專利名稱：用于微生物的分離、表征和/或鑒定的分離裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于分離微生物的分離裝置。具體而言，本發(fā)明的裝置可以用于分離微生物從而進(jìn)行表征和/或鑒定。
背景技術(shù)：
生物學(xué)流體中病原微生物的檢測(cè)應(yīng)該在盡可能最短的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行，尤其是在敗血癥的情況下，對(duì)于該病癥盡管醫(yī)生可利用的抗生素范圍廣泛，但是其死亡率仍然保持較高。 生物學(xué)活性劑(諸如微生物)在患者體液尤其是血液中的存在，一般采用血培養(yǎng)瓶進(jìn)行檢測(cè)。血流感染與高的發(fā)病率和死亡率有關(guān)，然而當(dāng)前的診斷方法，即培養(yǎng)后進(jìn)行生物化學(xué)鑒定和抗生素敏感性測(cè)試，可能要花費(fèi)幾天時(shí)間來(lái)進(jìn)行。通常，基于臨床癥狀開始進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)療法，而只有當(dāng)初始療法無(wú)效時(shí)，試驗(yàn)結(jié)果才會(huì)影響臨床決策。在陽(yáng)性血液培養(yǎng)結(jié)果之后的最初幾個(gè)小時(shí)內(nèi)、優(yōu)選在1個(gè)小時(shí)內(nèi)表征血液感染的能力將會(huì)顯著地提高所提供的診斷信息的臨床相關(guān)性。已經(jīng)提出了分子擴(kuò)增方法來(lái)填補(bǔ)這方面的需要，但是對(duì)于這種方法仍然存在嚴(yán)重的挑戰(zhàn)。陽(yáng)性血液培養(yǎng)液自身代表具有用于各種快速、鑒定(ID)試驗(yàn)的潛能的天然擴(kuò)增的微生物種群。為了提供穩(wěn)健的結(jié)果，傳統(tǒng)的自動(dòng)化表型ID試驗(yàn)(諸如Vitek 、Phoenix 和 Microscan 系統(tǒng))或手動(dòng)表型試驗(yàn)(諸如API)都要求微生物處于合適的生長(zhǎng)階段并且無(wú)干擾培養(yǎng)基和血液產(chǎn)物。這些系統(tǒng)采用了在平板培養(yǎng)基上從陽(yáng)性肉湯中生長(zhǎng)18 M小時(shí)的菌落。然而，為了獲得更快的結(jié)果，一些實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)報(bào)道了采用這些系統(tǒng)以及從陽(yáng)性血液培養(yǎng)瓶中分離的微生物。這些直接獲自培養(yǎng)瓶的測(cè)試并不適用于所有微生物(例如，革蘭氏陽(yáng)性球菌)，未經(jīng)試廠商驗(yàn)證，并且一般要花費(fèi)3 8小時(shí)才能提供結(jié)果。迫切需要更快速且更廣泛的特異性測(cè)試，以便在陽(yáng)性培養(yǎng)結(jié)果之后的最初幾個(gè)小時(shí)內(nèi)、優(yōu)選1小時(shí)內(nèi)為醫(yī)師提供臨床上相關(guān)的結(jié)果。光學(xué)光譜學(xué)方法諸如內(nèi)熒光(IF)、紅外光譜法(FTIR)或拉曼光譜法，以及質(zhì)譜方法諸如MALDI-T0F，都具有實(shí)現(xiàn)非?？焖俚罔b定微生物的潛能，但是可能會(huì)遇到在液體微生物培養(yǎng)基中和臨床樣品諸如血液或其組合中存在的許多高度熒光和吸收性化合物的干擾。 直接從陽(yáng)性血液培養(yǎng)液中回收微生物的最常用的方法是兩步差速離心和在血清分離器管中的離心。然而，這些方法具有一些缺點(diǎn)。所得的微生物制劑經(jīng)常包含污染性的紅血細(xì)胞、 血小板、脂質(zhì)微粒、血漿酶和細(xì)胞碎片，這些都可以導(dǎo)致傳統(tǒng)表型ID測(cè)試結(jié)果變差。這些方法也是非常勞動(dòng)密集型的并且由于能夠使?jié)撛谖ｋU(xiǎn)的病原體在空氣中暴露于使用者的步驟而是不安全的。仍需要從血液培養(yǎng)液和其它無(wú)這些干擾物質(zhì)并與快速鑒定技術(shù)相容的復(fù)
3雜樣品中分離微生物的簡(jiǎn)單、安全且可靠的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及可以用于從包含或疑似包含微生物的樣品中分離微生物的分離裝置或容器。根據(jù)本發(fā)明，分離裝置可以用于分離或?；粗⑸镆约半S后對(duì)分離的樣品或顆粒進(jìn)行探詢從而表征和/或鑒定未知微生物。在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及用于分離和鑒定微生物的容器，所述容器包含(a)具有寬內(nèi)徑的上部分；(b)具有窄內(nèi)徑的下部分；和 (C)在容器的底部、頂部和/或一個(gè)或多個(gè)側(cè)面上的光學(xué)窗口，所述光學(xué)窗口能透過(guò)至少一部分的近紅外光光譜、可見光光譜/或紫外光光譜。可選地，該容器可以另外具有連接寬內(nèi)徑的上部分和窄內(nèi)徑的下部分的中間楔形部分。在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一次性(任意使用)的分離裝置，包含(a)圓柱形容器，其包含具有縱軸的主體，該主體界定了沿著所述軸取向的并具有第一端和第二端的細(xì)長(zhǎng)內(nèi)部毛細(xì)管，該主體進(jìn)一步界定了連接至毛細(xì)管第一端的儲(chǔ)液池；(b)其中接近毛細(xì)管第二端的主體由光學(xué)透明材料制成；(C)用于能夠進(jìn)入儲(chǔ)液池從而允許流體樣品分散在該儲(chǔ)液池內(nèi)的儲(chǔ)液池的蓋子?？蛇x地，圓柱形容器可以包含儲(chǔ)液池內(nèi)的密度緩沖墊層。該容器可以另外具有連接儲(chǔ)液池和毛細(xì)管的楔形部分。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，以本文中所述的方式在位于分離裝置或容器中的毛細(xì)管的底部分離或粒化微生物劑?？梢詫?duì)分離或?；奈⑸飫┻M(jìn)行探詢從而表征和/或鑒定微生物劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可以將分離裝置密封，例如，可以對(duì)裝置進(jìn)行氣密式密封。 這些裝置在處理潛在的感染劑時(shí)可以提供安全優(yōu)勢(shì)。在其它可能的實(shí)施方式中，這種分離裝置可以提供獲得分離的、離析的或?；奈⑸飿悠返墓ぞ撸纱嗽试S將樣品在探詢或其它測(cè)試之前從分離裝置中移出。


圖1是根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的分離裝置的透視圖。圖2是圖1的分離裝置的橫截面視圖。圖3是根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式的分離裝置的透視圖。圖4是圖3中所示分離裝置的頂部分的橫截面視圖。圖5是圖3中所示分離裝置的底部分的橫截面視圖。該分離裝置的底部分安裝在圖4的分離裝置的頂部分的下端。圖6是圖3的分離裝置的橫截面視圖，顯示了在分離裝置的毛細(xì)管部分中的分離的微生物劑(例如，離心后的顆粒)。圖7是圖3分離裝置的底部分的另一個(gè)實(shí)施方式的橫截面視圖。如所示，該實(shí)施方式具有兩個(gè)通至鄰近窄側(cè)壁的鋸齒狀相對(duì)側(cè)面，由此允許從分離裝置的側(cè)面對(duì)毛細(xì)管部分中的分離的微生物劑進(jìn)行探詢。
圖8示意性地示出了圖6的分離裝置中的濃縮微生物劑經(jīng)由探詢模塊通過(guò)管子底部進(jìn)行探詢。圖9是本發(fā)明分離裝置的又一個(gè)可選實(shí)施方式的透視圖。圖10是圖9的分離裝置的橫截面視圖。圖11是本發(fā)明分離裝置的可選蓋子的透視圖。圖12顯示了根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的分離裝置的照片。根據(jù)本發(fā)明，在照片中清晰可見的是溶胞樣品、密度緩沖墊層和微生物顆粒。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明可以以不同的形式體現(xiàn)并且不應(yīng)該解釋為僅限于本文中所闡述的實(shí)施方式。相反，提供這些實(shí)施方式以便使本公開是更全面和完整的，并將向本領(lǐng)域的技術(shù)人員充分表達(dá)本發(fā)明的范圍。例如，可以將有關(guān)一個(gè)實(shí)施方式示出的特征結(jié)合到其它實(shí)施方式中， 以及可以將有關(guān)具體實(shí)施方式
示出的特征從該實(shí)施方式中刪除。另外，依據(jù)本公開，在本文中提出的對(duì)實(shí)施方式的各種變通和添加對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員是顯而易見的，所述的各種變通和添加沒(méi)有偏離本發(fā)明。用于分離、表征和/或鑒定微生物的方法已經(jīng)公開在以下共同受讓的美國(guó)專利申請(qǐng)中(1)于2009年10月30日提交的序列號(hào)為，標(biāo)題為“Method for the Isolation and Identification of Microorganisms” ；(2)于 2009 年 10 月 30 日提交的序列號(hào)為―，標(biāo) IS為“Method for Separation, Isolation and/or Identification of Microorganisms using Spectroscopy”；(3)于2009年10月30日提交的序列號(hào)為―，標(biāo)題為“Method for Separation, Characterization and/or Identification of Microorganisms using Mass Spectrometry” ；和(4)于2009年10月30日提交的序列號(hào)為―，標(biāo)題為“Method for Separation, Characterization and/or Identification of Microorganisms using Raman Spectroscopy".將這些申請(qǐng)結(jié)合于本文中作為參考。簡(jiǎn)而言之，這些發(fā)明公開了用于離析、表征和/或鑒定樣品中的微生物的方法。方法實(shí)現(xiàn)了比現(xiàn)有技術(shù)更快速地分離、表征和/或鑒定微生物，從而產(chǎn)生更快速的診斷(例如，在患有或疑似患有敗血癥的受試者中)并鑒定受污染物質(zhì)(例如，食品和藥物)。在這些方法和其他表征和/或鑒定微生物的方法中，提供用于后續(xù)表征和/或鑒定程序的分離的、離析的或?；奈⑸飿悠方?jīng)常是必要的。本發(fā)明公開了可以用于從樣品中分離、離析或?；⑸锏姆蛛x裝置。例如，本發(fā)明的分離裝置可以用于從液體培養(yǎng)物(例如，血液培養(yǎng)物)中?；⑸?例如，通過(guò)離心)。然后可以對(duì)微生物顆粒進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)探詢步驟以提供用于表征和/或鑒定微生物的測(cè)定結(jié)果。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以實(shí)施探詢步驟，同時(shí)分離的、離析的或粒化的微生物樣品保留在分離裝置中。例如，密封的分離裝置(例如，氣密式密封裝置)可以用于制備分離的、 離析的或?；奈⑸飿悠罚S后，可以對(duì)分離的、離析的或?；奈⑸飿悠愤M(jìn)行非侵入式的探詢技術(shù)以提供能夠表征和/或鑒定微生物的數(shù)據(jù)或測(cè)定結(jié)果。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在探詢之前可以將分離的、離析的或粒化的微生物樣品從分離裝置中移出。例如，分離的、離析的或?；奈⑸锟梢栽賾腋∮谶m當(dāng)?shù)木彌_溶液中并從該裝置或容器中移出(例如，通過(guò)移液管)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，如本文中所公開的，分離裝置或容器可以包含能夠從分離裝置或容器上拆卸或斷開的下部分(即，可拆卸的下部分)。在操作中，該下部分可以從分離裝置或容器斷開以提供獲取其中的分離的或離析的微生物的機(jī)會(huì)。一般而言，本發(fā)明的分離裝置或容器可以是用于從包含或疑似包含微生物的測(cè)試樣品中分離、離析或粒化微生物的任何裝置或容器。例如，這種分離裝置或容器可以包含單塊或多塊主體和封蓋或蓋子。裝置的主體可以模塑制成、吹塑制成或采用本領(lǐng)域眾所周知的其他技術(shù)形成。一般而言，可以使用任何已知的塑料、玻璃或透明材料等用于分離裝置。 將要形成的分離裝置在一個(gè)末端具有開口，從而提供進(jìn)入該裝置或容器的內(nèi)部的通道用于裝載和/或卸載測(cè)試樣品。在實(shí)施方式中，分離裝置或容器包含圓柱形主體，該主體在一端是封閉的而在對(duì)面一端是開口的。通常，封蓋或蓋子可以采用任何已知的機(jī)制來(lái)封閉或另外密封該裝置或容器的內(nèi)部以與外部環(huán)境隔絕。例如，封蓋或蓋子可以是卡扣型的蓋子，其連接到裝置或容器的主體上并且可以卡扣到裝置或容器的開口的上方以封閉或密封該裝置的內(nèi)部與外部環(huán)境隔絕?？蛇x地，封蓋可以是螺紋蓋，其能夠螺旋擰到該裝置或容器上以封閉該裝置/容器。如本領(lǐng)域內(nèi)眾所周知的，蓋子可以在其內(nèi)壁上具有螺紋，該螺紋可以絲扣到或螺旋擰到位于裝置或容器外壁上的螺紋上。在一個(gè)實(shí)施方式中，蓋子可以在其內(nèi)表面上包含一個(gè)或多個(gè)橡膠0型環(huán)，如本領(lǐng)域內(nèi)眾所周知的。一個(gè)或多個(gè)0型環(huán)的應(yīng)用提供了密封(例如，氣密式密封)。在另一個(gè)可能的實(shí)施方式中，如圖11中所示，封蓋或蓋子100 可以具有能夠例如被針等刺穿的可刺穿隔膜104，從而實(shí)現(xiàn)將測(cè)試樣品輸送到密封的裝置或容器中。可刺穿隔膜104的應(yīng)用可以在處理潛在感染劑時(shí)為使用者或技術(shù)員提供安全優(yōu)勢(shì)并能夠使鑒定方法自動(dòng)化?？纱檀└裟?04還確保裝置或容器保持密封(例如，氣密式密封)，并因此為分離裝置提供保護(hù)避免可能的污染。在本發(fā)明的分離裝置或容器中可以進(jìn)行分離、離析或?；臏y(cè)試樣品，包括其中存在或生長(zhǎng)或可能疑似存在或生長(zhǎng)微生物的臨床和非臨床樣品，以及常規(guī)或不定期測(cè)試微生物存在的物質(zhì)樣品。例如，測(cè)試樣品可以是來(lái)自臨床或非臨床試樣樣品的培養(yǎng)物的培養(yǎng)液?？梢赃M(jìn)行培養(yǎng)并隨后經(jīng)過(guò)分離技術(shù)分離、離析或?；渲兴奈⑸锏牡湫驮嚇訕悠?，可以包括，血液、血清、血漿、血液部分、關(guān)節(jié)液、尿液、精液、唾液、糞便、腦脊髓液、胃內(nèi)容物、陰道分泌物、組織勻漿、骨髓抽取液、骨勻漿、痰、抽吸物、拭子和拭子渣液 (rinsates)、其他體液，等等。在一個(gè)實(shí)施方式中，如本文中進(jìn)一步所述的，分離裝置或容器可以應(yīng)用密度緩沖墊層用于從測(cè)試樣品中分離、離析或?；⑸铩Ｈ绫疚闹兴玫男g(shù)語(yǔ)“密度緩沖墊層”是指整體上具有均勻密度的溶液。所用的密度緩沖墊層在本文中進(jìn)一步描述。例如，可以將已知包含或可能包含微生物的測(cè)試樣品裝載到容納于該裝置或容器內(nèi)的密度緩沖墊層的上方，并將該裝置的容器離心以離析或?；⑸?。根據(jù)該實(shí)施方式，分離裝置或容器將具有足以容納密度緩沖墊層和樣品的容積。在一個(gè)實(shí)施方式中，該容器放入或可以被放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子中。容器的容積可以是約0. Iml至約25ml，例如約Iml至約15ml，例如，約1. 5ml 至約8ml。如果分離在微量規(guī)模上進(jìn)行，則容器的容積可以是約2μ 1至約100 μ 1，例如，約 5 μ 1至約50 μ L0在一些實(shí)施方式中，如在本文中更詳細(xì)討論的，分離裝置或容器可以預(yù)先載入密度緩沖墊層。在一些實(shí)施方式中，在將樣品放置或鋪層在頂部之前可以在密度緩沖墊層的頂部放置中間層(液體或固體)以便防止密度緩沖墊層和樣品之間的任何混合。例如，可以將薄膜放置于預(yù)先包裝的密度緩沖墊層的上方以防止密度緩沖墊層與隨后加入的測(cè)試樣品發(fā)生混合。在又一個(gè)實(shí)施方式中，分離裝置或容器可以預(yù)先載入密度緩沖墊層并隨后預(yù)先載入溶胞溶液。所用的溶胞溶液公開在本文中所討論的共同受讓的美國(guó)專利申請(qǐng)中。根據(jù)該實(shí)施方式，可以使用薄膜來(lái)分離密度緩沖墊層和溶胞溶液，從而防止發(fā)生混合。在一個(gè)實(shí)施方式中，裝置或容器具有容納測(cè)試樣品和大部分密度緩沖墊層的寬直徑的上內(nèi)腔室或儲(chǔ)液池，和用于收集分離的、離析的或?；奈⑸锴揖哂姓睆降南聝?nèi)腔室或毛細(xì)管。上內(nèi)腔室或儲(chǔ)液池可以具有約0. 32至約0. 40英寸，例如約0. 34至約0. 38 英寸，例如約0.36英寸的內(nèi)徑。對(duì)于微量分離，內(nèi)徑可以甚至更小。例如，窄部分的內(nèi)徑可以是約0. 001至約0. 04英寸，例如約0. 002至約0. 01英寸。下內(nèi)腔室或毛細(xì)管可以具有約0. 04至約0. 12英寸，例如約0. 06至約0. 10英寸，例如約0. 08英寸的內(nèi)徑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，裝置或容器是一次性的分離裝置，包含管狀容器，該管狀容器包含具有縱軸的主體，該主體界定了沿著該軸取向的具有第一端和第二端的細(xì)長(zhǎng)的內(nèi)部毛細(xì)管，該主體進(jìn)一步界定了連接到毛細(xì)管的第一端的儲(chǔ)液池。在該實(shí)施方式的一個(gè)方面， 接近毛細(xì)管的第二端的主體由光學(xué)透明材料制成。為儲(chǔ)液池提供可拆卸的封蓋或蓋子并使進(jìn)入儲(chǔ)液池成為可能，從而允許將流體樣品分散到儲(chǔ)液池中?？蛇x地，可以將密度緩沖墊層預(yù)先包裝到設(shè)備或容器中。分離裝置或容器也可以具有連接上內(nèi)腔室或儲(chǔ)液池和下內(nèi)腔室或毛細(xì)管的中間楔形部分。中間楔形部分的內(nèi)側(cè)壁在上內(nèi)腔室或儲(chǔ)液池與下內(nèi)腔室或毛細(xì)管之間可以逐漸縮小，或可以縮小直徑。楔形部分的內(nèi)側(cè)壁可以具有約20至約70度，例如約30至約60度的角度。在一個(gè)實(shí)施方式中，下面的窄部分小于容器總高度的一半，例如，小于容器總高度的約 40%、30%、20%或 10%。在某些實(shí)施方式中，對(duì)容器進(jìn)行設(shè)計(jì)以使分離的、離析的或粒化的微生物在分離之后可以很容易地手動(dòng)或以自動(dòng)的方式從容器中回收(從而使技術(shù)人員不會(huì)暴露于容器的內(nèi)容物)。例如，容器可以包含可拆卸的部分或脫離部分，該部分包含顆粒并可以與容器的其余部分分開。在另一個(gè)實(shí)施方式中，容器包含用于在分離之后獲取顆粒的工具，諸如一個(gè)或多個(gè)用于插入注射器或其它采樣裝置或用于將顆粒引出的孔道或可穿透的表面。在一個(gè)實(shí)施方式中，容器可以是管，例如離心管。在另一個(gè)實(shí)施方式中，容器可以是小片或卡片。 在一個(gè)實(shí)施方式中，該容器是獨(dú)立容器，即，用于分離單個(gè)樣品的裝置。容器可以包含光學(xué)窗口，通過(guò)該光學(xué)窗口探詢能夠進(jìn)行。光學(xué)窗口可以在容器的底部、頂部和/或側(cè)面上。窗口可以由任何透光(例如，至少一部分的近紅外光(OTR ； 700nm-1400nm)、紫外光(UV ； 190nm-400nm)和 / 或可見光(VIS ；400nm-700nm)光譜)的材料構(gòu)成。合適的材料的實(shí)例包括但不限于，丙烯酸樹脂、甲基丙烯酸酯、石英、熔凝硅石、藍(lán)寶石、環(huán)狀烯烴共聚物(COC)和/或環(huán)烯烴聚合物(COP)(例如，Zeonex (Zeonex , San
Diego，CA))。在一個(gè)實(shí)施方式中，整個(gè)容器由光學(xué)窗口材料制成。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該容器可以由兩個(gè)或多個(gè)獨(dú)立部件，諸如用于光學(xué)窗口的光學(xué)UV-VIS-OTR透明組件和構(gòu)成容器的其余部分的其他材料(例如，低成本標(biāo)準(zhǔn)成型塑料)制成(例如，模塑制成)。在一個(gè)實(shí)施方式中，光學(xué)窗口足夠薄以允許進(jìn)行光譜探詢，這將取決于窗口的材料。在另一個(gè)實(shí)施方式中，光學(xué)窗口是盡可能薄的以減少對(duì)探詢的干擾。例如，窗口可以具有小于約0.20 英寸，例如小于約0. 15,0. 10或0. 05英寸的厚度?，F(xiàn)在參照附圖，將會(huì)對(duì)本發(fā)明的分離裝置或容器的幾種可能的設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行進(jìn)一步例證。分離裝置的一個(gè)可能的實(shí)施方式在圖1 2中示出。如圖1和圖2中所示，分離裝置2包含一般具有圓柱形狀的下部分6和由向外凸出的脊結(jié)構(gòu)或凸緣8、開口 9和封蓋4 界定的上部分。下部分6包含容器主體10，所述容器主體10封閉了內(nèi)腔室，該內(nèi)腔室包含全都圍繞容器的縱軸排列的上儲(chǔ)液池14、中間楔形部分16和下毛細(xì)管18。如所示，中間楔形部分16連接較寬直徑的上儲(chǔ)液池14和較小直徑的毛細(xì)管18。一般而言，容器主體10可以由本領(lǐng)域內(nèi)已知的任何塑料材料模塑制成或另外形成。向外凸起的脊結(jié)構(gòu)或凸緣8可以充當(dāng)封蓋4的擋塊和/或可以提供實(shí)現(xiàn)由使用者改善握緊裝置的部件。裝置的上部分也可以在裝置2的外壁上提供螺紋12用于將封蓋4絲扣或螺旋擰到裝置2上，從而封閉或密封內(nèi)腔室。裝置可以進(jìn)一步包含薄的光學(xué)窗口 19，通過(guò)這個(gè)窗口能夠進(jìn)行探詢。在一個(gè)實(shí)施方式中，光學(xué)窗口 19的直徑被設(shè)計(jì)用于匹配光纖電纜并有助于裝置精確耦合到光譜儀上。 如先前所描述的，光學(xué)窗口 19包含由透光材料構(gòu)成的裝置部分，并且通過(guò)該部分探詢能夠進(jìn)行。在其它實(shí)施方式中，整個(gè)裝置可以由透光材料制成，從而允許通過(guò)其進(jìn)行探詢。在一些實(shí)施方式中，該實(shí)施方式的分離裝置2可以預(yù)先載入密度緩沖墊層43 (例如圖6 7中所示的)以有助于微生物的分離、離析或?；?。在另一個(gè)實(shí)施方式中，剛好在裝載待進(jìn)行本文中描述的分離步驟的樣品之前將密度緩沖墊層加入到分離裝置2中。在又一個(gè)實(shí)施方式中，分離裝置2可以預(yù)先載入密度緩沖墊層43和溶胞溶液(未顯示)以有助于樣品溶胞和微生物的分離、離析或?；?，如本文中參考的共同受讓的美國(guó)專利申請(qǐng)中所描述的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，如在圖3 6和圖8中所示，分離裝置20可以由可以扣到一起或另外連接的兩個(gè)獨(dú)立部分上部分22和下部分M制成以形成單個(gè)分離裝置20。一般而言，通過(guò)本領(lǐng)域內(nèi)的任何已知方式可以將下部分M可拆卸地連接或永久性地連接到上部分22。上部分22包含一般具有圓柱形狀的上主體32、向外突起的脊結(jié)構(gòu)或凸緣30和開口四?？梢圆捎梅馍w或蓋子52將開口封閉或密封(參見圖8)。上主體32進(jìn)一步界定了內(nèi)腔室的上部分。內(nèi)腔室包含了全都圍繞容器的縱軸排布的上儲(chǔ)液池40、中間楔形部分42 和毛細(xì)管45的上部件44。下主體34包含毛細(xì)管45的下部件46。當(dāng)上主體32和下主體 34扣到一起，或另外附加到一起時(shí)，它們封閉了上腔室，該上腔室再次包含上儲(chǔ)液池40、中間楔形部分42和毛細(xì)管45。如所示，中間楔形部分42連接較寬直徑的上儲(chǔ)液池40和較小直徑的毛細(xì)管45。下主體34進(jìn)一步包含能夠適合(例如，扣入或連接到)上主體32底部中的對(duì)應(yīng)凹槽38的結(jié)構(gòu)，例如在下主體34的頂部中形成的凸脊36。裝置20的下主體34 可以進(jìn)一步包含薄的光學(xué)窗口 26，通過(guò)該光學(xué)窗口探詢能夠進(jìn)行。如先前所述，光學(xué)窗口沈包含由透光材料構(gòu)成的裝置部分，并且通過(guò)該部分探詢能夠進(jìn)行。在其他實(shí)施方式中，整個(gè)裝置可以由透光材料制成，從而允許通過(guò)其進(jìn)行探詢。如先前所述，對(duì)容器進(jìn)行設(shè)計(jì)以使分離的、離析的或?；奈⑸镌诜蛛x之后可以很容易地手動(dòng)或以自動(dòng)方式從該容器中回收(從而使技術(shù)人員不會(huì)暴露于容器的內(nèi)容物)。例如，下部分M在分離步驟之后是可拆卸的，從而允許用戶獲取分離的或粒化的微生物，所述的微生物將包含在下部分M的毛細(xì)管45的下部件46中。在一些實(shí)施方式中，該實(shí)施方式的分離裝置20可以預(yù)先載入密度緩沖墊層43 (例如，圖6 7中所示的)以有助于微生物的分離、離析或?；?。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可以剛好在待進(jìn)行本文中所述的分離步驟的樣品裝載之前將密度緩沖墊層加入分離裝置20中。在又一個(gè)實(shí)施方式中，分離裝置20可以預(yù)先載入密度緩沖墊層43和溶胞溶液(未顯示) 以有助于樣品溶胞和微生物的分離、離析或?；７蛛x裝置的下部分的另一個(gè)實(shí)施方式在圖7中顯示。根據(jù)本發(fā)明，下部分48可以可拆卸地連接或永久性地連接到上部分22以形成分離裝置39。上部分22和下部分47分別包含界定內(nèi)腔室的上主體32和下主體49。內(nèi)腔室包含上儲(chǔ)液池(未顯示)、中間楔形部分42和毛細(xì)管45。如所示，下主體34進(jìn)一步包含斜向內(nèi)的外壁48，其導(dǎo)致在內(nèi)部毛細(xì)管 45的底部對(duì)側(cè)上的側(cè)壁薄。這些薄側(cè)壁實(shí)現(xiàn)通過(guò)分離裝置的側(cè)面對(duì)分離的、離析的或?；奈⑸?0進(jìn)行探詢。在分離裝置60的又一個(gè)實(shí)施方式中，在圖9 10顯示。參照這些圖，分離裝置60 包含主體62，主體62界定了上儲(chǔ)液池80、中間楔形部分82和下毛細(xì)管84。中間楔形部分 82連接較大直徑的上儲(chǔ)液池80和下毛細(xì)管84。經(jīng)由可拆卸的封蓋或蓋子72進(jìn)入上儲(chǔ)液池80，可拆卸的封蓋或蓋子72可以絲扣或螺旋擰到在主體62的頂部外壁上形成的螺紋66 上。根據(jù)該實(shí)施方式，主體62的下部分包含4個(gè)穩(wěn)定翼68，其用于當(dāng)分離裝置60豎直立于例如桌上時(shí)提供穩(wěn)定性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在翼68底部上的四個(gè)凹口產(chǎn)生用于精確耦合光纖探針的凹陷區(qū)域。按照這種方式集束的激發(fā)光束導(dǎo)致熒光再現(xiàn)性的改善并降低了由雜散散射光產(chǎn)生的發(fā)射信號(hào)的污染。分離裝置60進(jìn)一步包含在毛細(xì)管84底部的主體62 中形成的光學(xué)窗口 70。光學(xué)窗口 70包含在主體62上厚度降低的小部分，通過(guò)該小部分能夠?qū)Ψ蛛x的、離析的或?；奈⑸镞M(jìn)行探詢。如本文中所述的，光學(xué)窗口 70可以由光學(xué)透明材料制成。在一些實(shí)施方式中，該實(shí)施方式的分離裝置60可以預(yù)先載入密度緩沖墊層85 (如例如圖10中所示的)以有助于微生物的分離、離析或粒化。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可以在剛好裝載待進(jìn)行本文中描述的分離步驟的樣品之前將密度緩沖墊層加入到分離裝置60中。 在又一個(gè)實(shí)施方式中，分離裝置60可以預(yù)先載入密度緩沖墊層和溶胞溶液以有助于樣品溶胞和微生物的分離、離析或粒化。圖8顯示了分離裝置60內(nèi)部的濃縮微生物劑50的探詢操作。在一個(gè)實(shí)施方式中， 采用本領(lǐng)域內(nèi)任何已知的方式可以對(duì)分離的、離析的或?；奈⑸镞M(jìn)行探詢(本文中如探詢裝置58所代表的)。例如，如在于2009年10月30日提交的標(biāo)題為“Method for the Isolation and Identification of Microorganisms”，序列號(hào)為_的共同待決的美國(guó)專利申請(qǐng)中所公開的，探詢步驟可以采用內(nèi)熒光光譜法、拉曼光譜法或其它光學(xué)技術(shù)進(jìn)行實(shí)施。盡管在上述實(shí)施方式中，在濃縮微生物劑仍然位于分離裝置內(nèi)時(shí)對(duì)其進(jìn)行光譜探詢，但是也可以設(shè)想，分離的、離析的或?；奈⑸飿悠房梢詮姆蛛x裝置中移出并例如采用質(zhì)譜法進(jìn)行探詢，如在于2009年10月30日提交的標(biāo)題為“Method for Separation,Characterization and/or Identification of Microorganisms using Mass Spectrometry”，序列號(hào)為_的共同待決的美國(guó)專利申請(qǐng)中所公開的。如上文所提及的，可以實(shí)施分離、離析或粒化步驟以使微生物與樣品的其它組分 (例如，非微生物或其組分)分離并將微生物濃縮成可以進(jìn)行探詢用于鑒定和表征目的的分離的、離析的或?；臉悠?。分離或?；襟E不必是完全的，S卩，不需要進(jìn)行100%的分離。需要的是微生物與其它樣品組分的分離足以允許對(duì)微生物進(jìn)行探詢而基本上不會(huì)受到其它組分的干擾。例如，分離能夠產(chǎn)生至少約10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、70 %、80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%純度或更高純度的微生物顆粒。在一個(gè)實(shí)施方式中，如在本文中所討論的共同受讓的美國(guó)專利中請(qǐng)中更全面地描述的，通過(guò)離心步驟實(shí)施分離，在所述的離心步驟中通過(guò)將測(cè)試樣品(例如，溶胞樣品)放置于分離容器中的密度緩沖墊層的頂部并將該容器在以允許微生物被分離(例如，微生物可以在容器的底部和/或側(cè)面上形成顆粒)的條件下離心。根據(jù)該實(shí)施方式，樣品的其它組分(例如，可能存在于樣品培養(yǎng)基中的非微生物或其組分)保留在密度緩沖墊層的頂部或密度緩沖墊層的頂層部分內(nèi)。這種分離步驟將微生物與樣品中的物質(zhì)諸如培養(yǎng)基、細(xì)胞碎片和/或其它可能干擾微生物的探詢(例如，通過(guò)內(nèi)熒光)的組分分開。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述密度緩沖墊層還用于分離活的微生物和死亡微生物(其不通過(guò)密度緩沖墊層)。 在另一個(gè)實(shí)施方式中，無(wú)論是在離心之前還是在離心之后，密度緩沖墊層都不含有密度梯度。換句話說(shuō)，對(duì)分離容器離心的時(shí)間和/或加速度的量不足以使構(gòu)成密度緩沖墊層的物質(zhì)形成密度梯度。選擇緩沖墊層的密度以便使樣品中的微生物通過(guò)緩沖墊層而樣品的其它組分 (例如，血液培養(yǎng)液、細(xì)胞碎片)仍然保留在緩沖墊層的頂部或沒(méi)有完全通過(guò)密度緩沖墊層。也可以選擇密度緩沖墊層用來(lái)分離活的微生物(其通過(guò)緩沖墊層)和死亡微生物 (其不通過(guò)緩沖墊層)。合適的密度將取決于密度緩沖墊層中所用的物質(zhì)以及待分離的樣品。在一個(gè)實(shí)施方式中，緩沖墊層的密度在約1.025至約1. 120g/ml，例如約1. 030至約 1. 070g/ml，約1. 040至約1. 060g/ml的范圍中或約1. 025至約1. 120g/ml之間的任何范圍中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，緩沖墊層的密度是約1. 025,1. 030,1. 035,1. 040,1. 045,1. 050、 1. 055,1. 060,1. 065,1. 070,1. 075,1. 080,1. 085,1. 090,1. 095,1. 100,1. 105,1. 110,1. 115 或 1. 120g/ml。用于密度緩沖墊層的物質(zhì)可以是具有用于本發(fā)明方法的適當(dāng)?shù)拿芏确秶娜魏挝镔|(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方式中，物質(zhì)是膠體二氧化硅。膠體二氧化硅可以是未涂覆的(例如， Ludox (W. R. Grace, CT))或者是例如采用硅燒(例如，PureSperm (Nidacon Int ‘ 1， 瑞典)或 Isolate (Irvine Scientific, Santa Ana, CA))或聚乙烯吡咯烷酮(例如， Percol 1 , Percol 1 Plus (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO))涂覆的。在一個(gè)實(shí)施方式中， 選擇了對(duì)光譜探詢產(chǎn)生最小干擾的膠體二氧化硅，例如，具有最低內(nèi)熒光的物質(zhì)。膠體二氧化硅可以在任何合適的介質(zhì)中稀釋以形成合適的密度，例如，平衡鹽溶液、生理鹽水和/或 0. 25M蔗糖。合適的密度可以采用濃度為約15%至約80% v/v，例如約20%至約65% ν/ν 的膠體二氧化硅獲得。用于密度緩沖墊層的另一種合適的物質(zhì)是碘化造影劑，例如碘海醇 (Omnipaque NycoPi^p ，或 Nycodenz )和碘克沙醇(Visipaque 或 OptiPi^p )。對(duì)于血液培養(yǎng)樣品，合適的密度可以采用濃度為約10%至約25% w/v，例如約14%至約18% w/ ν的碘海醇或碘克沙醇。對(duì)于血液培養(yǎng)樣品，蔗糖可以以約10%至約30% w/v，例如約15% 至約20 % w/v的濃度用作密度緩沖墊層?？梢杂糜谥苽涿芏染彌_墊層的其他合適的物質(zhì)包括低粘度高密度的油，諸如顯微鏡浸鏡油(例如，Type DF5Cargille Labs,New York)；礦物油(例如，Drakeol 5, Draketex 50, Peneteck ；Penreco Co. , Pennsylvania)；娃油(聚二甲基硅氧烷)；氟代硅油；硅凝膠；甲泛影酸鹽-Ficoll (Lymphoft^p )，例如對(duì)于血液培養(yǎng)樣品在約75%至約100%的濃度下；泛影酸鹽-葡聚糖(Polymorphoft 印 )，例如對(duì)于血液培養(yǎng)樣品在約25%至約50%的濃度下；羧甲基纖維素；羥丙基甲基纖維素；聚環(huán)氧乙烷(高分子量)；Pluronic F127 ；Pluronic F68 ；Pluronic :化合物的混合物；聚丙烯酸；
交聯(lián)的聚乙烯醇；交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷；PEG甲醚甲基丙烯酸酯；果膠；瓊脂糖；黃原膠；膠凝糖；Phytagel ；山梨醇；Ficoll (例如，對(duì)于血液培養(yǎng)樣品，濃度為約10%至約15%的 Ficoll 400)；甘油；葡聚糖(例如，對(duì)于血液培養(yǎng)樣品，在約10%至約15%的濃度下)；糖原；氯化銫(例如，對(duì)于血液培養(yǎng)樣品，在約15%至約25%的濃度下)；全氟碳流體(例如， 全氟正辛烷)；氫氟碳流體(例如，Vertrel XF)等本領(lǐng)域內(nèi)眾所周知的物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方式中，密度緩沖墊層選自以任意組合形式存在的膠體二氧化硅、碘克沙醇、碘海醇、氯化銫、甲泛影酸鹽-Ficoll 、泛影酸鹽-葡聚糖、蔗糖、Ficoll 400和/或葡聚糖中的一種或多種。密度緩沖墊層也可以由物質(zhì)的組合構(gòu)成，例如，膠體二氧化硅和油的組合。上述化合物的某些組合對(duì)于本發(fā)明的分離和讀取步驟可能是有益的。例如，具有不同UV-淬滅性質(zhì)的化合物的組合，諸如氯化銫和碘海醇。密度緩沖墊層的體積/高度應(yīng)該足以實(shí)現(xiàn)微生物與其它樣品組分的分離。體積將取決于分離容器的尺寸和形狀。一般而言，可以使用約0. 1至約5ml的體積，例如約0. 2至約1ml，例如約0. 2ml至約0. 5ml。如果分離是以微量規(guī)模進(jìn)行的，則密度緩沖墊層的體積可以是約 μ 1至約100μ 1，例如約5μ 1至約50 μ 1。置于或鋪層于密度緩沖墊層頂部的樣品體積應(yīng)該足以提供產(chǎn)生適于光譜探詢的顆粒的足夠微生物。一般而言，可以使用適于容器的任何體積。例如，可以使用約0. Iml至約5ml的體積，例如約0. 2ml至約1ml，例如約0. 2ml至約0. 5ml。如果分離以微量規(guī)模進(jìn)行，則樣品體積可以是約1 μ 1至約100 μ 1， 例如約5μ 1至約50μ 1。容器中對(duì)于樣品的可利用空間將取決于容器的尺寸和形狀。在一些實(shí)施方式中，在將樣品放置或鋪層在頂部之前可以將中間層(液體或固體)放置在密度緩沖墊層的頂部以防止密度緩沖墊層和樣品發(fā)生任何混合。在一個(gè)實(shí)施方式中，中間層可以是聚乙烯珠。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可以在密度緩沖墊層和樣品之間放置小氣泡以防止混合。在另外的實(shí)施方式中，可以將密度緩沖墊層鋪層在高密度物質(zhì)(例如，全氟碳流體) 的頂部從而使微生物在分離期間通過(guò)密度緩沖墊層并在密度緩沖墊層和高密度物質(zhì)之間的界面處收集。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，分離容器在甩平式轉(zhuǎn)子中進(jìn)行離心從而使微生物直接在容器底部形成顆粒。容器以足夠的加速度離心足夠長(zhǎng)的時(shí)間從而使微生物與樣品的其它組分分離(例如，形成顆粒)。離心加速度可以是約1，000 Xg至約20，000Χ g，例如約 2，500 X g至約15，000 X g,例如約7，500 X g至約12，500 X g，等。離心時(shí)間可以是約30s至約30min，例如約Imin至約15min，例如約Imin至約5min。離心可以在約2°C至約45°C，例如約15°C至約40°C，例如約20°C至約30°C的溫度下進(jìn)行實(shí)施。在一個(gè)實(shí)施方式中，分離容器包含封蓋，并在離心之前將封蓋應(yīng)用于容器以形成氣密式密封。封蓋的存在降低了處理具有或可能具有傳染性和/或危險(xiǎn)性的微生物的風(fēng)險(xiǎn)，以及樣品發(fā)生污染的風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明的方法的優(yōu)點(diǎn)之一是能夠采用密封容器(例如，氣密式密封容器)內(nèi)的微生物實(shí)施方法的任何一個(gè)或多個(gè)步驟(例如，溶胞、分離、探詢、和/或鑒定)。本發(fā)明方法涉及自動(dòng)化系統(tǒng)的應(yīng)用，避免了與處理高度毒性微生物相關(guān)的健康和安全性風(fēng)險(xiǎn)，諸如從樣品中回收微生物用于直接測(cè)試時(shí)發(fā)生的。在一個(gè)實(shí)施方式中，對(duì)容器離心的時(shí)間和/或力不足以在密度緩沖墊層內(nèi)形成密度梯度。本發(fā)明不涉及樣品的超離心，例如，以超過(guò)約100，OOOXg的力進(jìn)行離心。另外，本發(fā)明也不涉及等密度(平衡)沉降或分帶。
11
—旦制備了分離的、離析的或粒化的微生物樣品，可以實(shí)施后續(xù)探詢步驟以提供用于表征和/或鑒定微生物的測(cè)定結(jié)果。所用的探詢方式是本領(lǐng)域內(nèi)已知的。其它探詢方式描述在上文所討論的共同受讓的美國(guó)專利申請(qǐng)中。實(shí)施例實(shí)施例1.在原位鑒定純化的微生物顆粒的裝置和方法為了探索在分離裝置中在原位快速分離和鑒定微生物的潛能，根據(jù)本發(fā)明，設(shè)計(jì)并由UV透明塑料模塑制成幾種裝置。這些裝置包含幾個(gè)共同的特征，包括封蓋、樣品儲(chǔ)液池和能夠?qū)ο旅婧?或側(cè)面的沉降微生物顆粒進(jìn)行光譜探詢的楔形光學(xué)質(zhì)量下部區(qū)域、以及有助于裝置耦合到熒光分光光度計(jì)的特征。裝置還必須在分離步驟期間能夠經(jīng)受相對(duì)較高的g-力。這種管的幾個(gè)重復(fù)結(jié)構(gòu)被設(shè)計(jì)用于改進(jìn)微生物回收、熒光再現(xiàn)性并減少由雜散散射光引起的污染。該管也被設(shè)計(jì)成氣密式密封。沉降的微生物球粒的光學(xué)探詢通過(guò)將分離裝置插入放置在熒光分光光度計(jì)樣品室的定制適配器中或通過(guò)將分離裝置直接耦合到連接至熒光分光光度計(jì)(FlUorolog 3， 來(lái)自HORIBA Jobin Yvon Inc. , New Jersey)的雙叉分六環(huán)一 300 400 μ m的光纖電纜 (Ocean Optics,Dunedin,FL)來(lái)實(shí)現(xiàn)。構(gòu)建三反射鏡光纖適配器使其能夠使用這兩種系統(tǒng)檢測(cè)器(PMT和CCD)。在每種微生物顆粒上收集激發(fā)-發(fā)射矩陣(EEM)全光譜(掃描范圍 激發(fā) 260-800nm ；發(fā)射 ^O-IlOOnm ；增量 5nm)。量具重現(xiàn)性和可靠性研究在一次性裝置-光纖電纜設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)上采用純化的色氨酸和核黃素溶液進(jìn)行實(shí)施。對(duì)于這兩種熒光團(tuán)均獲得小于2. 5%的目標(biāo)CV，從而證實(shí)該一次性裝置和研究平臺(tái)的質(zhì)量。這些裝置證明適用于從培養(yǎng)基中分離和探詢微生物。圖12顯示了在通過(guò)使用密度緩沖墊層離心分離包含金黃色葡萄球菌(S. aureus)的溶胞血液培養(yǎng)樣品之后的裝置實(shí)例。根據(jù)本發(fā)明，在照片中清楚可見的是溶胞樣品、密度緩沖墊層和微生物顆粒。
權(quán)利要求
1.一種用于分離和鑒定微生物的容器，所述容器包含(a)具有寬內(nèi)徑的上部分；(b)具有窄內(nèi)徑的下部分；和(c)在容器的底部、頂部和/或一個(gè)或多個(gè)側(cè)面上的光學(xué)窗口，所述光學(xué)窗口能透過(guò)至少一部分的近紅外光光譜、可見光光譜和/或紫外光光譜。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其中所述容器具有足以容納足夠樣品以產(chǎn)生微生物顆粒的容積。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其中所述上部分和下部分通過(guò)中間楔形部分連接。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其中所述下部分小于容器的總高度的一半。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其中所述容器包含封蓋器件或帶有螺紋以接受封蓋器件從而密封所述容器。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其中所述光學(xué)窗口由石英、熔融硅石、藍(lán)寶石、丙烯酸樹脂、甲基丙烯酸酯、環(huán)狀烯烴共聚物、環(huán)烯烴聚合物或其任意組合組成。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的容器，其中所述容器包括容納其中的密度溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的容器，其中所述容器進(jìn)一步含有選擇性溶胞溶液。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分離裝置，其中所述裝置進(jìn)一步包含分離密度緩沖墊層和溶胞溶液的薄膜。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的容器，其中所述容器進(jìn)一步包含聚丙烯球。
11.一種一次性的分離裝置，包含(a)圓柱形容器，所述圓柱形容器包含具有縱軸的主體，所述主體界定了沿著所述軸取向的具有第一端和第二端的細(xì)長(zhǎng)的內(nèi)部毛細(xì)管，所述主體進(jìn)一步界定了連接至毛細(xì)管第一端的儲(chǔ)液池；(b)其中接近毛細(xì)管第二端的主體由光學(xué)透明材料制成；(c)用于能夠進(jìn)入儲(chǔ)液池從而允許流體樣品分散到儲(chǔ)液池中的儲(chǔ)液池蓋子。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離裝置，其中所述裝置進(jìn)一步包含容納在儲(chǔ)液池內(nèi)的密度緩沖墊層。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的分離裝置，其中所述裝置進(jìn)一步包含將溶胞溶液鋪層在密度緩沖墊層頂部的上方。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的分離裝置，其中所述裝置進(jìn)一步包含分離密度緩沖墊層和溶胞溶液的薄膜。
15.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離裝置，其中所述儲(chǔ)液池具有在0.5和15ml之間的流體容量。
16.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離裝置，其中所述裝置進(jìn)一步包含附加在主體上的終端件，所述終端件封閉了毛細(xì)管的第二端，并且其中所述終端件由光學(xué)透明材料制成。
17.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離裝置，其中所述裝置進(jìn)一步包含位于所述儲(chǔ)液池和所述毛細(xì)管之間的楔形部分。
18.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離裝置，其中所述容器包含容納其中的密度緩沖墊層。
19.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離裝置，其中所述儲(chǔ)液池進(jìn)一步含有選擇性溶胞溶液。
20.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離裝置，其中所述儲(chǔ)液池進(jìn)一步包含聚丙烯球。
全文摘要
本發(fā)明涉及可以用于從已知包含或疑似包含所述微生物的測(cè)試樣品中分離、離析或?；⑸锏姆蛛x裝置或容器。隨后，可以對(duì)分離的、離析的或?；奈⑸飿悠愤M(jìn)行一個(gè)或多個(gè)探詢步驟而提供用于微生物的表征和/或鑒定的測(cè)定結(jié)果。在本發(fā)明的一個(gè)方面，探詢步驟可以在本發(fā)明中所述的分離裝置或容器中在原位進(jìn)行。
文檔編號(hào)B01L3/14GK102271814SQ200980153286
公開日2011年12月7日 申請(qǐng)日期2009年10月30日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月31日
發(fā)明者克里斯多夫·羅恩斯克, 瓊斯·海曼, 約翰·林克, 約翰·沃爾什, 羅恩·羅賓遜, 馬克·威爾森 申請(qǐng)人:生物梅里埃公司