專(zhuān)利名稱(chēng)：一種用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及膜技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法。
背景技術(shù)：
膿毒血癥(Sepsis)是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)上面臨的棘手難題之一，存在著患病率高、病死率高、治療費(fèi)用高的三高現(xiàn)象，在對(duì)患者的身體健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅的同時(shí)，也為病人家屬帶來(lái)經(jīng)濟(jì)上的巨大壓力。膿毒血癥的發(fā)生被公認(rèn)與內(nèi)毒素密切相關(guān)，內(nèi)毒素(endotoxin)是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁上的一種脂多糖分子，位于細(xì)胞壁的最外層，覆蓋于細(xì)胞壁的黏肽上。內(nèi)毒素只有當(dāng)細(xì)菌死亡溶解或用人工方法破壞細(xì)菌細(xì)胞后才釋放出來(lái)，內(nèi)毒素對(duì)宿主有毒性，各種細(xì)菌的內(nèi)毒素的毒性作用大致相同，可引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素休克及播散性血管內(nèi)凝血等。內(nèi)毒素通過(guò)與免疫細(xì)胞上的受體發(fā)生作用來(lái)激活人體免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生復(fù)雜的炎癥反應(yīng)，單純使用抗生素?zé)o法阻斷內(nèi)毒素與免疫細(xì)胞之間的信號(hào)傳導(dǎo)作用，反而有可能因殺滅細(xì)菌而引起大量?jī)?nèi)毒素釋放，從而加重炎癥反應(yīng)，因此，目前膿毒血癥仍缺乏有效的藥物治療手段。近年來(lái)，研究者開(kāi)始嘗試通過(guò)親和吸附的方法來(lái)降低病人血液中內(nèi)毒素濃度，從而達(dá)到治療膿毒血癥的目的。親和膜由于具有選擇性高、分離速度快、易放大等優(yōu)點(diǎn)，是一種合適的親和吸附載體。日本東麗公司開(kāi)發(fā)的多粘菌素吸附柱(H. Shoji,et al. ,Therapeutic Apheresisand Dialysis,2(1) :3-12 (1998))在提高膿血癥重患者存活率方面取得了一定效果，但由于多粘菌素價(jià)格昂貴，且具有毒性，因此未實(shí)現(xiàn)廣泛應(yīng)用。申請(qǐng)?zhí)枮?7103649. 7的中國(guó)發(fā)明公開(kāi)了一種帶組氨酸配基尼龍親和膜，申請(qǐng)?zhí)枮?0123290. 8的中國(guó)發(fā)明公開(kāi)了一種用于內(nèi)毒素去除的疏水荷正電親和膜，這兩種親和膜可以去除自來(lái)水、生理鹽水及蛋白質(zhì)溶液中的內(nèi)毒素，但基于靜電作用力的配基(配基是親和層析的核心物質(zhì)，在分離中特異性吸附欲分離物)，容易引起蛋白質(zhì)的吸附，特異性不強(qiáng)，不適合用于血漿或全血當(dāng)中。

申請(qǐng)?zhí)枮?00910100567. 5中國(guó)發(fā)明公開(kāi)了一種以氨基酸為配基的聚偏氟乙烯親和膜，所偶聯(lián)的氨基酸配基對(duì)血漿或全血中內(nèi)毒素的去除率較高，但聚偏氟乙烯材料并不是一種常見(jiàn)的醫(yī)用材料，其在血液中的安全性尚不明確。聚砜材料是最常見(jiàn)的透析膜材料之一，其血液相容性得到了長(zhǎng)期臨床數(shù)據(jù)的驗(yàn)證。由于聚砜材料對(duì)有機(jī)溶劑的耐受性差，不易改性，因此以聚砜材料為載體的親和膜研究很少，目前以聚砜中空纖維膜為載體的內(nèi)毒素吸附膜未見(jiàn)報(bào)道
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，制備得到性能穩(wěn)定，血液相容性好，對(duì)內(nèi)毒素吸附特異性強(qiáng)的聚砜絲氨酸親和膜。一種用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，包括以下步驟(I)將聚砜中空纖維膜浸于氯甲基甲醚、四氯化錫和正己烷的混合溶液中進(jìn)行反應(yīng)，得到帶有活性基團(tuán)的聚砜中空纖維膜；(2)將帶有活性基團(tuán)的聚砜中空纖維膜浸于乙二胺中進(jìn)行反應(yīng)，得到帶有間隔臂的聚砜中空纖維膜；(3)將帶有間隔臂的聚砜中空纖維膜置于磷酸緩沖液中，平衡后浸于醋酸鈉水溶液與戊二醛水溶液的混合溶液中活化，得到活化后的聚砜中空纖維膜；
(4)將活化后的聚砜中空纖維膜浸于絲氨酸溶液中進(jìn)行反應(yīng)，得到偶聯(lián)絲氨酸的聚砜中空纖維膜；(5)將偶聯(lián)絲氨酸的聚砜中空纖維膜浸于硼氫化鈉溶液中還原，清洗烘干后得到聚砜絲氨酸親和膜。具體反應(yīng)過(guò)程見(jiàn)如下方程式
權(quán)利要求
1.一種用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)將聚砜中空纖維膜浸于氯甲基甲醚、四氯化錫和正己烷的混合溶液中進(jìn)行反應(yīng)，得到帶有活性基團(tuán)的聚砜中空纖維膜； (2)將帶有活性基團(tuán)的聚砜中空纖維膜浸于乙二胺中進(jìn)行反應(yīng)，得到帶有間隔臂的聚砜中空纖維膜； (3)將帶有間隔臂的聚砜中空纖維膜置于磷酸緩沖液中，平衡后浸于醋酸鈉水溶液與戊二醛水溶液的混合溶液中活化，得到活化后的聚砜中空纖維膜； (4)將活化后的聚砜中空纖維膜浸于絲氨酸溶液中進(jìn)行反應(yīng)，得到偶聯(lián)絲氨酸的聚砜中空纖維膜； (5)將偶聯(lián)絲氨酸的聚砜中空纖維膜浸于硼氫化鈉溶液中還原，清洗烘干后得到聚砜絲氨酸親和膜。
2.如權(quán)利要求I所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)氯甲基甲醚、四氯化錫和正己烷的混合溶液中氯甲基甲醚的摩爾分?jǐn)?shù)為5 10%,四氯化錫的摩爾分?jǐn)?shù)為5 10%,正己燒的摩爾分?jǐn)?shù)為80 90%。
3.如權(quán)利要求2所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)的反應(yīng)時(shí)間為30 120min，反應(yīng)溫度為25 35°C。
4.如權(quán)利要求3所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)的反應(yīng)時(shí)間為30 120min，反應(yīng)溫度為25 35°C。
5.如權(quán)利要求4所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中醋酸鈉水溶液的濃度為0. I 0. 3mol/L，戊二醛水溶液中戊二醛與水的體積比為I : 3，所述混合溶液中醋酸鈉水溶液與戊二醛水溶液的體積比為I : I 3。
6.如權(quán)利要求5所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)的活化時(shí)間為2 3h，活化溫度為25 35°C。
7.如權(quán)利要求6所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中絲氨酸溶液中絲氨酸的濃度為2 8mg/mL，所用溶劑為磷酸鹽緩沖液。
8.如權(quán)利要求7所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中反應(yīng)時(shí)間為20 24h，反應(yīng)溫度為25 45°C。
9.如權(quán)利要求8所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)硼氫化鈉溶液中的硼氫化鈉濃度為0. 5 2mg/mL，所用溶劑為硼酸緩沖液。
10.如權(quán)利要求9所述的用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)的還原時(shí)間為5 20min。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于脫除內(nèi)毒素的聚砜絲氨酸親和膜的制備方法，包括以下步驟將聚砜中空纖維膜浸于氯甲基甲醚、四氯化錫和正己烷混合溶液中進(jìn)行反應(yīng)，得到帶有活性基團(tuán)的聚砜中空纖維膜；將帶有活性基團(tuán)的聚砜中空纖維膜浸于乙二胺中反應(yīng)，得到帶有間隔臂的聚砜中空纖維膜；將帶有間隔臂的聚砜中空纖維膜置于磷酸緩沖液中，平衡后浸于醋酸鈉水溶液與戊二醛水溶液的混合溶液中活化，得到活化后的聚砜中空纖維膜；將活化后的聚砜中空纖維膜浸于絲氨酸溶液中進(jìn)行反應(yīng)，得到偶聯(lián)絲氨酸的聚砜中空纖維膜；將偶聯(lián)絲氨酸的聚砜中空纖維膜浸于硼氫化鈉溶液中還原，清洗烘干后得到聚砜絲氨酸親和膜。本方法制備得到相容性好，特異性強(qiáng)的聚砜絲氨酸親和膜。
文檔編號(hào)B01D71/82GK102743985SQ20121020313
公開(kāi)日2012年10月24日 申請(qǐng)日期2012年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月19日
發(fā)明者張 林, 張沫, 程麗華, 陳歡林 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)