專利名稱：一種蘇丹黑b染色液及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)學的檢驗領(lǐng)域，尤其涉及一種蘇丹黑B染色液及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
蘇丹黑B是一種脂溶性染料，應用于生物醫(yī)學對脂質(zhì)進行定性和定量分析。通常使用的蘇丹黑B染色液由于其溶解其中的溶劑比重輕、易揮發(fā)，造成溶液濃度不穩(wěn)定，加入染色液時漂浮在待染血清的表面，出現(xiàn)蘇丹黑B析出，部分會殘留在管壁上。染色液通常用磨口瓶密封，每次取液時因為較高的揮發(fā)性導致瓶口的表面析出蘇丹黑B，染色液的表面容易出現(xiàn)溶質(zhì)分散不均一，使溶液濃度會出現(xiàn)不穩(wěn)定現(xiàn)象，如觀察到保存的染色液會出現(xiàn)沉渣，以及染色效果的不均勻，從而最終導致脂質(zhì)染色分析出現(xiàn)嚴重誤差。因此本領(lǐng)域迫切需要提供一種新的蘇丹黑B染色液。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種全新的蘇丹黑B染色液及其制備方法和用途。在本發(fā)明的第一方面，提供了一種蘇丹黑B染色液，其中含有乙二醇或丙三醇和異丙醇，以乙二醇或丙三醇和異丙醇的總體積計，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于60% ；較佳地，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于80%。上述提供的蘇丹黑B染色液中，以染色液的總體積計，其中含有蘇丹黑 BO. 5-1. 0w/v% (g/100ml)。在本發(fā)明的第二方面，提供了一種如上所述的本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液的制備方法，所述的方法包括步驟(a)將蘇丹黑B與異丙醇和乙二醇或丙三醇混合，得到如上所述的本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液；以乙二醇或丙三醇和異丙醇的總體積計，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于 60%。在另一優(yōu)選例中，所述的方法包括步驟(1)將蘇丹黑B與異丙醇和乙二醇或丙三醇混合，得到混合溶液1 ；以乙二醇或丙三醇和異丙醇的總體積計，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于 60% ；(2)將混合溶液1在30_40°C 20-30小時；和(3)離心得到如上所述的本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液。在另一優(yōu)選例中，所述的方法中其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于80%。在另一優(yōu)選例中，所述的方法中，以染色液的總體積計，其中含有蘇丹黑B 0. 5-1. 0w/v% (g/100ml)。在另一優(yōu)選例中，所述的混合在避光條件下進行。
在另一優(yōu)選例中，得到的蘇丹黑B染色液室溫下(15_25°C )保存在避光容器內(nèi)。在本發(fā)明的第三方面，提供了一種如上所述的本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液的用途，用于血脂電泳分析。據(jù)此，本發(fā)明提供了一種新的蘇丹黑B染色液。


圖1是凝膠電泳法檢測血脂的染色效果；其中A 1. 0%蘇丹黑B-異丙醇，即溶劑為異丙醇的蘇丹黑B染色液，以下同；B :1.0%蘇丹黑B-異丙醇乙二醇G 1)，即溶劑為異丙醇和乙二醇的蘇丹黑B 染色液，并且異丙醇和乙二醇的體積比為4 1，以下同；C :0. 5%蘇丹黑B-異丙醇；D 0. 5%蘇丹黑B-異丙醇乙二醇G 1)。圖2是凝膠電泳法檢測血脂的定量掃描圖譜，橫坐標示電泳遷移距離，單位毫米， 縱坐標示吸光度。圖3是異丙醇占有機溶劑體積比對蘇丹黑B染色效果的影響。
具體實施例方式發(fā)明人經(jīng)過深入的研究，發(fā)現(xiàn)了一種溶解蘇丹黑B的合適溶劑，該溶劑由于具有合適的比重和揮發(fā)性，可以有效提高蘇丹黑B的染色效果。在此基礎(chǔ)上，完成了本發(fā)明。具體地，本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液中含有蘇丹黑B和用于溶解蘇丹黑B的溶劑；所述的溶劑由異丙醇和乙二醇或丙三醇構(gòu)成，以該溶劑的總體積計，其中異丙醇的體積百分比大于等于60%，更佳地大于等于80%。以染色液的總體積計，其中含有蘇丹黑B 0. 5-1. 0w/L% (g/100ml)。本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液可以通過下述步驟制備得到第一步，將蘇丹黑B與用于溶解蘇丹黑B的溶劑混合，得到混合溶液1 ；所述的溶劑由異丙醇和乙二醇或丙三醇構(gòu)成，以該溶劑的總體積計，其中異丙醇的體積百分比大于等于60% ；第二步，使混合溶液1在30_40°C下20-30小時；和第三步，離心得到本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液。第一步中的溶解需在避光情況下進行，并且第三步得到的本發(fā)明提供的蘇丹黑B 染色液也必須在避光容器中存放。如本發(fā)明所用，“蘇丹黑B”是指2，3_ 二氫-2，2_ 二甲基-6-K4-(苯基偶氮)-2-萘]偶氮]萘嵌間二氮雜苯，其英文名稱為Sudan Black B，CAS NO :4197_25_5，分子量456. 55，分子式:C29H24N60如本發(fā)明所用，“避光”是指操作條件或存放物品的容器等是阻隔了光線的，或具有光線阻隔性。本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液可用于生物醫(yī)學血脂電泳分析，所述的血脂包括極低密度脂蛋白(VLDL)；中間密度脂蛋白(IDL)；脂蛋白(a) (Lp (a))；低密度脂蛋白(LDL)； 高密度脂蛋白(HDL)；和白蛋白-游離脂肪酸(ALB-FFA)。
本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本案說明書所揭示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相同、 均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特征的一般性例子。本發(fā)明的主要優(yōu)點在于1、獲得了穩(wěn)定性高的蘇丹黑B染色液。2、獲得了蘇丹黑B在溶劑中分散度好的蘇丹黑B染色液。下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分數(shù)、比率、比例、或份數(shù)按重量計。本發(fā)明中的重量體積百分比中的單位是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，例如是指在 100毫升的溶液中溶質(zhì)的重量。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。實施例1-9蘇丹黑B染色液1-9稱取0. 125g或0. 25g蘇丹黑B，再根據(jù)下表量取有機溶劑25ml，避光溶解，經(jīng)過 37°C水浴M小時，離心去渣，室溫下密封保存于棕色瓶內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種蘇丹黑B染色液，其中含有乙二醇或丙三醇和異丙醇，以乙二醇或丙三醇和異丙醇的總體積計，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于60%。
2 .如權(quán)利要求1所述的蘇丹黑B染色液，其特征在于，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于80%。
3.如權(quán)利要求1或2所述的蘇丹黑B染色液，其特征在于，以染色液的總體積計，其中含有蘇丹黑 B 0. 5-1.0w/v% (g/100ml)。
4.一種如權(quán)利要求1-3任一所述的蘇丹黑B染色液的制備方法，其特征在于，所述的方法包括步驟(a)將蘇丹黑B與異丙醇和乙二醇或丙三醇混合，得到如權(quán)利要求1-3任一所述的蘇丹黑B染色液；以乙二醇或丙三醇和異丙醇的總體積計，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于 60%。
5.如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述的方法包括步驟(1)將蘇丹黑B與異丙醇和乙二醇或丙三醇混合，得到混合溶液1；以乙二醇或丙三醇和異丙醇的總體積計，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于 60% ；(2)將混合溶液1在30-400C 20-30小時；和(3)離心得到如權(quán)利要求1-3任一所述的蘇丹黑B染色液。
6.如權(quán)利要求4或5任一所述的制備方法，其特征在于，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于80%。
7.如權(quán)利要求4或5任一所述的制備方法，其特征在于，以染色液的總體積計，其中含有蘇丹黑 B 0. 5-1. 0w/v% (g/100ml)。
8.如權(quán)利要求4或5任一所述的制備方法，其特征在于，所述的混合在避光條件下進行。
9.如權(quán)利要求4或5任一所述的制備方法，其特征在于，得到的蘇丹黑B染色液室溫下 (15-25°C)保存在避光容器內(nèi)。
10.一種如權(quán)利要求1-3任一所述的蘇丹黑B染色液的用途，用于血脂電泳分析。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蘇丹黑B染色液及其制備方法和用途。本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液中含有乙二醇或丙三醇和異丙醇，以乙二醇或丙三醇和異丙醇的總體積計，其中含有的異丙醇的體積百分比大于等于60％。
文檔編號C09B67/10GK102181173SQ20111003718
公開日2011年9月14日 申請日期2011年2月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月14日
發(fā)明者張曉金, 陳允欽 申請人:復旦大學附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院