微生物培養(yǎng)器、微生物檢驗(yàn)試劑盒、透析液的檢驗(yàn)方法、微生物的培養(yǎng)方法、微生物的檢驗(yàn) ...的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本申請(qǐng)揭示一種微生物培養(yǎng)器、微生物檢驗(yàn)試劑盒、透析液的檢驗(yàn)方法、微生物的 培養(yǎng)方法、微生物的檢驗(yàn)方法、及微生物培養(yǎng)器的制造方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 微生物的培養(yǎng)是使用各種培養(yǎng)基而進(jìn)行。培養(yǎng)基例如有以前以來(lái)通常使用的液體 培養(yǎng)基或瓊脂培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基雖然沒(méi)有試樣量的限制，但存在無(wú)定量性、體積大的缺 點(diǎn)。另外，關(guān)于瓊脂培養(yǎng)基，當(dāng)采用通常使用的直徑90mm的培養(yǎng)皿時(shí)，試樣液量的上限通常 為至多l(xiāng)mL，超過(guò)lmL的試樣液難以進(jìn)行檢驗(yàn)。因此，檢驗(yàn)微生物濃度相對(duì)較低的試樣時(shí)，為 了以lmL左右的試樣液進(jìn)行檢驗(yàn)，先對(duì)原試樣進(jìn)行增菌培養(yǎng)后再供于檢驗(yàn)。
[0003] 例如，對(duì)于沙門菌（salmonella)等食物中毒菌的檢驗(yàn)，要求lcfu/25g的敏感度。 另外，近年來(lái)，對(duì)于例如透析用水（透析水）等醫(yī)療系的水的檢驗(yàn)，不僅要檢驗(yàn)放熱性物質(zhì)， 也推薦檢驗(yàn)微生物。然而，由于此種試樣的微生物濃度很低，故而有時(shí)檢驗(yàn)需要大量試樣。 例如，對(duì)于透析水，有時(shí)要求可檢測(cè)出試樣lmL中微生物小于一個(gè)的高敏感度，若可對(duì)超過(guò) lmL的例如10mL~100mL的試樣液直接、定量性地進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，則較簡(jiǎn)便，故而理想。
[0004] 對(duì)于此種大量試樣的檢驗(yàn)，若使用更大的容器，則也可進(jìn)行超過(guò)lmL的試樣的檢 驗(yàn)，但占用空間而不實(shí)用。因此，例如若以大面積使用如專利文獻(xiàn)1中提出的片狀培養(yǎng)基， 則也可進(jìn)行超過(guò)lmL的試樣的定量檢驗(yàn)，但變得需要大于培養(yǎng)基部分的襯紙與覆蓋膜，因 此會(huì)損害省空間性，若成為大面積，則覆蓋部的開閉、試樣的擴(kuò)散也需要時(shí)間。另外，在為薄 膜過(guò)濾(membrane filter,MF)法的情況下，需要專用的過(guò)濾器支架或歧管、或者抽吸泵類， 在檢驗(yàn)透析液時(shí)必須制成專用的培養(yǎng)基等，作業(yè)步驟多而繁雜。另外，在為無(wú)需瓊脂培養(yǎng)基 的簡(jiǎn)易MF法的情況下，必須添加液體培養(yǎng)基，不易進(jìn)行菌數(shù)的測(cè)定，另外，將試樣裝入裝置 時(shí)，細(xì)菌或病毒容易附著在手等上。另外，在顯色反應(yīng)法（SensiMedia法）的情況下，由于 為液體培養(yǎng)基，因此無(wú)定量性，另外，在檢測(cè)原理上，當(dāng)存在不具有呼吸活性的菌的情況下 無(wú)法進(jìn)行正確的檢測(cè)。
[0005] 因此，近年來(lái)提出有一種在袋狀容器中收納有片狀培養(yǎng)基的微生物培養(yǎng)器，其省 空間，且可簡(jiǎn)便地實(shí)現(xiàn)超過(guò)lmL的相對(duì)大量試樣的微生物定量檢驗(yàn)（例如參照專利文獻(xiàn)2)。
[0006][現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)]
[0007][專利文獻(xiàn)]
[0008][專利文獻(xiàn)1]國(guó)際公開第01/44437號(hào)手冊(cè)
[0009][專利文獻(xiàn)2]日本專利特開2007-124985號(hào)公報(bào) [0010][專利文獻(xiàn)3]日本專利特開平7-75545號(hào)公報(bào)
[0011] [專利文獻(xiàn)4]日本專利特開平8-112088號(hào)公報(bào)
[0012][專利文獻(xiàn)5]日本專利特開平11-137241號(hào)公報(bào)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 發(fā)明所要解決的問(wèn)題
[0014] 在袋狀容器收納有片狀培養(yǎng)基的微生物培養(yǎng)器例如可通過(guò)打開袋狀容器的開口 部分的拉鏈（zipper)而使其成為開口狀態(tài)，并置于滅菌氣體的氛圍（atmosphere)中，而成 為滅菌過(guò)的微生物培養(yǎng)器。但是，利用此種方式進(jìn)行滅菌處理的微生物培養(yǎng)器有在滅菌處 理后至關(guān)閉開口部分為止的期間，微生物等異物通過(guò)開口部分侵入容器內(nèi)部的問(wèn)題。另外， 使用拉鏈類作為開口部分的開閉物的袋狀容器由于密閉性較低，故而即便為關(guān)閉開口部分 的狀態(tài)也有異物類侵入的問(wèn)題，另外，例如難以大量地裝入透析液之類的原本細(xì)菌數(shù)較少 的試樣以檢測(cè)細(xì)菌。
[0015] 因此，本申請(qǐng)的目的在于提供一種可抑制侵入的異物的存在且裝入大量試樣的微 生物培養(yǎng)器、微生物檢驗(yàn)試劑盒、透析液的檢驗(yàn)方法、微生物的培養(yǎng)方法、微生物的檢驗(yàn)方 法、及微生物培養(yǎng)器的制造方法。
[0016] 解決問(wèn)題的技術(shù)手段
[0017] 為了解決上述課題，本發(fā)明分開設(shè)置用以將試樣裝入培養(yǎng)袋的注入口與用以將培 養(yǎng)基裝入內(nèi)部的開封部分（unsealing portion)。
[0018]詳細(xì)而言，本發(fā)明是一種微生物培養(yǎng)器，包括將片狀培養(yǎng)基裝入內(nèi)部并進(jìn)行密封 的附注入口的培養(yǎng)袋。若為此種微生物培養(yǎng)器，則將試樣裝入培養(yǎng)袋內(nèi)時(shí)，是通過(guò)與可取放 培養(yǎng)基的開封部分相比異物難以通過(guò)的注入口裝入，因此會(huì)抑制侵入的異物的存在。另外， 由于容器的密閉性好，難以漏出，故而也可裝入大量試樣。
[0019] 此外，培養(yǎng)部的注入口只要可在注入試樣后成為密封狀態(tài)，則可為任何注入口，例 如可應(yīng)用噴口（spout)、螺旋蓋（screw cap)、壓入蓋、皇冠蓋（crown cap)、橡膠塞（rubber plug)、氨甲酸乙酯塞（urethane plug)、娃塞（silicon plug)、軟木塞（cork)、金屬制蓋 (molten cap)、棉塞、紙塞、三通旋塞（three-way cock)、扣件（fastener)、夾頭（chuck)、拉 鏈（zipper)中的任一種以上。
[0020] 另外，上述微生物培養(yǎng)器也可具備將片狀培養(yǎng)基裝入內(nèi)部并進(jìn)行密封的附注入口 的培養(yǎng)袋、及將培養(yǎng)袋裝入內(nèi)部并進(jìn)行密封的滅菌袋。若為此種微生物培養(yǎng)器，則培養(yǎng)袋的 外側(cè)的減菌狀態(tài)由減菌袋保持，因此將試樣裝入培養(yǎng)袋時(shí)，異物進(jìn)入培養(yǎng)袋中的可能性低。
[0021] 另外，也可為：上述微生物培養(yǎng)器用于檢測(cè)好氣菌，培養(yǎng)袋由透氧性的原材料所形 成。若培養(yǎng)袋由透氧性的原材料所形成，則氧氣會(huì)自培養(yǎng)袋的外側(cè)被供給至內(nèi)側(cè)，因此可培 育好氣菌。
[0022] 另外，也可為：上述微生物培養(yǎng)器用于檢測(cè)厭氣菌，培養(yǎng)袋由非透氧性的原材料所 形成。若培養(yǎng)袋由非透氧性的原材料所形成，則氧氣不會(huì)自培養(yǎng)袋的外側(cè)被供給至內(nèi)側(cè)，因 此可培育厭氣菌。
[0023] 另外，也可為：微生物培養(yǎng)器用于檢測(cè)透析液中或逆滲透水中所包含的微生物，培 養(yǎng)袋內(nèi)的培養(yǎng)基具有補(bǔ)充透析液中或逆滲透水中所含的營(yíng)養(yǎng)成分的規(guī)定輔助營(yíng)養(yǎng)成分。若 培養(yǎng)基具有補(bǔ)充透析液中原本所含的營(yíng)養(yǎng)成分程度的規(guī)定輔助營(yíng)養(yǎng)成分，則可在不使透析 液中的微生物因營(yíng)養(yǎng)過(guò)多而死滅的情況下在培養(yǎng)袋內(nèi)進(jìn)行培育。
[0024] 此外，培養(yǎng)袋內(nèi)的培養(yǎng)基所具有的所謂規(guī)定輔助營(yíng)養(yǎng)成分例如可為每平方米 0?lg~3.Og的蛋白胨（peptone)、0?lg~3.Og的酵母提取物（yeastextract)、0?lg~ 〇? 5g的酪蛋白（casein)分解物、Og~0? 5g的葡萄糖（glucose)、0? 075g~0? 3g的丙酮酸 鈉（sodiumpyruvate)、0g~0? 3g的憐酸氫二鉀（dipotassiumphosphate)、0?lg~0? 5g 的可溶性淀粉、〇? 〇lg~〇? 〇5g的硫酸鎂（magnesiumsulfate)、及0? 015g~0?lg的四唑 鹽（tetrazoliumsalt)或0? 15g~l.Og的吲哚酚（indoxyl)衍生物。若培養(yǎng)基中包含該 程度的成分，則可在培養(yǎng)袋內(nèi)培育透析液中或逆滲透水中的微生物。
[0025] 此外，培養(yǎng)袋內(nèi)的培養(yǎng)基所具有的所謂規(guī)定輔助營(yíng)養(yǎng)成分例如也可為每平方米 0? 38g ~9. Og 的肉提取物（meat extract)或魚肉提取物（fish extract)、0? 63g ~15. Og 的胰化蛋白胨（tryptone)、0g~3. Og的葡萄糖、Og~0?