專利名稱:用于檢測新霉素的囊泡探針、用途及制備方法
技術領域:
本發(fā)明涉及一種用于檢測新霉素的囊泡探針、用途及制備方法。
背景技術:
抗生素污染目前被認為是威脅人類健康最嚴重的元兇之一,其中,濫用抗生素具有三大危害:危害一、大量使用抗生素會帶來較強毒副作用,直接傷害身體,尤其是對兒童聽力;危害二、抗生素過度使用會使細菌產生抗藥性,使抗生素效果變差或者直接沒有效果;危害三、抗生素過多過濫使用,會殺滅體內大量的正常細菌,從而使致病菌趁虛而入,致使人體死亡。新霉素是一種抗生素,屬于氨基糖苷類抗生素,新霉素對許多革蘭陰性桿菌如大腸埃希菌、克雷伯菌屬等具有抗菌作用,主要用于治療家禽的胃腸感染以及口腔炎、乳腺炎等類疾病。新霉素的過量使用會導致嚴重的病變,例如聽力減退、耳鳴或耳部飽滿感(耳毒性);步態(tài)蹣跚、頭昏或步履不穩(wěn)(耳毒性、影響前庭);尿量或排尿次數顯著減少,或極度口渴(腎毒性)。在氨基糖甙類抗生素中,新霉素的神經肌肉接頭抑制作用最強,曾有不少病人發(fā)生嚴重呼吸抑制甚至死亡。因此,新霉素含量的定量檢測在生物化學和臨床化學中具有重要意義。
目前檢測新霉素的技術手段主要是:酶聯免疫吸附測定法、熒光偏振免疫分析法以及高效液相色譜法等,但是這些技術手段耗時、靈敏度低、且需要復雜的實驗裝備和操作流程。
發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是:克服現有技術存在的問題,提供一種用于檢測新霉素的囊泡探針、用途、及制備方法。本發(fā)明技術構思如下:現有技術中已經存在熒光探針的檢測方法,這類方法快速、靈敏、準確,因此只要制備能與新霉素發(fā)生反應產生熒光的探針即可。本發(fā)明解決其技術問題的技術方案如下:本發(fā)明一種用于檢測新霉素的探針前體,其特征是,具有如式I所示的結構:
權利要求
1.一種用于檢測新霉素的探針前體,其特征是,具有如式I所示的結構:
2.一種制備權利要求1所述探針前體的方法,其特征是,包括以下步驟: 第一步、將10,12- 二炔二十五酸與N-羥基琥珀酰亞胺、N,N’- 二環(huán)己基碳二亞胺反應得到式II化合物;
3.根據權利要求2所述方法,其特征是,第一步的具體過程為:將10,12-二炔二十五酸溶解于含有N-羥基琥珀酰亞胺和N,N’-二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液中、得到反應液,在氮氣保護下持續(xù)攪拌該反應液直至反應結束;然后,減壓蒸餾去除溶劑,即得式II化合物。
4.根據權利要求2所述方法,其特征是,第二步的具體過程為:先將式II化合物溶解于四氫呋喃中得到式II化合物溶液,再將式II化合物溶液加至含有間氨基酚的四氫呋喃溶液中、得到反應液,在氮氣保護下持續(xù)攪拌該反應液直至反應結束;然后,減壓蒸餾去除溶劑獲得粗產物,并將粗產物以層析柱純化,即得式I所示探針前體。
5.根據權利要求4所述方法,其特征是,第二步中,在層析柱純化過程中采用體積比100:0.5的二氯甲烷:甲醇為洗脫液。
6.一種用于檢測新霉素的囊泡探針,其特征是,由重量比為9:1的10,12-二炔二十五酸和式I化合物聚合而成。
7.一種制備權利要求6所述囊泡探針的方法,其特征是,包括以下步驟: 將10,12- 二炔二十五酸和式I化合物按重量比9:1溶解于二甲基亞砜得到DMSO溶液,將DMSO溶液加熱到至少80°C、并加至4-羥乙基哌嗪乙磺酸緩沖液中得到反應液,冷卻反應液,以紫外光照射反應液進行聚合反應,即得囊泡探針。
8.根據權利要求7所述方法,其特征是,冷卻反應液前,將反應液超聲、并用濾器過濾。
9.根據權利要求8所述方法,其特征是,采用254nm紫外燈作為紫外光源。
10.權利要求6所述囊泡探針用于檢測新霉素的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于檢測新霉素的囊泡探針、用途及制備方法。該探針由重量比為9:1的10,12-二炔二十五酸和式Ⅰ化合物聚合而成。本發(fā)明的囊泡探針在4-羥乙基哌嗪乙磺酸緩沖液中呈藍色且無熒光,遇新霉素發(fā)生反應后變?yōu)槌壬l(fā)出熒光(熒光發(fā)射波長550nm),選擇性強,靈敏度高,采用該探針的熒光檢測方法在生物醫(yī)藥領域有極大的應用前景。
文檔編號C09K11/06GK103232358SQ20121043704
公開日2013年8月7日 申請日期2012年11月5日 優(yōu)先權日2012年11月5日
發(fā)明者陳小強, 周國棟, 王惠琳 申請人:南京工業(yè)大學