專利名稱：一種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于野外貝類單胞藻的培養(yǎng)領(lǐng)域，特別涉及ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法。
背景技術(shù)：
單細(xì)胞藻類是濾食性貝類的優(yōu)質(zhì)餌料，廣泛應(yīng)用于貝類育苗和養(yǎng)殖。目前，單胞藻類的培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成熟，一股要進(jìn)行三級培養(yǎng)，即保擴(kuò)種培養(yǎng)、擴(kuò)大培養(yǎng)和生產(chǎn)培養(yǎng)。單胞藻培養(yǎng)中，除光照、營養(yǎng)鹽和溫度外，水的處理是ー個非常重要的環(huán)節(jié)。其中包括水的過濾和消毒。保種用水一般需經(jīng)ニ級砂濾，然后再經(jīng)活性炭或脫脂棉過濾，然后再進(jìn)行煮沸消毒或消毒水消毒。在藻類擴(kuò)大培養(yǎng)和生產(chǎn)培養(yǎng)中，所用海水也需經(jīng)砂濾。但是，在野外的小規(guī) 模貝類育苗或科研試驗(yàn)中，受場地或條件限制，經(jīng)常無法取得砂濾海水。如果單用脫脂棉或活性炭過濾，不僅耗時，所得水量有限，而且脫脂棉和活性炭需要隨時更換，比較麻煩，造價也較高。另外，其過濾效果也不理想，尤其對于淤泥型灘涂海水，過濾后水體含大量懸浮微粒，透光性差，影響培養(yǎng)單胞藻的生長。濾食性海水貝類可以濾食攝取海水中的浮游植物及顆粒物質(zhì)，而且濾水率極高，張繼紅等(2005年)報道，單個櫛孔扇貝每小時過濾的海水量高達(dá)4し濾食性貝類攝食時只對食物的大小和質(zhì)量有選擇性，而對是否有食用價值沒有選擇性。因此，濾食性貝類可以過濾海水中懸浮的一定粒徑范圍內(nèi)的顆粒，并將之形成假糞或糞便排入底質(zhì)中。根據(jù)Riisgadrd (1988年)研究報道，雙殼貝類對粒徑為4_5 μ m以上的顆?？梢匀繛V除；對粒徑2μπι的顆粒，其濾除率也可達(dá)到50%。而根據(jù)李占海等(2007年)的研究報道，潮灘懸沙的粒徑組成范圍在3-22 μ m之間。因此，雙殼濾食貝類的這ー攝食生理特性可加以利用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，該方法利用海水雙殼貝類過濾顆粒物質(zhì)的生理特性，配合尼龍網(wǎng)、脫脂棉等過濾材料，無需砂濾池即可制備相當(dāng)數(shù)量的較十凈海水，成本低，操作簡便，可廣泛應(yīng)用于野外試驗(yàn)或小規(guī)模育苗生產(chǎn)，具有良好的應(yīng)用前景。本發(fā)明的ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，包括(I)將海水抽提至過濾容器中進(jìn)行沉淀，過濾容器頂部用黑布遮蓋，沉淀時間為24 28小時；抽取沉淀池上部分海水至過濾容器，水泵出水ロ用尼龍網(wǎng)袋對海水進(jìn)行初過濾；(2)挑選健康的濾食性貝類放置在網(wǎng)內(nèi)，然后放入過濾容器底部，過濾容器以黑布遮蓋，每隔6小時取樣觀測，至目測水體澄清見底即可；過濾完畢，用軟管虹吸去除底部及網(wǎng)箱上的貝類糞便和沉積物；(3)對用于單胞藻保種培養(yǎng)的海水進(jìn)行煮沸消毒，對用于單胞藻擴(kuò)大培養(yǎng)和生產(chǎn)培養(yǎng)的海水使用漂白液或漂白粉進(jìn)行消毒；消毒完畢后，充氣12 16小時后用硫代硫酸鈉中和后即可用于單胞藻接種。所述步驟(I)中的過濾 容器為室內(nèi)沉淀池或玻璃鋼桶。所述步驟(I)中的尼龍網(wǎng)袋的目數(shù)為150-200目。所述步驟(2)中的濾食性貝類為文蛤。所述步驟(3)中對用于單胞藻保種培養(yǎng)的海水煮沸消毒前用脫脂棉過濾海水，去除大顆粒雜質(zhì)。所述脫脂棉過濾具體エ藝為將厚度2_3cm的脫脂棉平鋪在布氏漏斗中，以細(xì)軟管虹吸海水至漏斗中進(jìn)行過濾。所述步驟(3)中的硫代硫酸鈉的濃度為25ppm。
_5] 有益.效果本發(fā)明利用海水雙殼貝類過濾顆粒物質(zhì)的生理特性，配合尼龍網(wǎng)、脫脂棉等過濾材料，無需砂濾池即可制備相當(dāng)數(shù)量的較干凈海水，成本低，操作簡便，可廣泛應(yīng)用于野外試驗(yàn)或小規(guī)模育苗生產(chǎn)，具有良好的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)ー步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。實(shí)施例I保種培養(yǎng)I、海水沉淀所用海水取自IOOmX IOOm的室外蓄水池,用小型潛水泵將海水抽提至室內(nèi)水泥沉淀池，沉淀池規(guī)格長4mX寬3mX深I(lǐng). 5m，水泵出水管ロ套150目的尼龍網(wǎng)袋進(jìn)行初過濾,加水至I. 2m。沉淀池用黑布遮光，沉淀24小時后，將潛水泵放在一過濾網(wǎng)箱中，網(wǎng)箱放入沉淀池中，將海水抽入2個100L的白塑料桶中，桶高Im。2、濾食性貝類過濾購買市場上常見的文蛤5kg左右，平均殼長4. 5cm,清洗外売，平均放入2個塑料網(wǎng)兜中，然后分別放入白塑料桶內(nèi)。桶內(nèi)充氣，用黑布遮蓋。每隔4小時取樣觀察，同時用軟管虹吸去除桶底、網(wǎng)上貝類糞便和沉積物；至12小時后，目測可見桶底，將塑料網(wǎng)兜取出。3、脫脂棉過濾取布氏漏斗(上口徑150mm，漏嘴口徑3cm) —只，將脫脂棉層層鋪在漏斗中，壓緊，至厚度3cm以上，兩邊鋪至漏斗邊緣；50L的帶蓋圓塑料桶，頂部蓋子鉆孔，孔徑3. 5 - 4cm。將塑料圓桶放置在較低處，漏斗置于桶蓋的孔中，以細(xì)軟管自上述白塑料桶中虹吸海水至漏斗中進(jìn)行過濾，用夾子控制水流速以防溢出，至桶滿即可停止過濾。4、海水消毒取5000mL的三角燒瓶，用I: I鹽酸洗刷,用淡水沖洗后,加入脫脂棉過濾的海水至4500mL。用1500W電爐煮沸后，用雙層打印紙封ロ，并用橡皮筋扎緊。待冷卻后即可用于接種。
5、接種培養(yǎng)將球等鞭金藻和蛋白核小球藻藻種各500mL接入煮沸消毒好的4500海水中，分別加入營養(yǎng)鹽溶液，置于室內(nèi)培養(yǎng)，采用自然光照，室溫26-33°C。每天搖動瓶體4次。至第6天，藻液濃度分別達(dá)到2. 3X IO6個/ml和2. 5X IO6個/ml。而同期僅用脫脂棉過濾海水培養(yǎng)的兩種藻顏色明顯較淡，平均濃度分別為I. 4X IO6個/ml和I. 5X IO6個/ml，且生長緩慢，其中金藻受影響尤為明顯。實(shí)施例2擴(kuò)大培養(yǎng)I、海水抽提與沉淀所用海水取自IOOmX IOOm的室外蓄水池,用小型潛水泵將海水抽提至室內(nèi)水泥沉淀池，沉淀池規(guī)格長4mX寬3mX深I(lǐng). 5m，水泵出水管ロ套200目的尼龍網(wǎng)袋進(jìn)行初過濾,加水至I. 2m。沉淀池用黑布遮光，沉淀28小時后，將潛水泵放在一過濾網(wǎng)箱中，網(wǎng)箱放入沉淀池一角，將海水抽入15個100L的白塑料圓桶中，桶高lm。2、濾食性貝類過濾購買文蛤，平均殼長4. 5cm，清洗外殼，放入塑料網(wǎng)兜中，分別放入各個白塑料桶內(nèi)，每桶放2. 5kg左右。桶內(nèi)充氣，用黑布遮蓋；每隔4小時取樣觀察，同時用軟管虹吸去除桶底、網(wǎng)上貝類糞便和沉積物。至12小時后，目測水體可見桶底，將塑料網(wǎng)兜取出，此時文蛤可用于下一次海水過濾。3、海水消毒將漂白液(有效氯15-30%)按250ppm的濃度潑灑入桶內(nèi)進(jìn)行消毒，桶內(nèi)充氣使消毒液均勻分布，同時將ー塊ImX Im的透明塑料薄膜放入桶內(nèi)消毒，16小時后加入硫代硫酸鈉中和，濃度控制在25ppm左右，攪拌、充氣后即可接種培養(yǎng)。4、接種培養(yǎng)將保種的金藻和小球藻按1:8的比例接入消毒好的海水中，分別加入營養(yǎng)鹽溶液，用已消毒的透明塑料薄膜蓋住桶ロ，進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。培養(yǎng)時，用単獨(dú)的氣泵微充氣或每天攪拌3次。在光照充足的條件下，5天后藻液濃度都達(dá)到2. O X IO6個/ml以上，可用于試驗(yàn)貝類的投喂。
權(quán)利要求
1.ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，包括 (1)將海水抽提至過濾容器中進(jìn)行沉淀，過濾容器頂部用黑布遮蓋，沉淀時間為24 28小時；抽取沉淀池上部分海水至過濾容器，水泵出水ロ用尼龍網(wǎng)袋對海水進(jìn)行初過濾； (2)挑選健康的濾食性貝類放置在網(wǎng)內(nèi)，然后放入過濾容器底部，過濾容器以黑布遮蓋，每隔6小時取樣觀測，至目測水體澄清見底即可；過濾完畢，用軟管虹吸去除底部及網(wǎng)箱上的貝類糞便和沉積物； (3)對用于單胞藻保種培養(yǎng)的海水進(jìn)行煮沸消毒，對用于單胞藻擴(kuò)大培養(yǎng)和生產(chǎn)培養(yǎng)的海水使用漂白液或漂白粉進(jìn)行消毒；消毒完畢后，充氣12 16小時后用硫代硫酸鈉中和后即可用于單胞藻接種。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，其特征在于所述步驟(I)中的過濾容器為室內(nèi)沉淀池或玻璃鋼桶。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，其特征在于所述步驟(I)中的尼龍網(wǎng)袋的目數(shù)為150-200目。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中的濾食性貝類為文蛤。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中對用于單胞藻保種培養(yǎng)的海水煮沸消毒前用脫脂棉過濾海水，去除大顆粒雜質(zhì)。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，其特征在于所述脫脂棉過濾具體エ藝為將厚度2-3cm的脫脂棉平鋪在布氏漏斗中，以細(xì)軟管虹吸海水至漏斗中進(jìn)行過濾。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中的硫代硫酸鈉的濃度為25ppm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種野外貝類單胞藻培養(yǎng)用海水的制備方法，包括海水沉淀、濾食性貝類過濾、脫脂棉過濾和消毒。本發(fā)明利用海水雙殼貝類過濾顆粒物質(zhì)的生理特性，配合尼龍網(wǎng)、脫脂棉等過濾材料，無需砂濾池即可制備相當(dāng)數(shù)量的較干凈海水，成本低，操作簡便，可廣泛應(yīng)用于野外試驗(yàn)或小規(guī)模育苗生產(chǎn)，具有良好的應(yīng)用前景。
文檔編號C02F1/50GK102730909SQ20121020823
公開日2012年10月17日 申請日期2012年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月21日
發(fā)明者唐保軍, 姜朝軍, 尹飛 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所