專利名稱：Co的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及靈芝子實體中三萜類化合物的提取，具體地說是CO2-SFE(超臨界二氧化碳萃取)在提取靈芝子實體中三萜類物質(zhì)(三萜類化合物)上的應用。
背景技術(shù)：
中藥的傳統(tǒng)提取過程主要是使用水和有機溶劑在較高溫度下長時間提取樣品，如固-液萃取、索氏提取、超聲、熱提取、加速溶劑萃取、微波輔助提取等。然而，這些方法本身存在許多無法避免的缺陷，如有效成分的損失、分解、變化以及有機溶劑的殘留等。
超臨界流體萃取(supercritical fluid extraction，簡稱SFE)是近年發(fā)展較快的一種新型樣品提取技術(shù)。超臨界流體既有與液體溶劑相當?shù)妮腿∧芰?，又有?yōu)良的氣體傳質(zhì)效果。二氧化碳(臨界壓力7.3MPa、臨界溫度31.1℃)作為最常用的萃取劑，已被用于天然產(chǎn)物中非極性和弱極性有效成分的提取，尤其是揮發(fā)性、熱敏性的物質(zhì)。此外，通過加入適當?shù)母男詣?如甲醇，水等)，還可以有效地萃取極性化合物。和傳統(tǒng)的化學方法相比，CO2-SFE是一種綠色的提取技術(shù)。不用或者少用有機溶劑，不僅能保持中藥本身的藥理活性，而且具有速度快、效率高、能耗較少、成本低、安全性好等優(yōu)點。此外，CO2-SFE技術(shù)易于操作，通過壓力和溫度的改變就能夠?qū)崿F(xiàn)選擇性的改變。為此，許多醫(yī)藥專家提出應采用超臨界流體萃取等先進技術(shù)進行中藥研究開發(fā)及產(chǎn)業(yè)化。目前，CO2-SFE已經(jīng)被用于提取青蒿素、薯蕷皂素、姜黃油等中藥里的活性成分。
靈芝的藥用歷史源遠流長，被《本草綱目》列為上品。近年來的研究表明，靈芝具有許多臨床療效，如治療慢性氣管炎、慢性肝炎、冠心病、神經(jīng)衰弱、白細胞減少癥、腫瘤等。靈芝子實體富含的三萜類化合物已經(jīng)被證明是其主要的有效成分。目前，這類化合物的通常采用甲醇等有機溶劑浸提，不僅所需時間長，而且還有溶劑殘留，效果不理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是將CO2-SFE應用于靈芝子實體中三萜類物質(zhì)的提取上；本發(fā)明使用超臨界二氧化碳作為萃取介質(zhì)，不但速度快、提取率高、對環(huán)境無污染，而且提取物的有效成分不被破壞，無溶劑殘留。此外，超臨界二氧化碳萃取率和甲醇提取率相當，提取物的組成也基本相似。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為CO2-SFE在提取靈芝子實體中三萜類物質(zhì)上的應用，以超臨界二氧化碳為萃取介質(zhì)，通過同時控制萃取壓力、萃取溫度和萃取時間，可以實現(xiàn)靈芝子實體中三萜類化合物的提取。
其中較佳的操作條件如下(1)利用超臨界二氧化碳(純度96％-99.995％)作為萃取介質(zhì)；(2)通過控制萃取壓力(8-25MPa)可以改變萃取率和產(chǎn)品組成；(3)通過控制萃取溫度(25-45℃)也可以改變萃取率和產(chǎn)品組成；(4)選擇合適的萃取時間，通?？蔀椤?至180min，優(yōu)選為30-180min；(5)超臨界二氧化碳萃取得到的提取物需經(jīng)過自然干燥或者冷凍干燥過程才能得到產(chǎn)品。
具體操作步驟如下(1)用三蒸水清洗靈芝子實體；(2)將洗凈的靈芝子實體置于空氣或烘箱中干燥至恒重；(3)將干燥后的靈芝子實體進行粉碎，過120-200目篩；(4)將粉碎后的靈芝子實體粉末放置于萃取容器內(nèi)，以超臨界二氧化碳為萃取劑，在選定的萃取壓力和萃取溫度下萃取一定的時間；(5)萃取結(jié)束后，將收集容器中得到的三萜提取物經(jīng)自然干燥或者冷凍干燥即可得到產(chǎn)品。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點1.本發(fā)明通過采用超臨界二氧化碳萃取了靈芝子實體中三萜類化合物，該方法無溶劑殘留，可以推動靈芝子實體產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展。
2.本發(fā)明相對于傳統(tǒng)的提取方法，不但速度快、提取率高、對環(huán)境無污染、提取物的有效成分不被破壞、無溶劑殘留。
3.而且超臨界二氧化碳萃取率和甲醇提取率相當，提取物的組成也基本相似。因此，利用該超臨界萃取法得到的靈芝三萜類提取物能夠直接加入到各類保健品、食品和飲料等制品中，具有良好的應用前景和經(jīng)濟效益。


圖1為本發(fā)明所采用的超臨界二氧化碳萃取裝置圖；圖中1為二氧化碳氣瓶，2為改性劑瓶，3為二氧化碳泵，4為改性劑泵，5為預熱環(huán)，6為混合柱，7為萃取容器，8為背壓控制器，9為收集容器；圖2為在固定萃取溫度(30℃和35℃)下萃取壓力對萃取量影響的示意圖；圖3為在固定萃取壓力(10MPa和15MPa)下萃取溫度對萃取量影響的示意圖；圖4為在萃取溫度35℃，萃取壓力15MPa下萃取時間對萃取量影響的示意圖；圖5為本發(fā)明一個實施例的高效液相色譜分離譜圖；圖6為本發(fā)明一個對照例的高效液相色譜分離譜圖。
具體實施例方式
具體操作方法如下
(1)用三蒸水清洗靈芝子實體；(2)將洗凈的靈芝子實體置于空氣或烘箱中干燥至恒重；(3)將干燥后的靈芝子實體進行粉碎，過120-200目篩；(4)將粉碎后的靈芝子實體粉末放置于萃取容器內(nèi)，以超臨界二氧化碳為萃取劑。用二氧化碳泵將純度為96％以上的二氧化碳以1mL/min的流量壓入萃取容器中，在特定的萃取壓力(8-25MPa)和萃取溫度(25-45℃)下萃取30-180min；(5)萃取結(jié)束后，將收集容器中得到的三萜提取物經(jīng)自然干燥或者冷凍干燥即可得到產(chǎn)品。
實施例1由于在一定溫度下，物質(zhì)的溶解度取決于溶劑的密度。而SF-CO2的密度隨著萃取壓力的增加而增加，從而其提取能力也相應的增強。本發(fā)明研究了在固定的萃取溫度(30℃和35℃)時不同萃取壓力對萃取量的影響；結(jié)果參見圖2所示，其中，樣品量3g；超臨界二氧化碳流量1mL/min；背壓控制器出口溫度50℃。
實施例2溫度對于萃取率也有很大的影響。在恒壓升溫時，SF-CO2的擴散和滲透能力增強，可以提高SF-CO2與溶質(zhì)的接觸幾率。此外，升溫還可以提高溶質(zhì)的蒸氣壓。這些均有利于提高樣品的萃取率。但是，SF-CO2的密度也會隨著溫度的升高而降低，從而降低了溶質(zhì)的溶解度。此外，較高的溫度還會導致熱敏性化合物的降解。因此，確定最佳萃取溫度必須綜合考慮這幾方面的影響。本發(fā)明研究了固定的萃取壓力(10MPa和15MPa)時不同萃取溫度對萃取量的影響；結(jié)果參見圖3所示，其中，樣品量3g；超臨界二氧化碳流量1mL/min；背壓控制器出口溫度50℃。
實施例3萃取時間是影響萃取量的重要因素之一。一般而言，時間越長，萃取越充分，但是過長的時間會降低效率，增加成本。本發(fā)明研究了在萃取溫度35℃，萃取壓力15MPa時不同萃取時間對萃取量的影響；結(jié)果參見圖4所示，其中，樣品量3g；超臨界二氧化碳流量1mL/min；背壓控制器出口溫度50℃。
實施例4為了比較超臨界二氧化碳提取物和甲醇提取物之間的物質(zhì)組成的區(qū)別，本發(fā)明還建立了新的高效液相色譜分離方法。通過比較兩者的液相色譜圖(結(jié)果參見圖5和圖6所示)，CO2-SFE能夠達到與甲醇相近的萃取效果，完全可以取代甲醇作為新一代的萃取溶劑。
高效液相色譜分離條件流動相A去離子水(1％甲酸)B乙腈(1％甲酸)；線性梯度洗脫程序0～60min，流動相B由20％線性增至100％；60min后流動相B保持100％。流速為1mL/min；檢測波長為254nm。
權(quán)利要求
1.CO2-SFE在提取靈芝子實體中三萜類物質(zhì)上的應用，其特征在于以超臨界二氧化碳為萃取介質(zhì)，實現(xiàn)靈芝子實體中三萜類化合物的提取。
2.按照權(quán)利要求1所述CO2-SFE在提取靈芝子實體中三萜類物質(zhì)上的應用，其特征在于萃取壓力為8-25MPa，萃取溫度為25-45℃。
3.按照權(quán)利要求1所述CO2-SFE在提取靈芝子實體中三萜類物質(zhì)上的應用，其特征在于萃取時間為30-180min。
4.按照權(quán)利要求1所述CO2-SFE在提取靈芝子實體中三萜類物質(zhì)上的應用，其特征在于萃取介質(zhì)二氧化碳的純度為96％-99.995％。
5.按照權(quán)利要求1所述CO2-SFE在提取靈芝子實體中三萜類物質(zhì)上的應用，其特征在于超臨界二氧化碳萃取得到的提取物需經(jīng)過自然干燥或者冷凍干燥過程才能得到產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明涉及靈芝子實體中三萜類化合物的提取，具體地說是CO
文檔編號B01D11/00GK1935832SQ20051004726
公開日2007年3月28日 申請日期2005年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月23日
發(fā)明者張玉奎, 張潔, 霍玉書, 張麗華, 張維冰 申請人:中國科學院大連化學物理研究所