專利名稱::復(fù)合型活菌生物凈水劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明屬于微生物菌劑
技術(shù)領(lǐng)域:
,應(yīng)用于水污染環(huán)境治理以及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和其他養(yǎng)殖場液體排放物的凈化處理,具體涉及含有益活菌的微生物凈水菌劑及其制備方法。
背景技術(shù):
:水體污染是一個(gè)世界性的水環(huán)境問題。我國的水資源環(huán)境保護(hù)雖然取得積極進(jìn)展,但形勢(shì)依然嚴(yán)峻。一方面,城市污染物排放量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過環(huán)境容量。另一方面,在水產(chǎn)養(yǎng)殖中,隨著動(dòng)物的排泄物增加,腐敗菌的作用下,產(chǎn)生大量的有毒害的物質(zhì),同樣的,其他養(yǎng)殖場的液體排放物也有這樣的問題。作為高新技術(shù)之一的生物技術(shù)應(yīng)用于水體污染治理巳有悠久的歷史。目前,水體污染的治理方法以微生物修復(fù)法的應(yīng)用和研究最為廣泛,這類方法有如下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)1)微生物具有很強(qiáng)的降解能力,處理效率高;2)微生物既具有很強(qiáng)的吸附力,又具有良好的沉降性,處理效果非常好;3)可處理的水量大;4)成本低且無二次污染?,F(xiàn)有技術(shù)中常采用含有益活菌微生物凈水菌劑。這類微生物凈水菌劑一般含有豐富的芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、硝化類菌、放線菌等有益菌,能夠一定程度地去除水中氨氮和亞硝酸鹽,減輕水中的富營養(yǎng)程度,改善水體污染,并且它們的代謝產(chǎn)物含有氨基酸、多種生化酶、輔酶Q、類抗生素物質(zhì)和抗病毒物質(zhì)等,對(duì)人畜和其他生物無任何負(fù)作用。但這類復(fù)合型菌劑都存在不同程度的局限性,例如適用性差,只能針對(duì)一些特定的有毒廢水或成分較為單一的高濃度廢水;其中的一些菌的生產(chǎn)成本太高,例如硝化類菌;特別是降解能力有限,持續(xù)性較差,經(jīng)常要求追加,這樣一來也增大了成本。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)提供一種降解能力更強(qiáng)、持續(xù)性更好的復(fù)合型活菌生物凈水劑。一種復(fù)合型活菌生物凈水劑,其中,該生物凈水劑包含以下微生物凈水菌枯草芽孢桿菌KX_1CCTCCNo.M208057、枯草芽孢桿菌KX_2CCTCCNo.M208058、枯草芽孢桿菌KX—4CCTCCNo.M208060,該生物凈水劑的總菌數(shù)大于lX108CFU/g。所述的復(fù)合型活菌生物凈水劑還可以包含枯草芽孢桿菌KX_3CCTCCNo.M208059或枯草芽孢桿菌KX—5CCTCCNo.M208061中一種或兩種。上述的五株微生物菌是從福建省龍海市角美鎮(zhèn)國家水產(chǎn)養(yǎng)殖示范園的淤泥中分離而得。菌種的篩選取淤泥進(jìn)行振蕩培養(yǎng)后,稀釋10—7倍數(shù)后涂瓊脂平板培養(yǎng),挑出同一菌落在3個(gè)以上的單菌落(等同于每克淤泥中的活菌含量不少于3.0X107CFU/g)作為初篩菌;對(duì)初篩菌進(jìn)行氨氮降解、脂類降解、蛋白質(zhì)降解及碳水化合物降解的定向篩選實(shí)驗(yàn),最終篩選得到上述五株降解能力強(qiáng)的枯草芽孢桿菌。上述五株菌于2008年4月21日在中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏,且于2008年4月26日檢測完畢,檢測結(jié)果為存活,保藏編號(hào)依次為枯草芽孢桿菌KX_1CCTCCNo.M208057、枯草芽孢桿菌KX—2CCTCCNo.M208058、枯草芽孢桿菌KX—4CCTCCNo.M208060、KX—3CCTCCNo.M208059、枯草芽孢桿菌KX_5CCTCCNo.M208061。上述五株的枯草芽孢桿菌具有如下特征(1)個(gè)體形態(tài)特征在LB瓊脂平板上培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌(KX15)的個(gè)體特征如下:<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>(2)群落基本特征枯草芽孢桿菌(KX15)在LB瓊脂平板上37'C培養(yǎng)1~2天,群落基本特征如下<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>(3)生理生化特性<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注+:陽性(90~100%菌株呈陽性);—陰性(90~100%菌株呈陰性)d:反應(yīng)不同,11~89%的菌株呈陽性;V—P試驗(yàn)?zāi)承┘?xì)菌在葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸縮合,脫羧成乙酰甲基甲醇,后者在強(qiáng)堿環(huán)境下,被空氣中氧氧化為二乙酰,二乙酰與蛋白胨中的胍基生成紅色化合物,稱V—P陽性,也稱V—P(+)反應(yīng)。根據(jù)《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》第九版(HoltJ.G.,KriegN.R.,SheathP.H.A.,etal.Bergey'sManualofDeterminativeBacteriology(NinthEditior01994.Williams&Wilkins.Baltimoce.Maryland.USA.)和《一般細(xì)菌常用鑒定方法》(中國科學(xué)院微生物研究所細(xì)菌分類組編著,北京-科學(xué)出版社1978.11)中提供的鑒定依據(jù)以及上述試驗(yàn)結(jié)果表明KX_1、KX—2、KX—3、KX—4、KX—5屬于原核生物界,與光無關(guān)的原核生物(門II),細(xì)菌(綱I),芽孢桿菌科(科I),芽孢桿菌屬(屬I),枯草芽孢桿菌(群I),但這五種菌株與原始菌種、現(xiàn)有的一些微生物凈水菌相比凈水能力更強(qiáng),具體如下(1)枯草芽孢桿菌KX—1、KX—2、KX—4具有更強(qiáng)的同化降解基質(zhì)碳源與無機(jī)氮源的能力;(2)KX_1、KX—4還能產(chǎn)生脂肪酶、酯酶,能分解揮發(fā)性脂肪酸分子,如部分的油脂和脂肪降解的產(chǎn)物一長鏈的和支鏈的揮發(fā)性脂肪酸(C4C9);(3)KX—2、KX—4具有較強(qiáng)的去除氨氮的能力,能在有NH/、N02—的條件下大量繁殖,去除有毒物質(zhì)NH/、N02—(將NH4+、N02—轉(zhuǎn)化生成硝酸鹽N03—),同時(shí)還生成了大量抗生素,在2~3天內(nèi)能殺死養(yǎng)殖池塘中的青苔,凈化水質(zhì);(4)KX—1能產(chǎn)生高活性的纖維素酶、淀粉酶,能分解常溫下不易被分解的纖維素和木質(zhì)素,使未腐敗的有機(jī)物發(fā)酵,進(jìn)而轉(zhuǎn)化為動(dòng)植物能有效吸收的養(yǎng)分;(5)KX—4還能生長在低溶氧水體環(huán)境中。包含有枯草芽孢桿菌KX—1、KX_2、KX—4的復(fù)合型活菌生物凈水劑能有效去除水中氨氮和亞硝酸鹽,改善水體污染;降解有機(jī)大分子,減輕水中富營養(yǎng)程度;并且上述的三株菌能將水體內(nèi)的有機(jī)大分子物質(zhì)分解成動(dòng)植物能吸收的糖類、氨基酸、維生素、生物活性物質(zhì)(激素)等,實(shí)現(xiàn)營養(yǎng)互補(bǔ)、協(xié)調(diào)共生,在水中增殖形成一個(gè)復(fù)雜而穩(wěn)定的微生物系統(tǒng)。另外,枯草芽孢桿菌KX—3能產(chǎn)生脂肪酶、酯酶、淀粉酶,同時(shí)還能形成生物絮凝體,代謝水體中營養(yǎng)物質(zhì)的同時(shí)形成可以利用的食物團(tuán)??莶菅挎邨U菌KX—5能產(chǎn)生高活性蛋白酶,且含有枯草芽孢桿菌KX—5的復(fù)合型活菌生物凈水劑還能生長在高鹽度的水體環(huán)境中。為達(dá)到最佳凈水效果,枯草芽孢桿菌KX—1CCTCCNo.M208057的菌數(shù)優(yōu)選2.5X108~4.0X109CFU/g,枯草芽孢桿菌KX—2No.M208058的菌數(shù)優(yōu)選1.5X108~3.0X109CFU/g,枯草芽孢桿菌KX—4CCTCCNo.M208060的菌數(shù)優(yōu)選2.0X108~4.0X109CFU/g。為達(dá)到最佳凈水效果,枯草芽孢桿菌KX_3CCTCCNo.M208059的菌數(shù)優(yōu)選1.5X108~3.0X109CFU/g。枯草芽孢桿菌KX—5CCTCCNo.M208061的菌數(shù)優(yōu)選3.0X107~5.0X108CFU/g。本發(fā)明的另一目的是提供了上述的復(fù)合型活菌生物凈水劑的制備方法以枯草芽孢桿菌KX—lCCTCCNo.M208057、枯草芽孢桿菌KX—2CCTCCNo.M208058、枯草芽孢桿菌KX—4CCTCCNo.M208060為菌種,將所述的這三種菌種分別進(jìn)行單體克隆培養(yǎng)(試管原種劃線培養(yǎng)、單菌落培養(yǎng)皿接種培養(yǎng)、斜面種子接種培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、一級(jí)種子罐培養(yǎng)),將培養(yǎng)合格的三株菌分別接入固體培養(yǎng)基進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)結(jié)束后再進(jìn)行混合,總菌數(shù)達(dá)到IX108CFU/g以上后,進(jìn)行制劑得到復(fù)合型活菌生物凈水劑。固體培養(yǎng)基優(yōu)選麩皮、豆粕、玉米粉、米糠的混合物。具體實(shí)施方式以下結(jié)合實(shí)施例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明的復(fù)合型活菌生物凈水劑的制備和凈水處理。圖1為試驗(yàn)例1中N03-N,N02-N的濃度隨時(shí)間的變化,縱坐標(biāo)代表濃度(mg/L),橫坐標(biāo)代表時(shí)間(天)。實(shí)施例1復(fù)合型活菌生物凈水劑的制備如下首先分別對(duì)枯草芽孢桿菌KX—lCCTCCNo.M208057、枯草芽孢桿菌KX—2CCTCCNo.M208058、枯草芽孢桿菌KX—4CCTCCNo.M208060進(jìn)行單體克隆培養(yǎng),其包括5個(gè)依次進(jìn)行的步驟,具體如下1)試管原種劃線,于37。C恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí);2)挑取培養(yǎng)皿中的單菌落進(jìn)行接種,于37'C恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)14小時(shí);3)斜面種子接種在無菌操作條件下,挑起單菌落在已滅菌的空白斜面培養(yǎng)基上,用涂棒涂布均勻,置37C恒溫培養(yǎng)24h,合格斜面收起,放24r冰箱保存;斜面培養(yǎng)基最好采用成份如下的培養(yǎng)基(單位g/L):酵母粉13、蛋白胨23、氯化鈉12、瓊脂23,自來水1000mL,pH7.27.4;4)搖瓶培養(yǎng)取合格斜面一只,以無菌操作,用已滅菌的挖塊針挖取適量大小的斜面菌膜于盛有滅菌發(fā)酵培養(yǎng)基的三角瓶中,將三角瓶置于210r/min搖床中,37'C搖床培養(yǎng)16小時(shí)后,做鏡檢和雜菌檢驗(yàn)。搖瓶培養(yǎng)基的成分與斜面培養(yǎng)基相同;5)—級(jí)種子罐培養(yǎng)取合格搖瓶培養(yǎng)種子,按0.11%的接種量接入滅過菌的種子罐培養(yǎng)基中,37'C,200轉(zhuǎn)/分鐘,培養(yǎng)16h后,做鏡檢和雜菌檢驗(yàn)。種子罐培養(yǎng)基最好采用成分如下的培養(yǎng)基(單位:g/L):豆粕粉13,玉米粉24,麩皮1.53.5,磷酸氫二鈉0.20.5,磷酸二氫鉀0.010.04,自來水1000mL。經(jīng)上述步驟培養(yǎng)合格的三株菌分別接入固體培養(yǎng)基進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)結(jié)束后按比例混合,具體如下-固體培養(yǎng)基選用麩皮、豆粕、玉米粉、米糠的混合物(要求麩皮、豆粕、玉米粉、米糠無雜質(zhì)、無霉變,且各組分的重量比如下,麩皮豆粕玉米粉=6.58:12.5:1~1.5),固體培養(yǎng)基中可添加少量微量元素,將配制好的固體培養(yǎng)基進(jìn)行121'C,壓力O.lMPa下滅菌30分鐘后,冷卻至3040'C,再將上述培養(yǎng)合格的三株菌分別接入固體培養(yǎng)基進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng),接種量在lxl03~2xl03CUF/g,在密閉無菌容器中進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng),將接種好的料均勻攤鋪在底部多孔的金屬盤內(nèi),料厚lcm5cm,再將料盤放到無菌培養(yǎng)室(P2級(jí)生化實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn))的培養(yǎng)架上,層層疊放。發(fā)酵時(shí),培養(yǎng)最適溫度為37'C(室溫控制在3540'C),濕度保持45%60%,pH值保持在6.8~7.5,定期翻動(dòng)物料以降低溫度,保持蓬松,發(fā)酵3640h后,得到發(fā)酵產(chǎn)物的顏色為深黃褐色,帶有濃濃的香味,活菌含量一般不小于150億個(gè)/克。采用沸騰干燥機(jī)對(duì)上述發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行沸騰干燥,干燥溫度小于50°C,當(dāng)水分小于10%時(shí),即干燥完成。然后用25目左右的振蕩篩對(duì)干燥好的料進(jìn)行過篩,將小于25目的麩皮、豆粕、玉米粉、米糠培養(yǎng)基過篩掉,最后對(duì)所得的混合物進(jìn)行壓片制劑,壓片前分別測試上述的三株菌的活菌含量,(枯草芽孢桿菌KX_1的菌數(shù)達(dá)2.SX108CFU/g以上,KX—2的菌數(shù)達(dá)1.5X10gCFU/g以上,KX—4的菌數(shù)達(dá)2.0X108CFU/g以上),將菌混合物倒入壓片機(jī)的料斗內(nèi)進(jìn)行壓片。復(fù)合型活菌生物凈水劑中還可以包含枯草芽孢桿菌KX—3CCTCCNo.M208059或枯草芽孢桿菌KX—5CCTCCNo.M208061中一種或兩種。KX—3和KX—5的單克隆培養(yǎng)方法與KX—l、KX—2、KX—4相同,單克隆培養(yǎng)合格后的KX_3和KX—5中的一種或兩種可以與KX—1、2、4一同接入固體培養(yǎng)基進(jìn)行混合固體發(fā)酵培養(yǎng),最后進(jìn)行制劑。試驗(yàn)1在河飩魚越冬池的應(yīng)用試驗(yàn)場所江蘇省現(xiàn)代漁業(yè)(祿口)科技示范園河飩魚越冬溫室內(nèi),越冬池面積每只120平方米(試驗(yàn)池與對(duì)照池各一只)。試驗(yàn)池與對(duì)照池試驗(yàn)前吸淤排水,加注新水,保證基礎(chǔ)水指標(biāo)一致。試驗(yàn)過程中,試驗(yàn)池不吸污,不排水,對(duì)照池按常規(guī)方法處理。取試驗(yàn)池水20Kg置于水桶中,并將實(shí)施例1所得復(fù)合型活菌生物凈水劑片劑(片劑17g,每克中大約有150億活菌)直接投入水桶中,對(duì)水桶溶液用小型氣泵增氧5小時(shí),以激活微生物孢子,5小時(shí)后再將桶中溶液潑入試驗(yàn)池。水化學(xué)指標(biāo)測定N03-N采用酚二磺酸比色法,測N02-N采用鹽酸萘胺比色法,測PH值采用酸度計(jì)測定法,測溶氧(DO)采用碘量法。結(jié)果如下-1)復(fù)合型活菌生物凈水劑對(duì)水體中水化學(xué)指標(biāo)的影響將復(fù)合型活菌生物凈水劑應(yīng)用于河飩魚越冬池,并每天定時(shí)對(duì)試驗(yàn)池和對(duì)照池的水化學(xué)指標(biāo)進(jìn)行測定,結(jié)果見表1、圖1。試驗(yàn)池在1-7天中,水化學(xué)指標(biāo)N03-N、N02-N逐漸減少,PH值趨向穩(wěn)定(見圖1),而對(duì)照池雖在中途換水排污一次,N0廣N自然降低外,N03-N始終含量較高,PH值呈下降趨勢(shì)。表l水化學(xué)指標(biāo)入比較表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>2)復(fù)合型活菌生物凈水劑對(duì)越冬河飩魚的影響經(jīng)一周對(duì)試驗(yàn)池與對(duì)照池河飩魚的攝食、活動(dòng)觀察,雖然兩池均用羅氏鳳充氣機(jī)增氧,溶解氧含量一直保持在7-8mg/L,但由于水中氨氮含量的差異,試驗(yàn)池河飩魚攝食速度明顯較對(duì)照池快,無殘留。相反,對(duì)照池河飩魚攝食速度明顯較慢,并有殘留,導(dǎo)致在試驗(yàn)過程中即使吸污換水,pH值仍有下降的趨勢(shì)??偟膩碚f,在7天的試驗(yàn)過程中,試驗(yàn)池中N03-N從0.2mg/L降至0.13mg/L,共下降了0.07mg/L,下降率達(dá)35%;NO廠N從0.18mg/L降至0.03mg/L,共下降了0.15mg/L,下降率達(dá)83.3%,PH值趨向穩(wěn)定,同時(shí)越冬河飩魚的攝食、活動(dòng)良好,達(dá)到了凈化水質(zhì)、控制水質(zhì)、無需排污、減少換水量、節(jié)約能耗的目的。試驗(yàn)2測定復(fù)合型活菌生物凈水劑的微生物絮凝活性分別將枯草芽孢桿菌KX-1、KX-2、KX-3、KX-4、KX-5五株菌在LB培養(yǎng)基(酵母粉5g/L,蛋白胨10g/L,NaCl5g/L)中培養(yǎng)30小時(shí),然后測定發(fā)酵液的絮凝活性。在測定管中,加入4.65mL的5g/L的高嶺土懸浮液,0.25raL90mmol/LCaCl2溶液,再O.lmL上述發(fā)酵液,調(diào)節(jié)PH,然后在旋渦混合器中充分混合均勻,在室溫下靜置5min,觀察絮凝現(xiàn)象,取上清液約2mL于分光光度計(jì)在550nm測定其混濁度,絮凝活性計(jì)算方法如下絮凝活性=1〃-1/B八=測試溶液之混濁度(0D550);8=參考溶液之混濁度(0D550);參考溶液為無添加生物高分子絮凝劑結(jié)果如下表2復(fù)合型活菌生物凈水劑的微生物絮凝活性<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>從表2中可以看出,菌株KX-3分泌的物質(zhì)能產(chǎn)生絮凝體,代謝水體中的營養(yǎng)物質(zhì)的同時(shí)形成可以利用的食物團(tuán)。KX-3分泌的物質(zhì)是多糖、蛋白質(zhì)或糖蛋白中的一種或幾種。試驗(yàn)3復(fù)合型活菌生物凈水劑產(chǎn)生的各種酶的活性測定分別將枯草芽孢桿菌KX-1、KX-2、KX-3、KX-4、KX-5五株菌在LB培養(yǎng)基(酵母粉5g/L,蛋白胨10g/L,NaCl5g/L)中培養(yǎng)30小時(shí),發(fā)酵液10000r/min5min離心,取上清液測定酶活力,結(jié)果見下表表3各菌株產(chǎn)生的酶活性<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>枯草芽孢桿菌KX—1、KX—3、KX—4能產(chǎn)生脂肪酶。(脂肪酶活力定義為在37'C,pH7.5條件下,每分鐘催化生成lPmol脂肪酸所需的酶量為一個(gè)活力單位。)枯草芽孢桿菌KX—1能產(chǎn)生纖維素酶。(纖維素酶活力定義為在常溫下,以葡萄糖作標(biāo)準(zhǔn)溶液,以每分鐘生成1wmol葡萄糖作為1個(gè)酶活單位。)枯草芽孢桿菌KX--1、KX—3、KX—4能產(chǎn)生淀粉酶。(淀粉酶活力定義為在30'C條件下,每一小時(shí)催化lml2%可溶性淀粉水解成糊精所需的酶量,定為一個(gè)酶活力單位。)枯草芽孢桿菌KX—1、KX—3、KX—4能產(chǎn)生酯酶。(酯酶活力定義為在30'C、pH6.0的條件下,每分鐘催化得到lumola-萘酚所需的酶量定為一個(gè)酶活力單位。)枯草芽孢桿菌KX—5能產(chǎn)生蛋白酶。(蛋白酶活力定義為在30'C、pH7.5的條件下,水解酪蛋白每分鐘產(chǎn)生酪氨酸lyg為一個(gè)酶活力單位。)。上述實(shí)施例只為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點(diǎn),其目的是讓熟悉此項(xiàng)技術(shù)的人士能夠了解本發(fā)明并加以實(shí)施,并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍,凡根據(jù)本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)所作的等效變化或修飾,都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。權(quán)利要求1、一種復(fù)合型活菌生物凈水劑,其特征在于,該生物凈水劑包含以下微生物凈水菌枯草芽孢桿菌KX-1CCTCCNo.M208057、枯草芽孢桿菌KX-2CCTCCNo.M208058、枯草芽孢桿菌KX-4CCTCCNo.M208060,該生物凈水劑的總菌數(shù)大于1×108CFU/g。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的復(fù)合型活菌生物凈水劑,其特征在于所述的枯草芽孢桿菌KX—lCCTCCNo.M208057的菌數(shù)為2.5X108~4.0X109CFU/g,所述的枯草芽孢桿菌KX—2No.M208058的菌數(shù)為1.5X108~3.0X109CFU/g,所述的枯草芽孢桿菌KX—4CCTCCNo.M208060的菌數(shù)為2.0X108-4.0X109C兩g。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合型活菌生物凈水劑,其特征在于該生物凈水劑還包含枯草芽孢桿菌KX—3CCTCCNo.M208059。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合型活菌生物凈水劑,其特征在于所述的枯草芽孢桿菌KX—3CCTCCNo.M208059的菌數(shù)為1.5X108~3.0X109CFU/g。5、根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的復(fù)合型活菌生物凈水劑,其特征在于該生物凈水劑還包含枯草芽孢桿菌KX—5CCTCCNo.M208061。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的復(fù)合型活菌生物凈水劑,其特征在于所述的枯草芽孢桿菌KX—5CCTCCNo.M208061的菌數(shù)為3.0X107~5.0X108CFU/g。7、權(quán)利要求1所述的復(fù)合型活菌生物凈水劑的制備方法,其特征在于以枯草芽孢桿菌KX—lCCTCCNo.M208057、枯草芽孢桿菌KX—2CCTCCNo.M208058、枯草芽孢桿菌KX—4CCTCCNo.M208060為菌種,將所述的這三種菌種分別進(jìn)行單體克隆培養(yǎng)(試管原種劃線培養(yǎng)、單菌落培養(yǎng)皿接種培養(yǎng)、斜面種子接種培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、一級(jí)種子罐培養(yǎng)),將培養(yǎng)合格的三株菌分別接入固體培養(yǎng)基進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)結(jié)束后再進(jìn)行混合,總菌數(shù)達(dá)到IX108CFU/g以上后,進(jìn)行制劑得到復(fù)合型活菌生物凈水劑。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的復(fù)合型活菌生物凈水劑的制備方法,其特征在于所述的固體培養(yǎng)基為麩皮、豆粕、玉米粉、米糠的混合物。全文摘要本發(fā)明公開了一種復(fù)合型活菌生物凈水劑及其制備方法,該生物凈水劑包含枯草芽孢桿菌KX-1CCTCCNo.M208057、枯草芽孢桿菌KX-2CCTCCNo.M208058、枯草芽孢桿菌KX-4CCTCCNo.M208060,且總菌數(shù)大于1×10<sup>8</sup>CFU/g。該生物凈水劑能有效去除水中氨氮和亞硝酸鹽,改善水體污染;降解有機(jī)大分子,減輕水中富營養(yǎng)程度;并且上述的三株菌能將水體內(nèi)的有機(jī)大分子物質(zhì)分解成動(dòng)植物能吸收的糖類、氨基酸、維生素、生物活性物質(zhì)(激素)等,實(shí)現(xiàn)營養(yǎng)互補(bǔ)、協(xié)調(diào)共生,在水中增殖形成一個(gè)復(fù)雜而穩(wěn)定的微生物系統(tǒng)。文檔編號(hào)C02F3/34GK101333499SQ20081010023公開日2008年12月31日申請(qǐng)日期2008年5月13日優(yōu)先權(quán)日2008年5月13日發(fā)明者鵬喬,吳自榮,孫玉華,張鯤鵬,郭大磊申請(qǐng)人:昆山工研院華科生物高分子材料研究所有限公司