專利名稱：一株1,2-二氯乙烷降解菌及其應用的制作方法
技術領域：
一株1，2-ニ氯乙烷降解菌——Starkeya sp. T-2，及其在微生物降解1，2_ ニ氯乙烷中的應用。
(ニ)
背景技術：
1，2-ニ氯乙烷(l，2_dichloroethane，C2H4Cl2)是ー種無色、易揮發(fā)、具有氯仿氣味的油狀可燃性液體，是エ業(yè)上常用的一種有機溶剤，廣泛應用于化學合成的原料、エ業(yè)試齊U、脫脂劑、金屬清潔劑和粘合劑等。在使用過程中，1，2- ニ氯乙烷可以通過廢氣和廢水的形式排放進入環(huán)境中，對環(huán)境造成嚴重而長期的污染。1，2_ ニ氯乙烷能刺激和引起肝、腎和腎上腺損害，對皮膚、黏膜、胃腸道也有刺激作用，可引起胃腸道反應、接觸性皮炎及肺水腫等，該物質還是ー種潛在的誘變劑和致癌物質，對人類健康產生嚴重的威脅。1，2_ニ氯乙烷對大氣臭氧層也有著極強的破壞力。由于1，2_ ニ氯乙烷的廣泛應用以及它的高毒性和持久性，研發(fā)出經濟又有實效的處理1，2_ ニ氯乙烷的方法已經成為國際上環(huán)境污染控制領域的研究熱點。1，2_ ニ氯乙烷的生物降解已被證明是可行的，如利用顆粒污泥在UASB反應器中可降解1，2-ニ氯乙烷，采用硝化生物膜反應器降解1，2_ ニ氯乙烷達到70% -90%的降解率。盡管如此，迄今為止僅分離到少數幾株可以以1，2_ ニ氯乙烷為唯一碳源和能源生長并實現降解的菌株， 如 Xanthobacter autotrophicus GJ10、 Ancyiobacter aquaticus AD25 相 Pseudomonas sp. strain DCA。2007年，Olmirm等在紙漿廠的廢液中，分離出三株能同時降解1，2-ニ '風乙焼禾ロ 1，3_ ニ'風內焼的菌株 Paenibacillusamyloiyticus、Bacillus megaterium 禾ロ Microbacterium oxydans。目前國內對1，2_ ニ氯乙烷的生物降解研究較少。本發(fā)明從環(huán)境中篩選到一株能高效降解1，2-ニ氯乙烷的菌株，為含該類污染物的廢水和廢氣的生物浄化工程應用奠定
—石出。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于針對工程實踐中的問題和需求，從環(huán)境中分離出ー株能夠降解 1，2_ ニ氯乙烷的新菌株——Starkeya sp. T-2，并提供菌體擴大培養(yǎng)方法，可用于環(huán)境中含 1，2- ニ氯乙烷的廢水和廢氣的處理。本發(fā)明采用的技術方案是一株1，2_ ニ氯乙烷降解菌——Starkeya sp. T-2，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址中國武漢武漢大學，430072，保藏日期2011年07月25日，保藏編號CCTCC NO: M 2011263。該菌株菌落特征如下菌體呈短桿狀，大小為(0. 4 0. 8) μ mX (0. 8 2. 0) μ m， 無芽抱，無鞭毛；菌落呈小圓狀、半透明、形態(tài)飽滿、光滑濕潤，易挑起，菌苔沿劃線生長；好氧，氧化酶反應為陽性，吲哚反應、接觸酶反應、檸檬酸鹽為陽性；M.R反應、V. P.反應為陰性；糖發(fā)酵實驗為陰性，革蘭氏染色為陰性。本發(fā)明所述菌株T-2的篩選過程如下(1)采集浙江某化工廠污水處理池的活性污泥，經靜置后，除去上層清液和懸浮雜質，留下顆粒細小的污泥，取靜置后的下層污泥與新鮮營養(yǎng)液按1 l(v/v)混合接入至污泥馴化罐，對污泥進行馴化，馴化實驗期間對馴化罐進行穩(wěn)定曝氣，控制馴化罐的PH值維持在7. 0 8. 0，每天加入一定量1，2- ニ氯乙烷，每隔3天更換一次營養(yǎng)液。(2)將長期馴化后的活性污泥接種到含50mL無機鹽培養(yǎng)基(BSM)的250mL密封鹽水瓶中。經過多次傳代富集后，進行稀釋涂布，依據菌體群落的差異性，挑取單菌落。對單菌落進行多次劃線分離后，再接至以1，2_ ニ氯乙烷為唯一碳源和能源的BSM中，測試降解活性。選擇具有1，2_ ニ氯乙烷降解能力的單菌落，進ー步分離純化，獲得有1，2_ ニ氯乙烷降解活性的純菌T-2。本發(fā)明所述菌株T-2的鑒定(1)所述1，2 ニ氯乙烷降解菌T-2菌落特征如下菌體呈短桿狀，大小為(0.4 0. 8) μ mX (0. 8 2. 0) μ m,無芽抱，無鞭毛；菌落呈小圓狀、半透明、形態(tài)飽滿、光滑濕潤， 易挑起，菌苔沿劃線生長；好氧，氧化酶反應為陽性，吲哚反應、接觸酶反應、檸檬酸鹽為陽性；M.R反應、V.P.反應為陰性；糖發(fā)酵實驗陰性，革蘭氏染色陰性。(2)所述的菌株T-2的16S rRNA序列分析細菌總DNA的提取按照細菌基因組DNA提取試劑盒(上海申能博彩生物科技有限公司)使用說明進行，對細菌的DNA基因組進行全序列PCR擴增，選用細菌引物 BSF27/20 和 BSR1492/20，序列分別為BSF27/20<5 ‘ -AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 ‘ > ； BSR1492/20<5' -GGTTACCTTGTTA CGACTT-3‘ >，擴增出來的全序列 DNA 大約在 1500bp 左右，測序工作由杭州華大基因研發(fā)中心完成。菌株的16S rDNA序列如DEQ IDNo. 1所示。對菌株的形態(tài)特征及生理生化特征進行研究和分析，將上述特征與《Bergry’ s Manual of Systematic Bacteriology》編錄的菌屬進行比較，結合該菌株的16S rRNA同源性分析，從而確定該菌為Markeya sp.。該菌株16S rDNA序列的Genebank登錄號為 JN606070o本發(fā)明還涉及所述的Markeya sp. T-2在微生物降解1，2_ ニ氯乙烷中的應用。 Starkeya sp. T-2能利用1，2_ ニ氯乙烷作為唯一的碳源和能源生長，將1，2_ ニ氯乙烷礦化成CO2和H20。在25-35°C，120-160r/min純培養(yǎng)條件下，Starkeya sp. T-2不需要經過誘導即可在Μ-4 !內能將無機鹽培養(yǎng)基中200mg/L的1，2- ニ氯乙烷完全降解。優(yōu)選的，所述降解在pH 5 9、20°C 37°C下進行。所述無機鹽培養(yǎng)基(BSM)每IOOOmL 含有=Na2HPO4 · 12H20 4. 5g、KH2PO4L 0g、 (NH4)2SO4L 8g、MgSO4 · 7H20 0. 2g、CaCl2 · 2H20 0. 03g,微量元素母液 ImL,溶劑為水，pH 7. 0。微量元素母液濃度組成=FeSO4 · 7H20 1. Og/L、CuSO4 · 5H20 0. 02g/L、H3BO3O. 014g/L、 MnSO4 · 4H200. 10g/L、ZnSO4 · 7H20 0. 10g/L、Na2MoO4 · 2H20 0. 02g/L、CoCl2 · 6H20 0. 02g/L, 溶劑為水。進ー步所述的Markeya sp. T-2菌體擴大培養(yǎng)方法(1)斜面培養(yǎng)將Markeya sp. T-2活化接種至R2A固體斜面培養(yǎng)基，30 32°C培養(yǎng)36 48h，獲得斜面菌體，所述R2A固體斜面培養(yǎng)基終濃度組成為酵母粉0. 50g/L、干酪素 0. 50g/L、可溶性淀粉 0. 50g/L、MgS04 ·7Η20 0. 05g/L、胰蛋白胨 0. 50g/L、葡萄糖 0. 50g/ L、丙酮酸鈉0. 30g/L、KH2PO4O. 45g/L，瓊脂15 18g/L ；pH7. 2，溶劑為水；先按如上組成配制成液體培養(yǎng)基，然后再制成斜面；(2)種子培養(yǎng)挑取步驟(1)制備的斜面菌體接種至R2A液體培養(yǎng)基，30 35で 培養(yǎng)M 36h，獲得種子液，所述R2A富營養(yǎng)培養(yǎng)基為R2A固體培養(yǎng)基中去除瓊脂其余各成分一致；(3)發(fā)酵培養(yǎng)將步驟O)制備的種子液以5 10%體積比接種量接種至發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵罐內30 35 °C，pH值7. 0 8. 0，培養(yǎng)M 36h，獲得含菌細胞發(fā)酵液； 所述發(fā)酵培養(yǎng)基終濃度組成為酵母粉0. 5g/L，Na2HPO4 · 12H20 4. 5g/L、KH2PO4L Og/L、 (NH4)2SO4L 8g/L、MgS04 · 7H200. 2g/L、CaCl2O. 023g/L，微量元素母液 lmL/L，溶劑為水，初始 PH值為7. 0 7. 5 ；微量元素母液終濃度組成為=FeSO4 · 7H20 1. Og/L、CuSO4 · 5Η200· 02g/ L、H3BO3O. 014g/L、MnSO4 · 4H20 0. 10g/L、ZnSO4 · 7H20 0. 10g/L、Na2MoO4 · 2H20 0. 02g/L、 CoCl2 · 6H20 0. 02g/L，溶劑為水。本發(fā)明的有益效果主要體現在本發(fā)明提供了一株1，2_ ニ氯乙烷的高效降解菌， 該菌株為好氧非發(fā)酵型革蘭氏染色陰性菌，能夠以1，2_ ニ氯乙烷為唯一碳源與能源生長同時高效降解該底物，本發(fā)明為生物法浄化含1，2_ ニ氯乙烷廢水及廢氣的工程應用奠定 / 圣 flin。


圖1為Markeya sp. T-2的透射電鏡照片；圖2為Markeya sp. T-2的菌體生長、1，2_ ニ氯乙烷降解、氯離子含量和pH變化曲線圖；圖3為不同pH對Markeya sp. T-2降解1，2_ ニ氯乙烷降解率的影響；圖4為不同溫度對Markeya sp. T-2降解1，2_ ニ氯乙烷降解率的影響；圖5為酵母粉預培養(yǎng)后的Markeya sp. T-2對1，2_ ニ氯乙烷的降解情況；圖6為Markeya sp. T-2對不同初始濃度1，2_ ニ氯乙烷的降解；A :50 250mg/ L初始底物濃度下1，2-ニ氯乙烷的降解曲線；B :50 250mg/L初始底物濃度下菌體生長曲線；C 300 1000mg/L初始底物濃度下1，2-ニ氯乙烷的降解曲線；D :300 1000mg/L初始底物濃度下菌體生長曲線。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發(fā)明進行進一歩描述，但本發(fā)明的保護范圍并不僅限于此實施例中所用無機鹽培養(yǎng)基濃度組成為=Na2HPO4 · 12H20 4. 5g/L、KH2PO4L Og/ L、(NH4)2SO4L 8g/L、MgSO4 · 7H20 0. 2g/L、CaCl2O. 023g/L,微量元素母液 lmL/L，pH 7. 0， 溶劑為水；微量元素母液組成=FeSO4 · 7Η201· 0g/L、CuSO4 · 5H20 0. 02g/L、H3BO3O. 014g/L、 MnSO4 · 4H20 0. 10g/L、ZnSO4 · 7H20 0. 10g/L、Na2MoO4 · 2H20 0. 02g/L、CoCl2 · 6H20 0. 02g/ L，溶劑為水。所用R2A富營養(yǎng)培養(yǎng)基濃度組成為酵母粉0. 50g/L、干酪素0. 50g/L、可溶性淀粉 0. 50g/L、MgSO4 · 7H20 0. 05g/L、胰蛋白胨 0. 50g/L、葡萄糖 0. 50g/L、丙酮酸鈉 0. 30g/L、 KH2PO4O. 45g/L，pH7. 2，溶劑為水。所用發(fā)酵培養(yǎng)基濃度組成為酵母粉0. 5g/L，Na2HPO4 · 12H20 4. 5g/L、KH2P04 1.0g/L、(NH4)2SO4L 8g/L、MgSO4 · 7H20 0. 2g/L、CaCl2 0. 023g/L，微量元素母液 lmL/L，溶劑為水，初始PH值為7. 0 7. 5，微量元素母液組成為=FeSO4 · 7H20 1. Og/L、CuSO4 · 5H20 0. 02g/L,H3BO3 0. 014g/L,MnSO4 ·4Η20 0. lOg/L,ZnSO4 ·7Η20 0. lOg/L,Na2MoO4 ·2Η20 0. 02g/ L、CoCl2 · 6H20 0. 02g/L，溶劑為水。實施例1 Jtarkeya sp. T_2的分離與鑒定(1)樣品采集及馴化現場采集浙江某化工廠污水處理池的活性污泥，經靜置沉降池后，除去上層清液和懸浮雜質，留下顆粒細小的污泥，取靜置后的下層污泥與新鮮營養(yǎng)液按1 l(v/v)混合接入至污泥馴化罐，對污泥進行馴化，馴化實驗期間對馴化罐進行穩(wěn)定曝氣，控制馴化罐的 PH值維持在7. 0左右，每天加一定量1，2- ニ氯乙烷，每隔3天更換一次營養(yǎng)液。數月后，將有降解效果的活性污泥接種到含50mL BSM培養(yǎng)基的250mL密封鹽水瓶中，以1，2_ ニ氯乙烷作為唯一碳源和能源，繼續(xù)培養(yǎng)、富集。實驗需恒溫(30士 ΓΟ，并保持在好氧條件下進行。(2)菌株分離與鑒定將在鹽水瓶中經過多次傳代富集的混合菌液，進行稀釋涂布，依據菌體群落的差異性，挑取單菌落。對單菌落進行多次劃線分離后，再接至以1，2-ニ氯乙烷為唯一碳源和能源的BSM中，測試降解活性。選擇具有1，2_ ニ氯乙烷降解能力的單菌落，進ー步分離純化，獲得有1，2- ニ氯乙烷降解活性的純菌——Starkeya sp. T-2。菌株Starkeya sp. T-2 細胞呈短桿狀，大小為(0. 4 0. 8) μ mX (0· 8 2· 0) μ m， 無芽抱，無鞭毛；菌落呈小圓狀、半透明、形態(tài)飽滿、光滑濕潤，易挑起，菌苔沿劃線生長。Starkeya sp. T-2的生理生化特征為好氧，氧化酶反應為陽性，吲哚反應、接觸酶反應、檸檬酸鹽為陽性；M. R反應、V. P.反應為陰性；糖發(fā)酵實驗陰性，革蘭氏染色陰性。所述的菌株Starkeya sp. T-2的16S rRNA序列分析細菌總DNA的提取按照細菌基因組DNA提取試劑盒(上海申能博彩生物科技有限公司)使用說明進行，對細菌的DNA基因組進行全序列PCR擴增，選用細菌引物BSF27/20 和 BSR1492/20，序列分別為BSF27/20<5' -AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 ‘ > ；BSR1492/20<5 ‘-GGTTACCTTGTTACGACTT-3‘ >，擴增出來的全序列DNA大約在1500bp左右，測序工作由杭州華大基因研發(fā)中心完成。菌株的16S rDNA序列如SEQ ID No. 1所示。上述特征與文獻(《常見細菌鑒定手冊》)編錄的Markeya屬的生理生化性狀相吻合。該菌株經16S rDNA同源性分析，結合以上生理生化的菌學特征，將其鑒定為Markeya sp.，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號CCTCC NO =M 201U63，Genebank登錄號為 JN606070o實施例2 =Starkeya sp. T_2 (CCTCC NO =M 2011263)降解 1,2- ニ氯乙烷的性能。(1)菌株對1，2-ニ氯乙烷的降解進程以1，2- ニ氯乙烷作為Markeya sp. T-2的唯一碳源，從種子液(無機鹽培養(yǎng)基富集培養(yǎng))中接菌體至新鮮的50mL BSM培養(yǎng)基，使初始菌體濃度(以0D_計)為0. 035 ；加入1，2_ ニ氯乙烷使初始1，2_ ニ氯乙烷濃度為200mg/L。放入溫度為30°C、轉數為160r/ min的搖床中培養(yǎng)，實驗過程中，設計2個平行樣和ー個空白對照(下同)。每隔一段時間取一次樣，測定菌體0D、1，2-ニ氯乙烷降解率、氯離子含量和pH變化，結果見圖2。由圖2可見，隨著時間的延長，菌體濃度逐漸増大，至20h吋，菌體濃度達到最大約為0. 15 (以OD6tltl計)。本實施例說明降解菌Markeya sp. T-2可利用1，2_ ニ氯乙烷作為唯一碳源和能源進行生長繁殖，并且具有穩(wěn)定高效降解1，2- ニ氯乙烷的能力。(2) pH對菌株降解性能的影響用lmol/L NaOH 或 H2SO4 溶液調節(jié) BSM 培養(yǎng)基為不同 pH 值(5· 0、6· 0、7· 0、8· 0、 9. 0)，在初始1，2-ニ氯乙烷濃度為200mg/L的條件下，接入種子液，使各平行樣中的初始菌體濃度(以0D_計)為0. 01。將樣品于30°C、160r/min恒溫搖床里振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)40h后取樣，測反應液中1，2_ ニ氯乙烷降解率，結果見圖3?？梢?，在pH5.0 9.0吋，微生物均能降解1，2-ニ氯乙烷；隨著pH從5.0増大到 9. 0，1，2-ニ氯乙烷的降解率先增大后減小，Starkeya sp. T-2降解1，2_ ニ氯乙烷的較適宜的pH值為7. 0 8. 0。本研究表明菌株在pH5. 0 9. 0均能不同程度地降解1，2- ニ氯乙烷，為其在不同PH環(huán)境中的應用提供了保證。(3)溫度對菌株降解性能的影響在初始1，2- ニ氯乙烷濃度為200mg/L的BSM培養(yǎng)基中，接入種子液，使各平行樣中的初始菌體濃度為0. 01 (以0D_計)。將各個樣品分別置于溫度為20°C、25°C、3(TC、 37°C搖床中恒溫振蕩培養(yǎng)(搖床轉數均為160r/min)，培養(yǎng)4 后取樣，測反應液中1，2_ ニ 氯乙烷降解率，結果見圖4。由圖4可知，在20°C 37°C溫度范圍內，隨著溫度從20°C增大到37°C，1，2- ニ氯乙烷的降解率先増大后減小，Starkeya sp. T-2降解1，2_ ニ氯乙烷較適宜的溫度為30°C左右，隨著溫度的進ー步升高或下降，菌株的降解能力開始下降。(4)非底物誘導培養(yǎng)對菌株降解性能的影響為了確定Markeya sp. T-2是否需要經過誘導就可以穩(wěn)定高效的降解1，2_ ニ氯乙烷，將Markeya sp. T-2接種到以酵母粉代替1，2-DCA作為碳源的無機鹽培養(yǎng)基中，傳代培養(yǎng)1代后，將菌體制成菌懸液，該菌懸液作為種子液接種于以1，2-DCA作為唯一碳源和能源的無機鹽培養(yǎng)基中，使各平行樣中的初始菌體濃度為0. 04(以0D_計)，初始1，2_ ニ 氯乙烷濃度為250mg/L，于30°C、轉數為160r/min的搖床中培養(yǎng)，定時取樣測定Markeya sp. T-2的生長OD6tltl和1，2-ニ氯乙烷降解速率，結果如圖5。由圖5可知，經過酵母粉預培養(yǎng)后的Markeya sp. T-2仍然能在30h內將初始濃度為250mg/L的1，2_ ニ氯乙烷完全降解，降解前期沒有延滯期，說明Markeya sp. T-2降解1，2- ニ氯乙烷不需要經過誘導。(5)底物濃度對菌株降解性能的影響在較適宜的培養(yǎng)條件(pH7. 0，溫度30°C )下，研究Markeya sp. T-2對不同濃度 1，2_ ニ氯乙烷的降解。在新鮮無機鹽培養(yǎng)基中接種種子液，使各平行樣中的初始菌體濃度為0. 046 (以OD計)，加入不同濃度的底物1，2- ニ氯乙烷，使底物初始濃度分別為50mg/ L,100mg/L,150mg/L,200mg/L,250mg/L,300mg/L,400mg/L,500mg/L,800mg/L,lOOOmg/L, 30°C、轉數為160r/min的搖床中培養(yǎng)，定時取樣測定Markeya sp. T-2的生長OD和1，2-ニ氯乙烷降解速率，結果如圖6。由圖6可知，Starkeya sp. T-2降解1，2_ ニ氯乙烷的降解速率受底物初始濃度的影響較小，可見1，2-ニ氯乙烷對菌株的毒性較小，且在較高濃度下仍可將其完全降解礦化，但降解至一定濃度后不能再將1，2_ ニ氯乙烷完全降解。實施例3 =Starkeya sp. T-2凈化1，2_ ニ氯乙烷廢水在含200mg/L 1,2- ニ氯乙烷的廢水中接種Markeya sp. T-2菌液(初始菌體濃度以OD6tltl計為0. 1)，經過Mh的處理后，1,2- ニ氯乙烷的凈化效率達100%。實施例4 Starkeya sp. T-2凈化1，2_ ニ氯乙烷廢氣在生物滴濾塔中接種Markeya sp. T-2菌液(初始菌體濃度以0D_計為0. 1)， 連續(xù)處理濃度為lOOmg/m3的1，2_ ニ氯乙烷廢氣。經過20天的掛膜啟動后，在停留時間為 36s的條件下，1，2- ニ氯乙烷去除率達92 %以上，此后系統(tǒng)能一直穩(wěn)定運行。
權利要求
1.一株1，2_ ニ氯乙烷降解菌——Starkeya sp. T-2，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址中國武漢武漢大學，430072，保藏日期2011年07月25日，保藏編號CCTCC NO: M 2011263。
2.如權利要求1所述的Markeyasp. T-2，其特征在于所述Markeya sp. T-2菌落特征如下菌體呈短桿狀，大小為(0. 4 0. 8) μ mX (0. 8 2. 0) μ m，無芽抱，無鞭毛；菌落呈小圓狀、半透明、形態(tài)飽滿、光滑濕潤，易挑起，菌苔沿劃線生長；好氧，氧化酶反應為陽性， 吲哚反應、接觸酶反應、檸檬酸鹽為陽性；M. R反應、V. P.反應為陰性；糖發(fā)酵實驗為陰性， 革蘭氏染色為陰性。
3.如權利要求1所述的Markeyasp. T-2，其特征在于所述Markeya sp. T-216S rDNA 序列如下 :ggcggggcggagcttacacatgcaagてcgaacgcaccgcaaggtgagtggcagacgggtgagtaaca cgtggggatctgcccaatggtacggaatagctccgggaaactggaattaataccgtatgtgcccgcaaggggaaaga tttatcgccattggatgaacccgcgtcggattagctagttggtgtggtaaaggcgcaccaaggcgacgatccgtagc tggtctgagaggatgatcagccacactgggactgagacacggcccagactcctacgggaggcagcagtggggaatat tggacaatgggcgcaagcctgatccagccatgccgcgtgagtgatgaaggccttagggttgtaaagctctttcgccg acgaagataatgacggtagtcggagaagaagccccggctaacttcgtgccagcagccgcggtaatacgaagggggct agcgttgttcggaatcactgggcgtaaagcgcacgtaggcggattgttaagtcaggggtgaaagcctggagctcaac tccagaactgcccttgatactggcaatctcgagtccggaagaggtaagtggaactgcgagtgtagaggtgaaatteg tagatattcgcaagaacaccagtggcgaaggcggcttactggtccggtactgacgctgaggtgcgaaagcgtgggga gcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatggaggctagccgttggtgagcatgctcatcagtg gcgcagctaacgcattaagcctcccgcctggggagtacggtcgcaagattaaaactcaaaggaattgacgggggccc gcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgcagaaccttaccagcctttgacatgtctcggaattg gaccagagatggaccaagctcttcggagccgggaacacaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgtcgtgagatg ttgggttaagtcccgcaacgagcgcaaccctcgcccttagttgccatcattaagttgggcactctagggggactgcc ggtgataagccgagaggaaggtggggatgacgtcaagtcctcatggcccttacgggctgggctacacacgtgctaca atggcggtgacagtgggatgcgaacccgcgagggtgagcaaatctccaaaagccgtctcagttcggattgcactctg caactcgagtgcatgaagttggaatcgctagtaatcgtgggagttggctttacccgaaggcgctgcgctaacccgca agggaggcagcgaccatcgtatttccggt
4.如權利要求1所述的Markeyasp. T-2在微生物降解1，2_ ニ氯乙烷中的應用。
5.如權利要求4所述的應用，其特征在于所述降解在pH5 9、20°C 37°C下進行。
全文摘要
本發(fā)明提供了一株1，2-二氯乙烷降解菌——Starkeya sp.T-2，及其在微生物降解1，2-二氯乙烷中的應用。該菌株保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址中國武漢武漢大學，430072，保藏日期2011年07月25日，保藏編號CCTCC NOM 2011263。本發(fā)明的有益效果主要體現在本發(fā)明提供了一株1，2-二氯乙烷的高效降解菌，該菌株為好氧非發(fā)酵型革蘭氏染色陰性菌，能夠以1，2-二氯乙烷為唯一碳源與能源生長同時高效降解該底物，本發(fā)明為生物法凈化含1，2-二氯乙烷廢水及廢氣的工程應用奠定了基礎。
文檔編號B01D53/84GK102533595SQ20111042612
公開日2012年7月4日 申請日期2011年12月17日 優(yōu)先權日2011年12月17日
發(fā)明者王小春, 陳東之, 陳建孟 申請人:浙江工業(yè)大學