專(zhuān)利名稱(chēng)：大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種分子印跡聚合物微球的制備方法，特別是大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚 合物微球的制備方法。
背景技術(shù)：
大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素是應(yīng)用較多的堿性中譜抗生素，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上都是以12 16元大環(huán)內(nèi) 酯為母體，以苷鍵和1 3個(gè)分子的糖相聯(lián)結(jié)的一類(lèi)多氧大環(huán)內(nèi)酯抗生素。紅霉素 (erythromycin,簡(jiǎn)稱(chēng)EM)和羅紅霉素(roxithromycin)是最常用的14元大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素。阿 齊霉素(azithromycin)是15元內(nèi)酯環(huán)半合成的C-9叔胺衍生物，麥迪霉素(midecamycin)、乙酰 螺旋霉素(spiramycin)是半合成的16元大環(huán)內(nèi)酯抗生素的半合成的麥迪霉素和螺旋霉素衍生 物。紅霉素為生物發(fā)酵抗生素，其余均為半合成的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素。
上述抗生素的發(fā)酵體系和合成體系中，存在著結(jié)構(gòu)極為相似的多組分，其抗菌活性不同， 毒性不一。要得到高純度的抗菌藥品，在提煉和合成過(guò)程中必須進(jìn)行組分分離，如紅霉素A 和紅霉素C的結(jié)構(gòu)極為相似，但紅霉素C抗菌活性比紅霉素A低很多，而其毒性卻比紅霉素 A高很多，在藥物中為雜質(zhì)。作為藥物，必須將紅霉素C與紅霉素A予以分離，以提高藥物 的抗菌活性及降低毒性。由于其結(jié)構(gòu)極為相似，在提煉和合成過(guò)程中難以分離。
采用分子印跡技術(shù)制備得到的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物可利用其特有的空間構(gòu) 效性和特異識(shí)別性，來(lái)"記憶"大環(huán)內(nèi)酯抗生素的分子構(gòu)型，從而具備對(duì)特定異構(gòu)體的識(shí)別選 擇能力。
多年來(lái)分子印跡聚合物的制備研究主要集中在非水溶劑體系中，水分子被認(rèn)為是削弱印 跡分子與功能單體之間氫鍵作用的強(qiáng)極性溶劑，容易對(duì)印跡分子與功能基團(tuán)之間的結(jié)合作用 造成破壞，如果印跡的條件選擇不當(dāng)就很有可能導(dǎo)致印跡的失敗。而生物分子的識(shí)別系統(tǒng)大 多是在水相環(huán)境中進(jìn)行的，非水體系制備的分子印跡聚合物在水相環(huán)境中的應(yīng)用效果較差， 有機(jī)溶劑中的印跡在多數(shù)情況下又無(wú)法模擬實(shí)際應(yīng)用中的水相環(huán)境，不能滿(mǎn)足使用環(huán)境的多 樣化要求。
文獻(xiàn)"專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)柺?00610023903.7的發(fā)明專(zhuān)利"公開(kāi)了一種氯霉素分子印跡聚合物微 球的制備方法，其制備的是用于食品中氯霉素檢測(cè)分離的氯霉素分子印跡聚合物微球，氯霉 素屬苯烴基胺類(lèi)抗生素。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，尚未發(fā)現(xiàn)采用分子印跡技術(shù)在水相中制備大環(huán)內(nèi)酯類(lèi) 抗生素分子印跡聚合物微球的相關(guān)報(bào)道。 發(fā)明內(nèi)容為了克服現(xiàn)有技術(shù)采用分子印跡技術(shù)在水相中不能制備大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚 合物微球的不足，本發(fā)明提供一種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球的制備方法，在水 相中制備大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球。
本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案 一種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微 球的制備方法，其特點(diǎn)是包括以下步驟
(a) 將分散劑聚乙烯醇或羥乙基纖維素溶于50 9(TC的二次蒸餾水中，攪拌至全部溶
解，成水相分散液，分散劑用量為功能單體用量的0.8% 1.5%;
(b) 將印跡分子和功能單體溶于有機(jī)溶劑中，20 30'C條件下超聲作用30 60min后， 加入交聯(lián)劑，超聲作用10 20min，成油相混合液；印跡分子:功能單體:交聯(lián)劑=1:2 6:5 40
(摩爾比)；
(c) 在400 500r/min攪拌作用下，將步驟(b)制備的油相混合液緩慢滴加到步驟(a) 制備的水相分散液中，油相混合液與水相分散液的體積比為1:6 14;滴加速度控制在2 3ml/min;通入N215 30min， N2流量0.5 lml/min;
(d) 在400 500r/min攪拌作用下，向步驟(c)制備的混合液中加入引發(fā)劑偶氮二異丁 腈，采用熱引發(fā)進(jìn)行懸浮聚合反應(yīng)，引發(fā)劑用量為功能單體用量的0.5 1.5%，在50 7(TC 水浴中熱引發(fā)聚合10 24h，冷卻至室溫，抽濾處理，得到聚合物微球；
(e) 將步驟(4)得到的聚合物微球在20 30。C、 10 15%乙酸丁酯水溶液或10 15% 乙酸的甲醇溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫印跡分子，超聲洗脫時(shí)間為30-60min，直至 檢測(cè)不出抗生素為止；
(f) 用蒸餾水反復(fù)洗滌，除去殘留的乙酸丁酯、甲醇或乙酸；
(g) 將洗脫后的分子印跡聚合物微球在50 6(TC下真空干燥，得到大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素 分子印跡聚合物微球；
所述印跡分子是紅霉素、羅紅霉素、阿齊霉素、9， 3"-二乙酰麥迪霉素或者乙酰螺旋霉 素的任一種；所述功能單體是(X—甲基丙烯酸、丙烯酸或者丙烯酰胺的任一種；所述交聯(lián)劑 是乙二醇二甲基雙丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸酯或者N',N'-2甲基雙丙烯酰胺乙二醇二 甲基丙烯酸酯的任一種；所述有機(jī)試劑是氯仿、乙睛、甲苯、乙酸丁酯、乙酸或者甲醇的 任一種。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明在水相中制備出了大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球， 可在水相中進(jìn)行分子識(shí)別，更接近于天然的生物分子識(shí)別系統(tǒng)，為親水性藥物在水相中識(shí)別、 分離和分析提供了方法。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說(shuō)明。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1:稱(chēng)取0.622g的聚乙烯醇加入到100ml 二次蒸餾水中，攪拌下升溫至8(TC將其 溶解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中，稱(chēng)取0.734g紅霉素溶于10ml甲 苯中，加入0.4ml丙烯酸，在3(TC條件下超聲作用40min，使紅霉素和丙烯酸充分作用形成 復(fù)合物，再加入4.655g乙二醇二甲基雙丙烯酸酯，超聲10min，成油相混合液。將1份的油 相混合液在450r/min的攪拌下緩緩滴加到6份的水相分散液中，滴加速度控制在2ml/min， 使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N2l5min， N2流量0.5ml/min。然后將0.0760g偶氮二異 丁睛加入并攪拌，攪拌條件400r/min，在5(TC水浴中熱引發(fā)聚合24小時(shí)。冷卻至室溫后， 抽慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在2(TC條件下、10%的乙酸丁酯水溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫 印跡分子，超聲洗脫時(shí)間為30min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止。再用蒸餾水 反復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球60'C真空干燥，得到紅霉素分子印跡聚 合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的紅霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為60Pm。競(jìng)爭(zhēng)底物為羅霉素，分 離因子為1.87。
實(shí)施例2:稱(chēng)取0.0451g的羥乙基纖維素加入到90ml二次蒸餾水中，攪拌下升溫至50°C 將其溶解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.734g紅霉素溶于7.5ml 乙腈中，加入0.4mla-甲基丙烯酸，在25'C條件下超聲作用30min,使紅霉素和甲基丙烯酸 充分作用形成復(fù)合物，再加入3.960g乙二醇二甲基雙丙烯酸酯，超聲20min，成油相混合液。 將1份的油相混合液在400r/min的攪拌下緩緩滴加到14份的水相分散液中，滴加速度控制 在3ml/min，使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N230min， &流量lml/min。然后將0.0760g 偶氮二異丁睛加入并攪拌，攪拌條件500r/min，在70'C水浴中熱引發(fā)聚合20小時(shí)。冷卻至 室溫后，抽慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在3(TC條件下、15%的乙酸丁酯水溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫 印跡分子，超聲洗脫時(shí)間為60min,直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水 反復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球5(TC真空干燥。得到紅霉素分子印跡聚 合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的紅霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為45Wn。競(jìng)爭(zhēng)底物為羅霉素，分 離因子2.25。
實(shí)施例3:稱(chēng)取0.055g的羥乙基纖維素加入到10ml 二次蒸餾水中，攪拌下升溫至80°C 將其溶解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.734g紅霉素溶于7.5ml乙腈中，加入0.4mla—甲基丙烯酸，在20。C條件下超聲作用50min，使紅霉素與a—甲基丙 烯酸充分作用形成復(fù)合物，再加入3.960g乙二醇二甲基雙丙烯酸酯，超聲10min，成油相混 合液。將l份的油相混合液在500r/min的攪拌下緩緩滴加到7份的水相分散液中，滴加速度 控制在2ml/min，使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N220min， N2流量0.6ml/min。然后將 0.0760g偶氮二異丁睛加入并攪拌，攪拌條件450r/min，在65"水浴中熱引發(fā)聚合20小時(shí)。 冷卻至室溫后，抽慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在25。C條件下、13%的乙酸丁酯水溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫 印跡分子，超聲洗脫時(shí)間為40min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水 反復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球55'C真空干燥。得到紅霉素分子印跡聚 合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的紅霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為40tai。競(jìng)爭(zhēng)底物為羅霉素，分 離因子為2.18。
實(shí)施例4:稱(chēng)取0.622g聚乙烯醇加入到120ml二次蒸餾水中，攪拌下升溫至90。C將其溶 解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.825g羅紅霉素溶于9ml氯仿 中，加入0.5ml丙烯酸，在20'C條件下超聲作用40min，使羅紅霉素和丙烯酸充分作用形成 復(fù)合物，再加入2.90g三羥甲基丙垸三丙烯酸酯，超聲15min，成油相混合液。將1份的油相 混合液在410r/min的攪拌下緩緩滴加到8份的水相分散液中，滴加速度控制在3ml/min，使 其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N2l8min， N2流量0.7ml/min。然后將0.0760g偶氮二異丁 睛加入并攪拌，攪拌條件410r/min，在65'C水浴中熱引發(fā)聚合18小時(shí)。冷卻至室溫后，抽 慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在22'C條件下、11%的乙酸丁酯水溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫 印跡分子，超聲洗脫時(shí)間為50min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水 反復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液，所得聚合物微球54'C真空干燥。得到羅紅霉素分子印跡 聚合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的羅紅霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為50Wn。競(jìng)爭(zhēng)底物為阿齊霉素， 分離因子為1.62。
實(shí)施例5:稱(chēng)取0.0521g的羥乙基纖維素加入到100ml 二次蒸餾水中，攪拌下升溫至60°C
將其溶解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.825g羅紅霉素溶于9ml
氯仿中，加入0.5ml丙烯酸，在3(TC條件下超聲作用40min，使羅紅霉素和丙烯酸充分作用
形成復(fù)合物，再加入2.90g三羥甲基丙烷三丙烯酸酯，超聲15min，成油相混合液。將1份
的油相混合液在420r/min的攪拌下緩緩滴加到9份的水相分散液中，滴加速度控制在2ml/min，使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N2l6min， N2流量0.8ml/min。然后將0.0760g 偶氮二異丁睛加入并攪拌，攪拌條件430r/min，在55'C水浴中熱引發(fā)聚合18小時(shí)。冷卻至 室溫后，抽慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在26X:條件下、14%的乙酸丁酯水溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫 印跡分子，超聲洗脫時(shí)間為35min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水 反復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液，所得聚合物微球53'C真空干燥，得到羅紅霉素分子印跡 聚合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的羅紅霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為40^n。競(jìng)爭(zhēng)底物為阿齊霉素， 分離因子為1.93。
實(shí)施例6:稱(chēng)取0.622g聚乙烯醇加入120ml 二次蒸餾水中，攪拌升溫至80。C將其溶解， 成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.880g阿齊霉素溶于7.5ml乙腈中， 加入0.3g丙烯酰胺，在25T:條件下超聲作用60min，使阿齊霉素和丙烯酰胺充分作用形成復(fù) 合物，再加入4.655g乙二醇二甲基雙丙烯酸酯，超聲10min，成油相混合液。將1份的油相 混合液在430r/min的攪拌下緩緩滴加到10份的水相分散液中，滴加速度控制在3ml/min，使 其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N2l7min， &流量0.9ml/min。然后將0.0760g偶氮二異丁 睛加入并攪拌，攪拌條件440r/min，在6(TC水浴中熱引發(fā)聚合16小時(shí)，冷卻至室溫后，抽 慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在28'C條件下、12%的乙酸丁酯水溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫 印跡分子，超聲洗脫時(shí)間為45min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水 反復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球52。C真空干燥。得到阿齊霉素分子印跡 聚合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的阿齊霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為60toi。競(jìng)爭(zhēng)底物為羅紅霉素， 分離因子為2.35。
實(shí)施例7:稱(chēng)取0.0451g羥乙基纖維素加入90ml 二次蒸餾水中，攪拌升溫至60'C將其溶 解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.880g阿齊霉素溶于7.5ml乙 睛中，加入0.3g丙烯酰胺，在2(TC條件下超聲作用60min，使阿齊霉素和丙烯酰胺充分作用 形成復(fù)合物，再加入4.655g乙二醇二甲基雙丙烯酸酯，超聲10min，成油相混合液。將l份 的油相混合液在460r/min的攪拌下緩緩滴加到11份的水相分散液中，滴加速度控制在 2ml/min，使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N222min， N2流量0.5ml/min。然后將0.0760g 偶氮二異丁睛加入并攪拌，攪拌條件460r/min,在65'C水浴中熱引發(fā)聚合16小時(shí)，冷卻至 室溫后，抽慮處理，得到聚合物微球。將上述聚合物微球在2(TC條件下、10%乙酸的甲醇溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫印 跡分子，超聲洗脫時(shí)間為55min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水反
復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球5rc真空干燥。得到阿齊霉素分子印跡聚
合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的阿齊霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為45Wn。競(jìng)爭(zhēng)底物為羅紅霉素， 分離因子為2.18。
實(shí)施例8:稱(chēng)取0.0451g的羥乙基纖維素加入到90ml二次蒸餾水中，攪拌升溫至50'C將 其溶解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.850g9,3"-二乙酰麥迪霉 素溶于8ml乙腈中，力卩入0.4ml丙烯酸，在2(TC條件下超聲作用40min，使9,3"-二乙酰麥迪 霉素和丙烯酸充分作用形成復(fù)合物，再加入2.16g N',N'-2甲基雙丙烯酰胺乙二醇二甲基丙烯 酸酯，超聲20min，成油相混合液。將1份的油相混合液在470r/min的攪拌下緩緩滴加到12 份的水相分散液中，滴加速度控制在2ml/min，使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N224min， N2流量0.6ml/min。然后將0.0469g偶氮二異丁睛加入并攪拌，攪拌條件470r/min，在55'C水 浴中熱引發(fā)聚合20小時(shí)。冷卻至室溫后，抽慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在3(TC條件下、15%乙酸的甲醇溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫印 跡分子，超聲洗脫時(shí)間為30min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水反 復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球56X:真空干燥。得到9， 3"-二乙酰麥迪霉 素分子印跡聚合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的9， 3"-二乙酰麥迪霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為55^n。競(jìng)爭(zhēng)底 物為紅霉素，分離因子為1.88。
實(shí)施例9:稱(chēng)取0.622g的聚乙烯醇加入到120ml二次蒸餾水中，攪拌升溫至90'C將其溶 解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.850g9，3"-二乙酰麥迪霉素溶 于8ml乙腈中，加入0.3g丙烯酰胺，在25。C條件下超聲作用60min，使9，3"-二乙酰麥迪霉 素和丙烯酰胺充分作用形成復(fù)合物，再加入2.16gN',N'-2甲基雙丙烯酰胺乙二醇二甲基丙烯 酸酯，超聲20min，成油相混合液。將l份的油相混合液在480r/min的攪拌下緩緩滴加到13 份的水相分散液中，滴加速度控制在3ml/min，使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N226min， N2流量0.8ml/min。然后將0.0469g偶氮二異丁睛加入并攪拌，攪拌條件480r/min，在60'C水 浴中熱引發(fā)聚合20小時(shí)。冷卻至室溫后，抽慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在25'C條件下、13%乙酸的甲醇溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫印
跡分子，超聲洗脫時(shí)間為60min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水反
復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球57i:真空干燥。得到9,3"-二乙酰麥迪霉素分子印跡聚合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的9，3"-二乙酰麥迪霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為60toi。競(jìng)爭(zhēng)底 物為紅霉素，分離因子為1.91。
實(shí)施例10:稱(chēng)取0.0451g的羥乙基纖維素加入到90ml 二次蒸餾水中，攪拌升溫至50°C 將其溶解，成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.922g乙酰螺旋霉素溶 于8ml乙睛中，加入0.3g丙烯酰胺，在3(TC條件下超聲作用40min，使乙酰螺旋霉素和丙烯 酰胺充分作用形成復(fù)合物，再加入2.16gN'，N'-2甲基雙丙烯酰胺乙二醇二甲基丙烯酸酯，超 聲10min，成油相混合液。將1份的油相混合液在4卯r/min的攪拌下緩緩滴加到IO份的水相 分散液中，滴加速度控制在2ml/min，使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N228min， N2流 量0.5ml/min。然后將0.0469g偶氮二異丁睛加入并攪拌，攪拌條件4卯r/min，在50。C水浴中 熱引發(fā)聚合16小時(shí)。冷卻至室溫后，抽慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在26。C條件下、11%乙酸的甲醇溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫印 跡分子，超聲洗脫時(shí)間為40min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水反 復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球58'C真空干燥。得到乙酰螺旋霉素分子印 跡聚合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的乙酰螺旋霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為47^m。競(jìng)爭(zhēng)底物為麥迪 霉素，分離因子為1.93。
實(shí)施例11:稱(chēng)取0.622g聚乙烯醇加入到90ml 二次蒸餾水中，攪拌升溫至卯。C將其溶解， 成水相分散液，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)入250ml反應(yīng)器中。稱(chēng)取0.922g乙酰螺旋霉素溶于8ml乙腈 中，加入0.5ml甲基丙烯酸，在3(TC條件下超聲作用60min，使乙酰螺旋霉素和甲基丙烯酸 充分作用形成復(fù)合物，再加入2.16gN',N'-2甲基雙丙烯酰胺乙二醇二甲基丙烯酸酯，超聲 20min，成油相混合液。將1份的油相混合液在450r/min的攪拌下緩緩滴加到8份的水相分 散液中，滴加速度控制在3ml/min，使其形成乳白色的微懸浮乳液。通入N229min， N2流量 0.9ml/min。然后將0.0469g偶氮二異丁腈加入并攪拌，攪拌條件410r/min，在70。C水浴中熱 引發(fā)聚合18小時(shí)。冷卻至室溫后，抽慮處理，得到聚合物微球。
將上述聚合物微球在2rC條件下、12%乙酸的甲醇溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫印 跡分子，超聲洗脫時(shí)間為50min，直到在492nm處檢測(cè)不出紅霉素分子為止，再用蒸餾水反 復(fù)洗滌除去殘留甲醇、乙酸溶液。所得聚合物微球59i:真空干燥。得到乙酰螺旋霉素分子印 跡聚合物微球。
經(jīng)檢測(cè)，所制備的乙酰螺旋霉素分子印跡聚合物微球平均粒徑為55toi。競(jìng)爭(zhēng)底物為麥迪 霉素，分離因子為1.95。
權(quán)利要求
1、一種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球的制備方法，其特征在于包括以下步驟(a)將分散劑聚乙烯醇或羥乙基纖維素溶于50～90℃的二次蒸餾水中，攪拌至全部溶解，成水相分散液，分散劑用量為功能單體用量的0.8％～1.5％；(b)將印跡分子和功能單體溶于有機(jī)溶劑中，20～30℃條件下超聲作用30～60min后，加入交聯(lián)劑，超聲作用10～20min，成油相混合液；印跡分子∶功能單體∶交聯(lián)劑＝1∶2～6∶5～40(摩爾比)；(c)在400～500r/min攪拌作用下，將步驟(b)制備的油相混合液緩慢滴加到步驟(a)制備的水相分散液中，油相混合液與水相分散液的體積比為1∶6～14；滴加速度控制在2～3ml/min；通入N2 15～30min，N2流量0.5～1ml/min；(d)在400～500r/min攪拌作用下，向步驟(c)制備的混合液中加入引發(fā)劑偶氮二異丁腈，采用熱引發(fā)進(jìn)行懸浮聚合反應(yīng)，引發(fā)劑用量為功能單體用量的0.5～1.5％，在50～70℃水浴中熱引發(fā)聚合10～24h，冷卻至室溫，抽濾處理，得到聚合物微球；(e)將步驟(4)得到的聚合物微球在20～30℃、10～15％乙酸丁酯水溶液或10～15％乙酸的甲醇溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫印跡分子，超聲洗脫時(shí)間為30～60min，直至檢測(cè)不出抗生素為止；(f)用蒸餾水反復(fù)洗滌，除去殘留的乙酸丁酯、甲醇或乙酸；(g)將洗脫后的分子印跡聚合物微球在50～60℃下真空干燥，得到大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球；所述印跡分子是紅霉素、羅紅霉素、阿齊霉素、9，3”-二乙酰麥迪霉素或者乙酰螺旋霉素的任一種；所述功能單體是α—甲基丙烯酸、丙烯酸或者丙烯酰胺的任一種；所述交聯(lián)劑是乙二醇二甲基雙丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸酯或者N’，N’-2甲基雙丙烯酰胺乙二醇二甲基丙烯酸酯的任一種；所述有機(jī)試劑是氯仿、乙睛、甲苯、乙酸丁酯、乙酸或者甲醇的任一種。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球的制備方法，其特點(diǎn)是將分散劑聚乙烯醇或羥乙基纖維素溶于二次蒸餾水中，制成水相分散液；將印跡分子和功能單體溶于有機(jī)溶劑中，制成油相混合液；在攪拌作用下，將油相混合液加到水相分散液中，再加入引發(fā)劑偶氮二異丁腈，水浴中熱引發(fā)聚合，得到聚合物微球；然后在乙酸丁酯水溶液或乙酸的甲醇溶液中，采用超聲萃取的方法洗脫印跡分子，用蒸餾水洗滌，下真空干燥，得到大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球。本發(fā)明在水相中制備出了大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素分子印跡聚合物微球，可在水相中進(jìn)行分子識(shí)別，更接近于天然的生物分子識(shí)別系統(tǒng)，為親水性藥物在水相中識(shí)別、分離和分析提供了方法。
文檔編號(hào)B01J13/14GK101507916SQ20091002112
公開(kāi)日2009年8月19日 申請(qǐng)日期2009年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月16日
發(fā)明者張新麗, 麗 朱, 萍 管, 胡小玲 申請(qǐng)人:西北工業(yè)大學(xué)