專利名稱：：用于病原體滅活的脆性化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及可用于滅活材料(如血液制品)中的病原體的化合物以及該化合物的使用方法。
背景技術(shù)：
：通過血液制品和其它生物材料進(jìn)行的疾病傳播是一種嚴(yán)重的健康問題。盡管對獻(xiàn)血者進(jìn)行篩選和血液試驗已經(jīng)具有了巨大發(fā)展，但在試驗中，由于病毒或病毒抗體的水平^f氐，所以如乙型肝炎(HBV)、丙型肝炎(HCV)和人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒可能在血液制品中躲避檢測。除了病毒的危害，目前對用于輸血的血液中所存在的細(xì)菌或原生動物還沒有任何篩選許可試驗。另外，由于迄今未知的病原體在血液供給中變得非常普遍，具有疾病傳播的威協(xié)，所以存在著危險，而且這種危險在認(rèn)識到通過輸血傳播HIV之前就已經(jīng)發(fā)生。實驗室工作人員接觸血液或其它體液也具有健康危害問題。根據(jù)疾病治療中心的估計(防止醫(yī)護(hù)人員及公共安全人員傳播人免疫缺陷病毒及乙型肝炎指南("GuidelinesforPreventionofTransmissionofHumanImmunodeficiencyVirusandHepatitisBVirustoHealth-CareandPublic-SafetyWorkers"),每周疾病及死亡率報告(MorbidityandMortalityWeeklyReport),vol.38，no.S-6，1989年6月)，每年有1.2萬工作涉及接觸血液的醫(yī)護(hù)人員感染乙肝病毒。為了降低由輸血導(dǎo)致疾病的發(fā)生率，人們已經(jīng)提出了幾種對獻(xiàn)血者進(jìn)行補充篩選和血液試驗的方法。有人建議在臨床使用血液制品之前，在血液或血漿中加入化學(xué)試劑，可滅活病原體。在研究有效殺病毒劑中，可向血液成分中加入氮芥CH3-N(CH2CH2C1)2。然而，在滅活所研究的病毒之一所必須的濃度上會發(fā)生實質(zhì)性溶血，表明氮芥不適用于血液。LoGrippo爭人.，國際輸血協(xié)會第六次會議論文集(ProceedingsoftheSixthCongressoftheInterrmtionalSocietyofBloodTransfusion)，血液學(xué)文庫(BibliothecaHaematologica)(Hollander,ed.)，1958，pp.225-230。Horowitz，等人，血液(WoocO79:826(1992)和Horowitz,等人，輸血f7y朋s/ww'o/^25:516(1985)中描述了用于滅活病毒的"溶劑/洗滌劑(solvent/detergent)"(S/D)方法。該方法在30"C下使用1%三(正丁基)磷酸鹽和196四丁酚醛X-100四小時，從而滅活新鮮冷凍血漿中的病毒。為了滅活新鮮冷凍血漿中的病毒，Piquet爭人，VoxSang.63:251(1992)使用1%三(正丁基)磷酸鹽和1%辛苯聚醇-9。滅活血液中的病毒的另一方法涉及向血液中加入苯酚或甲醛(美國專利4,833,165)。但是溶劑/洗滌劑方法和苯酚/甲醛方法均需要在臨床使用血液制品之前去除化學(xué)添加劑。人們也描述了使用光活化劑滅活血液制品中病原體，參見如Wagner等人.，輸血，34:521(1994)。然而由于血紅細(xì)胞在紫外和可見光譜的幾個區(qū)域中吸收光，所以光處理僅局限應(yīng)用于含血紅細(xì)胞的材料。另有一些跡象表明對血紅細(xì)胞進(jìn)行光處理可以某些方式改變細(xì)胞，參見Wagner等人，輸血33:30(1993)。由此需要研制處理血液、血液衍生制品和其它生物材料的組合物和方法，它們能夠在沒有使制品或材料不適用于其使用目的的條件下，滅活存在于制品或材料中的病原體。無需在使用前從生物材料中分離的組合物特別有用，因為可省去用于分離組合物的設(shè)備和材料，且可降低處理生物材料的成本。然而，需要對組合物提出另外的要求，也就是說，如果組合物殘留在生物材料中，當(dāng)將生物材料用于所需目的時，該組合物不能具有任何危害。例如能夠滅活血液樣品中病原體的高毒性化合物應(yīng)當(dāng)預(yù)先排除將這種血液用于輸血目的(盡管這種血液樣品仍可以用于實驗室分析)。本發(fā)明的目的之一在于提供一種在沒有使材料不適用于其使用目如何完成上述目的的實例包括但不局限于在離體或體外使用化合物處理生物材料，然后在使用該材料之前分離化合物；使用一組合物，即使是其殘留在材料中，也可使材料能夠適用于所需使用目的；或使用一組合物，其能夠在滅活材料中病原體之后分解成產(chǎn)物，其中所述分解產(chǎn)物可保留在所述材料中而不會使材料不適用于其使用目的。發(fā)明公開由此，本發(fā)明的目的在于提供能夠滅活材料中病原體的化合物，其中這樣的化合物包含核酸結(jié)合部分、能夠與核酸反應(yīng)形成共價鍵的效應(yīng)子部分，以及包含共價連接核酸部分和效應(yīng)子部分的脆性連接基，其中脆性連接基可在使材料仍適用于所需目的的條件下降解從而不能再共價連接核酸結(jié)合部分和效應(yīng)子部分。本發(fā)明另一目的在于提供這類用于滅活材料中病原體的化合物，其中核酸結(jié)合部分選自吖啶、吖啶衍生物、補骨脂素、異補骨脂素和補骨脂素衍生物。本發(fā)明另一目的在于提供這類用于滅活材料中病原體的化合物，其中脆性連接基包含選自這里所定義的正向酯、反向酯、正向酰胺、反向酰胺、正向硫代酸酯、反向硫代酸酯、正向和反向硫羰酸酯、正向和反向二疏代酸、硫酸根、正向和反向磺酸根、磷酸根及正向和反向膦酸根的官能單元。本發(fā)明另一目的在于提供這類用于滅活材料中病原體的化合物，其中效應(yīng)子基團(tuán)包含烷基化試劑官能單元。本發(fā)明另一目的在于提供這類用于滅活材料中病原體的化合物，其中效應(yīng)子基團(tuán)包含選自氮芥基團(tuán)、氮芥基團(tuán)等同物、環(huán)氧化物、醛和甲醛合成元(formaldehydesynthons)的官能單元。本發(fā)明另一目的在于提供了下式化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體(包括對映體和非對映體)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>其中至少RhR2、R3、R4、R5、R6、R7、1^和Rg之一為下文定義的-V—W-X-E,其余Ri、R2、R3、R4、R5、R6、R7、Rs和Rg獨立地選自—H、-R10、-0-R10、-N02、-NH2、-NH-R10、-N(R10)2、-F、-Cl、-Br、-1、-C(=0)-R10、-C(=0)-0-R10和-0-C(=0)-R10，其中-Rw獨立地為H、-CH烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d—3烷基-芳基、-d—3雜烷基-芳基、-d-3烷基-雜芳基、-d-3雜烷基-雜芳基、-芳基-Cw烷基、-芳基-d-3雜烷基、-雜芳基-d—3烷基、-雜芳基-Cw雜烷基、-d-3烷基-芳基-d-3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3烷基-芳基-d—3雜烷基、-Cw雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-Cw雜烷基-芳基-d—3雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-d—3雜烷基；V獨立地為-Ru-、-NH-Ru-或-N(CH3)-Ru-，其中-Rn-獨立地為-d-8烷基-、-d-8雜烷基-、-芳基-、-雜芳基-、-d-3烷基-芳基-、-d-3雜烷基-芳基-、-d-3烷基-雜芳基-、-d—3雜烷基-雜芳基-、-芳基-C卜3烷基-、-芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-Cw烷基-、-雜芳基-Cw雜烷基-、-d-3烷基-芳基-d-3烷基-、-C卜3雜烷基-芳基-C卜3烷基-、-d-3烷基-雜芳基-d-3烷基-、-d-3烷基-芳基-d-3雜烷基-、-d-3雜烷基-雜芳基-C卜3烷基-、-d-3雜烷基-芳基-C卜3雜烷基-、-C卜3烷基-雜芳基-C卜3雜烷基-或-Cw雜烷基-雜芳基-d—3雜烷基-;W獨立地為-C^O)-0-、-0-c(=o)-、-c(=s)-o-、-0-C(=S)-、-c(二s)-s-、—s-c(=s)-、—c(=o)—s-、-s-c(=o)-、-o-s(=o)2-o-、-S(二0)廣0-、-0-S(=0)2-、-C(=0)-NR10-、-NR10-C(=O)-、-0-P(=0)(-OR10)-0-、-P(=0)(-0R1())-0-、-0-P(=0)(-0R10)-;X獨立地為-Ru-;和E獨立地選自-N(R12)2、_N(R12)(K13)、-S-R。和其中-R"為-CH2CH2-G，其中G獨立地為-C1、-Br、-1、-0-S(=0)2—CH3、-0-S(=0)2-CH2-C6H5或-0—S(=0)2—C6H4-CH3;以及其中R。獨立地為-d-8烷基、-d—8雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-d-3雜烷基-雜芳基、-芳基-d-3烷基、-芳基-d—3雜烷基、-雜芳基-d-3烷基、-雜芳基-C卜3雜烷基、-C卜3烷基-芳基-C卜3烷基、-d-3雜垸基-芳基-d-3烷基、-Cw烷基-雜芳基-d—3烷基、-d-3烷基-芳基-d—3雜烷基、-d-3雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-C卜3雜烷基-芳基-d-3雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-d—3雜烷基或-d—3雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基。本發(fā)明另一目的在于提供了下式化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體(包括對映體和非對映體)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中Ri、R2、R3、R4、R5、Re、&和Rs獨立地選自-H、-R1()、-0—R10、—N02、-NH2、-NH-R10、-N(R10)2、-F、-Cl、-Br、-1、-C(=0)-R10、-C(=0)-O-R10和-0-C(=0)-R10，其中-Ru)獨立地為H、-d-s烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-d—3雜烷基-芳基、-d—3烷基-雜芳基、-d—3雜烷基-雜芳基、-芳基-Cw烷基、-芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-d—3烷基、-雜芳基-d-3雜烷基、-d-3烷基-芳基-d—3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3烷基、-Cw烷基-雜芳基-d-3烷基、-d—3烷基-芳基-d-3雜烷基、-d-3雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3雜烷基-芳基-C卜3雜烷基、-d—3烷基-雜芳基-Cw雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基；R2。為—H或-CH3;和R2!為-R!廣W-X-E，其中-Ru-獨立地為-d-8烷基-、-d—8雜烷基-、-芳基-、-雜芳基-、-C卜3烷基-芳基-、-d-3雜烷基-芳基-、-Cw烷基-雜芳基-、-C卜3雜烷基-雜芳基-、_芳基-d-3烷基-、-芳基-d-3雜烷基、-雜芳基-d-3烷基-、-雜芳基-d-3雜烷基-、-d-3烷基-芳基-d-3烷基-、-C1-3雜烷基-芳基-C1-3烷基-、-d—3烷基-雜芳基-d—3烷基-、-Cw烷基-芳基-d-3雜烷基-、-d-3雜烷基-雜芳基-d-3烷基-、-Cw雜烷基-芳基-d-3雜烷基-、-d一3烷基-雜芳基-Cw雜烷基-或-d—3雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基-；W獨立地為-C(二0)—0-、-0-C(=0)-、-C(=S)—0-、-0-C(=S)—、-c(二s)-s-、-s-c(:s)-、—c(=o)—s-、—S—C(=0)—、—0-S(=0)2-0-、-S(=0)2-0—、-0—S(=0)2—、_C(=0)—NR10—、-NR10—C(=0)-、-0—P(=0)(—0R10)-0-、-P(=0)(-0R1D)-0-、-0-P(=0)(-0R10)-;X獨立地為-Ru-;和E獨立地選自-N(R！2)2、-N(R12)(R13)、-S-R12*—CH—CH2其中-Rt2為-CH2CH2-G,其中各個G獨立地為-C1、-Br、-1、-0-S(=0)2—CH3、-0—S(=0)2—CH2-C6Hs或—0—S(=0)2—C6H4-CH3;以及其中Rn獨立地為-d-8烷基、-C卜s雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-C卜3雜烷基-雜芳基、-芳基-d-3烷基、-芳基-C卜3雜烷基、-雜芳基-Cw烷基、-雜芳基-d-3雜烷基、-C卜3烷基-芳基-d-3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d—3烷基、-Cw烷基-雜芳基-d-3烷基、-Cw烷基-芳基-Cw雜烷基、-C卜3雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3雜烷基-芳基-C卜3雜烷基、-C卜3烷基-雜芳基-d-3雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基。本發(fā)明另一目的在于提供了下式化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體(包括對映體和非對映體)其中至少R"、R55、R3、R4、Rs和Rs之一為-V-W-X-E，其余R44、R55、R3、R4、Rs和Rs獨立地選自-H、-R10、-0-R10、—N02、-NH2、-NH-R10、—N(Ru))2、-F、-Cl、-Br、-1、-C(=0)-R1Q、-C(=0)-0-R1o和-0-C(=0)-其中-R!。獨立地為H、-Cw烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d—3烷基-芳基、-。-3雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-d—3雜烷基-雜芳基、-芳基-d-3烷基、-芳基-d-3雜烷基、-雜芳基-d-3烷基、-雜芳基-C卜3雜烷基、-d—3烷基-芳基-d—3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3烷基-芳基-d-3雜烷基、-d—3雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-d—3雜烷基或-Cw雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基；V獨立地為-Ru-、-NH-Rh-或-N(CH3)-RU-,其中-Ru-獨立地為-d-8烷基-、-d-8雜烷基-、-芳基-、-雜芳基-、-d-3烷基-芳基-、-C卜3雜烷基-芳基-、-d—3烷基-雜芳基-、-d-3雜烷基-雜芳基-、-芳基-d-3烷基-、-芳基-d-3雜烷基、-雜芳基-(V3烷基-、-雜芳基-d-3雜烷基-、-d-3烷基-芳基-d-3烷基-、-d-3雜烷基-芳基-d—3烷基-、-d—3烷基-雜芳基-d-3烷基-、-d-3烷基-芳基-d—3雜烷基-、-d-3雜烷基-雜芳基-d-3烷基-、-Cw雜烷基-芳基-d-3雜烷基-、-d-3烷基-雜芳基-C1-3雜烷基-或-C1-3雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基-；w獨立地為-c&o)-o-、-o-c(=o)-、-c(=s)-o-、-o-c(=s)-、-c(=s)—s—、-s-c(=s)-、_c(=o)-s—、—s-c(-o)-、—0—S(二0)2-0-、-S(=0)2—0—、—0—S(=0)2-、-C(=0)-NR10—、-NR10—C(=0)—、—O—P^OM-OIU-O-、-P(=0)(-OR10)-0-、-0-P(=0)(-0R10)-;X獨立地為-Ru-;和E獨立地選自-N(R12)2、-N(R12)(R13)、-S-Ru和/。\—CH—CH2其中-Ru為-CH2CH2-G,其中G獨立地為-C1、-Br、-1、-0-S(=0)2—CH3、-0-S(=0)2—CH2-C6H5或-O-S(=0)2—C6H4-CH3;以及其中R!3獨立地為-d—8烷基、-d—8雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-d—3雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-d—3雜烷基-雜芳基、-芳基-C卜3烷基、-芳基-d—3雜烷基、-雜芳基-d—3烷基、-雜芳基-C卜3雜烷基、-d—3烷基-芳基-d-3烷基、-d—3雜烷基-芳基-d—3烷基、-d—3烷基-雜芳基-d—3烷基、-d-3烷基-芳基-d—3雜烷基、-d-3雜烷基-雜芳基-C卜3烷基、-C卜3雜烷基-芳基-d-3雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-d—3雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-d—3雜烷基。本發(fā)明再一目的在于提供化合物P-丙氨酸，N-(2-甲氧甲酰吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙基酯；4-氨基丁酸N-(2-甲氧甲酰吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙基酯；5-氨基戊酸N-[(2-甲氧甲酰吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙基酯；p-丙氨酸，N-(2-甲氧甲跣吖啶-9-基)，3-[雙(2-氯乙基)氨基]丙基酯；(3-丙氨酸，[N，N-雙(2-氯乙基)]，3-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]丙基酯；|5-丙氨酸，[N,N-雙(2-氯乙基)]，2-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]乙基酯；[N，N-雙(2-氯乙基)]-2-氨基乙基4,5'，8-三甲基-4'-補骨脂素乙酸酯；以及J3-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙基酯及其所有的鹽。本發(fā)明提供了滅活材料(如生物材料)中病原體的方法，該方法包括向所述材料中加入一種或多種本發(fā)明化合物，然后孵育該材料。該化合物可加入到材料中形成化合物濃度(如果使用多種化合物，則為所有化合物的總濃度)為如1至500nM的最終溶液。可被處理的生物材料包括由人或其它哺乳動物或脊推動物產(chǎn)生的血液、血液制品、血漿、血小板制劑、血紅細(xì)胞、壓緊(packed)血紅細(xì)胞、血清、腦脊髓液、唾液、尿、汗水、糞便、精液、乳汁、組織樣品和均化組織樣品。完成發(fā)明的最佳方案本發(fā)明提供了用于滅活存在于材料中的病原體的化合物，特別是用于滅活存在于生物材料中的病原體的化合物，所述生物材料包括血液或其它體液。本發(fā)明也提供了利用這類化合物滅活材料中病原體的方法。本發(fā)明還提供了滅活存在于生物用途材料中或存在于生物用途材料表面上的病原體的方法。該化合物可用于體外和離體。所述生物材料或用于生物用途的材料可用于體外、體內(nèi)或離體?；衔锟赏ㄟ^與核酸反應(yīng)而滅活病原體。在水溶液中，于適當(dāng)pH值下，當(dāng)化合物與核酸結(jié)合并與核酸反應(yīng)時，所迷化合物具有一段時期的活性。在這段時期之后，化合物分解成不再能與核酸結(jié)合或與核酸反應(yīng)的產(chǎn)物?；衔锏幕瘜W(xué)結(jié)構(gòu)可廣義地描述成固定子(錨，anchor),與脆性連接基共價相連，該固定子與效應(yīng)子通過共價鍵相連。"固定子"被定義成與核酸生物聚合物(DNA或RNA)共價結(jié)合的部分。"效應(yīng)子"被定義成通過形成與核酸共價結(jié)合的機(jī)理與核酸反應(yīng)的部分。"脆性連接基"被定義成用于共價連接固定子和效應(yīng)子的部分，該部分能夠在一定條件下降解，從而使得固定子與效應(yīng)子不再共價連接。固定子-脆性連接基-效應(yīng)子的排列使得化合物能夠與核酸進(jìn)行特殊結(jié)合(由于固定子的結(jié)合能力)。這就使效應(yīng)子接近核酸，與核酸反應(yīng)?；衔锟捎糜跍缁畲嬖谟诓牧现械牟≡w，特別是存在于生物材料如血液和其它體液中的病原體。細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外以及其它病原體材料均可被滅活。例如，當(dāng)本發(fā)明化合物在生理pH下與含病原體的血紅細(xì)胞組合物結(jié)合時，化合物的效應(yīng)子部分就會與病原體核酸反應(yīng)。不與核酸反應(yīng)的效應(yīng)子部分漸漸地被溶劑水解。脆性連接基的水解與效應(yīng)子-核酸反應(yīng)及效應(yīng)子水解同時發(fā)生。因此需要脆性連接基以足夠低的速度分解，從而使材料中的病原體滅活；也就是說，脆性連接基的分解速度低于化合物與核酸的反應(yīng)速度。在足夠長的時間過去之后，化合物分解成固定子(所述固定子仍可帶有脆性連接基的片段)和效應(yīng)子-核酸分解產(chǎn)物(其中脆性連接基的片段也可能仍然與效應(yīng)子相連)，或者是分解成固定子(所述固定子仍可帶有脆性連接基的片段)和水解的效應(yīng)子分解產(chǎn)物(其中脆性連接基的片段也可能仍然與效應(yīng)子相連)。脆性連接基的另外片段也可能在化合物降解時產(chǎn)生，其不再與固定子或效應(yīng)子相連。本發(fā)明化合物的具體實施方案決定了固定子分解產(chǎn)物或效應(yīng)子分解產(chǎn)物是否帶有脆性連接基片段，或是否能夠產(chǎn)生另外的脆性連接基片段，所述片段不再與固定子或效應(yīng)子分解產(chǎn)物結(jié)合。本發(fā)明的優(yōu)選實施方案包括化合物，該化合物在脆性連接基裂解時得到具有低誘變性的分解產(chǎn)物。在效應(yīng)子水解之后，化合物的誘變性主要取決于固定子部分，即使效應(yīng)子部分已經(jīng)水解，固定子也雛與核酸進(jìn)行相互反應(yīng)且具有干擾核酸復(fù)制的能力。優(yōu)選地，在脆性連接基裂解之后，固定子片段已基本上降低了誘變性。定乂"病原體"是指能夠在人、其它哺乳動物或脊推動物中導(dǎo)致疾病的任何含核酸劑。實例包括微生物，如單細(xì)胞或多細(xì)胞微生物。病原體的實例為能夠在人、其它哺乳動物或脊推動物中導(dǎo)致疾病的細(xì)菌、病毒、原生動物門、真菌、酵母菌、霉菌和支原菌屬。病原體的基因物質(zhì)可以是DNA或RNA，基因物質(zhì)可以單鏈或雙鏈核酸形式存在。病原體的核酸可存在于溶液、細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞外中或與細(xì)胞結(jié)合。表I羅列了一些病毒，但不以任何方式限制本發(fā)明范圍。表I<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>材料或化合物的"傳/T應(yīng)用是指將材料或化合物引入到人、哺乳動物或脊推動物的活體中。材料或化合物的"沐#"應(yīng)用是指在人、哺乳動物或脊推動物的體外使用材料或化合物，其中不論是材料或化合物均不能再引入到人、哺乳動物或脊推動物的活體中去。體外應(yīng)用的實例為利用實驗室設(shè)備對血樣成分進(jìn)行分析。化合物的"離體"應(yīng)用是指將化合物用于在人、哺乳動物或脊推動物的活體外部處理生物材料，其中處理過的生物材料打算用于人、哺乳動物或脊推動物的活體內(nèi)部。例如，從人體取出血液，向該血液中引入化合物，從而滅活病原體，如果打算將此血液再引入到該人或另一人體內(nèi)，則可認(rèn)為是該化合物的離體應(yīng)用。相對于化合物的離體應(yīng)用，將人的血液再引入到該人或另一人中去應(yīng)當(dāng)是血液的體內(nèi)應(yīng)用。如果當(dāng)將血液再引入到人體時化合物仍然存在于血液中，那么該化合物除了離體應(yīng)用之外，也引入到了體內(nèi)。"生物材料"是指來自于任何類型的生物有機(jī)體的材料。生物材料的實例包括但不局限于血液；血液制品，如血漿、血小板制劑、血紅細(xì)胞、壓緊血紅細(xì)胞和血清；腦脊髓液；唾液；脲；糞便；精液；汗水、乳汁；組織樣品；均化組織樣品及其它任何源于生物有機(jī)體的物質(zhì)。生物材料也可包括摻有源于生物有機(jī)體的物質(zhì)的合成材料，如包含明礬和病原體(在這種情況下，病原體為源于生物有機(jī)體的物質(zhì))的疫苗制劑；分析用樣品制劑，該樣品制劑為血液和分析試劑的混合物；細(xì)胞培養(yǎng)基；細(xì)胞培養(yǎng)物；病毒培養(yǎng)物及其它由有機(jī)體活體產(chǎn)生的培養(yǎng)物。"生物應(yīng)用材料"是指與人、哺乳動物或脊推動物的活體接觸或加入到人、哺乳動物或脊推動物的活體中去的任何材料，其中所述接觸帶有傳染疾病或病原體的危險。這種材料包括但不局限于醫(yī)療植入物，如起搏器和人工關(guān)節(jié)；為持續(xù)釋放藥物設(shè)計的植入物；針、靜脈線等；牙科器械；牙科用材料，如牙冠；導(dǎo)管；以及其它在與人、哺乳動物或脊推動物的活體接觸或引入到人、哺乳動物或脊推動物的活體中去存在傳染疾病或病原體危險的任何材料。"滅活病原體"是指使病原體在材料中不能復(fù)制。滅活被表達(dá)成能夠復(fù)制的剩余病原體部分的負(fù)對數(shù)。由此，如果某一濃度的化合物使得材料中99%的病原體不能復(fù)制，那么只有1%(0.01)的病原體能夠復(fù)制。0.01的負(fù)對數(shù)為2，該化合物的濃度被認(rèn)為以2logs滅活了病原體，換句話說，該化合物在該濃度時具有2logs殺傷。這里使用的"烷基"是指含有碳和氫的環(huán)鏈、支鏈或直鏈化學(xué)基團(tuán)，如甲基、戊基和金剛烷基。烷基可以是未取代或由一個或多個取代基取代，所述取代基如卣基、氨基、羥基、巰基、羧基、芐氧基、苯基、芐基或其它官能團(tuán)。烷基可以是飽和的或在一個或幾個位置為不飽和(如含有-C=C-或-CsC-亞卓元)。典型地，除非另外指明，烷基可包含1至12個碳原子，優(yōu)選1至10個碳原子，更優(yōu)選1至8個碳原子。這里使用"雜烷基"是指鏈中摻有一個或多個N、0、S或P雜原子的烷基鏈。雜原子上可不帶取代基或帶有一個或多個上述取代基。"雜原子"也可包括雜原子N、S和P的氧化形式。雜烷基的實例包括(但不局限于)甲氧基、乙氧基和其它烷氧基基團(tuán)；含醚基團(tuán)；含跣胺基團(tuán)，如多肽鏈；環(huán)系，如哌啶基、內(nèi)酰胺和內(nèi)酯；以及其它在碳鏈中摻有雜原子的基團(tuán)。典型地，除非另外指明，除了雜原子之外，雜烷基基團(tuán)將包含1至12個碳原子，優(yōu)選1至10個碳原子，更優(yōu)選1至8個碳原子。"芳基"或"Ar"是指具有一個環(huán)(如苯基)或多個稠合環(huán)(如萘基或蒽基)的不飽和芳族碳環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可任意地為未取代或由氨基、羥基、Cw烷基、烷氧基、卣素、巰基和其它取代基取代。"雜芳基"基團(tuán)是指具有一個環(huán)(如吡啶基或呋喃基)或多個稠合環(huán)(如吖啶基、丐l哚基或苯并噻呤基)且在至少一個環(huán)中帶有至少一個雜原子(如N、0或S)的不飽和芳族碳環(huán)基團(tuán)，該環(huán)可任意地為未取代或由氨基、羥基、烷基、烷氧基、離素、巰基、酰氧基、羧基、千氧基、笨基、千基和其它取代基取代。裙漆語本發(fā)明使用了下列縮略語QM(奎納克林氮芥)；Hct(血細(xì)胞比容)；RBC(血紅細(xì)胞)；LB(Luria培養(yǎng)基)；cfu(菌落形成單位)；pfu(蝕斑形成單位)；廳M(Delbecco's改進(jìn)的eagles培養(yǎng)基)；FBS(胎牛血清)；PRBC(壓緊血紅細(xì)胞)；rpm(每分鐘轉(zhuǎn)數(shù))；TC(組織培養(yǎng)物)；NHSP(正常人血清庫)；NCS(新生小牛血清)；PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)。必合參W記夢潛源可用作固定子、連接基和效應(yīng)子的基團(tuán)有許多種?？捎糜诨衔锏墓潭ㄗ踊鶊F(tuán)實例包括但不局限于嵌入劑；小溝粘合劑；大溝粘合劑；通過靜電作用結(jié)合的分子，如聚酰胺；以及通過特定的序列作用結(jié)合的分子。下列基團(tuán)是一些可能的固定子基團(tuán)非限定性實例吖啶(及吖啶衍生物，如硫酸原黃素、吖啶黃素、二吖啶、吖啶酮、苯并吖咬、奎納克林)、放線菌素、anthracyclinones、紫紅霉素、柔毛霉素、噻噸酮(及噻噸酮衍生物，如米來西D)、安曲霉素、絲裂霉素、棘霉素(醌霉素A)、三骨菌素、橢圓玫瑰樹堿(及其二聚物、三聚物和類似物)、norphilinA、芴類(及其衍生物，如芴酮、藥二胺)、吩嗪、菲啶、吩噻嗪(如氯丙嗪)、吩噁溱、苯并瘞唑、olj烴和噻噸、蒽醌、蒽吡唑、苯并噻喃吲哚、3,4-苯并芘、1-芘基環(huán)氧乙烷、苯并蒽、苯并安乃近、喹啉類(如氯喹、奎寧、苯基喹啉、甲酰胺)、呋喃駢香豆精(如補骨脂素和異補骨脂素)、乙錠、丙錠、甲氧檗因(coralyne)和多環(huán)芳烴及其環(huán)氧乙烷衍生物；偏端霉素、紡錘菌素、其它lexitropsins、煙酸己可堿(Hoechst)33258及其它煙酸己可堿染料、DAPI(4'，6-二脒基-2-苯基丐l哚)、重氮氨苯脒乙酰甘氨酸鹽和三芳基甲烷染料；黃曲霉毒素；精胺、亞精胺及其它聚酰胺；以及通過序列特殊作用結(jié)合的核酸或類似物，如三股螺旋形成、D-環(huán)路形成和與單鏈靶成對的直接堿基(directbase)。這些化合物的衍生物也是固定子基團(tuán)的非限定性實例，其中化合物的衍生物包括但不局限于在任何位置帶有一個或多個任何類型的取代基的化合物、化合物的氧化或還原產(chǎn)物等。可用于本發(fā)明的連接基的實例包括但不局限于包含下述官能團(tuán)的化合物酯(其中酯的羰基碳位于固定子與酯的sps氧之間，這種排列也被稱為"正向酯")、"反向酯"(其中酯的sps氧位于固定子與酯的羰基碳之間)、硫代酸酯(其中硫代酸酯的羰基碳位于固定子與硫代酸酯的硫之間，也被稱為"正向硫代酸酯")、反向硫代酸酯(其中硫代酸酯的硫位于固定子與硫代酸酯的羰基碳之間，也被稱為"反向辟u代酸酯")、正向和反向發(fā)u羰酸酯、正向和反向二辟l代酸、硫酸根、正向和反向磺酸根、磷酸根和正向和反向膦酸根。"硫代酸酯"是指-C(二O)-S-基團(tuán)；"硫羰酸酯"是指-C^S)-0-基團(tuán)，而"二硫代酸"是指-C(二S)-S-基團(tuán)。脆性連接基也可包括酰胺，其中酰胺的羰基碳位于固定子與酰胺的氮之間(也稱為"正向酰胺")，或者其中的酰胺的氮位于固定子與酰胺的羰基碳之間(也稱為"反向酰胺")。對于可被指定為"正向"和"反向"的基團(tuán)，正向取向是指下述官能團(tuán)的取向其中當(dāng)官能團(tuán)水解之后，所得酸性官能團(tuán)與固定子部分共價相連，所得醇或硫醇官能團(tuán)與效應(yīng)子部分共價相連。反向取向是指下述官能團(tuán)的取向其中當(dāng)官能團(tuán)水解之后，所得酸性官能團(tuán)與效應(yīng)子部分共價相連，所得醇或硫醇官能團(tuán)與固定子部分共價相連。脆性連接基(如酰胺部分)也能夠在酶降解條件下，通過所處理的生物材料中的內(nèi)源酶或通過向材料中加入的酶而降解。可用于本發(fā)明的效應(yīng)子實例包括但不局限于氮芥基團(tuán)、氮芥基團(tuán)等同物、環(huán)氧化物、醛類、甲醛合成元及其它烷基化劑或交聯(lián)劑。氮芥基團(tuán)被定義成包括單或雙鹵代乙胺基團(tuán)和單鹵代乙基硫化物基團(tuán)。氮芥基團(tuán)等同物被定義成通過與氮芥類似的機(jī)理反應(yīng)的基團(tuán)(也就是，通過形成吖丙啶鐳鹽中間體，或通過帶有或形成氮丙啶環(huán)，所述氮芥基團(tuán)等同物能夠與親核試劑反應(yīng))，如單或雙甲磺?；野坊鶊F(tuán)、單甲磺?；一蚧锘鶊F(tuán)、單或雙甲笨磺?；野坊鶊F(tuán)和單甲笨磺?；一杌锘鶊F(tuán)。甲醛合成元被定義成能夠在水溶液中分解成甲醛的任何化合物，包括羥甲胺，如羥甲基甘氨酸。甲醛合成元的實例可參見美國專利4,337，269和國際專利申請W097/02028。盡管本發(fā)明不限定于任何特定機(jī)理，但是形成或能夠形成親電性基團(tuán)(如氮芥基團(tuán))的效應(yīng)子基團(tuán)被認(rèn)為能夠與核酸反應(yīng)或形成與核酸的共價下列通式I、II和III描述了本發(fā)明化合物的三個實施方案。通式I化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體(包括對映體和非對映體)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>(I)其中至少Ri、R2、R3、R4、R5、R6、R7、Rs和Rg之一為下文定義的-V-W-X-E，其余RhR2、R3、R4、R5、R6、R7、Rs和&獨立地選自-H、-R10、-0-R10、-N02、-NH2、-NH-R10、-N(R10)2、-F、-Cl、-Br、-1、-C(=0)-R10、-C(=0)-0-R10和-0-C(=0)-R10,其中-Rn)獨立地為H、-d—8烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d-3烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-d-3烷基-雜芳基、-d-3雜烷基-雜芳基、-芳基-d-3烷基、-芳基-d-3雜烷基、-雜芳基-d—3烷基、_雜芳基-C卜3雜烷基、-d-3烷基-芳基-d-3烷基、-Cw雜烷基-芳基-d—3烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3烷基、-(V3烷基-芳基-C卜3雜烷基、-C卜3雜烷基-雜芳基-Cw烷基、-(V3雜烷基-芳基-d—3雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-d—3雜烷基；V獨立地為-Ru_、-NH-Rn-或-N(CH3)-Ru-，其中-Rn-獨立地為-d-8烷基-、-d-8雜烷基-、-芳基""、-雜芳基-、-Cw烷基-芳基-、-C卜3雜烷基-芳基-、-d—3烷基-雜芳基-、-d-3雜烷基-雜芳基-、-芳基-d-3烷基-、-芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-d-3烷基-、-雜芳基-d-3雜烷基-、-C卜3烷基-芳基-C卜3烷基-、-Cw雜烷基-芳基-CV3烷基-、-d-3烷基-雜芳基-d-3烷基-、-d-3烷基-芳基-(V3雜烷基-、-d-3雜烷基-雜芳基-d-3烷基-、-d-3雜烷基-芳基-d-3雜烷基-、-d-3烷基-雜芳基-d-3雜烷基-或-C1-3雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基-；w獨立地為-c(=o)-o-、-o-c(-o)-、-C(=S)-0-、-0-c(=s)-、-c(=s)-s—、-s-c(-s)-、-C(=0)-S—、—s—c(=o)-、—O-S(=0)2-0—、—S(二0)2一0—、-O一S(=0)2-、-C(=0)—NR10—、—NR10—C(=0)—、—O一P(=0)(—0R10)-0-、-P(=0)(-ORJ-O-、-O-P(=0)(-0R10)-;X獨立地為-Ru-;和E獨立地選自-N(R12)2、-N(R12)(R13)、-S-R"和A——CH—CH2其中-R12為-CH2CH2-G，其中每個G獨立地為-Cl、-Br、-1、-O-S(=0)2-CH3、—0—S(=0)2-CH2-C6H5或-0—S(=0)2—C6H4-CH3;以及其中Rn獨立地為-d-8烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d-3烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-C卜3雜烷基-雜芳基、-芳基-d—3烷基、-芳基-d—3雜烷基、-雜芳基-C卜3烷基、-雜芳基-Cw雜烷基、-d—3烷基-芳基-d—3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3烷基、-Cw烷基-雜芳基-Cw烷基、-d—3烷基-芳基-C卜3雜烷基、-C卜3雜烷基-雜芳基-C卜3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基。通式n化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體(包括對映體和非對映體)R4R-(II)其中R,、R2、R3、R4、R5、R6、&和R8獨立地選自-H、-R1()、-0—R10、-N02、-NH2、-NH-R1()、-N(R1())2、-F、-Cl、-Br、-1、-C(=0)-R1()、-C(=0)-0-R1(和-0-C(=0)-Rl0,其中-Rt。獨立地為H、-C卜8烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d—3烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-d-3烷基-雜芳基、-C卜3雜烷基-雜芳基、-芳基-d-3烷基、-芳基-d-3雜烷基、-雜芳基-C卜3烷基、-雜芳基-Cw雜烷基、-d-3烷基-芳基-d—3烷基、-d-3雜烷基-芳基-C卜3烷基、-Cw烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3烷基-芳基-d-3雜烷基、-d-3雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-d—3雜烷基-芳基-d-3雜烷基、-C卜3烷基-雜芳基-Cw雜烷基或-C卜3雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基；R加為—H或-CH3;和Ru為—Ru—W—X-E，其中-Ru-獨立地為-d-8烷基-、-d-s雜烷基-、-芳基-、-雜芳基-、-Cw烷基-芳基-、-d-3雜烷基-芳基-、-d-3烷基-雜芳基-、-C卜3雜烷基-雜芳基-、-芳基-d-3烷基-、-芳基-d-3雜烷基、-雜芳基-d-3烷基-、-雜芳基-d-3雜烷基-、-Cw烷基-芳基-C卜3烷基-、-d-3雜烷基-芳基-d-3烷基-、-d-3烷基-雜芳基-d-3烷基-、-d—3烷基-芳基-d-3雜烷基-、-d-3雜烷基-雜芳基-d—3烷基、-d-3雜烷基-芳基-Cw雜烷基-、-d—3烷基-雜芳基-Cw雜烷基-或-Cw雜烷基-雜芳基-C卜3雜烷基-；W獨立地為-C(二0)-0-、-O-C(二O)-、-C(=S)+、-0-C(二S)-、-c(=s)-s-、-s-c(=s)-、-C-S-、-S-C(二O)-、-0-S(二0)2-0-、-S(=0)2-0—、—0—S(=0)2—、-C(-O)-NRh)-、-nr1()-c(=o)-、-o-p(=o)(-ORh))-0-、-P(=0)(-ORh))-0-、-0-P(=0)(-OR10)-;X獨立地為-Ru-;和E獨立地選自-N(R12)2、-N(R12)(R13)、-S-Ru和o/\—CH—CH2其中-Ru為-CH2CH2-G,其中各個G獨立地為-C1、-Br、-1、-0-S(=0)2-CH3、—O-S(=0)2—CH2—C6H5或-O-S(=0)2—C6H4—CH3;以及其中R^獨立地為-d—8烷基、_d—8雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-C卜3雜烷基-雜芳基、-芳基-Cw烷基、-芳基-C卜3雜烷基、-雜芳基-Cw烷基、-雜芳基-C卜3雜烷基、-Cw烷基-芳基-d-3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3烷基、-C卜3烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3烷基-芳基-C卜3雜烷基、-d—3雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3雜烷基、-C卜3烷基-雜芳基-C卜3雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基。通式III化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體(包括對映體和非對映體)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>其中至少R"、R55、R3、R4、Rs和R8之一為-V-W-X-E,其余R44、R55、R3、R4、Rs和R8獨立地選自-H、-R1()、-0-R1()、—N02、-NH2、-NH-R1()、一N(R10)2、-F、-Cl、-Br、-I、-C(=0)-R10、-C(=0)-O-Rk^+C^-其中-仏。獨立地為H、-d—8烷基、-d-s雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d-3烷基-芳基、-d—3雜烷基-芳基、-3烷基-雜芳基、-d—3雜烷基_雜芳基、-芳基-d一3烷基、_芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-d-3烷基、-雜芳基-C!一3雜烷基、-d—3烷基-芳基-d一3烷基、-d—3雜烷基-芳基-3烷基、-d—3烷基-雜芳基-d-3烷基、-d—3烷基-芳基-d—3雜烷基、-C卜3雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3雜烷基-芳基-C卜3雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-C卜3雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基；V獨立地為-R"-、-NH-Ru-或-N(CH3)-Ru-,其中-Rn-獨立地為-d-8烷基-、8雜烷基_、-芳基-、-雜芳基-、-d-3烷基-芳基-、-C卜3雜烷基-芳基-、-d-3烷基-雜芳基-、-Cw雜烷基-雜芳基-、-芳基-d-3烷基-、-芳基-(V3雜烷基、-雜芳基-d-3烷基-、-雜芳基-C卜3雜烷基-、-d-3烷基-芳基-d—3烷基-、-d—3雜烷基-芳基-d—3烷基-、-d-3烷基-雜芳基-Cw烷基-、-C卜3烷基-芳基-d-3雜烷基-、-d-3雜烷基-雜芳基-d-3烷基-、-d-3雜烷基-芳基-d-3雜烷基-、-d-3烷基-雜芳基-C1-3雜烷基-或-C1-3雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基-;W獨立地為-C^0)-0-、-0-C(=0)-、-C(=S)-0-、-0—C(=S)—、—c(=s)—s—、—s-c(=s)—、-c(=o)—s—、—s—c(=o)-、—0—S(=0)2—o-、-S(=0〉2-0—、—0—S(=0)2—、-C(=0)—NR10—、-NR10—C(=0)—、-0—P(=0)(_0R10)-0-、-P(=0)(-0R1())-0-、-0-P(=0)(-0R10)-;X獨立地為-Ru-;和E獨立地選自-N(R12)2、-N(R12)(R13)、-S-Ru和其中-Ri2為-CH2CH2-G，其中G獨立地為-C1、-Br、-1、-0-S(=0)2—CH3、—0—S(=0)2—CH2-C6H5或—0—S(=0)2-C6H4-CH3;以及其中Rn獨立地為-C卜8烷基、-d—8雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d-3烷基-芳基、-d-3雜烷基-芳基、-d-3烷基-雜芳基、-C卜3雜烷基-雜芳基、-芳基-d-3烷基、-芳基-C卜3雜烷基、-雜芳基-d—3烷基、-雜芳基-d—3雜烷基、-C卜3烷基-芳基-d—3烷基、-d-3雜烷基-芳基-C卜3烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3烷基、-d-3烷基-芳基-d-3雜烷基、-d—3雜烷基-雜芳基-Cw烷基、-d-3雜烷基-芳基-d—3雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基。應(yīng)當(dāng)可以理解，在上述通式I中，吖啶核為固定子部分，-v-w-x-基團(tuán)包含脆性連接基，E基團(tuán)為效應(yīng)子部分。類似地，在上述通式III中，補骨脂素核為固定子部分，-V-W-X-基團(tuán)包含脆性基團(tuán)，E基團(tuán)為效應(yīng)子基團(tuán)。通式II為通式I的子集。本發(fā)明實例性化合物為下式結(jié)構(gòu)，指定為IV:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula>在IV中，2-甲氧甲酰吖啶環(huán)系通過嵌入用作固定子部分。雙(氯乙基)胺基團(tuán)用作效應(yīng)子部分，所述效應(yīng)子部分能夠?qū)⒑怂嵬檠趸?；如果所述效?yīng)子不與核酸反應(yīng)，則氮芥水解。連接基為-NH-CH2CH2-C(二O)-0-CH2CH2-。在生理pH的水溶液中，該含酯連接基在幾小時內(nèi)就水解。改變?nèi)芤簆H可改變連接基的水解速率；對于相應(yīng)的式IV醇類似物(其中式IV的-Cl原子被-0H替代)，在pH3、37r下100分鐘之后可觀察到^1%的酯鍵的水解；在pH8、37匸下IOO分鐘之后則可觀察到大于50%的酯鍵的水解。所得的式IV水解產(chǎn)物為N-(2-甲氧甲酰基-9-吖啶基)丙氨酸和三乙醇胺其中2-甲氧甲酰吖啶帶有作為連接基片段的p-丙氨酸，效應(yīng)子分解產(chǎn)物帶有作為連接基片段的乙醇基團(tuán)。在生理pH值下，|3-丙氨酸的羧酸鹽將帶負(fù)電荷，該特征降^氐了相連的2-甲氧甲酰吖咬基團(tuán)插入到帶負(fù)電荷的核酸分子中去的趨勢。由此降低了N-(2-甲氧甲酰-9-吖t基)-p-丙氨酸相對于9-氨基吖啶的誘變性。這種降低固定子片段誘變性的效力揭示了由脆性連接基提供的一個優(yōu)點。在類似于式IV化合物中的脆性連接基的另一個優(yōu)點在于通過改變9-氨基吖啶固定子與酯官能團(tuán)之間的連接臂長度，可調(diào)節(jié)其水解速率。正如下文實施例7和表III和IV中所描述，對于本發(fā)明某些化合物的二醇類似物(其中氮芥的-Cl原子被-OH替代)，氨基吖啶固定子與酯基之間的亞甲基數(shù)量的增加可導(dǎo)致在pH8、37X:下的水溶液中的水解量降低。下文給出了本發(fā)明化合物的一些實例，這些實例只用來說明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>本發(fā)明化合物的應(yīng)用實例包括但不局限于將固體或溶液形式的本發(fā)明化合物加入生物材料，從而滅活存在于生物材料中的病原體；在本發(fā)明化合物溶液中對應(yīng)用于生物用途的材料進(jìn)行浸漬或其它處理，從而滅活存在于材料中或材料表面上的病原體；以及將本發(fā)明化合物夾雜在靶向脂質(zhì)體中，使化合物對準(zhǔn)特定的細(xì)胞，從而破壞那些細(xì)胞中的核酸。人們應(yīng)當(dāng)注意到當(dāng)將本發(fā)明化合物設(shè)計成在某些條件下水解時，該化合物在其它條件下則是穩(wěn)定的。對于脆性連接基和效應(yīng)子基團(tuán)，在用于儲存的某些條件下相對穩(wěn)定是所需的?；衔锟杀粌Υ娴姆绞綄嵗ǖ痪窒抻跓o水固體、含低水分的油、冷凍水溶液、冷凍非水溶液、懸浮液和不允許脆性基閉或效應(yīng)子基團(tuán)水解的溶液(如液態(tài)非水溶液)?；衔锟纱娣旁趏n以下(如于冷凍箱中)或0"C以上(如于冷藏箱中或環(huán)境溫度下)。優(yōu)選地，化合物在儲存條件下于下列時期內(nèi)是穩(wěn)定的三天至一年、一周至一年、一月至一年、三月至一年、六月至一年、一周至六月、一月至六月、三月至六月、一周至三月或一月至三月?；衔锏姆€(wěn)定性取決于其儲存的溫度及其儲存的狀態(tài)(如非水溶液、無水固體)。^^糸義澤^務(wù)斧利用病原體滅活化合物處理生物材料的條件可基于所選擇的材料和滅活化合物進(jìn)行選擇。用于處理生物材料(如血液制品)的病原體滅活化合物的典型濃度為大約0.lpM至5mM數(shù)量級，如約為500nM。例如，所用病原體滅活化合物的濃度為足以滅活樣品中病原體的至少約1log,或至少約21ogs,如至少約3至61ogs。在一個實施方案中，病原體滅活化合物在不大于500nM濃度下產(chǎn)生至少1log殺傷，更優(yōu)選在不大于約500pM濃度下產(chǎn)生至少3logs殺傷。在另一個非限定性實例中，病原體滅活化合物在大約0.1^M至大約3mM濃度下產(chǎn)生至少1log殺傷，優(yōu)選至少6logs殺傷。利用病原體滅活化合物孵育血液制品可進(jìn)行如約5分鐘至72小時或更長，或約1至48小時，如約1至24小時或約8至20小時。對于血紅細(xì)胞，孵育可典型地在約2t!至37C下進(jìn)行，優(yōu)選約18*0至25"C。對于血小板，溫度優(yōu)選為約20至24"C。對于血漿，溫度可以為約0至60X:,典型地為約0-24匸。被處理材料的pH優(yōu)選為約4至10"C，更優(yōu)選為約6至8匸。本發(fā)明的一個實施方案包括化合物及其在滅活血液或血液制品中的病原體中的使用方法，為此目的的優(yōu)選儲存條件應(yīng)當(dāng)是便于在血庫中儲存和使用化合物的那些條件。在用于滅活材料中或材料表面上病原體的條件下，脆性連接基和效應(yīng)子基團(tuán)將經(jīng)歷水解或反應(yīng)。脆性連接基和效應(yīng)子基團(tuán)的水解速率應(yīng)當(dāng)足夠慢，從而能夠滅活所需數(shù)量的病原體。例如，用于滅活病原體所需的時間應(yīng)當(dāng)為約5分鐘至72小時。優(yōu)選地，利用病原體滅活化合物處理含血紅細(xì)胞的材料應(yīng)當(dāng)不損害血紅細(xì)胞的功能或使處理后的血紅細(xì)胞改性。對血紅細(xì)胞功能的實質(zhì)性損害作用的不足可通過測試血紅細(xì)胞功能領(lǐng)域中公知的方法測定。例如可測定指示劑的水平并與未處理對照組進(jìn)行比較，所述指示劑如細(xì)胞內(nèi)ATP(5'-三磷酸腺苷)、細(xì)胞內(nèi)2,3-DPG(2,3-二磷酸甘油)或細(xì)胞外鉀。另外也可測定溶血、pH、血細(xì)胞比容、血紅蛋白、滲透脆性、葡萄糖消耗和乳酸鹽生成。測定ATP、2,3-DPG、葡萄糖、血紅蛋白、溶血和鉀的方法是本領(lǐng)域已有技術(shù)。如參見Davey爭乂，7>雄/^2.。/7,52-528(1992),本公開在此引作參考。測定血紅細(xì)胞功能的方法也描述在下述文獻(xiàn)中Greenwalt爭乂，F(xiàn)bx5^,互8:94-99(1990);Hogman等人，VoxSang，65:271-278(1993)和Beutler等人，血液(Blood)，Vol.59(1982)，這些公開在此引作參考。細(xì)胞外鉀的水平可利用CibaCorning型614K十/Na+分析儀(CibaCorningDiagnosticsCorp.,Medford,MA)測定，DiagnosticsCorp.,Medford,MA)測定。下列物質(zhì)如IgG、白蛋白和IgM對血紅細(xì)胞的結(jié)合也可利用現(xiàn)有技術(shù)已知的方法測定。分子對血紅細(xì)胞的結(jié)合可利用如吖啶和IgG的抗體進(jìn)行測定。用于測定的抗體可市購或利用本領(lǐng)域公知的方法制得，所述方法描述在下列文獻(xiàn)中Harlow和Lane,"Antibodies,aLaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratory",1998，此公開在此引作參考。例如抗IgG(anti-IgG)可從下列公司市購Caltag,Burlingame,CA;SigmaChemicalCo.,St.Louis,MO和LampireBiologicalLaboratory,Pipersvelle，PA。在病原體滅活化合物處理含血紅細(xì)胞的材料的方法中，一天后細(xì)胞外的鉀水平優(yōu)選不超過未處理對照組所顯示的量的3倍，更優(yōu)選不超過2倍。在另一實施方案中，儲存28天后處理過的血紅細(xì)胞的溶血優(yōu)選低于3%，更優(yōu)選42天后低于2%，最優(yōu)選在4X:下儲存42天后低于或等于約1%。利用病原體滅活化合物可處理大量的生物材料。生物材料包括血液制品，如全血；壓緊血紅細(xì)胞；血小板及新鮮或冷凍血漿。血液制品進(jìn)一步包括血漿蛋白質(zhì)部分、抗血友病因子(因子VIII)、因子IX和因子IX復(fù)合物、纖維蛋白原、因子XIII、凝血酶原和凝血酶、免疫球蛋白(如IgG、IgA、IgD、IgE和IgM及其片段)、白蛋白、干擾素和淋巴因子。另外還包括合成血液制品。其它生物材料包括疫苗、重組DNA生成的蛋白和寡肽配體。另外還包括臨床樣品，如尿、汗水、唾液、糞便、脊髓液。還進(jìn)一步包括合成血液或血液制品儲存介質(zhì)。^^^^舉炎^^存f必合參^求^在處理后，可降低生物材料(如血液制品)中病原體滅活化合物的濃度?？墒褂玫姆椒ê脱b置描述在下述文獻(xiàn)中PCTUS96/09846;1997年1月6日申請的美國序號08/779,830;以及共同申請從血液制品中減少小有機(jī)化合物的方法和裝置"MethodsandDevicesforReductionofSmallOrganicCompoundsfromBloodProducts"，序號為PCT/US98/00531,代理人記事本序號為2000440，1998年1月6曰申請，這些文獻(xiàn)的公開在此全部引作參考。扭在另一實施方案中，本發(fā)明化合物可以與淬滅劑結(jié)合的方式使用。淬滅病原體滅活化合物在生物材料中的不希望的副反應(yīng)的方法描述在美國共同臨時申請中，該申請的序號為60/070597，申請日為1998年1月6日，代理人記事本序號為282173000600，"用于淬滅生物材料中病原體滅活劑的方法(MethodsforQuenchingPathogenInactivatorsinBiologicalMaterials)",該公開在此引作參考。該共同申請公開了淬滅病原體滅活化合物的不希望的副反應(yīng)的方法，所述病原體滅活化合物包括形成或能夠形成親電性基團(tuán)的官能團(tuán)。在該實施方案中，利用病原體滅活化合物和淬滅劑處理材料，其中淬滅劑包含能夠與親電性基團(tuán)進(jìn)行共價反應(yīng)的親核官能團(tuán)。優(yōu)選的淬滅劑為硫醇，如谷胱甘肽。實施例下列特定實施例用來說明制備用于本發(fā)明方法的有代表性化合物的方法，提供了對專業(yè)人員有用的化合物的相關(guān)數(shù)據(jù)；以及用來說明確定化合物有效性的方式。這些實施例不是用來限定本發(fā)明的范圍。除非另外指明，所有NMR光譜均是在CDCl3中于Varian200MHz儀器上記錄的；所記錄的化學(xué)位移為相對于四甲M烷(TMS);利用PerkinElmerFTIR記錄IR光譜；利用梯度型YMCC8柱進(jìn)行HPLC測定，流動相A為5mMH3P04水溶液，流動相B為5mMCH3CN;在DMS0或乙醇中制備樣品，在注射前保持在^15X:。<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>實施例1合成P-丙氨酸，N-(2-甲氧甲?；灌?9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽(化合物IV)步驟AP-丙氨酸，N-(叔丁氧基羰基)，2-[雙(2-羥乙基)氨基]乙酯在N2氣氛、-15"C下，向攪拌著的N-(叔丁氧基羰基)-j3-丙氨酸(20.3g，107mmo1)和4—甲基嗎淋(13.Oml,12.0g，119mmo1)的無水THF(200ml)溶液中加入氯甲酸異丁酯(13.9ml，14.6g,107mmo1),得到中間形成的白色沉淀(4-甲基嗎啉'HC1)。反應(yīng)混合物在-15*C下攪拌5分鐘，接著在-15*0下將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移至包含攪拌著的三乙醇胺(48.3g，324mmo1)的無水THF(150ml)溶液的燒瓶中。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?3t:,再攪拌1.5小時，接著通過真空過濾分離沉淀。從濾液中真空分離THF,將所得粘性黃色油狀物分配在水(500ml)和EtOAc(5x150ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層。真空分離溶劑，得到25.8g(7596)所需產(chǎn)物p-丙氨酸，N-(叔丁氧基羰基)，2-[雙(2-鞋乙基)氨基]乙酯，為淺黃色油狀物。〗HNMR:S5.32(brs，lH)，4.18(t>J=5.4Hz,2H)，3.58(XJ=5.1Hz，4H),3.37-3.23(m,2H)，2.80(t^J=5.4Hz^2H)，2.69(XJ=5.1取4H)，2.51&J=6.02H),1.41(s,9H)未觀測到羥基質(zhì)子，13CNMR:S173.0，156.4，79.8;63.3，60.2,57.3，54.1，36.7，35.3，28.8.步驟B|3-丙氨酸，N-(叔丁氧基羰基)，2-[雙(2-叔丁基二甲基珪烷氧基乙基)氨基]乙酯在N2下，將攪拌著的由步驟A得到的p-丙氨酸，N-(叔丁氧基羰基)，2-[雙(2-羥乙基)氨基]乙酯(22.7g,70.9mmo1)和咪唑(11.lg,163mmo1)的乙腈溶液(70ml)冷卻至0"C。然后加入叔丁基二甲基硅烷基氯(534mg，3.54mmo1),在0"C下再攪拌反應(yīng)混合物5分鐘。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?3t:，攪拌2小時，接著通過真空過濾分離所得白色沉淀(咪唑.HC1)。真空除去濾液中的乙腈，將剩余物質(zhì)分配在飽和鹽水(600ml)和EtOAc(3x200ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層。真空分離溶劑，得到35.2g(90%)所需產(chǎn)物p-丙氨酸，N-(叔丁氧基羰基)，2-[雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)氨基]乙酯，為黃色油狀物。iHNMR:S5.29(brs,1H),4.14(t，J-6.0Hz，2H),3.65(t，J=6.3Hz,4H),3.37(表5t見<b2H),2.85(t,J=6.0私2H),2.71(XJ=6.3Hz,4H)，2.49仏J-5.9Hz,2H)，1.42(s,9H)，0.88(s，18H),0.03(s,12H);I3CNMR:S172.7，156.3，79.7，63.3，62.4,57.7，54.3,36.7，35.3,28.9,26.4,18.7,49.步驟C(3-丙氨酸，2-[雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)氨基]乙酯向含由步驟B得到的p-丙氨酸，N-(叔丁氧基羰基)，2-[雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)氨基]乙酯(3.Olg,5.48mmo1)的燒瓶中加入純?nèi)宜?5ml)，放出C02氣體。攪拌反應(yīng)混合物5分鐘，真空分離三氟乙酸。將剩佘物質(zhì)分配在飽和NaHC0s(100ml)和EtOAc(3x30ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層。真空分離溶劑，得到2.45g(100%)所需產(chǎn)物p-丙氨酸，2-[雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)氨基]乙酯，為淺黃色油狀物。iHNMR:S4.12(t,J=6.0Hz^2H)，3.63(t^J-6.4取4H),2.96&J=6.2取2H)，2.84(仁J=6.02H)，2.69(t^J=6.4Hz，4H)，2.44(t>J=6.2取2H)，0.86(s，18H),0.03(s,12H).未觀測到胺質(zhì)子.^CNMR(CDCl3):S173.0，63.4,62.6，57.9,54.4，38.4,38.1,26,4，18.7，>4.9.步驟DP-丙氨酸，N-(2-甲氧甲?；灌?9-基)，2-[雙(2-羥乙基)氨基]乙酯在室溫下，通過在10mlCHC13中攪拌12.5小時，將P-丙氨酸，2-[雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)氨基]乙酯(736mg，1.64mmo1)與9-甲氧基吖啶-2-羧酸甲酯(669mg,2.50mmo1)反應(yīng)。過濾沉淀(吖咬酮)，將濾液分配在飽和NaHC03(100ml)和CHC13(3x35ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層并真空濃縮，得到1.61g粘性褐色油狀物。所得二醇的脫保護(hù)可通過下述方法進(jìn)行在N2氣氛下，將粗中間在冷卻至O"C時，利用HF/歡咬(1.Oml)處理。在攪拌l小時條件下，將溶液溫?zé)嶂潦覝亍Ｕ婵粘]發(fā)性物質(zhì)，將殘留物分配在飽和NaHC03水溶液(100ml)和CHC13(3x35ml)之間。干燥合并的有機(jī)層并濃縮，得到649mg黃褐色固體。進(jìn)行制備性TLC(C-18,CH3CN)后得到收率為20%的所需二醇，p-丙氨酸，N-(2-甲氧甲?；灌?9-基)，2-[雙(2-羥乙基)氨基]乙酯(通過HPLC測定，純度>80%);iHNMR:58.82(s,1H)，U卜7.94(m，2H),7.9參7.72(叫2H)，7.59(表觀t，1H)，7.23(表觀t1HX4.304.18(叫2H)，4.184.05(叫2H),3.89(s^3H)，3.69-3.50(叫4機(jī)2.92-2.73(ro,4H)，2.73-2.554H)未觀察到胺和雍基質(zhì)子。步驟EP-丙氨酸，N-(2-甲氧甲酰基吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽通過類似于Peck,等人(美國化學(xué)學(xué)會雜志(/.j邁.C力e巡.5bc《7J卯，力描述的方法，將j3-丙氨酸，N-(2-甲氧甲?；灌?9-基)，2_[雙(2-羥乙基)氨基]乙酯轉(zhuǎn)變成二氯化合物。在室溫下攪拌步驟D產(chǎn)物(41mg，0.090,ol)的純SOC:U(6ml)黃色溶液20小時。真空除去S0C12,得到黃色固體(二鹽酸鹽)。將物質(zhì)分配在飽和NaHC03(50ml)和CH2C12(3x20ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層。真空除去溶劑得到35.4mg二氯化合物游離堿，為桔黃色膠狀物。lH畫R:58.82(s,1H)，8.20-7.83(m，4H),7.5(表觀t^1H)，7.25(表觀、1H)，4.36415(m，4H),3.93(s,3H),3.48(t^J=6.9Hz,4H)，3.06-2.77(m^4H)，2.S6(tJ-6.9H^4H)未觀測到胺質(zhì)子.13CNMli;S172.3,166.6，155.2，146.5,144.6，133.1，131.6，128.7,124.6,124.3,116.1，114.3,63.7,57.2,53.5,52.9,46.3,42.5,35.2.未觀察到其它碳。通過滴加1MHC1的醚溶液，從CH2Cl2中沉淀出HC1鹽，得到P-丙氨酸,N-(2-甲氧甲?；挂?9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽(化合物IV),為黃色固體(通過HPLC測定，純度為81%)。根據(jù)類似的方法，可制備J3-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽(化合物V)。由此，在步驟D中，利用9-甲氧基吖啶替代9-甲氧基吖啶-2-羧酸甲酯，可得到中間體二醇(7.1%),為黃色油狀物(通過HPLC測定，純度為74%)。工HNMR:S8.14(d，J=7-5Hz^2H),7.93(d，J=8.6取2H)，7.52(表觀t,2H)，7.23(表觀仁2H),4.364.08(n^4H),3.76-3.5(aw4H),3.08-2.60(取8H)未觀察到胺和羥基質(zhì)子。在23X:下攪拌中間體二醇(37.3mg,0.0793mmo1)的亞發(fā)u酰氯(4.0ml)溶液7.5小時。真空除去亞碌u酰氯，得到黃色油狀物。將該物質(zhì)溶解在乙醇(~4ml)中，真空除去溶劑。然后將該物質(zhì)溶解在CH2Cl2(4ml)中，真空除去溶劑；重復(fù)該步驟兩次。然后利用己烷(3x4ml)研磨該物質(zhì)，得到40.Omg(通過HGPLC測定，純度為42%)產(chǎn)物，為黃色吸濕玻璃狀固體。為了分析，有些物質(zhì)可通過下述方法轉(zhuǎn)變成游離胺將其分配在飽和NaHC03和CH2Cl2之間，在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層，真空除去溶劑。lHNMR:58.21-S.0O(rn^4H)，7.66(表觀t，2H)，7.3S(表觀12H),4.26"4.12(m^2H)，4.12,3.98(m，2H),3.43(t^J=6.9H2;4H)，2.96-2.68機(jī)8H)未觀察到胺質(zhì)子。根據(jù)上述步驟，只是利用N-(叔丁氧基羰基)-4-氨基丁酸替代N-(叔丁氧基羰基)-P-丙氨酸，可制備4-氨基丁酸N-(2-甲氧甲?；灌?9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽，化合物VI(通過HPLC測定，純度為78%)。lHNMR:S8.89(s,l)，8.12(表觀t,2)，7.93-7.802)，7.59(表觀I),7.36-7J20(rn^1),4.16(t>2，J=5.7Hz)，4.07-3.92(m,2),3.97(s，3)，3.46(t,4,J=6.9Hz),2.93-2.80(m,6),2.60(T，2,J=6.5Hz)，2.29-2.12(m,2).未觀察到胺質(zhì)子。實施例2利用3-[N，N-雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)]氨基丙醇替代實施例1步驟A中的三乙醇胺，然后繼續(xù)步驟C，可制得p-丙氨酸，N-(2-甲氧甲?；灌?9-基)，3-[雙(2-氯乙基)氨基]丙酯二鹽酸鹽，化合物VIII(通過HPLC測定，純度為63%)。!HNMR:S8.91(s,l),8J20-7-93(m，4)，7.18(表觀t，1)，7.39(表觀t，I),4.30(m,4),3.96(s，3),3.484,J=6.9Hz)，2.88-2.60(m^2),2.83ft4，J=6,9Hz),2.62(t>2，J=6.7Hz),1.85-1.682)未觀察到胺質(zhì)子。實施例3在實施例1中合成的化合物也可通過下述方法制備合成P-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽(化合物V):方法II步驟A(3-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，甲酯鹽酸鹽合并9-氯吖咬(11.7g,OrganicSynthesis,Coll.VolIII,pg57)、p-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(9.9g)和甲醇鈉(3.26g)，加入60ml甲醇。利用磁性攪拌器攪拌混合物并回流5.5小時。除去加熱裝置，趁熱(S35"C)過濾懸浮液。通過再加約10ml甲醇漂洗固體鹽，濃縮合并的深綠色濾液，得到21g含水綠黃色固體。將該固體溶解在350ml沸騰的2-丙醇中，在室溫下結(jié)晶。利用約15ml2-丙醇和15ml己烷漂洗所得晶體，然后空氣干燥，得到15.5g亮黃色產(chǎn)物，P-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，甲酯鹽酸鹽(收率78.5%)。.s,2H);3.24(t^J-7.0Hz,2H);3.76(s，3H);4.45(brs，2H);7.23(app.J=S取2H);7.49(app.>8Hz，2H);8.11(4J-8.4Hz，2H);8.30(d,J=&4取2H);9.68(brs，0.5H).IR:1574(s)，1691(s),1726(s)，2336(m)，2361(m),3227(m).步驟B(3-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-鞋乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽將步驟A得到的p-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，甲酯鹽酸鹽(5.00g)分配在甲苯(750ml)、飽和Na2C03(200ml)和水(50ml)之間。利用甲苯(3x250ml)再萃取水層，合并有機(jī)層，利用飽和Na2C03水溶液(50ml)洗滌。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將甲苯體積降至約100ml。然后加入三乙醇胺(30ml),形成部分不混溶體系。然后加入NaOMe(50mg)的MeOH(2nd)溶液。在室溫下，通過攪拌旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，迅速從反應(yīng)混合物中除去溶劑。除去溶劑之后，反應(yīng)混合物在真空下再放置1-1.5小時，得到糖漿狀溶液。為了分離過多的三乙醇胺，將粗混合物分配在CH2C12(200邁1)和鹽水(200ml)之間。用CH2C12(5x100ml)萃取鹽水層，合并有機(jī)層，利用鹽水(50ml)洗滌，然后利用0.5MHC1(2x100ml)萃取》合并水性酸層，利用CH2C12(50ml)洗滌。在CH2C12(200ml)存在下，利用粉狀K2C03(s)使酸溶液呈堿性。分離有機(jī)層，再利用CH2Cl2(5X100ml)萃取水層。利用鹽水(50ml)洗滌合并的有機(jī)相，利用無水Na2S04(s)干燥，汽提后得到粗二醇游離胺(5.02g)為粘稠黃色膠狀物。通過NMR測定，該物質(zhì)與實施例1中通過另一方法制得的物質(zhì)相同。將部分上述粗物質(zhì)(0.400g)與異丙醇(100ml)—起劇烈攪拌，利用1MHC1的乙酸溶液酸化。驟冷膠狀物，除去第一次沉淀物。除去一半溶劑后，第二次晶體得到p-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-羥乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽，為亮黃色結(jié)晶固體(0.200g,HPLC測定，純度>95%)。1HNMR:58-11(表觀4H)，7.69(表觀12H),7.41(表觀t>2H),423(t,J-5.4Hz，2H),4.03(t,J=5.9Hz,2H)，3.58(t,J=5.2H;4H)，2.73(、J=5.4Hz,2H),2.70(t，J-5.9Hz^2H)2.68(t^J=5.2取4H).未觀測到胺和羥基質(zhì)子13CNMR:S173.3，151.7，149.4，130.5，129.5,124.0,123.4'118.4,63.5，60-1，57.3，54.0,46.6，35.8.步驟CP-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽將S0Cl2(0，5ml)加入到攪拌著的步驟B得到的p-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-羥乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽(113mg，0.24mmo1)的CH3CN(0.5ml)懸浮液中。在23*C下攪拌所得黃色溶液16小時，接著真空除去揮發(fā)性物質(zhì)。將剩余桔黃色油狀物溶解在EtOH(~2ml)中，真空除去EtOH，得到黃色固體。利用己烷(2x3ml)研磨該物質(zhì)，真空除去殘留溶劑，得到123mg所需物質(zhì)j3-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽(HPLC測定，純度為93%),為黃色固體。1HMMR:S8.09(表觀t^-8.8Hz，4H)，7.66(表觀t,J-7.6祖2H)，7.38(表觀仁J-7.7Hz2H)，4.14(!>Jf=5,9取2H)，4.00(、J=5.8Hz^2H)，3.43(t>J-6.9Hz4H),2.87("J-6.9Hz^4H)，2.77(t^J=5.9H2;2H乂2.69(XJ-5.82H).未觀測到胺質(zhì)子，13CNMR:S173.0，151.5，49.4，130.5,129.6，124.1，123.4,118.6，63.5，57.3,53.5，46.7,42.5，35.7.IR(HC1鹽的KBr小丸)3423，3236，2939，2879，1736，1634，1586，1572，1540,1473,1272,173cm一l.實施例4P-丙氨酸，N-(4-甲氧基吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽，化合物IX通過下述方法制備p-丙氨酸，N-(4-甲氧基吖啶-9-基)，甲酯混合1.4g(5.84mmol)4，9一二甲氧基吖啶、0.89g(6.42咖o1)p-丙氨酸甲酯鹽酸鹽和20ml甲醇，然后在N2氣氛下加熱回流12小時。接著真空濃縮反應(yīng)，溶解在CHCl3-異丙醇(50ml，4:lv/v)中，利用50%NH40H(2x25ml)和鹽水(lx25ml)洗滌。利用Na2S04干燥有機(jī)層并真空濃縮，得到1.24g(68%)甲酯(通過HPLC測定，純度>74%)，為黃色油狀物；Rf(Si02，乙酸乙酯)=0.25;IR(薄膜)3363,2947，1730，1611，1573，1518，1484,1463,1423,1420，1246，1170,1081cnrl;HN盧:52.70ftJ=5-7Hz),3.74(s,3H)，4.00ft21i>6.3Hz),4.11(s，3H),6.98(d1H,^=7.4Hz)，7.36(m2H),7.65(m2H)，8.12(42H^8.5Hz);13CNMR):S35.7,46.9，52.3，56-5,107.2，115.3，119.8,123.5,124.1,130.0，151.4,173.6.在實施例3步驟B描述的條件下，將其轉(zhuǎn)變成二醇，得到647mg黃色油狀物。HPLC分析粗混合物表明收率為85%(X=278nm);Rf(Si02，20%甲醇-乙酸乙酯)=0.17;IR(薄膜)3337,2947,2828,1726,1616,1569，1522，兩，1463，1420,1348，1250,1174，1127,1081，043curl;!HNMR:S2.7(叫8H),3.554H),3.974.08(m，2H)，4.08(s，3H)，4.19(t,>5.5Hz),6.96(d，^7.4Hz),7.29(化2H),7.61(iru2H),8.10(取2H);乜CNMR;536.0，46.9，53.7,56.4,57.1，60.1，63.3，107.4，115.7，119.1，U9.6,123.2，123.5，123.9，128.5，130.0,140.8,147.4，151.6，I5L7，154.3，173.3.正如實施例3步驟C描述，利用亞硫酰氯將其轉(zhuǎn)變成p-丙氨酸，N-(4-甲氧基吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽。利用乙酸乙酯快速過濾(Si02)粗產(chǎn)物，接著再用10%甲醇-乙酸乙酯過濾；柱中降解一些產(chǎn)物后得到58mg黃色油狀物；Rf(Si02，乙酸乙酯)=0.26;IR(薄膜):3405,2955,2828,1726，1616,1577，1518，1463，1416>1348，1246，1174,1123，1081,1013cm-l;lHNMR:S2:69-2.99(m^8H)，3.45(t^4H>J"-6.7Hz),4.03(m^2H),4.09(s,3H)，4.16"Hz)，6.97(41H,>7.7Hz)，7.32(m,2H)，7.65(m，2H),8.12(4通過共沸分離過量的亞硫酰氯(2x5ml甲笨)真空濃縮反應(yīng)，可分離粗品形式的二鹽酸鹽。HPLC表明起始原料完全耗盡，4-甲氧基吖啶酮(R"22.3分鐘)為主要雜質(zhì)。iHNMR(CD30D):S3.18(、2Ii>6.4Hz),3.71(m,6H)，4.04(m^4H),4J8(s，3H),4.51(rn^2H)，7.17(m，2H)，7.56(叫2H)，7.91-8.15(m^2H),8-55(山1HJ=8.8Hz).根據(jù)類似的方法從3-氯-9-甲氧基-4-甲基吖啶制備P-丙氨酸，N-(3-氯-4-甲基吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽，化合物X。游離堿的NMR為57.96-8.17(叫3H)，7J29-7.523H),4.19ftJ=5.8取2H)，4.00(s，3H),3.89(t^J=5.12H),3.47ftJf-6.8取4H)，2.91ftJ=6.8Hz，4H)，2.83(XJ=5.8H2>2H)，2.67(t，J=5.SHz，2H).根據(jù)類似的方法從6-氯-2，9-二甲氧基吖啶制備(3-丙氨酸，N-(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酯二鹽酸鹽，化合物XIII。游離堿的^NMR為S7.96-8.17(nUH)，7.29-7.52(m，3H)，4.19(t^J-5.SHz^2H)，4.00(s，3H),3.89(t，J=5.1H;2H)，3.47(t，J=6.8Hz^4H),2.91(t，J=6.8Hz，4H)，2.83(仁J=5.8Hz^2H)，2.67(t^J=5.52H).實施例5j3-丙氨酸，[N，N-雙(2-氯乙基)]，3-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]丙酯二鹽酸鹽，化合物XI步驟Ap-丙氨酸，[N,N-雙(2-三異丙基硅烷氧基)乙基]乙酯將P-丙氨酸乙酯鹽酸鹽(1.99g，12.9mmol)、K2C03(6.0g,43.4mmo1)和碘乙基三異丙基甲珪烷基醚(9.47g，28.9mmo1)的乙腈(175ml)漿狀液回流5-7天。真空蒸發(fā)溶劑后，利用CH2Cl2研磨固體。利用稀Na2C03水溶液洗滌有機(jī)層，然后利用鹽水洗滌，在無水Na2S04上干燥。粗產(chǎn)物通過珪膠色譜純化(1:4Et0Ac/己烷)，得到5.60g油狀物|3-丙氨酸，[N，N-雙(2-三異丙基硅烷氧基)乙基]乙酯(83.1%)。lHNMR:S4.12(+J-7.1Hz^2H)，3.73(仁J=6.8Hz，4H)，2.92(t，J=7.3取2H),2.70J=6.6Hz,4H)，2.46(t,J=7.4Hz,2H),1.4-0.9(叫45H包括三峰L25(3H)反單峰1-06和1-05).步驟B13-丙氨酸N,N-雙(2-三異丙基硅烷氧基)乙酯將上述步驟A得到的P-丙氨酸，[N，N-雙(2-三異丙基硅烷氧基)乙基]乙酯(5.60g，10.8mmo1)和氬氧化鋰(0.59g，14.lmmol)在乙醇中攪拌并回流3小時。分離溶劑，將粗產(chǎn)物分配在CH2Cl2和稀NaHC03水溶液之間。利用鹽水洗滌有機(jī)層，在無水Na2S04上干燥并汽提，得到J3-丙氨酸N，N-雙(2-三異丙基硅烷氧基)乙酯，為淺黃色油狀物(5.03g，收率95.1%)。iHNMR:53鄰(tJ=5.54H)，3.04(t^J=6.2Hz2H)，2.92aJ=5.54H),2.50(、J=6.1Hz，2H)，1.06(s，42H).步驟C|3-丙氨酸，[N,N-雙(2-羥乙基)]，3-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]丙酯在&氣氛下于CH2C12(lml)中攪拌由上述步驟B得到的(3-丙氨酸N，N-雙(2-三異丙基硅烷氧基)乙酯(51.0mg,0.104mmo1)。在水浴中驟冷的同時，滴加SOC12(0.5ml)，攪拌反應(yīng)2.25小時。在汽提反應(yīng)混合物除去過量的S0Ch后，加入無水CH2C12(0.5邁1)，在N2氣氛下使溶液在冰浴上驟冷。加入驟冷的9-(3-羥基)丙氨基-6-氯-2-甲氧基吖啶(29.0mg,91.5,ol)的pH2Cl2(lml)漿狀液。0.5小時之后，將混合物分配在CH2Cl2和NaHC03水溶液之間。利用鹽水洗滌有機(jī)層，在無水Na2S04上干燥并汽提。利用己烷研磨得到的膠狀物，汽提己烷提取液，得到非常粗的三異丙基甲硅烷基被護(hù)的原料和產(chǎn)物的混合物(53.5mg)。為了去除三異丙基甲硅烷基基團(tuán)，在冰冷卻THF(lml)中攪拌部分粗品被護(hù)的二醇(33.lmg)。在加入HFA比咬(0.5ml)之后，在充填N2氣下于環(huán)境溫度中攪拌混合物2.5小時。將反應(yīng)混合物分配在CH2C12和NaHC03水溶液之間，利用稀NaHC03水溶液洗滌有機(jī)層數(shù)次，除去過量的HF/吡啶。在利用鹽水初步干燥后，再利用無水Na2S04干燥，汽提溶劑，得到粗二醇(13.lmg)。將其與另外的粗二醇(5.Omg)合并，以95CH2Cl2/5iPA/1TFA作為洗脫液，通過C-18制備性TLC純化，得到二醇TFA鹽。在將該鹽分配在CH2Cl2和NaHC03水溶液之間之后，利用鹽水干燥有機(jī)層，再利用無水Na2S04干燥并汽提，得到二醇游離堿[3-丙氨酸，[N，N-雙(2-幾乙基)],3-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]丙酯(5.0mg)。lHNMR:S7.92-8.25(m^3H)，7.23-7.47(叫3H),4.30&J=5.72H))，3.98(s,3H)，3.81仏J-6.2Hz^2H),3.64(tJ=4.9Hz,4H)，2.86(U=6.1Hz，2H)，2.67(t^J-4.9取4H),2.51(t>J=5.9Hz，2H)，2.04(表觀五重峰，2H).步驟Dp-丙氨酸，[N，N-雙(2-氯乙基)],3-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]丙酯二鹽酸鹽，化合物XI將上述得到的P-丙氨酸，[N，N-雙(2-羥乙基)]，3-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]丙酯(4.Oing，0.0073mmo1)溶解在CH2C12(lml)中，在冰/水浴上驟冷。加入水冷S0C12(0.lml)，反應(yīng)在室溫下攪拌4小時。汽提反應(yīng)混合物，除去溶劑，利用己烷研磨，將其分配在CH2C12和NaHCOs水溶液之間。先利用鹽水干燥有機(jī)層，再利用無水Na2S04干燥并汽提，得到二氯-化合物，為黃色膠狀物。1hnmr:57.s.8j2(a3h)，7,2-7.5(m,3h),4.35(t>j-5.9h，2hx3.85~4.10(3.99，s，OMe和3.9-4.0，m,NHCH2，總共5H)，3.48(t,J=6.94H)，2.9-3.0(m,6H),2.49(、J-6.6取iH)，2.1-2.3(1^211).在驟冷的CH2Cl2中攪拌游離胺，利用1MHC1的乙醚溶液酸化并滴入幾滴甲醇汽提，得到所需化合物P-丙氨酸，[N，N-雙(2-氯乙基)],3-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]丙酯二鹽酸鹽(2.5mg),(3.5mg，81%)，為黃色固體。利用上述步驟C給出的相同方法，只是利用6-氯-9-(2-^基)乙氨基-2-甲氧基-吖啶替代6-氯-9-(3-羥基)丙氨基-2-甲氧基-吖啶，可制得類似的二醇。丄HNMR:S7.96*8,13(邁,3H)，7.20-7.47(nu3H),4.76(t^J=4.9Hz^2H),3.99(s，3H)，3.924.14(m,2H)，3.60J-5.1取4H),2.78J-6.1Hz2H),2.63(t^J=5.1Hz,4H),2.45(仁J-6.0Hz^2H).通過類似于步驟D的方法，將其轉(zhuǎn)變成p-丙氨酸，[N，N-雙(2-氯乙基)]，2-[(6-氯-2-甲氧基吖啶_9-基)氨基]乙酯二鹽酸鹽，化合物XII。HNMR:S7.94~&20(m),7.20-7.50(m),4.42(Q^OOO),3.904.10(OCH3，NHCH2)，3.46(CH2CI),2.82(N(g^2)3)，2-39-2.56,OO).實施例6-2-氨基乙基4，5'，8-三甲基-4'-補骨脂素乙酸酯鹽酸鹽，化合物XIV步驟A[N,N-雙(2-羥乙基)]-2-氨基乙基4，5'，8-三甲基-4'-補骨脂素乙酸酯在100t:下，攪拌4，5',8-三甲基-4'-補骨脂素乙酸甲酯(MOmg,0.832mmol)、三乙醇胺(12ml)和1MHC1的乙醚(2ml)漿狀液2小時。將所得亮褐色溶液冷卻至室溫，將其分配在CH2Cl2和飽和NaHC03水溶液之間。利用飽和NaHC03水溶液漂洗有機(jī)層數(shù)次，利用無水Na2S04千燥之后，真空除去溶劑，將殘留物分配在CH2Cl2和1MHC1水溶液之間。利用CH2Cl2漂洗水層數(shù)次，然后在存在有機(jī)溶劑條件下，利用K2C03(s)使其呈堿性。利用水漂洗含中性產(chǎn)物的有機(jī)層，然后干燥并濃縮。重復(fù)酸-堿提取步驟，得到所需產(chǎn)物，為米色固體(84.3mg,24.3%):'HNMR:57.53(s,1H)，6.24(s,1H),4.23(t,J=5.4Hz,2H),3.69(s,2H),3.56(t>J=5.34H),2.82(XJ=5.4取2H)，2.69(t,J=5.3Hz,4H)，2.57(s，3H)，2.51(d,J=UHOH)'2.47(s，3H).步驟B[N,N-雙(2-氯乙基)]」-氨基乙基4，5',8-三甲基-4'-補骨脂素乙酸酯鹽酸鹽將亞辟u跣氯(0.2ml)加入到上述二醇(9.8mg，0.023mmol)的CH2Cl2(lml)冰冷卻混合物中，在氮氣氣氛下于室溫下攪拌過夜。濃縮所得漿狀液，然后利用己烷研磨，得到所需產(chǎn)物(6.2mg，53.9%)為黃白色固體'HNMR(CD3OD):57.71(s>1H)，6.28(s，1H)，4.56(t，J=4.8取2H),3.95(仁J=6.1H;4H)，3.89(s，2H),3.60-3.S3(rn^6H),2.54(s，3H)，2.53(s,3H)'2.50(s,3H).實施例7合成p-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酰胺(化合物XV)步驟A2-[N'，N'-雙(2-羥乙基)]-N-(叔丁氧基羰基)乙二胺在O"C下，向N-(叔丁氧基羰基)乙醇胺(1.21g,7.5mmol)和三乙胺(1.57ml，1.lg，ll咖ol)的無水CH2C12(25ml)溶液中滴加甲磺酰氯(0.64ml，0.95g,8.3邁mo1)。反應(yīng)在0"C下攪拌1小時，溫?zé)嶂?3X:并攪拌過夜。真空除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到甲磺酸鹽，為白色固體。加入二乙醇胺(7.2ml，7.9g,75mmo1)，在攪拌條件下，將反應(yīng)混合物加熱至75"C6小時。將粗反應(yīng)混合物分配在水(60ml)和CH3C1(4x20ml)之間。利用鹽水(20ml)洗滌合并的有機(jī)層，在Na2S04上干燥。真空去除溶劑，得到1.21g(65%)二醇，為粘稠黃色油狀物。NMR:S5.51-5.39(m,1H),3.61(t,J=4.9Hz^4H)，3.29-3.13(取2H)，2.68-2.52(m,6H)，1"44(s,9H).未觀察到羥基質(zhì)子。步驟B2-[N',N'-雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)]-N-(叔丁氧基羰基)乙二胺在0"C下，向上述步驟A得到的二醇(1.21g，4.87mmo1)和吡咬(1.59ml，1.55g，19.6mmo1)的無水CH2Cl2(12ml)攪拌溶液中加入叔丁基二甲基硅烷基氯(2.21g,14.7mmol)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?3匸并攪拌2天。利用CH2C12(80邁1)稀釋反應(yīng)混合物并先利用水(3x25ml)洗滌，再用鹽水(3x25ml)洗滌。在Na2S04上干燥有機(jī)層。真空除去溶劑，得到2.26g(97%)淺黃色油狀物。'HNMR:S5.37-5.22K叫3.62(仁J=6.2H;4H),3.19-3-08(m^2H)2.63(tJ-6.2祖6H),1.42(s,9H),0.873(s,,，0.04I2H).步驟C2-[N,N-雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)]乙二胺在23C下，向含步驟B的被護(hù)胺(4.24g，8.89mmo1)的燒瓶中加入5ml三氟乙酸。反應(yīng)混合物在23"C下攪拌15分鐘，然后真空除去三氟乙酸。將粗產(chǎn)物分配在2NNaOH(100ml)和CH2C12(3X35ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層。真空除去溶劑，得到1.76g(53%)黃色油狀物。'HNMR:53.66(t'J-6.54H)，2.72-2.53(m,8H),1.72-1.63(m,2H),0.87(s,18H),0.02(s,12H).'步驟Dp-丙氨酸，N-(叔丁氧基羰基)，2-[雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)氨基]乙酰胺在-15t:下，向3-(N-叔丁氧基羰基)氨基丙酸(822.0mg，4.34mmo1)和4-甲基嗎啉(442.0mg，4.37m邁o1)的14ml無水THF溶液中加入氯甲酸異丁基酯(0.53ml,0.56g,4.1mmo1)。反應(yīng)混合物在-15"C下攪拌l分鐘，接著加入由步驟C得到的胺(1.72g,4.57mmo1)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?3"C，攪拌1小時。然后過濾混合物，利用THF(5ml)洗滌沉淀物，真空濃縮濾液。將殘留物質(zhì)分配在2NNa0H(50ml)和CH2C12(3x20ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層。真空除去溶劑，得到2.25g褐黃色膠狀物。通過中壓液相色譜(硅膠，1:1CHCl3/EtOAc)純化粗品(2.25g),得到627.0mg(26%)淺黃色油狀物.、HNMR:S3.63"J-6'2Hz^4H)，3.54^3.35(m,4H)>3.20-3.19(m，2H)，2.71-2.50(m，6H),1.43(s，9H)，0.89(s,18H),0.05(s，12H).未觀察到酰胺和氨基甲酸酯質(zhì)子。步驟EP-丙氨酸，2-[雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)氨基]乙酰胺在23。C下，將上述步驟D得到的被護(hù)胺(627.Offlg，1.14mmo1)溶解在三氟乙酸(5ml)中。攪拌所得溶液5分鐘(直至停止放出C02),接著真空除去三氟乙酸。將殘留物質(zhì)分配在飽和NaHCOd(50ml)和CH2Cl2(3x20ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層，真空除去溶劑，得到203.4mg(40%)淺黃色油狀物。步驟FP-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-叔丁基二甲基硅烷氧基乙基)氨基]乙酰胺將步驟E粗品胺(203,4mg,0.45,1)、9-甲氧基吖咬(96.8mg，0.46mmo1)和甲醇(10ml)的混合物加熱至回流4小時。反應(yīng)混合物冷卻至23"C，再攪拌2.5天。真空除去甲醇，將殘留物質(zhì)分配在2NNaOH(50ml)和CH2C12(3x20ml)之間。在Na2S04上干燥合并的有機(jī)層，真空除去溶劑，得到69.6fflg黃色油狀物。通過TLC(硅膠，1:1CHCl3/EtOAc)純化粗品(69.6mg),得到23.4(8.3%)黃色油狀物。'HNMR:S8.19(d,J-8.8Hz^2H),8.06(d,J=8.8H2^2H),7.65(brt,J=7.6Hz^2H),7.36(brJ=7-6Hz^2H)，6.8-6.7(m,1H)，4.06(t,J=5.62H)，3,61(t,J=5.8Hz^4H),3.37-3.32(m,2H)，2.72-2.61(m，6H),2.51(t,J=5.5Hz,2H),0.86(s,18H),0.02(s，12H).未觀測到胺質(zhì)子,13CN感S172.1，152.4，149,3，130,5,129.3，123.7，118.0,112.8，62.3,57.4，54.1，47,4,38.2，36.5,26.4，18.8,-4.8.步驟GP-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-羥乙基)氨基]乙酰胺二鹽酸鹽在23"C下，向步驟F得到的雙被護(hù)二醇(22.Omg,0.04mmol)的異丙醇(1,0ml)攪拌溶液中加入5-6NHCl/異丙醇溶液(0.05ml)。在231C下攪拌反應(yīng)混合物17小時，通過真空過濾收集所得的黃色沉淀。利用另外的l.Oml異丙醇漂洗黃色固體。真空(過夜)除去殘留的異丙醇，得到11.4mg(69%)二醇鹽酸鹽，為黃色固體。'HNMR(CD3OD):S8.52(d,J=8.8Hz^2H),7.96(brt,J=7.5Hz,2H)，7.82(d,J=8.42H),7.57(brt，J=7.5Hz,2H)，4.49(t,J=6.2Hz,2H)，3.91(仁J=4.84H)，3.74-3.56(m,2H),3.53-3.38(m,6H),2.97(t,J=6.1Hz^2H).未觀察到酰胺、胺和羥基質(zhì)子。步驟Hp-丙氨酸，N-(吖啶-9-基)，2-[雙(2-氯乙基)氨基]乙酰胺二鹽酸鹽在23D下，向步驟G得到的二醇(11.4mg,0.024fflmo1)的CH3CN(1.0ml)攪拌懸浮液中加入S0C12(0.12ml,200mg,1.7mmo1)。在23"C下攪拌反應(yīng)混合物15分鐘，將溶液加熱至50t:3.5小時。通過真空過濾收集所得的黃色沉淀物，利用CH3CN(3x1.0ml)漂洗并真空干燥，得到8.3mg(67%)黃色粉狀物(通過HPLC測定，純度為95%)。'HNMR(CD3OD):S8.55(d，J=8.7取2H)，8,00(brt，J-7.7Hz2H)，7.84(4J-8.7取2H),7.59(brt,J=7.7Hz，2H),4-51(t>J=62Hz，2H),3.98(仁J=5.74H),3.71(t，J=5,7Hz,4H)，3.65-3.55(m,2H),3.55-3.42"2H)，2.99(t，J=6.2Hz^2H).未觀察到酰胺和胺質(zhì)子。實施例8脆性化合物的水解對于脆性連接基中包含酯基("正向"和"反向"酯)的脆性化合物，為了確定酯的水解量，本發(fā)明研究了一些典型化合物。本發(fā)明研究了下列反應(yīng)AcrNH-(CH》n陽C(^0)-OR—AcrNIHCHA-CC^H+HO-R("正向酯")("吖嚏酸")其中AcrNH表示帶有下表中所指明的取代基的9-氨基吖啶，以及n和R也如表中所指明。表III表明了當(dāng)吖啶環(huán)與烷氨基之間的酯連接為飽和時酯水解速率的提高情況。不論吖啶部分位于酯的酸末端或醇末端，其水解速率都^f艮快。表III100分鐘時的水解百分?jǐn)?shù)(水溶液，pH8,37X:)吖啶取代基(s)ri=甲基R=R--(CH2)3N(CH2CH2OH)26:C1，2-OMe128%6-Ci，2-OMe22"/o6:CI，2-OMe5%6-Cl，2陽OMe42%6-Cl，2-OMe72-C。2CH32550/057%2-C02CH332-COjCH3417%1對于反應(yīng)AcrNH-(CH2)-O"C(=0)-R—AcrNIKCHA-OH+HOC(=0)-R("反向酯")("吖啶醇")其中AcrNH表示帶有下表中所指明的取代基的9-氨基吖啶，以及n和R也如表中所指明，可獲得如下結(jié)論表IV<table>tableseeoriginaldocumentpage62</column></row><table>當(dāng)pH為3時，表III和IV中所有化合物在100分鐘時的水解^1%。由于氮芥化合物同時發(fā)生多重降解反應(yīng)，所以不能利用相同的方法來評價。盡管如此，當(dāng)在如表in和iv的相同條件下孵育化合物VIII時，長時間孵育后的主要產(chǎn)物為吖啶酸(295%)且在100分鐘時形成40%。這可與表中類似的二醇的記錄相比(IOO分鐘時的水解百分比為57%)。從表III和IV中的數(shù)據(jù)可明顯地看出，酯連接鍵的水解速率與9-氨基吖啶部分和酯基的連接臂長度成反比(在表III和IV中，隨著n的增加，100分鐘時的水解量降低)。這就提供了一種調(diào)整化合物水解速率的方法。這種調(diào)整連接基分解速率的能力使得允許根據(jù)需要調(diào)節(jié)各種應(yīng)用條件下的化合物反應(yīng)度。材料下迷材料可用于下列實施例中。盡管可從BaxterHealthcareCorp.,Deerfield，市購，但本實驗及下列實驗中所用的Adsol是通過無菌過濾下述混合物制得的22g葡萄糖、9gNaCl、7.5g甘露醇和0.27g腺嘌呤，于1升蒸餾水中?？{克林氮芥可從AldrichChemicalCo.，St.Louis,MO.得到。全血可從SacramentoBloodCenter(SacramentoCA)得到。實施例9滅活水皰性口炎病毒(VSV)通過下列方法制備各種化合物的貯備液(典型地為10-30mM):將適量物質(zhì)溶解在先前利用2mMH3P04酸化的血庫鹽水中，然后迅速冷凍成lml等分試樣。在使用時，將等分試樣溫?zé)嶂痢秈ox:并在1小時內(nèi)使用。為了制備壓緊血紅細(xì)胞(PRBC)，將測定過Hct的全血以3800rpm轉(zhuǎn)速離心6分鐘。分離上清液血漿并測定。加入Adsol,得到6096Hct的PRBC。血漿濃度為15-20%。將VSV(貯備液，大約109pfu/ml，由ATCC美國典型細(xì)胞培養(yǎng)物(AmericanTypeCellCulture),Rockville，MD得到)以1:10稀釋至組織培養(yǎng)基(含10%NCS的DMEM)或PBRC,從而得到試驗培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基為裝入2ml無菌0-環(huán)試管的等分試樣(1ml)。向每個試管中加入足夠的試驗化合物溶液，得到濃度為10-30(HiM的試驗化合物。通過完全抽吸數(shù)次混合物，將各種樣品快速混合。在環(huán)境溫度下孵育懸浮液4小時。在BHK(幼鼠腎)宿主細(xì)胞中孵育處理過的培養(yǎng)基之后，確定病毒滴定度。直接使用PRBC，而不只是上清液。病毒殺傷與細(xì)胞培養(yǎng)液中的蝕斑出現(xiàn)的量成反比。未處理培養(yǎng)基的滴定度與處理過的樣品滴定度之間的差異能夠給出該濃度時的化合物log殺傷。檢出限為1014pfu/ml。在組織培養(yǎng)基中，在〈50pM試驗化合物時，奎納克林氮芥(QM)和化合物IV、VI、XI、VII和VIII滅活了〉3logsVSV。化合物XII在大約200nM時滅活2logs。由于酯的水解，該化合物被認(rèn)為是特別不穩(wěn)定的。如實施例8表IV中的第一個記錄所表示，在pH8、37"C、100分鐘后，相應(yīng)二醇化合物(p-丙氨酸，[N,N-雙(2-羥乙基)],2-[(6-氯-2-甲氧基吖啶-9-基)氨基]乙酯)水解99%。氮芥化合物似乎也經(jīng)歷著快速水解。這就說明了向核酸引導(dǎo)分子效應(yīng)子部分的固定子部分的重要性，以及說明了調(diào)整9-氨基吖啶類化合物反應(yīng)度，從而使得它們在實際使用條件下具有作用的重要性。在所描迷的滅活記錄中，化合物XII的水解有望與滅活相竟?fàn)?。在PRBC中，在試驗化合物濃度〈150nM時，QM和化合物IV、VI、VIII、V和XIII的滅活〉2logsVSV。實施例10滅活小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌根據(jù)實施例9制備VSV的方法制備PRBC和ji^備液。在振動器上于37E下，在LB-肉湯培養(yǎng)基上培養(yǎng)耶爾森氏菌屬(CaliforniaDepartmentofHealthServices,MicrobialDiseaseLaboratory,Berkeley,CA)。取一部分(10ml)在15ml錐形試管中以2500rpm轉(zhuǎn)速離心10分鐘。將沉淀再懸浮于lmlAdsol中，得到大約1(f細(xì)菌/ml。為了測定滴定度，測量1:100稀釋液在Adsol(108細(xì)菌/ml處的0D61。=0.2)中的光學(xué)密度。然后，將細(xì)菌原液以1:100稀釋至鹽水或PRBC中，得到試驗培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基為裝入2ml無菌0-環(huán)試管的等分試樣(l邁l)。向每個試管中加入足夠的試驗化合物溶液，得到濃度為10-300pM的試驗化合物。通過完全抽吸數(shù)次混合物，將各種樣品快速混合。在環(huán)境溫度下將其孵育2小時，然后置于開始含lO(Hil樣品的LB-瓊脂板上，開始時稀釋濃度為10、然后繼續(xù)稀釋至10—8。將該板在37"下孵育過夜并計數(shù)克隆數(shù)。未處理培養(yǎng)基的滴定度與處理過的樣品滴定度之間的差異能夠給出該濃度時的化合物1og殺傷。檢出限為10細(xì)菌/ml。在鹽水中，于濃度S200jiM時，奎納克林氮芥(QM)和化合物IV、VI、VIII、V、IX和X滅活了〉2logs耶爾森氏菌。在PSBC中，于濃度^200jiM時，QM和化合物VI、VIII、V、X和XIII滅活了〉2logs耶爾森氏菌屬。實施例11引入本發(fā)明化合物之后的血液功能測定本發(fā)明化合物意向中的一個用途包括將一種或多種本發(fā)明化合物加入到輸注用血液或血液制品中。血液或血液制品在利用化合物處理后必須保持適于輸注。為了評估化合物對血紅細(xì)胞功能的作用，將化合物進(jìn)行下述試驗。通過以2500rpm離心已知Hct的全血6分鐘，制備50%血細(xì)胞比容(Hct)為50%的壓緊血紅細(xì)胞。分離上清液并測定。利用足夠體積的Adsol稀釋懸浮液，得到所需的Hct。將1.5mlPRBC置于各自2ml0-環(huán)試管中，加入足夠的試驗化合物貯備液，得到所需的濃度。樣品在環(huán)境溫度下孵育4小時，然后在4匸下儲存過夜。按照Hogman等人-,Transfusion,31:26-29(1991)描述的方法測定溶血。通過利用水以兩步稀釋l(HiM孵育混合物制備各種樣品的溶胞標(biāo)準(zhǔn)，得到最終稀釋為1:4000。對于測定，從4t:儲存位置中取出樣品并溫?zé)帷?5分鐘。直接渦旋混合后，分離等分試樣并在14,000rpm下旋轉(zhuǎn)2分鐘。分離上清液并在14000rpm下旋轉(zhuǎn)IO分鐘。分離上清液并根據(jù)需要在水中稀釋。相對于水空白對照組，記錄溶胞標(biāo)準(zhǔn)在414nm處的吸光度和稀釋的上清液。計算溶血百分比(100%-50%Hct)x(樣品A"4x稀釋因子)/(溶胞標(biāo)準(zhǔn)A"4x4000)由于存在本發(fā)明化合物，樣品A4H任何吸光度均未校正。結(jié)果示于表Va中。表Va第一天的溶血數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage66</column></row><table>*BBS=血庫鹽水**ABBS=酸性血庫鹽水***QM=奎納克林氮芥細(xì)胞外鉀可利用CibaCorning型614K7Na+分析儀(CibaCorningDiagnosticsCorp.，Medford,MA)測定。ATP可利用Sigma方法No.366(Sigma,St.Louis,M0)測定。表Vb表明了該實驗中細(xì)胞外鉀相對于未處理PRBC樣品的對照值的相對值。例如，相對值1.03表示處理過的樣品的細(xì)胞外鉀濃度比未處理對照組大3%。表Vb細(xì)胞外鉀相對水平(平行測定值)*化合物濃度(MM)第1天第7天第14天IV1001.01(1)0.98①1-03(1)2001.05(1)U5(1)1.01(1)3001.03(1)V3001.04-1.46(4)0.96-1.01(4)0.95-1.01(4)*[K+](處理過)/[K+](未處理)表Vc表明了該實驗中相對于未處理PRBC樣品對照值的ATP相對值。例如，相對值1.03表示處理過的樣品的ATP比未處理對照組大3%。表VcATP相對水平(平行測定值)*化合物濃度(PM)第1天第7天第14天IV1001.01(1)0.93(1)0.94(1)2001.05(1)0.94(1)0.94(I)3001.03(1)0.93(1)0.92(1)V3000.96-1.00(4)0.91-1-01(4)0.94-1.01(4)*[ATP](處理過)/[ATP](未處理)實施例12通過本發(fā)明化合物滅活HIVTC培養(yǎng)基中的與細(xì)胞相關(guān)的HIV(Popovic等人.，存夢廣5"cj'e/7ceJ,，497(1984):H9-IIIb細(xì)胞懸浮在TC培養(yǎng)基中，得到滴定度大約》106pfu/ml的懸浮液。在15ml錐形試管中向2ml試驗介質(zhì)等分試樣中加入足夠量的試驗化合物溶液，得到所需濃度的活性材料。通過完全抽吸數(shù)次，將懸浮液立即混合，然后快速渦旋。樣品在環(huán)境溫度下孵育2-4小時，然后離心。將沉淀懸浮在lml蝕斑測定稀釋液中，然后在-80t:下迅速冷凍，通過微蝕斑測定滴定度。(Hanson等人.，臨床微生物雜志(J.Clin.Micro.),28:2030(1990))。在試驗化合物濃度為^25jiM時，化合物奎納克林氮芥、IV和VI滅活〉3logsHIV。PRBC中與細(xì)胞相關(guān)的HIV:為了在PRBC中進(jìn)行測定，根據(jù)VSV測定中描述的方法制備壓緊細(xì)胞。在稀釋離心細(xì)胞之前，將HIV9-IIIb細(xì)胞加入到Adsol中。通過完全抽吸所有物質(zhì)混合所得懸浮液。在完成試驗化合物孵育之時，利用含5nl肝素的3ml1:1血漿DMEM溶液稀釋樣品。然后利用fycol-hypaque梯度分離感染的細(xì)胞，再懸浮在lml稀釋劑中并冷凍，以備以后滴定之用。在試驗化合物濃度為《200nM時，化合物奎納克林氮芥、VI和V滅活>3logsHIV。PRBC中不含細(xì)胞的HIV:方法類似于上文所述，只是在制備后將不含細(xì)胞的HIV直接加入到PRBC中。在孵育之后離心培養(yǎng)基，冷凍上清液，以備以后滴定之用。在試驗化合物濃度為《100nM時，化合物奎納克林氮芥、IV、V和VI滅活>3logsHIV。盡管通過說明及實施例清楚完整地對上述發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)描述，但對本領(lǐng)域技術(shù)人員來講非常明顯可以進(jìn)行某些改變和修飾。因此，說明書和實施例不應(yīng)當(dāng)用來限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明范圍已描述在所附權(quán)利要求書中。美國專利5,559，250和5，399,719的全部在此引作參考。這里所引用的所有其它專利和參考文獻(xiàn)均在此引作參考。權(quán)利要求1.一種化合物，該化合物包括與核酸共價結(jié)合的部分；效應(yīng)子部分，所述效應(yīng)子部分能夠與核酸形成共價鍵；以及共價連接核酸部分與效應(yīng)子部分的脆性連接基；其中在適于滅活生物材料病原體，并且不會使材料不適于其使用目的的條件下，脆性連接基降解，使得不再共價連接核酸共價結(jié)合部分和效應(yīng)子部分。2.根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，其中核酸結(jié)合部分選自吖啶、吖啶衍生物、補骨脂素、異補骨脂素和補骨脂素衍生物。3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中脆性連接基包含選自下述的官能單元正向酯、反向酯、正向石克代酸酯、反向石克代酸酯、正向和反向石克羰酸酯、正向和反向二硫代酸、硫酸根、正向和反向磺酸根、磷酸根和正向和反向膦酸根。4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中效應(yīng)子基團(tuán)包含烷基化試劑官能單元。5.根據(jù)權(quán)利要求l的化合物，其中效應(yīng)子基團(tuán)包括選自下述的官能單元氮芥基團(tuán)、氮芥基團(tuán)等同物、環(huán)氧化物、醛和甲醛合成元。6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，它是下式化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>所述主體異構(gòu)體包括對映體和非對映體；其中Id、R2、R3、R"R5、R6、R和Rs獨立地選自-H、-R10、-0-R10、-N02、-NH2、-NH-R1Q、-N(RJ2、-F、-CI、-Br、-I、-C(=0)-R1Q、-C(=0)-O-R10和-O-C(=0)-R10，其中-R,。獨立地為H、-Cw烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-d一雜烷基-雜芳基、-芳基-Cw烷基、-芳基-d—3雜烷基、-雜芳基-Cw烷基、-雜芳基-d-3雜烷基、-Cw烷基-芳基-Cw烷基、-Cw雜烷基-芳基-d-3烷基、-a—3烷基-雜芳基-c]-3烷基、-d—3烷基-芳基-Cw雜烷基、-d-3雜烷基-雜芳基-C卜3烷基、-Cw雜烷基-芳基-d—3雜烷基、-Cw烷基-雜芳基-Cw雜烷基或-d—3雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基；R2。為-H或-CH3;和R"為-Rn-W-X-E，其中-Ru-獨立地為-Cw烷基-、-d-s雜烷基-、-芳基-、-雜芳基-、-d-3烷基-芳基-、-Cw雜烷基-芳基-、-Cw烷基-雜芳基-、-Cw雜烷基-雜芳基-、-芳基-Cw烷基-、-芳基-d-3雜烷基、-雜芳基-d-3烷基-、-雜芳基-d-3雜烷基-、-Ch烷基-芳基-Ch烷基-、-d—3雜烷基-芳基-d-3烷基-、-d-3烷基-雜芳基-Cw烷基-、-d—3烷基-芳基-Cw雜烷基-、-Cw雜烷基-雜芳基-d-3烷基-、-CH雜烷基-芳基-d-3雜烷基-、-Cw烷基-雜芳基-Cw雜烷基-或-Cw雜烷基-雜芳基-d—3雜烷基-；W獨立地為-C(-0)-0-、-O-CH))-、-C(-S)-O-、-0-C(-S)-、-c(=s)—s-、一s-c卜s)-、-C(-O)-S-、-S-C(=0)-、一0-S(-0)2-0-、-S(-0)2-0-、-0-S(=0)2-、-O-P(-O)(-ORj-O-、-P(-O)(-OFU)-O-、-O-P(-O)(-ORJ-；X獨立地為-Rn-;和E獨立地選自-N(Ru)2、-N(R12)(R13)、一S-Ru和其中-Rn為-CH2CH2-G，其中各個G獨立地為-C1、-Br、-I、-0-SH))2-CH3、-0-S(=0)2-CH2-C6H5或-O-S(=0)2-C6H4-CH3;以及其中Ru獨立地為-d-8烷基、-CH雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-C卜3雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-Cw雜烷基-雜芳基、-芳基-Cw烷基、-芳基-d—3雜烷基、-雜芳基-Cw烷基、-雜芳基-Cw雜坑基、-Ci-3坑基-芳基-Cl-3坑基、-Ci-3雜坑基-芳基-Cl—3坑基、-Cw烷基-雜芳基-Cw烷基、-Cw烷基-芳基-Cw雜烷基、-Cw雜烷基-雜芳基-d-3烷基、-Cw雜烷基-芳基-C卜3雜烷基、-d—3烷基-雜芳基-Cw雜烷基或-d—3雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基。7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，它是下式化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體所述主體異構(gòu)體包括對映體和非對映體；其中Ri、R2、R3、R4、R5、R6、R和Rs獨立地選自-H、-1。、-0-R-F、-Cl、-Br、-I和-C(-O)-O-R10，其中-R!。獨立地為H或-(V8烷基；R2。為-H或-CH3;和R"為-Ru-W-X-E，其中-Rn-獨立地為-CH烷基-；W獨立地為-C(=0)-O-或-O-C(-0)-；X獨立地為-Ru-；和E獨立地選自-N(R12)2、-N(R12)(R13)和其中-Rn為-CH2CH廣G，其中各個G獨立地為-C1、-Br、-1、一0-S(-0)2-CH3、—0-S(-0)2—CH2-C6H5或一0-S(=0)2-C6H4-CH3;以及其中Ru獨立地為-CH烷基。8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，它是下式化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體所述立體異構(gòu)體包括對映體和非對映體；其中至少R"、R55、R3、R4、R5和Rs之一為-V-W-X-E，其余R"、R55、R3、R4、R5和Rs獨立地選自-H、-R1Q、-O-R!。、-N02、-NH2、-NH-K。、-N(R!。)2、-F、-Cl、-Br、-1、-C(=O)-R10、-C(=0)-0-K。和-0-C(=0)-R10，其中-Rn獨立地為H、-d—8烷基、-CH雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-d—3雜烷基-雜芳基、-芳基-Cw烷基、-芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-C2—3烷基、-雜芳基-d-3雜烷基、-d-3烷基-芳基-d-3烷基、-Cw雜烷基-芳基-CH烷基、-d-3烷基-雜芳基-Cw烷基、-d—3烷基-芳基-d-3雜坑基、-Cw雜烷基-雜芳基-Cw烷基、-d—3雜烷基-芳基-Cw雜烷基、-Cw烷基-雜芳基-Cw雜烷基或-Cw雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基；V獨立地為-Ru-、-NH-Rn-或-N(CH3)-R-，其中-Ru-獨立地為-d-s烷基-、-d-s雜烷基-、-芳基-、-雜芳基-、-d-3烷基-芳基-、-d—3雜烷基-芳基-、-C-3烷基-雜芳基-、-Cw雜烷基-雜芳基-、-芳基-d-3烷基-、-芳基-d—3雜烷基、-雜芳基-Cw烷基-、-雜芳基-Cw雜烷基-、-Cw烷基-芳基-d—3烷基-、-Cw雜烷基-芳基-d-3烷基-、-Cw烷基-雜芳基-d-3烷基-、-Cw烷基-芳基-Cw雜烷基-、-Cw雜烷基-雜芳基-d-3烷基-、-Cw雜烷基-芳基-Cw雜烷基-、-Cw烷基-雜芳基-d-3雜烷基-或-Cw雜烷基-雜芳基-Ch雜烷基-；W獨立地為-C(-0)-0-、-O-C(-O)-、-C(-S)-O-、-O-C(-S)-、-c(-s)-s-、-S-C(-S)-、-C(=0)-S-、-S-C(-0)-、-0-S(-0)2-0-、-S(-0)2-0-、-0-S(-0)2-、-0-P(=0)(-OR!。)-0-、-P(-O)(-ORj-O-、-O-P(-O)(-OR10)-;X獨立地為-Ru-;和E獨立地選自-N(Ru)2、-N(R12)(R13)、-S-Ru和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中-R12為-CH2CH「G，其中G獨立地為-C1、-Br、-1、-0-S(=0)2-CH3、一O-S(-0)2-CH2—C6H5或-O-S(=0)2—C6H4-CH3;以及其中Ru獨立地為-Cw烷基、-d—8雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d—3烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-Cw雜烷基-雜芳基、-芳基-C卜3烷基、-芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-Cw烷基、-雜芳基-d-3雜烷基、-Cw烷基-芳基-CH烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3烷基、-Cw烷基-雜芳基-d—3烷基、-Cw烷基-芳基-Cw雜烷基、-d-3雜烷基-雜芳基-Cw烷基、-d—3雜烷基-芳基-Cw雜烷基、-Cw烷基-雜芳基-Cw雜烷基或-Cw雜烷基-雜芳基-d-3雜烷基。9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，它是下式化合物及其所有鹽和立體異構(gòu)體<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>所述立體異構(gòu)體包括對映體和非對映體；其中至少R"、R55、R3、R4、R5和Rs之一為-V-W-X-E，其余R"、R55、R3、R4、Rs和Rs獨立地選自-H或-CH烷基，V獨立地為-CVs烷基-;W獨立地為-C(-0)-0-、-O-C(-O)-；X獨立地為-Cw烷基-;和E獨立地選自-N(R12)2、-N(R12)(R13)和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中-Rn為-CH2CH「G,其中G獨立地為-CI、-Br、-I、-O-S(-0)2-CH3、-O-S(=0)2-CH2-C6H5或-O-S(-0)rC6H4-CH3;以及其中Ru獨立地為-d—8烷基。10.滅活材料中病原體的方法，該方法包括向材料中加入權(quán)利要求1-9任一項的化合物；和孵育所述材料。11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中將化合物加入到材料中，形成化合物濃度為1至500nM的最終溶液。12.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中材料為生物材料。13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中生物材料包含選自下列組分的成分血液、血液制品、血漿、血小板制劑、血紅細(xì)胞、壓緊血紅細(xì)胞、血清、汗液、腦脊髓液、唾液、尿、糞便、精液、乳汁、組織樣品、均化組織樣品、細(xì)胞培養(yǎng)基；細(xì)胞培養(yǎng)物；病毒培養(yǎng)物及摻入了有機(jī)活體產(chǎn)生的材料的培養(yǎng)物。14.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中材料包含血液制品。15.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中材料包含血紅細(xì)胞。16.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述方法包括向材料中加入有效量的化合物，至少滅活約2logs材料中病原體。17.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中孵育時間至少為約1至48小時。18.制備權(quán)利要求7化合物的方法，該方法包括下列步驟將氨基酯與9-取代吖啶反應(yīng)，得到N-(9-吖咬基)氨基酯。19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中氨基酯為co-氨基鏈烷酸酯。20.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中氨基酯為p-丙氨酸衍生物。21.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中氨基酯包含被護(hù)二醇。22.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，該方法進(jìn)一步包括下列步驟使被護(hù)二醇取代基脫保護(hù)，形成含二醇取代基的N-(9-吖咬基)氨基酯。23，根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中氨基酯包含被護(hù)雙(羥烷基)胺。24.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中9-取代吖啶為9-曱氧基吖啶。25.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中9-取代吖啶為9-氯吖啶。26.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，該方法進(jìn)一步包括下列步驟將N-(9-吖啶基)氨基酯轉(zhuǎn)變成含二醇取代基的N-(9-吖啶基)氨基酯。27.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中將N-(9-吖咬基)氨基酯轉(zhuǎn)變成含二醇取代基的N-(9-吖啶基)氨基酯的步驟包括酯交換反應(yīng)。28.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中該方法進(jìn)一步包括下列步驟利用氯基團(tuán)取代二醇取代基中的羥基基團(tuán)。29.制備權(quán)利要求8化合物的方法，該方法包括下列步驟a)使補骨脂素乙酸酯發(fā)生酯交換反應(yīng)，得到補骨脂素乙酸氨基烷基酯；和b)將補骨脂素乙酸氨基烷基酯轉(zhuǎn)變成補骨脂素乙酸(氯烷基)氨基烷基酯。30.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中補骨脂素乙酸酯為甲基取代的補骨脂素乙酸酯。31.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中補骨脂素乙酸酯為4'-補骨脂素乙32.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中補骨脂素乙酸氨基烷基酯為補骨脂素乙酸氨基乙基酯。33.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中補骨脂素乙酸氨基烷基酯的轉(zhuǎn)換反應(yīng)包括將羥基轉(zhuǎn)變成氯基團(tuán)的反應(yīng)。34.下式化合物及其鹽和立體異構(gòu)體<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>所述立體異構(gòu)體包括對映體和非對映體；其中R!、R2、R3、R4、R5、R6、R7和Rs獨立地選自-H、-R1()、-0-R10、-N02、-NH2、-NH-R!。、-N(R!。)2、-F、-Cl、-Br、-1、-C(-0)-Id。、-C(=0)-0-R10和-0-C(-0)-R!。；其中-R!。獨立地為H、-d-s烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-d-3烷基-芳基、-d—3雜烷基-芳基、-Cw烷基-雜芳基、-Cw雜烷基-雜芳基、-芳基-d—3烷基、-芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-d—3烷基、-雜芳基-d-3雜烷基、-d-3烷基-芳基-C卜3烷基、-Cw雜烷基-芳基-Cw烷基、-Cw烷基-雜芳基-d-3烷基、-Cw烷基-芳基-d-3雜烷基、-d—3雜烷基-雜芳基-d—3烷基、-d-3雜烷基-芳基-Cw雜烷基、-d-3烷基-雜芳基-d-3雜烷基或-Cw雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基；R2。為-H或-CH3;和R"為-Ru-W-X-E，其中-Rn-獨立地為-CH烷基-、-Cw雜烷基-、-芳基-、-雜芳基-、-Cw烷基-芳基-、-d—3雜烷基-芳基-、-Cw烷基-雜芳基-、-Cw雜烷基-雜芳基-、-芳基-Cw烷基-、-芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-Cw烷基-、-雜芳基-Cw雜烷基-、-Cw烷基-芳基-Cw烷基-、-Cw雜烷基-芳基-d-3烷基-、-CH烷基-雜芳基-Cw烷基-、-d-3烷基-芳基-Cw雜烷基-、-Cw雜烷基-雜芳基-Cw烷基-、-Cw雜烷基-芳基-Cw雜烷基-、-Cw烷基-雜芳基-Cw雜烷基-或-Cw雜烷基-雜芳基-d—3雜烷基-;W獨立地為-CH))-O-、-o-c(-o)-、-c(-s)-o-、-o-c(-s)-、-C(-S)-S-、-S-C(-S)-、-C(-O)-S-、-S-C(-0)-、-0-S(=0)2-0-、-S(-0)2-0-、-0-S(-0)2-、-C(-0)-NR廣、-NR,C(0)-、-0-P(=0)(-ORJ-0-、-PH))(-ORJ-0-、-0-P(-O)(-OU-；X獨立地為-Rn-;和E獨立地選自-N(R^2、-N(R12)(R13)、-S-Ru和其中-R,2為-CH2CH廠G，其中各個G獨立地為-C1、-Br、-I、-O-S(-0)2-CH3、-O-S(=0)2-CH2-C6H5或-O-S(=0)2-C6H4-CH3;以及其中Ru獨立地為-d-8烷基、-Cw雜烷基、-芳基、-雜芳基、-Cw烷基-芳基、-Cw雜烷基-芳基、-d—3烷基-雜芳基、-d—3雜烷基-雜芳基、-芳基-Cw烷基、-芳基-Cw雜烷基、-雜芳基-Cw烷基、-雜芳基-Cw雜烷基、-Cw烷基-芳基-Cw烷基、-Cw雜烷基-芳基-d-3烷基、-Cw烷基-雜芳基-d-3烷基、-d—3烷基-芳基-Cw雜烷基、-Cw雜烷基-雜芳基-Cw烷基、-d-3雜烷基-芳基-d-3雜烷基、-d—3烷基-雜芳基-Cw雜烷基或-d-3雜烷基-雜芳基-Cw雜烷基；其中所述化合物表現(xiàn)出至少一種下列性質(zhì)i)在pH8的37X:的水溶液中保持100分鐘后40。/。-99%的脆性連接基水解；ii)在不大于500liM的濃度下至少21ogs病原體^^滅活；iii)在用病原體滅活化合物處理并保存42天后血紅細(xì)胞的溶血小于2%。35.根據(jù)權(quán)利要求34的化合物，它是下式化合物及其鹽和立體異構(gòu)體所述立體異構(gòu)體包括對映體和非對映體；其中K、R2、R3、R4、R5、R6、R和R8獨立地選自-H、-Id。、-O-R-F、-C1、-Br、-1和-C(-O)-O-R10，其中-Ri。獨立地為H或-Cw烷基；R2。為-H或-CH3;和Ru為-Ru-W-X-E，其中-Ru-獨立地為-d—8烷基；W獨立地為-C(=0)-O-或-O-C(=0)-；X獨立地為-Rn-;和E獨立地選自-N(R12)2、-N(R12)(R13)和/。\—ch—ch2其中-Ru為-CH2CH2-G，其中各個G獨立地為-C1、-Br、-I、-O-S(=0)2-CH3、-0-S(=0)2-CH2-C6H5或一O-S(=0)2-C6H4-CH3;以及其中Ru獨立地為-d—8烷基；其中所述化合物表現(xiàn)出至少一種下列性質(zhì)i)在pH8的37*C的水溶液中保持100分鐘后40%-99%的脆性連接基水解；ii)在不大于500陣的濃度下至少21ogs病原體,皮滅活；iii)在用病原體滅活化合物處理并保存42天后血紅細(xì)胞的溶血小于2%36.根據(jù)權(quán)利要求35的化合物，其中所述化合物表現(xiàn)出至少兩種下列性質(zhì)i)在pH8的37C的水溶液中保持100分鐘后400/。-99%的脆性連接基水解；ii)在不大于500liM的濃度下至少21ogs病原體^皮滅活；iii)在用病原體滅活化合物處理并保存42天后血紅細(xì)胞的溶血小于2%。37.根據(jù)權(quán)利要求36的化合物，其中所述化合物表現(xiàn)出下列性質(zhì)i)在pH8的37^:的水溶液中保持100分鐘后40%-99%的脆性連接基水解；ii)在不大于500^M的濃度下至少21ogs病原體被滅活；iii)在用病原體滅活化合物處理并保存42天后血紅細(xì)胞的溶血小于2%。全文摘要本發(fā)明公開了滅活材料中病原體的化合物和方法，包括滅活生物材料中病原體的組合物和方法，所述生物材料如紅血細(xì)胞制品和血漿。所述化合物和方法可用于處理打算用于體外或體內(nèi)(如臨床試驗或輸血)的材料。該化合物應(yīng)當(dāng)能夠與核酸進(jìn)行特定結(jié)合和反應(yīng)，然后降解生成分解產(chǎn)物。所述降解反應(yīng)速度優(yōu)選低于與核酸的反應(yīng)速度。文檔編號B01J20/28GK101676268SQ20091016331公開日2010年3月24日申請日期1998年1月6日優(yōu)先權(quán)日1997年1月6日發(fā)明者A·斯塔西諾波洛斯,A·耐里歐,D·庫克,H·拉伯波特,J·馬利特,J·馬提約維克,S·沃洛維茨申請人:塞魯斯公司