專利名稱：用于mtt比色實驗的細胞混勻裝置的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種在醫(yī)學教學及科研中用于MTT(噻唑藍)比色實驗的細胞混勻裝置。
背景技術：
近年來，隨著醫(yī)學研究領域的不斷深入和發(fā)展，細胞學研究是醫(yī)學領域研究的重要環(huán)節(jié)之一，其原因在于細胞是生命有機體的結構和生命活動的最基本單位。MTT比色實驗是一種通過測定細胞能量代謝水平用以間接反映細胞增殖情況的檢測方法。檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚 (Formazan)并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚，用酶標儀在相應波長處測定其光吸收值，在一定細胞數(shù)范圍內，MTT結晶形成的量與細胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(0D值)，來判斷活細胞數(shù)量，OD值越大，細胞活性越強 (如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。以往的實驗方法是將細胞稀釋到所需濃度時，用混勻器不斷的混勻細胞或用排槍不斷的吹打細胞，然后，再用排槍將細胞加入96孔板。在此過程中，由于吹打的力度或次數(shù)的不同，導致細胞濃度產生差異，造成各孔細胞分布不均勻而影響實驗結果，此問題長期以來使大部分實驗者受到困擾。

發(fā)明內容
本發(fā)明針對背景技術所存在的問題，提供了一種方便、快速的細胞混勻裝置，可有效減少實驗過程中的操作誤差、節(jié)省時間、避免交叉污染。為達到以上目的，本發(fā)明是采取如下技術方案予以實現(xiàn)的一種用于MTT比色實驗的細胞混勻裝置，其特征在于，包括一個恒流泵、一個帶攪拌器的金屬容器和一個設有進、出液口的取液槽，金屬容器和恒流泵并列緊固于一個綜合固定架內，取液槽緊固于綜合固定架內的金屬容器與恒流泵箱之間的上方；所述金屬容器底部設有一個下彎管連接導液管，導液管通過恒流泵后與取液槽的進液口相連接；金屬容器頂部設有一個可拆卸的端蓋，端蓋中心設有一個從動輪連接伸入容器內的攪拌器，端蓋上距中心大于從動輪半徑處設有一帶孔蓋的加液孔，在加液孔所在端蓋直徑的相對位置設有一上彎管，其通過軟管與取液槽的出液口連接，恒流泵中心軸設有上、下兩個主動輪，其中上方的主動輪與金屬容器端蓋上的從動輪通過傳送帶連接。上述方案中，所述的取液槽為一個V型金屬槽，其進液口位于長度方向一端的上部，出液口位于長度方向另一端的下部。所述取液槽上設有槽蓋。所述下彎管和上彎管上設置有用于對進出金屬容器的細胞液體進行流量控制的閥門。本發(fā)明裝置的優(yōu)點是，恒流泵、金屬容器、取液槽三者之間通過管道連接構成細胞液半封閉的循環(huán)系統(tǒng)，在細胞液循環(huán)過程中通過攪拌器可同步實現(xiàn)對金屬容器內細胞液的自動攪拌，防止細胞的聚集，使細胞液混合更加均勻；并且通過取液槽取液，防止交叉污染， 取液快速、方便。


圖1為本發(fā)明結構示意圖。圖中1、恒流泵；2、主動輪；3、取液槽；4、槽蓋；5、閥門；6、上彎管；7、加液孔(帶蓋)；8、箍；9、金屬容器；10、下彎管；11、攪拌葉片；12、導液管；13、從動輪；14、綜合固定架。
具體實施例方式如圖1所示，一種用于MTT比色實驗的細胞混勻裝置，包括一個金屬容器9、一個恒流泵1 ；一個綜合固定架14、一個設有進、出液口的取液槽3。恒流泵1、金屬容器9和取液槽3三者之間通過管道連接構成細胞液循環(huán)系統(tǒng)。金屬容器9為耐氧化、耐腐蝕的圓柱形容器，其圓周上設有兩個箍8，用于將其固定在綜合固定架14內。金屬容器9底部設有一個L形金屬下彎管10，管口伸出容器底部 lcm，連接導液管12，導液管12通過恒流泵1后與取液槽3的進液口相連接。金屬容器9頂部設有一個可拆卸的端蓋，端蓋中央鑲嵌一個轉子伸入容器內，轉子上端帶有一個從動輪 13，下端帶有攪拌葉片11，攪拌葉片距容器底部為0. 5cm，在容器端蓋上距離端蓋中心大于從動輪半徑處設有一加液孔7，加液孔7上設有孔蓋。端蓋直徑方向相對加液孔7的位置鑲嵌有一上彎管6，經軟管與取液槽3的出液口相連接。下彎管10、上彎管6上可設置閥門5 用于對進出金屬容器的細胞液體進行流量控制。 取液槽3為一個耐氧化、耐腐蝕的V型金屬槽，其進液口位于V型金屬槽長度方向一端的上部，出液口位于V型金屬槽長度方向另一端下部，取液槽3采用V型結構可使流經槽內的液體容積小、液面高，有利于混勻細胞液的吸?。蝗∫翰凵峡稍O有槽蓋4，在不進行取液操作時可將取液槽的槽口蓋住，防止槽內液體的污染。恒流泵1中心軸設有上下兩個主動輪，下方主動輪帶動恒流泵完成恒流功能。上方的主動輪2通過皮帶傳動帶動金屬容器端蓋上的從動輪13驅動轉子完成金屬容器9中細胞液的混勻過程。將金屬容器9、恒流泵1、取液槽3緊密的固定在綜合固定架14內。一方面可保證主皮帶輪的正常傳動，另一方面可防止機械振動對金屬容器9中細胞造成損傷。金屬容器 9和取液槽3等部件和連接橡膠管皆能采用高壓消毒，以保證無菌。本發(fā)明裝置的工作原理是將配制好的細胞懸液從加液孔7注入金屬容器9中，蓋上孔蓋，開啟恒流泵，金屬容器9中細胞懸液通過下彎管10、導液管12 (經恒流泵)、取液槽 3、軟管、上彎管6又回到金屬容器9中，形成細胞液流體循環(huán)；同時，恒流泵1上的主動輪2 通過皮帶傳動帶動金屬容器端蓋上的從動輪13驅動轉子實現(xiàn)金屬容器9中細胞液的混勻過程。當實驗人員需要對混勻的細胞液進行MTT比色實驗時，只需打開槽蓋4從取液槽3 中抽取即可。該裝置運行較長時間后，可將金屬容器9頂部的端蓋及攪拌轉子拆下，對金屬容器內部進行清理。
權利要求
1.一種用于MTT比色實驗的細胞混勻裝置，其特征在于，包括一個恒流泵、一個帶攪拌器的金屬容器和一個設有進、出液口的取液槽，金屬容器和恒流泵并列緊固于一個綜合固定架內，取液槽緊固于綜合固定架內的金屬容器與恒流泵之間的上方；所述金屬容器底部設有一個下彎管連接導液管，導液管通過恒流泵后與取液槽的進液口相連接；金屬容器頂部設有一個可拆卸的端蓋，端蓋中心設有一個從動輪連接伸入容器內的攪拌器，端蓋上距中心大于從動輪半徑處設有一帶孔蓋的加液孔，在加液孔所在端蓋直徑的相對位置設有一上彎管，其通過軟管與取液槽的出液口連接，恒流泵中心軸設有上、下兩個主動輪，其中上方的主動輪與金屬容器端蓋上的從動輪通過傳送帶連接。
2.如權利要求1所述的用于MTT比色實驗的細胞混勻裝置，其特征在于，所述的取液槽為一個V型金屬槽，其進液口位于長度方向一端的上部，出液口位于長度方向另一端的下部。
3.如權利要求2所述的用于細胞MTT比色實驗的混勻裝置，其特征在于，所述取液槽上設有槽蓋。
4.如權利要求1所述的用于細胞MTT比色實驗的混勻裝置，其特征在于，所述下彎管和上彎管上設置有用于對進出金屬容器的細胞液體進行流量控制的閥門。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于MTT比色實驗的細胞混勻裝置，包括一個恒流泵、一個金屬容器和一個設有進、出液口的取液槽，金屬容器和恒流泵并列緊固于一個綜合固定架內，取液槽緊固于綜合固定架內的金屬容器與恒流泵之間的上方；金屬容器底部設有一個下彎管連接導液管，導液管通過恒流泵后與取液槽的進液口相連接；金屬容器頂部設有一個可拆卸的端蓋，端蓋中心設有一個從動輪連接伸入容器內的攪拌器，在端蓋上距端蓋中心大于從動輪半徑處設有一帶孔蓋的加液孔，端蓋直徑方向相對加液孔的位置設有一上彎管，其通過軟管與取液槽的出液口相連接，恒流泵中心軸設有兩個主動輪，其中上方的主動輪與金屬容器端蓋上的從動輪通過傳送帶連接。
文檔編號B01F3/08GK102247772SQ20111009900
公開日2011年11月23日 申請日期2011年4月20日 優(yōu)先權日2011年4月20日
發(fā)明者于軍, 仝黎, 劉楠楠, 劉芳娥, 南海燕, 張學策, 曲萍, 梁向艷, 田菲, 趙?？? 趙玉峰, 鐵茹, 顏林楓, 黃小軍 申請人:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學