專利名稱：溶酶體靶向的熒光物質(zhì)及其合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種溶酶體靶向的熒光物質(zhì)及其合成方法，屬于細胞成像領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代細胞顯微光學成像技術(shù)及細胞器精細功能研究的發(fā)展，要求具有高效率，高 靈敏度且具有細胞器靶向作用的熒光試劑的開發(fā)和應用。細胞以及細胞器的顯微成像，甚 至細胞器精細功能的可視化動態(tài)標示，一直是現(xiàn)代顯微成像的重點和難點，為人類各種疾 病和細胞衰老提供直觀的科學依據(jù)，具有極其重要的生物學意義和新藥開發(fā)價值。細胞器一股并沒有明確有效的靶點，能夠?qū)崿F(xiàn)特定細胞器的靶向作用的化學小分 子很稀少。目前這一領(lǐng)域正成為國內(nèi)外研究的熱點，并具有重大的學術(shù)意義和應用價值。目 前為止，以特定細胞器為靶點，如線粒體，溶酶體以及高爾基體等，能夠在活體細胞中作用 于這些靶點的，應用比較成熟的有染料和抗體兩類。一股染料都會有光漂白性和光致毒性， 在紫外可見光的照射下短時間內(nèi)即失去熒光活性，或者產(chǎn)生單線態(tài)氧等極易對活細胞發(fā)生 毒害作用的物質(zhì)，不利于活體細胞的無損傷成像；抗體雖然低毒，但是其昂貴的價格和容易 失活的缺點限制了抗體的細胞成像應用。而且染料和抗體本身可供選擇的范圍也比較小， 無論是在熒光激發(fā)和發(fā)射范圍還是在細胞器靶向作用方面，都無法滿足科研和實際應用的 需要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種高效、低毒、溶酶體靶向的熒光物質(zhì)及 其合成方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是一種溶酶體靶向的熒光物質(zhì)，結(jié)構(gòu)式如下上述物質(zhì)可以在紫外光下激發(fā)，也可以在近紅外光區(qū)雙光子激發(fā)，產(chǎn)生可見光熒 光發(fā)射。通過活細胞實驗證實，上述熒光物質(zhì)能夠特異性的作用于溶酶體，實現(xiàn)溶酶體的清 晰成像。上述熒光物質(zhì)的合成方法以4-溴苯胺和多聚甲醛為原料，以三氟乙酸作為溶劑 和反應催化劑，0 25°C反應得到中間體5，11- 二溴-[1，5 二氮芳辛]二氮雜環(huán)辛間四烯， 再用Heck反應將中間體中的溴以4-乙烯基-N，N- 二甲基芐胺取代。反應路線如下
權(quán)利要求
一種溶酶體靶向的熒光物質(zhì)，結(jié)構(gòu)式如下FDA0000028054620000011.tif
2.權(quán)利要求1所述的溶酶體靶向的熒光物質(zhì)的制備方法，其特征為以4-溴苯胺和多 聚甲醛為原料，以三氟乙酸作為溶劑和反應催化劑，O 25°C反應得到中間產(chǎn)物5，11- 二 溴-[1，5 二氮芳辛]二氮雜環(huán)辛間四烯，再用Heck反應將中間產(chǎn)物中的溴以4-乙烯基-N， N-二甲基芐胺取代。
3.根據(jù)權(quán)利2所述的溶酶體靶向的熒光物質(zhì)的制備方法，其特征為按4-溴苯胺多聚甲醛摩爾比為1 2 2.5的比例，將4-溴苯胺和多聚甲醛均勻混 合在一起，滴加入過量的三氟乙酸作為溶劑和反應催化劑，然后在O 25°C反應70 160 個小時；將反應溶液中和至PH值為7 8，用有機溶劑萃取，將有機溶劑蒸干大部分，結(jié)晶為中 間體5，11- 二溴-[1，5 二氮芳辛]二氮雜環(huán)辛間四烯；以中間體摩爾量為基準，加入2. 4 3. 0倍的4-乙烯基-N，N- 二甲基芐胺，還加入5 10%的醋酸鈀作為催化劑，10 20%的三苯基磷作為配體，以及4 6倍的碳酸銫作為堿， 以無水N，N-二甲基甲酰胺為溶劑，在氮氣保護下加熱到137°C反應8 10個小時。
4.權(quán)利要求1所述化合物用作細胞溶酶體成像劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種溶酶體靶向的熒光物質(zhì)，結(jié)構(gòu)式如下上述化合物的合成方法以三氟乙酸作為溶劑和反應催化劑，用4-溴苯胺和多聚甲醛反應生成溴取代溴取代的中間產(chǎn)物，再通過Heck反應，將溴用4-乙烯基-N，N-二甲基芐胺取代。本發(fā)明方法有效應用Heck反應，合成路徑簡單，產(chǎn)率較高，得到的產(chǎn)物性質(zhì)穩(wěn)定，具有可見光熒光發(fā)射以及溶酶體靶向作用。
文檔編號C09K11/06GK101962536SQ201010505360
公開日2011年2月2日 申請日期2010年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月13日
發(fā)明者吳志國, 周翔, 田沺, 翁小成 申請人:武漢大學