一種可變模式的分離管的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公布了一種可變模式的分離管，所述分離管是基于密度梯度法分離細(xì)胞，所述分離管由管蓋、隔離裝置、管體和樣品密度分離液組成。本實(shí)用新型提出一種全新的分離管構(gòu)造技術(shù)理念???可變模式構(gòu)造，即通過設(shè)定分離管不同的結(jié)構(gòu)狀態(tài)來適應(yīng)不同的環(huán)境需求，分離管結(jié)構(gòu)分為貯存模式和工作模式，其中貯存模式以適應(yīng)生產(chǎn)、貯存、運(yùn)輸?shù)确枪ぷ鳡顟B(tài)；工作模式以適應(yīng)分離管工作狀態(tài)，而且分離管能很容易從貯存模式轉(zhuǎn)換到工作模式。本文公布的分離管自成體系，在工作狀體下，操作者無需額外引入其他的試劑、耗材、操作即可直接加樣分離，因而能大大簡(jiǎn)化操作，縮短操作時(shí)間，從而使操作中可能出現(xiàn)的污染降到了最低，保證實(shí)驗(yàn)的安全性。
【專利說明】
一種可變模式的分離管
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種可變模式的細(xì)胞分離管，主要應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)等領(lǐng)域，特別適合于單核免疫細(xì)胞的體分離。
【背景技術(shù)】
[0002]細(xì)胞生物學(xué)和細(xì)胞免疫學(xué)研究中，常常涉及到從體細(xì)胞中分離特定靶細(xì)胞技術(shù)，其中又以外周血中分離單個(gè)核細(xì)胞應(yīng)用最為廣泛，目前基于密度梯度離心法從外周血中分離淋巴細(xì)胞的技術(shù)方法主要有以下兩類:
[0003]方法1:經(jīng)典方法，操作步驟為I)取適量分離液于離心管中；2)將待分離樣本做適當(dāng)稀釋;3)小心翼翼將稀釋好的樣本平鋪在步驟I中分離液上表面，注意不能打亂分離液與樣本的界面;4)將加好樣本的離心管小心翼翼的轉(zhuǎn)移至離心機(jī)中，5)合適的參數(shù)離心;6)離心結(jié)束后，小心翼翼的將離心管從離心機(jī)中取出，注意，管內(nèi)液體不能被晃動(dòng);7)用吸管一點(diǎn)一點(diǎn)吸出目標(biāo)細(xì)胞層(白膜層)；8)洗滌吸出的目標(biāo)細(xì)胞，待用；
[0004]方法2:分離管法，為方法I的改進(jìn)型，具體改進(jìn)點(diǎn)包括I)在方法I中第I步與第3步之間引入其他媒介，第I步操作后，在離心管中分離液上表面引入固體或半固體支撐物，以提供可以支持樣本加入時(shí)對(duì)分離液上表面產(chǎn)生的沖擊力，從而使第3步加樣變得更為快捷方便，同時(shí)也可以加大分樣量;2)現(xiàn)有的部分分離管改善了方法I中步驟7的操作，離心后可以直接將分離管隔板上層液體全部倒出，較方法I中的回收細(xì)胞的方法，不僅快速而且回收率更高。
[0005]現(xiàn)有分離技術(shù)存在的缺點(diǎn):
[0006]方法I的缺點(diǎn)主要有I)整個(gè)分離過程操作時(shí)間長(zhǎng)，被污染的幾率大，風(fēng)險(xiǎn)高；2)操作繁瑣，其中步驟3、4、6、7對(duì)操作者要求很高，稍不小心就會(huì)使實(shí)驗(yàn)失敗;3)樣品處理量小，不僅體現(xiàn)在單次分離耗時(shí)較長(zhǎng)，還體現(xiàn)在單次實(shí)驗(yàn)分樣量很小，所以不適合大量分樣，特別是在生物治療領(lǐng)域的應(yīng)用?？偟膩碚f，該方法技術(shù)比較成熟，但是隨著技術(shù)進(jìn)步，必然會(huì)被方法2所取代。
[0007]方法2的缺點(diǎn)主要有I)目前已經(jīng)上市的分離管分為進(jìn)口產(chǎn)品和國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品，其中進(jìn)口產(chǎn)品價(jià)格高昂，主要包括挪威的Axis Shield公司的Lympho-tube以及德國(guó)GreinerB1公司的Leuco-Septube。由于其較高的價(jià)格，不便于大規(guī)模推廣；2)國(guó)產(chǎn)分離管主要包括以下幾種類型:a模仿進(jìn)口產(chǎn)品，主要是采用固定式隔板，該類型分離管生產(chǎn)工藝要求很高，生產(chǎn)成本很高，并且產(chǎn)品還存在運(yùn)輸不便(下層分離液容易倒流形成氣泡)、操作不便、容易產(chǎn)生有毒有害化學(xué)析出等問題;b改良進(jìn)口產(chǎn)品，利用疏松多孔介質(zhì)將下層分離液吸附在一起形成整體半固體狀態(tài)，該技術(shù)已有產(chǎn)品上市，但是實(shí)際尋找合適的疏松多孔材料相當(dāng)困難，目前上市產(chǎn)品采用海綿為介質(zhì)，但是由于海綿生產(chǎn)工藝限制，產(chǎn)品毒性析出、內(nèi)毒素等指標(biāo)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能達(dá)到細(xì)胞分離管的設(shè)計(jì)要求，在沒有合適的新材料出現(xiàn)之前，該技術(shù)產(chǎn)品也只能停留在技術(shù)論證階段;c采用新的技術(shù)理念，將進(jìn)口固定式篩板改為非固定式，操作者在使用前先取出隔板，加入分離液后放入隔板即可加樣分離，這種方法最大的缺點(diǎn)是，隔板操作不方便，取、放隔板需要使用特殊潔凈的器具，實(shí)驗(yàn)者需要提前預(yù)備鑷子等工具，實(shí)驗(yàn)被污染的幾率大大增加，導(dǎo)致很多實(shí)驗(yàn)操作者有所忌憚。
[0008]總結(jié)以上說明，方法I的主要缺點(diǎn)是操作時(shí)間長(zhǎng)、步驟繁瑣而且費(fèi)勁，容易失敗，被污染幾率大;方法2中，半固體法有毒有害析出多，內(nèi)毒素不達(dá)標(biāo)，生產(chǎn)麻煩；固定隔板法，技術(shù)工藝要求高，化學(xué)析出多，運(yùn)輸不方便，操作不方便;可動(dòng)隔板法，容易被污染，操作麻煩。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0009]通過綜合對(duì)比目前已有的各種分離技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，本發(fā)明提出一種全新的分離管構(gòu)造技術(shù)理念一可變模式構(gòu)造，即通過設(shè)定分離管不同的結(jié)構(gòu)狀態(tài)來適應(yīng)不同的環(huán)境需求，分離管結(jié)構(gòu)分為貯存模式和工作模式，其中貯存模式以適應(yīng)生產(chǎn)、貯存、運(yùn)輸?shù)确枪ぷ鳡顟B(tài);工作模式以適應(yīng)分離管工作狀態(tài)，而且分離管能很容易從貯存模式轉(zhuǎn)換到工作模式。在貯存模式下，分離隔板3被束縛在管蓋I下方，從而與樣本密度分離液4空間隔離，避免了分離隔板3微量的有毒有害析出，同時(shí)也避免了分離管在貯藏、運(yùn)輸時(shí)下層氣泡的產(chǎn)生；同時(shí)，本實(shí)用新型各部件之間又是一個(gè)完整的體系，工作模式下，分離管解決了操作不便、容易污染等問題;本發(fā)明的分離管自成體系，在工作狀體下，操作者無需引入其他額外的試劑、耗材、操作即可直接加樣分離，因而能大大簡(jiǎn)化操作，縮短操作時(shí)間，從而使操作中可能出現(xiàn)的污染降到了最低，保證實(shí)驗(yàn)的安全性。
[0010]本實(shí)用新型的技術(shù)問題通過以下的技術(shù)方案予以解決:
[0011]—種可變模式的細(xì)胞分離管，包括管蓋1、管體2、隔離裝置3、樣本密度分離液4，所述隔離裝置分為貯存模式和工作模式，貯存模式下，所述隔離裝置3懸掛在所述管蓋I的下方，與管體2底部的樣本密度分離液4空間分離，但二者又同處于一個(gè)完整體系內(nèi)；工作模式下，通過外部作用力，所述隔離裝置3擺脫管蓋束縛，自由滑落至管體底部分離液上表面，從而使分離管具備完整的功能結(jié)構(gòu)。
[0012]優(yōu)選地:
[0013]所述管蓋I內(nèi)部中央位置具有一個(gè)圓弧狀“卡扣”結(jié)構(gòu)凸起5，該凸起5由兩片圓弧體構(gòu)成夾子形狀，圓弧體內(nèi)徑為柱狀凸起6外徑的85%?95% ;
[0014]所述隔離裝置3正面中央位置具有一個(gè)柱狀凸起6，當(dāng)柱狀凸起6在外力作用下插入凸起5內(nèi)部時(shí)，凸起5的兩片圓弧體就會(huì)夾住柱狀凸起6，通過二者之間的摩擦力，將管蓋I與隔離裝置3連接在一起，從而實(shí)現(xiàn)本使用新型貯存模式下管蓋I對(duì)隔離裝置3的束縛效果。當(dāng)需要解除該束縛作用使本使用新型由貯存模式轉(zhuǎn)換為工作模式時(shí)，操作者可以簡(jiǎn)單的通過手持管體2，在垂直距離實(shí)驗(yàn)臺(tái)面I?2cm高度適當(dāng)松手，分離管自由落體撞擊臺(tái)面，在慣性作用下，隔離裝置3即可擺脫凸起5的束縛作用，并且自由滑落至管體2底部，并且覆蓋在樣本密度分離液4的上表面，從而實(shí)現(xiàn)本使用新型工作模式下完整的功能結(jié)構(gòu)。
[0015]所述隔離裝置3的主體部分由微型柱狀體結(jié)構(gòu)陣列8通過陣列結(jié)構(gòu)單體底部加強(qiáng)筋9連接而行成，并根據(jù)所用管體2內(nèi)徑的實(shí)際尺寸，通過圓周加強(qiáng)筋11調(diào)節(jié)所述隔離裝置3的最大直徑，使工作模式下，所述隔離裝置3能完全密封管體2底部樣本密度分離液4，滿足管體靜止傾斜或者倒置狀態(tài)下，管體底部樣本密度分離液保持至少15秒不外漏；
[0016]所述微型柱狀體結(jié)構(gòu)陣列8是由柱狀體單體通過一定規(guī)律陣列而來，陣列參數(shù)應(yīng)滿足單體與單體之間的間隙在0.3mm?1.5mm之間，所述柱狀體單體應(yīng)滿足上表面呈弧形或菱形凸起。所述加強(qiáng)筋9為多條同向貫穿陣列8單體的結(jié)構(gòu)，并且上表面為弧形或菱形凸起，相鄰兩條加強(qiáng)筋之間的縫隙10的寬度值在0.3_?1.5_之間。
[0017]所述隔離裝置3通過下方伸出的加強(qiáng)筋7的支撐作用對(duì)抗工作模式下隔離裝置受到的離心力作用，其作用效果應(yīng)滿足使所述隔離裝置3在整個(gè)工作狀態(tài)下，始終固定在管體2的同一刻度處，本實(shí)用新型所述加強(qiáng)筋7的數(shù)量為4;
[0018]所述隔離裝置3也可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)節(jié)下方加強(qiáng)筋7的長(zhǎng)度，從而調(diào)節(jié)所述隔離裝置在工作狀態(tài)下不同時(shí)刻所處的位置。
【附圖說明】
[0019]圖1為本實(shí)用新型模式轉(zhuǎn)換示意圖；
[0020]圖2為本實(shí)用新型管蓋結(jié)構(gòu)示意圖；
[0021 ]圖3為本實(shí)用新型隔離裝置側(cè)視圖；
[0022]圖4為本實(shí)用新型隔離裝置俯視圖；
[0023]圖5為本實(shí)用新型隔離裝置縱向剖面圖局部放大圖；
[0024]圖6為本使用新型隔離裝置內(nèi)部連接筋9的整體俯視圖；
[0025]圖7為本實(shí)用新型隔離裝置內(nèi)部連接筋9的縱向剖面圖局部放大圖；
[0026]其中:1.管蓋，2.管體，3隔離裝置，4.樣本密度分離液，5.“卡扣”結(jié)構(gòu)凸起，6.柱狀凸起，7.隔離裝置下部加強(qiáng)筋，8.微型柱狀體結(jié)構(gòu)陣列，9.連接陣列結(jié)構(gòu)8單體的加強(qiáng)筋，10.加強(qiáng)筋9之間的縫隙，11.圓周加強(qiáng)筋。
【具體實(shí)施方式】
[0027]下面對(duì)照附圖并結(jié)合優(yōu)選的實(shí)施方式對(duì)本使用新型作進(jìn)一步說明。并且，以下說明僅為描述性語(yǔ)言，不能認(rèn)定本使用新型的具體實(shí)施只局限于這些文字，不能以此來限定本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。
[0028]如圖1所示，本實(shí)用新型分為貯存模式和工作模式，并且，本實(shí)用新型自成完整體系，貯存模式下，保證本實(shí)用新型在生產(chǎn)、貯存、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)境下質(zhì)量安全性，工作模式下，保證本實(shí)用新型使用安全性。
[0029]本實(shí)用新型的創(chuàng)新點(diǎn)在于:
[0030]所述管蓋I下方設(shè)計(jì)一個(gè)“卡扣”狀凸起5，所述隔離裝置3上方設(shè)計(jì)一個(gè)柱狀凸起6，通過凸起5與凸起6之間的摩擦力作用，使隔離裝置3與樣本密度分離液4在非工作狀態(tài)下呈空間分離，在工作狀態(tài)下呈相互接觸，并且，本實(shí)用新型為一個(gè)完整體系，保證本實(shí)用新型自質(zhì)檢合格出廠到客戶使用之時(shí)，整個(gè)功能部件均處于一個(gè)密閉的空間內(nèi)部，保證產(chǎn)品質(zhì)量及使用效果，更好的實(shí)施產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化控制。
[0031 ]本實(shí)用新型細(xì)胞分離管的具體實(shí)現(xiàn)方法如下:
[0032](I)實(shí)用新型產(chǎn)線裝配:用鑷子夾起質(zhì)檢合格的隔離裝置3，將其上方的柱狀凸起6插入管蓋I中央的“卡扣”狀凸起5內(nèi)部，檢查二者的配合性，滿足二者緊密連接。用移液器向管體2內(nèi)部加入15ml淋巴細(xì)胞分離液，然后將管蓋I連同隔離裝置3—起旋蓋在管體2的管口處，從而構(gòu)成本實(shí)用新型的貯存模式。需要說明的是，本操作是由產(chǎn)品生產(chǎn)商完成，本實(shí)用新型產(chǎn)品自下產(chǎn)線至客戶實(shí)際使用前均處于貯存模式下。
[0033](2)實(shí)用新型實(shí)際使用:使用者需要事先準(zhǔn)備50ml試管架、待分離樣本20ml、50ml低速離心機(jī)、目標(biāo)細(xì)胞回收管，其中加樣、回收操作均在超凈工作臺(tái)內(nèi)完成。操作步驟:a.取一直本實(shí)用新型分離管，手持管體在操作臺(tái)上輕磕管體底部，使隔離裝置3滑落至管底;b.打開管蓋，倒入待分離樣本;c.旋緊管蓋，將分離管至于離心機(jī)中800?100g離心15min?30min;d.超凈臺(tái)內(nèi)打開管蓋，將隔離裝置3上面的液體倒入目標(biāo)細(xì)胞回收管內(nèi)，待用。
[0034]本實(shí)用新型的有益效果在于，使用者無需引入額外的試劑、耗材、操作即可輕松完成實(shí)驗(yàn)，分離管由生產(chǎn)廠家按標(biāo)準(zhǔn)化控制模式生產(chǎn)、質(zhì)檢，對(duì)質(zhì)量負(fù)責(zé)。本實(shí)用新型技術(shù)方案有益于本類產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)制定，有益于標(biāo)準(zhǔn)化的推廣。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種可變模式的分離管，包括管蓋、管體、隔離裝置、樣本密度分離液，所述分離管具備兩種模式狀態(tài)，即貯存模式和工作模式，所述管蓋內(nèi)部中央位置具有一個(gè)圓弧狀“卡扣”結(jié)構(gòu)凸起，所述隔離裝置上方中央位置具有一個(gè)柱狀凸起，所述隔離裝置主體部分由微型柱狀體陣列通過陣列單體底部的加強(qiáng)筋連接而成，所述隔離裝置下方具有向外伸出的加強(qiáng)筋。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種可變模式的分離管，其特征在于:所述分離管的貯存模式是通過所述管蓋中央的“卡扣”結(jié)構(gòu)凸起與所述隔離裝置中央上部的柱狀凸起在靜摩擦力作用下連接在一起，使所述隔離裝置懸掛在所述管蓋下方，并且與所述樣本密度分離液呈空間分離狀態(tài)。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種可變模式的分離管，其特征在于:所述分離管的工作模式是由所述分離管的貯存模式通過簡(jiǎn)單的外部作用力作用結(jié)果轉(zhuǎn)化而來，所述分離管的工作模式自成完整體系。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種可變模式的分離管，其特征在于:所述隔離裝置主體部分通過圓周加強(qiáng)筋調(diào)節(jié)其最大直徑的尺寸，以適應(yīng)不同型號(hào)的管體。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種可變模式的分離管，其特征在于:所述隔離裝置下側(cè)具有向外延伸的加強(qiáng)筋，該加強(qiáng)筋保證所述隔離裝置在所述分離管工作模式下，始終處于管體固定刻度處。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種可變模式的分離管，其特征在于:所述隔離裝置下側(cè)向外延伸的加強(qiáng)筋，可以通過調(diào)節(jié)該加強(qiáng)筋的長(zhǎng)度來調(diào)節(jié)所述隔離裝置工作模式下所處的位置。7.根據(jù)權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的一種可變模式的分離管，其特征在于:所述隔離裝置的表面，所有向上的平面部分均做弧形或者菱形倒角處理。
【文檔編號(hào)】C12M1/24GK205590688SQ201620401214
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年5月5日
【發(fā)明人】張春典, 其他發(fā)明人請(qǐng)求不公開姓名
【申請(qǐng)人】張春典