羅丹明6g酰肼衍生物、其制備方法、應(yīng)用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種羅丹明6G酰肼衍生物、其制備方法、應(yīng)用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法，該羅丹明6G酰肼衍生物可選擇性地與次氯酸發(fā)生反應(yīng)，快速產(chǎn)生明顯的熒光增強效應(yīng)。本發(fā)明可以在水中和細胞內(nèi)實現(xiàn)對微量次氯酸的高靈敏性和高選擇性的定量檢測，在環(huán)境和生物等領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用前景。
【專利說明】羅丹明6G酰肼衍生物、其制備方法、應(yīng)用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測次氯酸的衍生物、其制備方法、應(yīng)用及檢測方法，具體涉及一種羅丹明6G酰肼衍生物、其制備方法、應(yīng)用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]次氯酸(HOCl)是一種強氧化劑，能夠在環(huán)境水處理過程中和活性生物體內(nèi)起到抗菌作用。在日常生活中，次氯酸因為殺菌效果好、價格低廉和使用方便，已被廣泛地用作自來水消毒劑。但是高濃度的次氯酸溶液刺激性強，傷害呼吸系統(tǒng)，易與水中有機物反應(yīng)生成氯仿、四氯化碳等嚴重致癌物質(zhì)，對人類的健康存在著潛在的危害。在生物體內(nèi)，次氯酸是一類重要的活性氧物種(ROS)，在許多具有重要生理學(xué)和生物學(xué)意義的過程中起著關(guān)鍵性的作用。但是過量次氯酸的形成會誘發(fā)組織損傷，引起動脈硬化、關(guān)節(jié)炎甚至癌癥等系列疾病的產(chǎn)生。因此，發(fā)展具有高靈敏性和高選擇性的分析試劑和檢測方法，用于環(huán)境和生物體內(nèi)次氯酸的檢測，具有十分重要的應(yīng)用價值。
[0003]目前，檢測次氯酸的方法主要有硫代硫酸鈉滴定法(HG/T2498-93)、鄰聯(lián)甲苯胺比色法(GB5750-85)和四甲基聯(lián)苯胺(TMB)比色法等。這些試劑選擇性差，易受干擾，在應(yīng)用方面有很大限制。另外，近年來發(fā)展的若干有機熒光探針對次氯酸檢測顯示出較好的靈敏性、選擇性和生物相容性(Org.Lett.2013，15:878-881 ；J.Am.Chem.Soc.2012，134:1200-1211 ；Chem.Eur.J.2012，18:2700-2706 ；J.Am.Chem.Soc.2011，133:5680-5682 ；Chem.Commun.2011,47:12691-12693)。但是，這些試劑的合成過程工序繁瑣、技術(shù)復(fù)雜，制約了它們在環(huán)境分析和生物分析中的實際應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0004]本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點，提供了一種羅丹明6G酰肼衍生物、其制備方法、應(yīng)用及作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法，該羅丹明6G酰肼衍生物可以有效對次氯酸進行檢測。
[0005]為達到上述目的，本發(fā)明所述的羅丹明6G酰肼衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)為
【權(quán)利要求】
1.一種羅丹明6G酰肼衍生物，其特征在于，所述羅丹明6G酰肼衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)為
2.一種羅丹明6G酰肼衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)稱取一定量的羅丹明6G、乙醇以及質(zhì)量濃度為80%的肼一水化合物，并將羅丹明6G溶解于乙醇中，再逐滴加入肼一水化合物，然后經(jīng)回流及過濾后得沉淀，洗滌及干燥后，得粉紅色固體的羅丹明6G酰肼，其中羅丹明6G、乙醇及肼一水化合物的比例為l.0g: 20-30mL: 2_4mL ； 2)稱取一定量的1-萘甲酰氯及乙腈，然后將1-萘甲酰氯溶解到乙腈中，得1-萘甲酰氯的乙腈溶液，其中1-萘甲酰氯的乙腈溶液中1-萘甲酰氯與乙腈的比例為76-115 μ L: 10-15mL ； 3)稱取一定量的羅丹明6G酰肼及乙腈，然后將羅丹明6G酰肼溶解到乙腈中，得羅丹明6G酰肼的乙腈溶液，其中羅丹明6G酰肼的乙腈溶液中羅丹明6G酰肼與乙腈的比例為0.21g: 15-25mL ； 4)將步驟2)得到的1-萘甲酰氯的乙腈溶液逐滴加入到步驟3)得到的羅丹明6G酰肼的乙腈溶液中，其中羅丹明6G酰肼與1-萘甲酰氯的物質(zhì)的量的比為1: 1-1.5，并在溫度為40-60°C的條件下攪拌反應(yīng)，然后冷卻至室溫，并去除溶劑，再經(jīng)柱層析洗脫后得粉紅色固體的羅丹明6G酰肼衍生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的羅丹明6G酰肼衍生物的制備方法，其特征在于， 步驟I)回流時間為2-4h ； 步驟4)攪拌時間為4-8h ； 步驟4)柱層析洗脫的具體過程為以沸點為60-90°C的石油醚及乙酸乙酯的混合物為洗脫劑進行洗脫，其中石油醚與乙酸乙酯的體積比為5: 1-3: 2。
4.如權(quán)利要求1所述的羅丹明6G酰肼衍生物作為對次氯酸進行熒光分析的熒光探針的應(yīng)用。
5.一種羅丹明6G酰肼衍生物作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法，基于權(quán)利要求I所述的羅丹明6G酰肼衍生物，其特征在于，包括以下步驟: 1)稱取一定量的羅丹明6G酰肼衍生物及乙醇，然后將羅丹明6G酰肼衍生物溶解到乙醇中，得羅丹明6G酰肼衍生物的乙醇溶液，其中羅丹明6G酰肼衍生物的乙醇溶液中羅丹明6G酰肼衍生物的溶度為0.1-1.0mM ； 2)將相同體積的N份步驟I)得到的羅丹明6G酰肼衍生物的乙醇溶液分別放置于N個離心管中，然后給N個離心管中分別加入N組不同體積的次氯酸鈉標(biāo)準溶液，再通過磷酸鹽緩沖溶液定容，得N組混合溶液，其中，N組混合溶液中羅丹明6G酰肼衍生物的濃度均為10-50μΜ，N組混合溶液中羅丹明6G酰肼衍生物與次氯酸的物質(zhì)的量的比均為I: 0.05-3.5，N為正整數(shù)，然后再將得到的N組混合溶液放置到室溫環(huán)境中，待其反應(yīng)完成后，將N組反應(yīng)完成后的混合溶液分別放置到石英比色皿中，設(shè)置激發(fā)和發(fā)射狹縫寬度為2.5-5.0nm，光電倍增管電壓為700V，用480-5IOnm范圍的波長激發(fā)，測得N組熒光發(fā)射光譜，然后再根據(jù)測得的N組熒光發(fā)射光譜對次氯酸進行熒光分析。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的羅丹明6G酰肼衍生物作為熒光探針對次氯酸進行熒光分析的方法，其特征在于， 步驟2)磷酸鹽緩沖溶液的濃度為lO-lOOmM，pH值為7.0-7.4 ； 步驟2)室溫反應(yīng)時間為2-10min。`
【文檔編號】C09K11/06GK103880853SQ201410090201
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年3月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月12日
【發(fā)明者】張禎, 鄧成權(quán), 孟列素, 顏曉梅 申請人:西安交通大學(xué)