專利名稱：一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種分離的方法。
技術(shù)背景
土壤動物是指生活在土壤或地表凋落物層中的動物。土壤動物在分解生物殘體、 改變土壤理化性質(zhì)、促進土壤物質(zhì)循環(huán)和能量轉(zhuǎn)化過程中起著重要作用。研究土壤動物需將其從野外土壤中先分離出來。Tullgren法是一種分離收集土壤動物的常用的方法，它是將采集到的土壤放在2mm孔徑的篩子上，篩子上方用裝有25-40W白熾燈的筒罩罩著烘烤， 篩子下方放一漏斗，漏斗出口下放一個裝有10-20mL酒精的50mL燒杯。開燈后分離器內(nèi)土樣溫度升高，水分減少，土壤動物受熱向下移動，直到離開土，順著漏斗掉進酒精里，以此收集土壤動物。由于直徑小于2mm的土很容易通過篩子掉進燒杯中，土與土壤動物混合，使得提取土壤動物效率低，個體較小和與土顏色相近的土壤動物不易被發(fā)現(xiàn)，分離工作繁重，樣品易損失，統(tǒng)計誤差增大。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是解決Tullgren法獲得的粗品中土壤動物提取效率低、個體較小和與土顏色相近的土壤動物不易被發(fā)現(xiàn)的問題，而提供一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法。
將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法按以下步驟實現(xiàn)
一、稱取500g蔗糖溶于500mL蒸餾水中，獲得蔗糖溶液；
二、采用Tullgren法分離土壤動物，然后將收集土壤動物的燒杯靜置l_2h，然后倒出上清液并收集土壤動物，再向燒杯內(nèi)的沉淀粗品中加入8 IOml的蔗糖溶液，振蕩后有土壤動物浮到蔗糖溶液中，靜置20 30s，倒出液體于培養(yǎng)皿中，重復用蔗糖溶液分離 1 3次；
三、用鑷子夾取大型土壤動物并用體積濃度為95%的酒精進行清洗，收集保存，然后用吸管吸出中小型土壤動物于另一培養(yǎng)皿中，加入20 25mL體積濃度為95%的酒精進行清洗，重復清洗1 3次后收集保存，即完成將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法。
本發(fā)明中使用質(zhì)量比濃度為50%的蔗糖溶液可以使土壤中的大部甚至全部土壤動物與土分離，避免了洗滌樣品過程中混入土，解決了動物個體較小和與土顏色相近的土壤動物不易被發(fā)現(xiàn)的問題，提高了提取效率和統(tǒng)計精度；用體積濃度為95%的酒精反復清洗以降低蔗糖含量并提高酒精濃度。本發(fā)明與現(xiàn)有分離方法相比，分離效率提高了 1 10 倍，土壤動物損失率接近零，統(tǒng)計精度提高了 5% 10%。
具體實施方式
具體實施方式
一本實施方式將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法按以下步驟實現(xiàn)
一、稱取500g蔗糖溶于500mL蒸餾水中，獲得蔗糖溶液；
二、采用Tullgren法分離土壤動物，然后將收集土壤動物的燒杯靜置l_2h，然后倒出上清液并收集土壤動物，再向燒杯內(nèi)的沉淀粗品中加入8 IOml的蔗糖溶液，振蕩后有土壤動物浮到蔗糖溶液中，靜置20 30s，倒出液體于培養(yǎng)皿中，重復用蔗糖溶液分離 1 3次；
三、用鑷子夾取大型土壤動物并用體積濃度為95%的酒精進行清洗，收集保存，然后用吸管吸出中小型土壤動物于另一培養(yǎng)皿中，加入20 25mL體積濃度為95%的酒精進行清洗，重復清洗1 3次后收集保存，即完成將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法。
本實施方式與現(xiàn)有分離方法相比，分離效率提高了 1 10倍，土壤動物損失率接近零，統(tǒng)計精度提高了 5% 10%。
本實施方式步驟一中蔗糖溶液的質(zhì)量比濃度為50%。
本實施方式步驟二中采用Tullgren法分離土壤動物為常規(guī)操作。
本實施方式還可以根據(jù)不同樣品變更所加入的蔗糖濃度，15%的蔗糖即可使部分種類土壤動物與土分離，但是由于含水量為85%，需要用較多的酒精清洗以提高保存土壤動物的酒精濃度。提取質(zhì)量較大的土壤動物可以提高蔗糖的濃度至30%或70%。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟二中向燒杯內(nèi)的粗品中加入9ml的蔗糖溶液。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟二中靜置25s，倒出液體于培養(yǎng)皿中，重復用蔗糖溶液分離2次。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟二中燒杯內(nèi)的沉淀粗品中若含有剩余的酒精，則加入8 IOml的蔗糖溶液，振蕩后土壤動物懸浮于的酒精與蔗糖溶液的相接處，靜置20 30s，倒出液體于培養(yǎng)皿中，重復用蔗糖溶液分離1 3次。 其它步驟及參數(shù)與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟三中加入22mL體積濃度為95%的酒精進行清洗，重復清洗2次后收集保存。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
六本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟三中大型土壤動物的長度為0. 01 0. 1mm。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
七本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟三中中小型土壤動物的長度為0. 1 1mm。其它步驟及參數(shù)與具體實施方式
一相同。
權(quán)利要求
1.一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法，其特征在于將 Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法按以下步驟實現(xiàn)一、稱取500g蔗糖溶于500mL蒸餾水中，獲得蔗糖溶液；二、采用Tullgren法分離土壤動物，然后將收集土壤動物的燒杯靜置l_2h，然后倒出上清液并收集土壤動物，再向燒杯內(nèi)的沉淀粗品中加入8 IOml的蔗糖溶液，振蕩后有土壤動物浮到蔗糖溶液中，靜置20 30s，倒出液體于培養(yǎng)皿中，重復用蔗糖溶液分離1 3 次；三、用鑷子夾取大型土壤動物并用體積濃度為95%的酒精進行清洗，收集保存，然后用吸管吸出中小型土壤動物于另一培養(yǎng)皿中，加入20 25mL體積濃度為95%的酒精進行清洗，重復清洗1 3次后收集保存，即完成將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法，其特征在于步驟二中向燒杯內(nèi)的粗品中加入9ml的蔗糖溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法，其特征在于步驟二中靜置25s，倒出液體于培養(yǎng)皿中，重復用蔗糖溶液分離2次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法，其特征在于步驟二中燒杯內(nèi)的沉淀粗品中若含有剩余的酒精，則加入8 IOml的蔗糖溶液，振蕩后土壤動物懸浮于的酒精與蔗糖溶液的相接處，靜置20 30s，倒出液體于培養(yǎng)皿中，重復用蔗糖溶液分離1 3次。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法，其特征在于步驟三中加入22mL體積濃度為95%的酒精進行清洗，重復清洗2次后收集保存。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法，其特征在于步驟三中大型土壤動物的長度為0. 01 0. 1mm。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法，其特征在于步驟三中中小型土壤動物的長度為0. 1 1mm。
全文摘要
一種將Tullgren法獲得的粗品中土壤動物與土高效分離的方法，它涉及一種分離的方法。它解決了Tullgren法獲得的粗品中土壤動物提取效率低、個體較小和與土顏色相近的土壤動物不易被發(fā)現(xiàn)的問題。方法配置蔗糖溶液；采用Tullgren法分離土壤動物，收集土壤動物的燒杯靜置后倒出上清液并收集土壤動物，再向燒杯內(nèi)的粗品中蔗糖溶液，振蕩后靜置，倒出液體于培養(yǎng)皿中，重復用蔗糖溶液分離；取大型土壤動物并用酒精清洗，收集保存，然后吸出中小型土壤動物加入酒精清洗，重復清洗后收集保存即完成。本發(fā)明解決了動物個體較小和與土顏色相近的土壤動物不易被發(fā)現(xiàn)的問題，分離效率提高了1～10倍，統(tǒng)計精度提高了5％～10％。
文檔編號B01D11/02GK102500129SQ201110333848
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月28日
發(fā)明者倪珍, 吳東輝, 張兵, 閆修民 申請人:中國科學院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所