中的一種或多種;包括減少樣本中其他物質干擾， 促進微生物生長的乙二胺四乙酸鹽、對氨基苯甲酸、聚茴香磺酸鈉、葡萄糖氧化酶、氯化血 紅素中的一種或多種。
[0022] 所述液體培養(yǎng)基中添加有質量百分比2%_20%的吸附樹脂，吸附樹脂為一種或多 種非離子吸附樹脂和陽離子交換樹脂，以減弱樣本中抗生素對樣本培養(yǎng)的干擾。
[0023] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的內部密閉空間含有內置氣體，所述的內置氣體包括氧 氣、氮氣、二氧化碳、氫氣、空氣中的一種或多種氣體。
[0024] -種體液增菌培養(yǎng)瓶的制備方法，包括以下步驟：
[0025] (1)雙層培養(yǎng)瓶的制備：先形成雙層型坯，再進行吹塑，吹塑的溫度在25攝氏度到 150攝氏度；
[0026] (2)傳感器材料制備:將熒光指示劑和酸堿指示劑用純化水溶解，遮光劑用純化水 配制成懸濁水溶液，按照比例混合后，加入含有鉑系催化劑的硅橡膠材料、固化劑，在真空 條件下攪拌脫泡，攪拌均勻的同時完成脫泡工作；
[0027] (3)傳感器添加及固化:使用均勻分裝設備將傳感器材料引入到瓶體內，在底部鋪 平，形成2-10_厚度的傳感器;將引入傳感器材料的瓶體在溫度45-85Γ環(huán)境下固化，在1-2 小時內完成固化；
[0028] (4)培養(yǎng)基制備：將液體培養(yǎng)基組分按比例添加到純化水中，溶解，攪拌均勻，除 菌；
[0029] (5)灌裝:將滅菌的液體培養(yǎng)基和滅菌的吸附樹脂通過灌裝-加塞-壓蓋機灌裝到 含有傳感器的瓶體內；
[0030] (6)密封:將滅菌的膠塞附著到瓶口上方，通過灌裝-加塞-壓蓋機填充氣體，并形 成真空，然后將膠塞壓實，最后通過灌裝-加塞-壓蓋機將鋁塑蓋附著到瓶口上方，然后壓 實；
[0031] (7)滅菌:將已密封好、各組件裝置好的培養(yǎng)瓶進行輻照滅菌，最終形成密封的無 菌的體液增菌培養(yǎng)瓶產品。
[0032]本實用新型的有益效果是：
[0033] 1、提供一種雙層的塑料材質的培養(yǎng)瓶瓶體，同時解決易破碎的安全風險、透氣的 影響內置氣體成分和內部負壓的風險、工藝復雜，造價高的風險。
[0034] 2、提供一種基于酸堿指示劑和熒光指示劑的傳感器，同時實現傳感器顏色變化和 熒光反應的檢測方法，解決依靠酸堿指示劑顏色變化容易產生誤報結果的風險，和熒光指 示劑不能進行人工判讀且自動檢測設備成本高的缺點，提高整個檢測系統(tǒng)的靈敏度和準確 率。
[0035] 3、所使用的體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器為選擇性半透膜，其能透過非極性分子而阻 擋極性分子，保證二氧化碳能夠透過半透膜而阻擋培養(yǎng)基中的其他分子和/或離子，使傳感 器的顏色變化只由樣本中微生物生長產生的二氧化碳的濃度引起，而免除其他離子和/或 分子的干擾，進而提高設備檢測的準確率。
[0036] 4、所用的傳感器中的高分子硅橡膠材料包括聚甲基硅氧烷、固化劑、鉑系催化劑， 并在高溫條件下固化，能大大縮短傳感器的制備時間和固化時間，進而縮短整個生產過程 的時間。
[0037] 5、所用的傳感器中的遮光劑包括鋅白、鈦白、鋅鋇白、鈦鋇白，能起到遮光作用，使 傳感器不透明，采集光信號不受到干擾，進而提高自動化檢測設備的靈敏度。
[0038] 6、所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的液體培養(yǎng)基中添加對微生物起修復作用的維生素 B族 和/或維生素 K族和/或維生素 E族，能使樣本中受到損傷的微生物細胞(例如血液樣本中含 有抗生素而使可能存在的微生物受到損傷)得到修復，增加檢出幾率，避免臨床的漏檢而延 誤患者病情。
[0039] 7、所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的液體培養(yǎng)基中添加促進厭氧微生物生長的枸櫞酸鈉、 硫乙醇酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鐵、亞硫酸鈉、L-半胱氨酸鹽酸鹽中的一種或多種，對液體培 養(yǎng)基中或樣本中引入的氧化性物質中和，保證厭氧微生物生長的厭氧環(huán)境。增加厭氧菌的 尤其是專性厭氧菌的檢出幾率，避免臨床的漏檢而延誤患者病情。
[0040] 8、提供一種簡單的制造工藝，采用最終輻照滅菌，降低生產過程中對環(huán)境的潔凈 要求，減少生產過程步驟，降低生產成本。
【附圖說明】
[0041 ]圖1體液增菌培養(yǎng)瓶結構示意圖。
[0042] 圖2體液增菌培養(yǎng)瓶的生產工藝過程。
【具體實施方式】
[0043] 下面結合附圖和【具體實施方式】對本實用新型作進一步詳細說明：
[0044] 如圖1和2所示，本實用新型的體液增菌培養(yǎng)瓶，包括瓶體1、瓶塞3、瓶蓋2、傳感器 6、液體培養(yǎng)基5;其中所述的培養(yǎng)瓶瓶體為圓柱形，傳感器6貼于瓶底內部底部，瓶塞3和瓶 蓋2起到密封和機械保護作用，培養(yǎng)瓶內部為無菌環(huán)境。
[0045] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的瓶體1為雙層塑料瓶體，所述雙層瓶體的內層或外層為 具有強度支撐的塑料材料，例如尼龍、聚碳酸酯PC或聚丙烯PP，所述雙層瓶體的外層或內層 為具有氣體屏障作用的塑料材料，例如聚萘二甲酸乙二醇酯、聚對苯二甲酸乙二酯、聚酯或 聚氯乙稀。
[0046] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的密封空間為負壓；
[0047] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的瓶塞3為彈性的丁基膠塞，與瓶口緊密貼合，起到密封作 用；
[0048] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的瓶蓋2為鋁塑蓋，以確保瓶塞不會掉落和污染，使用時表 層的塑料蓋8可去掉，便于操作。
[0049] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器6為選擇性半透膜，其能透過非極性分子而阻擋 極性分子，保證二氧化碳能夠透過半透膜而阻擋培養(yǎng)基中的其他分子和/或離子。
[0050] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器使用高分子硅橡膠材料。
[0051] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器含有遮光劑。
[0052] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器含有酸堿指示劑，該指示劑能根據培養(yǎng)基中微生 物生長產生的二氧化碳而發(fā)生顏色變化。
[0053]所述的酸堿指示劑包括溴百里酚藍、溴甲酚紫、溴甲酚綠、二甲苯酚藍等。
[0054]所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器含有熒光指示劑，該指示劑能根據培養(yǎng)基中微生 物生長產生的二氧化碳而發(fā)生熒光反應。
[0055] 所述的熒光指示劑包括熒光素、副玫瑰紅、磺基羅丹明B、羅丹明B、酸性品紅、茜素 紅、酸性紅等。
[0056] 所述的傳感器中的高分子硅橡膠材料包括聚甲基硅氧烷。
[0057]所述的傳感器中的遮光劑包括鋅白，鈦白，鋅鋇白，鈦鋇白。
[0058] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的液體培養(yǎng)基為絕大多數微生物所需要的胰酶大豆肉湯、 腦心浸液、酵母提取物、糖類等營養(yǎng)成分。
[0059] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的液體培養(yǎng)基還包括對微生物起修復作用的維生素 B族 和/或維生素 K族和/或維生素 E族。
[0060] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的液體培養(yǎng)基還包括促進厭氧微生物生長的枸櫞酸鈉、硫 乙醇酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鐵、亞硫酸鈉、L-半胱氨酸鹽酸鹽中的一種或多種。
[0061] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的液體培養(yǎng)基還包括減少樣本中其他物質干擾，促進微生 物生長的乙二胺四乙酸鹽、對氨基苯甲酸、聚茴香磺酸鈉、葡萄糖氧化酶、氯化血紅素中的 一種或多種。
[0062] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的液體培養(yǎng)基中添加有2%_20% (w/w)的吸附樹脂，以減 弱樣本中抗生素對樣本培養(yǎng)的干擾。
[0063] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的內部密閉空間含有內置氣體，所述的內置氣體包括氧 氣、氮氣、二氧化碳、氫氣、空氣中的一種或多種氣體。
[0064] 本實用新型體液增菌培養(yǎng)瓶的制備方法?，F有技術中有單層塑料培養(yǎng)瓶或玻璃培 養(yǎng)瓶，前文已經提到其存在的缺陷，還有一種多層塑料培養(yǎng)瓶，其能夠滿足不易破碎，不透 氣性等特點，但是工藝復雜，制備困難，造價較高。
[0065] 因此，本實用新型提供一種能夠滿足培養(yǎng)瓶所需要的不易破碎，不透氣性，透明， 熱穩(wěn)定性等需要的體液增菌培養(yǎng)瓶。最終輻照滅菌，最終形成無菌產品，并減少過程中的無 菌要求和滅菌步驟。
[0066] 所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的生產過程包括，雙層塑料瓶體的制備，傳感器材料的制 備，傳感器的添加和固化，液體培養(yǎng)基的制備，灌裝，密封，滅菌。
[0067] 所述的雙層培養(yǎng)瓶的制備過程包括:形成型坯;吹塑成型。
[0068] 所述的傳感器材料制備過程包括:將熒光指示劑和酸堿指示劑用純化水溶解，遮 光劑用純化水配制成懸濁水溶液，按照比例混合后混合到硅橡膠中。
[0069] 所述的傳感器添加和固化過程包括:使用均勻分裝設備將傳感器材料引入到培養(yǎng) 瓶瓶體內，在45-85°C條件下經1-2小時固化。
[0070] 所述的傳感器固化過程包括使用催化劑和固化劑，所述的催化劑為添加到傳感器 組分中的鉑系催化劑。
[0071] 所述的液體培養(yǎng)基制備過程包括:將培養(yǎng)基組成成分按比例添加到純化水中，充 分溶解，經過滅菌處理。
[0072] 所述的灌裝過程包括:將滅菌后的吸附樹脂等量分裝到已制備好傳感器的培養(yǎng)瓶 內。
[0073]所述的灌裝過程還包括:將過濾除菌后的液體培養(yǎng)基添加到已制備好傳感器的培 養(yǎng)瓶內。
[0074] 所述的密封過程包括:將滅菌后的丁基膠塞置于灌裝好吸附樹脂和液體培養(yǎng)基的 培養(yǎng)瓶上方，通過灌裝-加塞-壓蓋機對培養(yǎng)瓶內部填充氣體。
[0075] 所述的密封過程還包括:將滅菌后的丁基膠塞置于灌裝好吸附樹脂和液體培養(yǎng)基 的培養(yǎng)瓶上方，通過灌裝-加塞-壓蓋機對培養(yǎng)瓶內部施加真空，形成負壓。
[0076]所述的密封過程還包括:將鋁塑蓋壓在已注入內部填充氣體形成負壓的培養(yǎng)瓶瓶 口，壓實密封。
[0077] 所述的滅菌過程為輻照滅菌。
[0078] 本實用新型的體液增菌培養(yǎng)瓶，不僅能進行血液培養(yǎng)，還可以對臨床其他體液樣 本進行培養(yǎng)，如胸水、腹水、腦脊液等。
[0079] 具體地說，所述的培養(yǎng)瓶瓶體為雙層塑料瓶1，無色透明不透氣的圓柱體型，內部 為無菌負壓環(huán)境，使樣本順利注入培養(yǎng)瓶內，免除污染風險。瓶塞3為彈性丁基膠塞，與瓶口 緊密貼合保證培養(yǎng)瓶的氣密性。瓶蓋2為雙層的鋁塑蓋，使用時將表層的塑料帽8去除，使用 前塑料帽將保持膠塞的密封和無菌。培養(yǎng)瓶內配置的液體培養(yǎng)基4為絕大多數微生物生長 需要的胰酶大豆肉湯、腦心浸液、酵母提取物、糖類等培養(yǎng)基組分，并添加適當對微生物細 胞其修復作用的維生素，使微生物快速繁殖，并能修復受到樣本中干擾物質（例如抗生素） 損傷的微生物，提高檢出幾率。液體培養(yǎng)基中添加有拮抗作用的物質，如乙二胺四乙酸鹽、 對氨基苯甲酸、聚茴香磺酸鈉、葡萄糖氧化酶、氯化血紅素中的一種或多種，能夠促進微生 物的生長和快速繁殖。液體培養(yǎng)基中添加有吸附樹脂5,吸附樹脂為一種或多種非離子吸附 樹脂和陽離子交換樹脂，吸附樹脂懸浮于液體培養(yǎng)基中，用于吸附樣本中含有的抗生素等 物質，降低抗生素等物質對體液培養(yǎng)的干擾，提高檢出率。體液增菌培養(yǎng)瓶內含有內置氣 體，提供微生物生長的必要條件。體液增菌培養(yǎng)瓶的瓶底，注入傳感器6，傳感器為選擇性半 透膜，采用高分子硅橡膠材料制備，其能透過非極性分子而阻擋極性分子，保證二氧化碳能 夠透過半透膜而阻擋培養(yǎng)基中的其他分子和/或離子，使傳感器的顏色變化只由樣本中微 生物生長產生的二氧化碳的濃度引起，而免除其他離子和/或分子的干擾，進而提高設備檢 測的準確率。傳感器中含有催化劑，能夠使傳感器材料引入培養(yǎng)瓶內后快速固化，縮短固化 時間。傳感器中含有酸堿指示劑和熒光指示劑，當瓶內微生物生長產生二氧化碳時，引起酸 堿指示劑顏色變化和熒光指示劑熒光物質變化。體液增菌培養(yǎng)瓶內含有內置填充氣體7,包 括氮氣、氧氣、氫氣、二氧化碳、空氣中的一種或多種，滿足不同類微生物的生長需求，促進 微生物的生長。
[0080] 如圖2所示，本實用新型的體液增菌培養(yǎng)瓶的生產工藝過程，需要7個步驟，具體描 述如下：
[0081] 步驟1雙層塑料瓶體制備:首先使用型坯模具鑄造型坯內層，在120-150°C條件下 將聚碳酸酯注入模具，冷卻后依此型坯外層模具的內芯鑄造型坯外層，在70-100°C條件下 將聚萘二甲酸乙二醇酯注入型坯模具，冷卻后脫坯，然后轉入雙層瓶模具，在高溫條件下吹 塑成型。
[0082] 步驟2傳感器材料制備:稱取羅丹明B 0.0496g，溶解在，10mL純化水中，稱取溴百 里酚藍0.345g，溶解在15mL純化水中，稱取鋅白3.472g加入到10mL純化水中，將以上配好溶 液，與495.9mL硅橡膠基本成分和49.6mL固化劑混合，用純化水定容到600mL，在真空條件下 攪拌脫泡15min，攪拌均勻的同時完成脫泡工作。
[0083] 步驟3傳感器添加:使用均勻分裝設備將傳感器材料引入到瓶體內，在底部鋪平， 形成2-1 Omm厚度的傳感器。
[0084]步驟4傳感器固化:將引入傳感器材料的瓶體在溫度45-85Γ環(huán)境下固化，硅橡膠 中含有的固化劑和鉑系催化劑起到促進固化作用，在1-2小時內完成固化，傳感器制備工作 完成。
[0085]步驟5液體培養(yǎng)基制備:稱取胰酶大豆肉湯90g，腦心浸液6g，酵母提取物6g，葡萄 糖30g，氯化鈉15g，聚茴香磺酸鈉0.03g，組合維生素0.03g，氯化血紅素0.003g，生長因子 0.003g，將以上液體培養(yǎng)基組分添加到3000mL純化水中，溶解，攪拌均勻，過濾除菌。
[0086] 步驟6灌裝:將滅菌的液體培養(yǎng)基和滅菌的吸附樹脂通過灌裝-加塞-壓蓋機灌裝 到含有傳感器的瓶體內，每瓶30mL。
[0087] 步驟7密封:將滅菌的膠塞附著到瓶口上方，通過灌裝-加塞-壓蓋機填充氣體，并 形成真空，然后將膠塞壓實，最后通過灌裝-加塞-壓蓋機將鋁塑蓋附著到瓶口上方，然后壓 實。
[0088]步驟8滅菌:將以密封好，各組件裝置好的培養(yǎng)瓶進行輻照滅菌(25kGy)，最終形成 密封的無菌的體液增菌培養(yǎng)瓶產品。
[0089] 下面就一些關鍵步驟通過一些實施例來進行進一步的描述。
[0090] 在一個實施例中，傳感器的材料包括： Sy丨gard 1.84桂橡肢基本組分 84· 75% 固化劑 ：8.4:8% 溴百里酚藍 1. 69%
[0091] 鋅# 0.85? 羅丹明B 0. 85% 其他 3:. .38?
[0092]其中Sylgard 184硅橡膠基本組分包括聚甲基硅氧烷和鉑系催化劑。
[0093]在另一個實施例中，傳感器的材料包括： S y i g a r d 18 4毯橡股基本組分 82.64% 固化劑： 8. 26% 溴百里酚藍 2. 48%
[0094] 鋅白 1.65% 羅丹明B 1. 651 其他 3. 32%
[0095] 在又一個實施例中，傳感器的材料包括： Sylgard 184石圭橡膠基本組分 76· 33% 固化劑 7.6:3% 溴百里酚藍 3.82?
[0096] 鋅白 3,0:5? 羅丹明B 6,11? 其他 3. 0祕
[0097] 一個實施例中，傳感器的材料包括： Sylgard 184桂橡膠基本組分 79. 36%:
[0098] 固化劑 7,:94? 溴百里酚藍 5. 56°/。 鋅白 2. 38°/。
[0099] 羅丹明B 0. 40% 其他 4. 36?/。
[0100] 又一個實施例中，傳感器的材料包括： Sylgard 184娃橡膠基本組分 77. .521 固化劑 7.75? 溴百里酚藍 5. 38%
[0101] 辭自' 4.62% 酸性紅 1.54% 其他 3.19%
[0102]本實用新型中傳感器材料配方的范圍： Sylg.ard. 184毯橡股基本組分 70:1-901. 固化荊 7%-· 溴百里酚藍 Θ. 11-101
[0103] 鋅白 Θ. 11-9? 羅丹明B Θ. 11-101 其他 m
[0104] 以上所述的為體積比例，其中溴百里酚藍為濃度0.1%-10%(w/w)的水溶液，鋅白 為濃度10 %-80 % (w/w)的懸濁液，羅丹明B為濃度0.1-10 % (w/w)的水溶液，其他成分為水 或乙醇等。
[0105] 在一個實施例中，液體培養(yǎng)基的制備方法為，將下列組分按比例稱取，然后溶解到 純化水中，加熱使其充分溶解。 胰酶大豆肉湯 1-20? 腦心浸液 Θ. 1-5%
[0106] 酵母提取物 0,1-10%： 糖類 0.1-10? 氣化鈉 0. 1-5% 聚茴香磺酸鈉 0. 01-5%：
[0107] 組合維生素 0· 0001-0. 5% 氯化血紅素 0. 0001-0. 5% 生長因子 0.0001-1%
[0108] 另一個實施例中，液體培養(yǎng)基包括： 胰酶大豆肉湯 1-20% 腦心浸液 Q. 1-5% 酵母提取物 0. 1-10% 糖類 0.1-10% 氯化納 0.1-5% 聚茴香磺酸鈉 0. 01-5%
[0109] 組合維生素 0· 0001-0.1% 氯化血紅素 0· 00G1-G. 1% L-半胱氣酸鹽酸鹽G. 001-1? 檸檬酸鈉 0. 01-1% 生長因子 0 0001-1% 還原劑 0. 01-5? 余量為純化水。
[0110] 以上所述的實施例僅用于說明本實用新型的技術思想及特點，其目的在于使本領 域內的技術人員能夠理解本實用新型的內容并據以實施，不能僅以本實施例來限定本實用 新型的專利范圍，即凡本實用新型所揭示的精神所作的同等變化或修飾，仍落在本實用新 型的專利范圍內。
【主權項】
1. 一種體液增菌培養(yǎng)瓶，包括瓶體（I)、瓶塞(3)、瓶蓋(2)、傳感器(5)、液體培養(yǎng)基(4)， 培養(yǎng)瓶瓶體為圓柱形，傳感器貼于瓶底內部底部，瓶塞和瓶蓋起到密封和機械保護作用，體 液增菌培養(yǎng)瓶的密封空間為負壓的無菌環(huán)境，其特征在于，體液增菌培養(yǎng)瓶的瓶體(1)為雙 層塑料瓶體，一層為具有強度支撐的塑料材料，另一層為具有氣體屏障作用的塑料材料。2. 根據權利要求1所述的體液增菌培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述具有強度支撐的塑料材料 為尼龍、聚碳酸酯PC或聚丙烯PP，所述雙層瓶體的外層或內層為具有氣體屏障作用的塑料 材料，所述具有氣體屏障作用的塑料材料為聚萘二甲酸乙二醇酯、聚對苯二甲酸乙二酯或 聚氯乙稀。3. 根據權利要求1所述的體液增菌培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器 為選擇性半透膜，其能透過非極性分子而阻擋極性分子，保證二氧化碳能夠透過半透膜而 阻擋培養(yǎng)基中的其他分子和/或離子。4. 根據權利要求3所述的體液增菌培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器 為高分子硅橡膠材料聚甲基硅氧烷及其固化劑。5. 根據權利要求1所述的體液增菌培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述體液增菌培養(yǎng)瓶的傳感器 含有遮光劑、酸堿指示劑和熒光指示劑，酸堿指示劑能根據培養(yǎng)基中微生物生長產生的二 氧化碳而發(fā)生顏色變化，熒光指示劑指示劑能根據培養(yǎng)基中微生物生長產生的二氧化碳而 發(fā)生熒光反應。6. 根據權利要求5所述的體液增菌培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述的酸堿指示劑為溴百里酚 藍、溴甲酚紫、溴甲酚綠或二甲苯酚藍;所述熒光指示劑為熒光素、副玫瑰紅、磺基羅丹明B、 羅丹明B、酸性品紅、茜素紅或酸性紅;所述遮光劑為鋅白、鈦白、鋅鋇白或鈦鋇白。7. 根據權利要求1所述的體液增菌培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述的體液增菌培養(yǎng)瓶的內部 密閉空間含有內置氣體，所述的內置氣體包括氧氣、氮氣、二氧化碳、氫氣、空氣中的一種或 多種氣體。
【文檔編號】C12M1/34GK205528783SQ201620125218
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年2月18日
【發(fā)明人】劉慧 , 劉學源, 宋新妥
【申請人】允匯科技（天津）有限公司