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      氧化發(fā)色劑的穩(wěn)定化方法

      文檔序號(hào):3746305閱讀:604來(lái)源:國(guó)知局
      專利名稱:氧化發(fā)色劑的穩(wěn)定化方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種在溶液中使氧化發(fā)色劑(也稱為成色劑、顯色劑)穩(wěn)定化的方法及使用前述方法的氧化發(fā)色劑試劑。
      背景技術(shù)
      已知N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉一般作為通過(guò)氧化而發(fā)色的高靈敏度發(fā)色劑使用。這樣的高靈敏度發(fā)色劑可以在,例如,通過(guò)氧化還原酶使其與氧化物質(zhì)反應(yīng),通過(guò)吸光度測(cè)定其發(fā)色量確定前述氧化物質(zhì)的量時(shí)使用。當(dāng)供給到這樣的酶反應(yīng)時(shí),N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉通常是溶解于水,調(diào)制其溶液,使用其作為液體試劑。
      但是,由于N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉這樣的氧化發(fā)色劑在水溶液中不穩(wěn)定,因此擔(dān)心不到1天就自然發(fā)色。因此,如果使用在溶液狀態(tài)下保存的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉,吸光度測(cè)定中背景吸收上升,存在測(cè)定精度降低的問(wèn)題。
      為了防止這樣的自然發(fā)色產(chǎn)生的影響,需要在每次測(cè)定時(shí)調(diào)制前述液體試劑,但這樣做操作繁雜、成本高。

      發(fā)明內(nèi)容
      因此,本發(fā)明的目的在于提供一種使N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉之類的氧化發(fā)色劑在溶液中穩(wěn)定化的方法及使用該方法的試劑。
      為了達(dá)成前述目的,本發(fā)明氧化發(fā)色劑的穩(wěn)定化方法是在溶液中使前述氧化發(fā)色劑穩(wěn)定化,其特征在于,在前述溶液中使前述氧化發(fā)色劑與果糖基氨基酸氧化酶(以下,稱為FAOD)及過(guò)氧化物酶(以下,稱為POD)的至少之一共存。作為前述氧化發(fā)色劑,可以列舉出例如N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉。
      這樣,使FAOD或POD的至少之一共存于溶液中,其機(jī)理尚不明,但可以抑制N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉這樣的氧化發(fā)色劑的自然發(fā)色。據(jù)此,例如,前述氧化發(fā)色劑在溶液狀態(tài)下的保存成為可能,不需要每次測(cè)定時(shí)調(diào)制液體試劑,因此測(cè)定等操作變得簡(jiǎn)易,低成本化也成為可能。進(jìn)而,即使使用保存的溶液作為發(fā)色反應(yīng)的試劑,由于在吸光度測(cè)定中背景吸收的上升得到抑制,因此可以提高測(cè)定精度。
      在本發(fā)明的穩(wěn)定化方法中,氧化發(fā)色劑的濃度優(yōu)選為1~10000μmol/L的范圍。
      在本發(fā)明的穩(wěn)定化方法中,F(xiàn)AOD的濃度優(yōu)選為0.002~200g/L的范圍或0.1~1000KU/L的范圍,POD的濃度優(yōu)選為0.02~50g/L的范圍或1~5000KU/L的范圍。
      在本發(fā)明的穩(wěn)定化方法中,相對(duì)于0.1mmol的氧化發(fā)色劑,優(yōu)選以0.01~200g的范圍或0.5~1000KU的范圍添加FAOD,優(yōu)選以0.02~50g的范圍或1~5000KU的范圍添加POD。此外,當(dāng)添加前述兩種酶時(shí),優(yōu)選以0.01~100g的范圍或0.5~600KU的范圍添加FAOD,以0.02~50g的范圍或1~5000KU的范圍添加POD。
      在本發(fā)明的穩(wěn)定化方法中,由于可以進(jìn)一步抑制自然發(fā)色,因此優(yōu)選前述溶液含有從ADA緩沖液、Tris-HCl緩沖液、Bis-Tris緩沖液、甘氨酰替甘氨酸緩沖液、Bicine緩沖液及磷酸緩沖液構(gòu)成的組中選取的至少一種緩沖液。
      在本發(fā)明的穩(wěn)定化方法中,優(yōu)選還使從α-生育酚乙酸酯(VE)、異抗壞血酸鉀及山梨酸鉀構(gòu)成的組中選取的至少一種抗氧劑、或從乙二胺四乙酸(EDTA)、二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)及反式-1,2-二氨基環(huán)己烷-N,N,N’,N’-四乙酸(CyDTA)、O,O’-二(2-氨乙基)乙二醇-N,N,N’,N’-四乙酸(GEDTA)及氨三乙酸(NTA)構(gòu)成的組中選取的至少一種螯合劑、或疊氮化鈉等共存。通過(guò)使這些物質(zhì)共存,可以進(jìn)一步抑制自然發(fā)色。此外,可以使這些物質(zhì)的一種,也可以使兩種以上共存。
      其次,本發(fā)明的氧化發(fā)色劑試劑是將前述氧化發(fā)色劑溶解于水性溶劑中,進(jìn)一步使FAOD及POD的至少之一溶解而得到的試劑溶液。與前述相同,作為前述氧化發(fā)色劑,可以列舉出例如N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉等。
      這樣的試劑即使放置或保存也可以抑制N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉這樣的氧化發(fā)色劑的自然發(fā)色,因此不需每次使用時(shí)調(diào)制試劑。所以,例如,使用N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉的各種測(cè)定反應(yīng)等的操作變得簡(jiǎn)便。


      圖1為本發(fā)明穩(wěn)定化方法的一實(shí)施例中,在緩沖液中使FAOD共存時(shí)表示DA-64的吸光度光譜的附圖。
      圖2為本發(fā)明穩(wěn)定化方法的其他實(shí)施例中,在緩沖液中使POD共存時(shí)表示DA-64的吸光度光譜的附圖。
      圖3為本發(fā)明穩(wěn)定化方法另外的其他實(shí)施例中,在緩沖液中使FAOD及POD共存時(shí)表示DA-64的吸光度光譜的附圖。
      圖4為比較例中,表示緩沖液中DA-64的吸光度光譜的附圖。
      具體實(shí)施例方式
      對(duì)于本發(fā)明的穩(wěn)定化方法,對(duì)使用N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉作為氧化發(fā)色劑的一例進(jìn)行說(shuō)明。
      本發(fā)明的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉的穩(wěn)定化,例如,可以通過(guò)將前述N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉和FAOD及POD的至少之一溶解于水性溶劑中,調(diào)制N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉水溶液來(lái)進(jìn)行。
      前述FAOD可以為催化下述式(1)反應(yīng)的酶,其來(lái)源源無(wú)特別限制,例如可以使用商品名FAOX-E(Kikkoman Corporation制造)、FOD(Asahi Chemical Industry Co.,Ltd.制造)等市售品。
      (1)前述式(1)中,R1表示羥基或來(lái)自于糖化反應(yīng)前的糖的殘基(糖殘基)。當(dāng)反應(yīng)前的糖為醛糖時(shí),前述糖殘基(R1)為醛糖殘基,當(dāng)反應(yīng)前的糖為酮糖時(shí),為酮糖殘基。例如,當(dāng)反應(yīng)前的糖為葡萄糖時(shí),通過(guò)阿馬多利(Amadori)重排,反應(yīng)后的結(jié)構(gòu)成為果糖結(jié)構(gòu),此時(shí)糖殘基(R1)成為葡萄糖殘基(醛糖殘基)。該糖殘基(R1)可以例如用-[CH(OH)]n-CH2OH表示,n為0~6的整數(shù)。
      在前述式(1)中,R2并無(wú)特別限定,例如,當(dāng)基質(zhì)為糖化氨基酸、糖化肽或糖化蛋白質(zhì)時(shí),α-氨基被糖化的情況與除α-氨基之外的氨基被糖化時(shí)的情況不同。
      在前述式(1)中,當(dāng)α-氨基被糖化時(shí),R2為下述式(2)所示的氨基酸殘基或肽殘基。
      -CHR3-CO-R4(2)在前述式(2)中,R3表示氨基酸側(cè)鏈基。此外,R4表示羥基、氨基酸殘基或肽殘基,例如,可以用下述式(3)表示。在下述式(3)中,n為0以上的整數(shù),R3與前述同樣,表示氨基酸側(cè)鏈基。
      -(NH-CHR3-CO)n-OH (3)此外,在前述式(1)中,當(dāng)α-氨基以外的氨基被糖化(氨基酸側(cè)鏈基被糖化)時(shí),R2可以用下述式(4)表示。
      -R5-CH(NH-R6)-CO-R7(4)在前述式(4)中,R5表示氨基酸側(cè)鏈基中被糖化的氨基以外的部分。例如,當(dāng)被糖化的氨基酸為賴氨酸時(shí),R5為-CH2-CH2-CH2-CH2-,例如,當(dāng)被糖化的氨基酸為精氨酸時(shí),R5為-CH2-CH2-CH2-NH-CH(NH2)-。
      此外,在前述式(4)中,R6為氫、氨基酸殘基或肽殘基,例如,可以用下述式(5)表示。此外,在下述式(5)中,n為0以上的整數(shù),R3與前述同樣,表示氨基酸側(cè)鏈基。
      -(CO-CHR3-NH)n-H(5)此外,在前述式(4)中,R7為羥基、氨基酸殘基或肽殘基,例如,可以用下述式(6)表示。在下述式(6)中,n為0以上的整數(shù),R3與前述同樣,表示氨基酸側(cè)鏈基。
      -(NH-CHR3-CO)n-OH (6)此外,POD可以使用催化下述式(7)反應(yīng)的已知物質(zhì)。另外,在下述式(7)中,AH2表示基質(zhì),A沒(méi)有特別限制。
      (7)前述水溶液中N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉的濃度并無(wú)特別限制,但從N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉相對(duì)于水的溶解度等出發(fā),如前所述,其為例如1~10000μmol/L的范圍,優(yōu)選1~1000μmol/L的范圍。
      當(dāng)添加FAOD時(shí),如前所述,其濃度為例如0.002~200g/L的范圍,優(yōu)選0.01~50g/L的范圍,更優(yōu)選0.3~20g/L的范圍。此外,當(dāng)用酶的活性表示時(shí),其為例如0.1~1000KU/L的范圍,優(yōu)選0.5~300KU/L的范圍,更優(yōu)選1~150KU/L的范圍。此外,相對(duì)于0.1mmol的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉的添加比例,例如為0.01~200g的范圍,優(yōu)選0.1~50g的范圍,更優(yōu)選0.6~20g的范圍,如果用酶的活性表示,例如為0.5~1000KU的范圍,優(yōu)選1~300KU的范圍,更優(yōu)選2~100KU的范圍。
      當(dāng)添加POD時(shí),如前所述,其濃度例如為0.02~50g/L的范圍,優(yōu)選0.2~10g/L的范圍。此外,當(dāng)用酶的活性表示時(shí),例如為1~5000KU/L的范圍,優(yōu)選5~1000KU/L的范圍。此外,相對(duì)于0.1mmol的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉的添加比例,例如POD為0.02~50g的范圍,優(yōu)選0.2~10g的范圍,如果用酶的活性表示,例如為1~5000KU的范圍,優(yōu)選5~1000KU的范圍。
      此外,可以同時(shí)添加FAOD及POD,在這種情況下,例如,F(xiàn)AOD為0.002~100g/L,POD為0.02~50g/L的范圍,優(yōu)選FAOD為0.01~50g/L,POD為0.2~10g/L的范圍,更優(yōu)選FAOD為0.3~20g/L,POD為0.2~10g/L的范圍。此外,如果用酶的活性表示,例如,F(xiàn)AOD為0.1~600KU/L,POD為1~5000KU/L的范圍,優(yōu)選FAOD為0.5~300KU/L,POD為5~1000KU/L的范圍,更優(yōu)選FAOD為1~150KU/L,POD為5~1000KU/L的范圍。
      相對(duì)于0.1mmol的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉的添加比例,例如,F(xiàn)AOD為0.01~100g、POD為0.02~50g的范圍,優(yōu)選FAOD為0.1~50g、POD為0.2~10g的范圍,更優(yōu)選FAOD為0.6~20g、POD為0.2~10g的范圍。此外,如果用酶的活性表示,F(xiàn)AOD為0.5~600KU、POD為1~5000KU的范圍,優(yōu)選FAOD為1~300KU、POD為5~1000KU的范圍,更優(yōu)選FAOD為2~100KU、POD為5~1000KU的范圍。
      此外,F(xiàn)AOD(A)與POD(B)的添加比例(A∶B),用重量比表示時(shí),例如,為A∶B=100∶0~0∶100的范圍。
      作為前述水系的溶劑,例如可以使用水、各種緩沖液。其中,從進(jìn)一步能夠抑制N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉的自然發(fā)色出發(fā),優(yōu)選各種緩沖液。作為前述緩沖液,例如,可以使用前述的ADA緩沖液、Tris-HCl緩沖液、Bis-Tris緩沖液、甘氨酰替甘氨酸緩沖液、Bicine緩沖液及磷酸鉀緩沖液(KPB)等磷酸緩沖液、HEPES緩沖液、HEPSO緩沖液等,優(yōu)選ADA緩沖液、Tris-HCl緩沖液、磷酸緩沖液。作為前述緩沖液的pH,例如,pH為5.0~9.0的范圍,優(yōu)選6.0~8.0的范圍。
      此外,前述緩沖液的濃度并無(wú)特別限制,例如,為1~1000mmol/L的范圍,但由于相對(duì)的高濃度更可以抑制N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉的自然發(fā)色,優(yōu)選50~800mmol/L的范圍,更優(yōu)選100~500mmol/L的范圍。
      此外,調(diào)制的前述水溶液的pH并無(wú)特別限制,例如,pH為5.0~9.0的范圍,優(yōu)選6.0~8.0的范圍。
      這樣的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉水溶液,通過(guò)與前述FAOD及POD的至少之一共存而被穩(wěn)定化,因此可以在溶液狀態(tài)下保存。其保存溫度并無(wú)特別限制,例如,為0~40℃的范圍,優(yōu)選0~25℃的范圍,更優(yōu)選0~10℃的范圍。
      當(dāng)FAOD及POD的任一個(gè)都不添加時(shí),如果在10℃下保存,則發(fā)色的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉在吸收波長(zhǎng)727nm的吸光度,保存5天后,例如增加2~3倍,保存18天后,例如增加10~11倍。與此相比,如果根據(jù)本發(fā)明進(jìn)行穩(wěn)定化,即使在10℃下保存,例如,在9天內(nèi)可以防止自然發(fā)色,優(yōu)選為1~5天。
      此外,在本發(fā)明的穩(wěn)定化方法中,不僅是FAOD及POD,還可以進(jìn)一步使前述的抗氧劑、前述螯合劑、疊氮化鈉等與所述氧化發(fā)色劑共存。其中優(yōu)選前述螯合劑、疊氮化鈉。
      作為前述抗氧劑,可以使用前述的VE、異抗壞血酸鉀、山梨酸鉀等。作為前述抗氧劑的添加比例,例如,為0.1~1000μmol/L的范圍,優(yōu)選0.2~100μmol/L的范圍,更優(yōu)選0.5~20μmol/L的范圍。此外,相對(duì)于0.1mmol的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉,例如,為0.1~100μmol的范圍,優(yōu)選0.2~20μmol的范圍。
      作為前述螯合劑,如前所述,可以使用EDTA、DTPA、CyDTA、GEDTA、NTA等,優(yōu)選EDTA、DTPA、CyDTA。作為前述螯合劑的添加比例,例如,為0.01~20mmol/L的范圍,優(yōu)選0.05~10mmol/L的范圍,更優(yōu)選0.1~5mmol/L的范圍。此外,相對(duì)于0.1mmol的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉,例如,為0.02~15mmol的范圍,優(yōu)選0.05~10mmol的范圍,更優(yōu)選0.1~5mmol的范圍。
      作為前述疊氮化鈉的添加比例,例如,為0.01~20mmol/L的范圍,優(yōu)選0.05~10mmol/L的范圍,更優(yōu)選0.1~5mmol/L的范圍。此外,相對(duì)于0.1mmol的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉,例如,為0.01~10mmol的范圍,優(yōu)選0.05~5mmol的范圍,更優(yōu)選0.1~2mmol的范圍。
      用這樣的方法穩(wěn)定化的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉,例如,即使在溶液狀態(tài)下長(zhǎng)期保存也可以如前述那樣抑制自然發(fā)色,因此作為液體試劑是有用的。作為前述N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉試劑的用途,并無(wú)特別限制,例如,可以如前所述作為氧化還原反應(yīng)中的發(fā)色基質(zhì)等使用。當(dāng)利用于這樣的反應(yīng)時(shí),如前所述由于可以抑制自然發(fā)色,因此可以抑制吸光度測(cè)定中背景吸收的上升,也可以提高各種測(cè)定的精度。此外,與前述本發(fā)明的穩(wěn)定化方法相同,優(yōu)選添加各種緩沖液、抗氧劑、表面活性劑、螯合劑、疊氮化鈉等。
      實(shí)施例(實(shí)施例1~3及比較例1)該實(shí)施例為在Tris-HCl緩沖液中使N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉與FAOD及POD共存時(shí),考察其穩(wěn)定性(吸光度變化)的實(shí)施例。
      在200mM Tris-HCl緩沖液(pH7.0)中添加N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉(商品名DA-64、Wako Pure ChemicalIndustries,Ltd.制造、以下稱為“DA-64”),使?jié)舛瘸蔀?.088mM。在該DA-64溶液中添加FAOD(商品名FOD、Asahi Chemical Industry Co.,Ltd.制造)、POD(Toyobo Co.,Ltd.制造),使其達(dá)到以下濃度,調(diào)制出樣品,使用自動(dòng)分析裝置(商品名JCA-BM8、Japan Electron Optics LaboratoryCo.,Ltd.制造)測(cè)定將這些樣品在10℃下保持所定時(shí)間(剛制成之后、5天、9天、18天)時(shí)的吸光光譜。比較例除了不添加FAOD及POD以外,與前述實(shí)施例相同調(diào)制樣品,測(cè)定吸收光譜。
      FAOD濃度 POD濃度實(shí)施例10.09g/L(22KU/L) -實(shí)施例2-0.37g/L(15KU/L)實(shí)施例30.09g/L(22KU/L) 0.37g/L(15KU/L)比較例1--這些結(jié)果示于圖1~4。圖1表示實(shí)施例1、圖2表示實(shí)施例2、圖3表示實(shí)施例3、圖4表示比較例1在保存所定天數(shù)后的吸收光譜圖。
      如圖所示,添加了FAOD或POD的實(shí)施例1~3,即使保存期間增長(zhǎng),與比較例相比,發(fā)色的DA-64在吸收波長(zhǎng)727nm的吸光度的增加被抑制在約1/2~1/10。特別是對(duì)于添加了FAOD及POD兩者的實(shí)施例3,自然發(fā)色得到了最有效地抑制。
      如上所述,根據(jù)本發(fā)明的穩(wěn)定化方法,可以在溶液狀態(tài)下穩(wěn)定地保存N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉這樣的氧化發(fā)色劑。因此,即使需要例如N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉等氧化發(fā)色劑的液體試劑時(shí),由于不需要每次使用時(shí)調(diào)制試劑,因此試劑的低成本化成為可能,操作也變得簡(jiǎn)便。
      權(quán)利要求
      1.在溶液中使氧化發(fā)色劑穩(wěn)定化的方法,其特征在于,在所述溶液中使所述氧化發(fā)色劑與果糖基氨基酸氧化酶和過(guò)氧化物酶的至少之一共存。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1記載的穩(wěn)定化方法,其中,氧化發(fā)色劑為N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉。
      3.根據(jù)權(quán)利要求1或2記載的穩(wěn)定化方法,氧化發(fā)色劑的濃度為1~10000μmol/L的范圍。
      4.根據(jù)權(quán)利要求1~3的任一項(xiàng)記載的穩(wěn)定化方法,其中,果糖基氨基酸氧化酶的濃度為0.002~200g/L的范圍或0.1~1000KU/L的范圍。
      5.根據(jù)權(quán)利要求1~4的任一項(xiàng)記載的穩(wěn)定化方法,其中,過(guò)氧化物酶的濃度為0.02~50g/L的范圍或1~5000KU/L的范圍。
      6.根據(jù)權(quán)利要求1~5的任一項(xiàng)記載的穩(wěn)定化方法,其中,相對(duì)于0.1mmol的氧化發(fā)色劑,以0.01~200g的范圍或0.5~1000KU的范圍添加果糖基氨基酸氧化酶,以0.02~50g的范圍或1~5000KU的范圍添加過(guò)氧化物酶。
      7.根據(jù)權(quán)利要求1~6的任一項(xiàng)記載的穩(wěn)定化方法,其中,所述溶液含有從ADA緩沖液、Tris-HCl緩沖液、Bis-Tris緩沖液、甘氨酰替甘氨酸緩沖液、Bicine緩沖液及磷酸緩沖液構(gòu)成的組中選取的至少一種緩沖液。
      8.根據(jù)權(quán)利要求1~7的任一項(xiàng)記載的穩(wěn)定化方法,其中,還使從α-生育酚乙酸酯(VE)、異抗壞血酸鉀及山梨酸鉀構(gòu)成的組中選取的至少一種抗氧劑共存。
      9.根據(jù)權(quán)利要求1~8的任一項(xiàng)記載的方法,其中,還使從乙二胺四乙酸(EDTA)、二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、反式-1,2-二氨基環(huán)己烷-N,N,N’,N’-四乙酸(CyDTA)、O,O’-二(2-氨乙基)乙二醇-N,N,N’,N’-四乙酸(GEDTA)及氨三乙酸(NTA)構(gòu)成的組中選取的至少一種螯合劑共存。
      10.根據(jù)權(quán)利要求1~9的任一項(xiàng)記載的方法,其中,還使疊氮化鈉共存。
      11.根據(jù)權(quán)利要求1~10的任一項(xiàng)記載的方法,其中,溶液的pH為5.0~9.0的范圍。
      12.根據(jù)權(quán)利要求1~11的任一項(xiàng)記載的方法,其中,溶液的溫度為0~40℃的范圍。
      13.試劑溶液,其包含水性溶劑和溶解于該水性溶劑中的氧化發(fā)色劑,其中果糖基氨基酸氧化酶及過(guò)氧化物酶的至少之一進(jìn)一步在所述水性溶劑中溶解。
      14.根據(jù)權(quán)利要求13記載的試劑溶液,其中,氧化發(fā)色劑為N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉。
      全文摘要
      本發(fā)明提供了一種在溶液狀態(tài)下使氧化發(fā)色劑穩(wěn)定化的方法。通過(guò)在溶液中使作為氧化發(fā)色劑的N-(羧甲胺基羰基)-4,4’-二(二甲胺基)二苯胺鈉與果糖基氨基酸氧化酶(FAOD)及過(guò)氧化物酶(POD)的至少之一共存,使其穩(wěn)定化。FAOD的濃度為0.01~1.0g/L或1~100KU/L的范圍,POD的濃度為0.01~1.0g/L或1~100KU/L的范圍。
      文檔編號(hào)C09B67/00GK1568355SQ0281997
      公開日2005年1月19日 申請(qǐng)日期2002年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月11日
      發(fā)明者八木雄次, 小森胤樹 申請(qǐng)人:愛科來(lái)株式會(huì)社
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