專利名稱：一種page濃縮膠修復(fù)技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種PAGE濃縮膠修復(fù)技術(shù)，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。更具體的說(shuō)是是一種將膠室內(nèi)損壞的濃縮膠進(jìn)行修復(fù)的技術(shù)。
背景技術(shù)：
PAGE凝膠電泳屬于分子生物學(xué)常規(guī)技術(shù)，分離同工酶時(shí)采用的多為不連續(xù)凝膠系統(tǒng)，分為分離膠和濃縮膠。在凝膠灌注過(guò)程中，有時(shí)會(huì)由于外界溫度、凝膠時(shí)間、光照強(qiáng)度、試劑、緩沖液PH等因素的干擾，導(dǎo)致濃縮膠不凝固，操作失敗。一旦出現(xiàn)這種情況，現(xiàn)有的做法是清除整個(gè)膠體，返工重做，因而會(huì)大大延緩實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，浪費(fèi)時(shí)間，也浪費(fèi)藥品。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明一種PAGE濃縮膠修復(fù)技術(shù)的目的是在出現(xiàn)膠體不凝固時(shí)，采取損壞部分修復(fù)的方法加以補(bǔ)救，既提高工作效率，又節(jié)約試驗(yàn)試劑。在凝膠灌注過(guò)程中，濃縮膠的灌注是在分離膠灌注后完全凝固的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，所以當(dāng)出現(xiàn)濃縮膠凝固不完全時(shí)，將之割去重做，就相當(dāng)于節(jié)省了分離膠灌注的工耗和材料。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的1.一種PAGE濃縮膠修復(fù)技術(shù)包括①分尚玻璃板與膠室；②分開(kāi)玻璃板；③割除損壞膠；④裝回玻璃板；⑤裝回膠室封閉膠室側(cè)縫；⑦灌注濃縮膠凝固濃縮膠。①分尚玻璃板與膠室旋松電泳槽旋鈕，將膠室取出，刮去膠室與玻璃板底部、兩側(cè)結(jié)合處的瓊脂凝膠，將玻璃板從膠室內(nèi)取出；
②分開(kāi)玻璃板用刀片插入右側(cè)底部?jī)蓧K玻璃板接觸部位，撬開(kāi)兩塊玻璃板；
③割除損壞膠用刀片從分離膠和損壞的濃縮膠的分界處割開(kāi)膠體，摒棄已損壞的濃縮膠，用蒸餾水將原濃縮膠處的玻璃板位置沖洗干凈；
④裝回玻璃板將兩塊玻璃板貼緊，裝入膠室；
⑤裝回膠室將膠室裝入電泳槽，旋緊旋鈕；
⑥封閉膠室側(cè)縫用瓊脂溶液封閉膠室的側(cè)邊縫隙；
⑦灌注濃縮膠將濃縮膠灌入短玻璃板最高處，插入樣品梳；
⑧凝固濃縮膠將整個(gè)電泳槽轉(zhuǎn)移25°C下凝固。本發(fā)明的有益效果是將濃縮膠不凝固的處理策略由完全返工改為部分返工，既節(jié)約了用工，也節(jié)約了時(shí)間和材料。
具體實(shí)施例方式 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的描述。實(shí)施例1 :辣椒POD同工酶濃縮膠的快速修復(fù)
試驗(yàn)中遇到辣椒POD同工酶濃縮膠不凝固現(xiàn)象，采取了以下步驟進(jìn)行修復(fù)
①分尚玻璃板與膠室旋松電泳槽旋鈕，將膠室取出，刮去膠室與玻璃板底部、兩側(cè)結(jié)合處的瓊脂凝膠，將玻璃板從膠室內(nèi)取出；
②分開(kāi)玻璃板用刀片插入右側(cè)底部?jī)蓧K玻璃板接觸部位，撬開(kāi)兩塊玻璃板；
③割除損壞膠用刀片從分離膠和損壞的濃縮膠的分界處割開(kāi)膠體，摒棄已損壞的濃縮膠，用蒸餾水將原濃縮膠處的玻璃板位置沖洗干凈；
④裝回玻璃板將兩塊玻璃板貼緊，裝入膠室；
⑤裝回膠室將膠室裝入電泳槽，旋緊旋鈕；
⑥封閉膠室側(cè)縫用瓊脂溶液封閉膠室的側(cè)邊縫隙；
⑦灌注濃縮膠將濃縮膠灌入短玻璃板最高處，插入樣品梳；
⑧凝固濃縮膠將整個(gè)電泳槽轉(zhuǎn)移25°C下凝固。通過(guò)以上步驟后，用提取的受鹽脅迫的辣椒葉片POD同工酶進(jìn)行電泳，獲得了清晰分離的深藍(lán)色POD同工酶條帶。實(shí)施例2 =EST同工酶濃縮膠的快速修復(fù)
試驗(yàn)中遇到辣椒EST同工酶濃縮膠不凝固現(xiàn)象，采取了實(shí)施例1同樣的步驟進(jìn)行修復(fù)。修復(fù)后，用提取的受鹽脅迫的辣椒葉片EST同工酶進(jìn)行電泳，獲得了清晰分離的淡紅色EST同工酶條帶。
權(quán)利要求
1.一種PAGE濃縮膠修復(fù)技術(shù)，其特征在于，針對(duì)同工酶分離時(shí)濃縮膠不凝固的故障，米取部分返工，只對(duì)濃縮膠進(jìn)行修復(fù)，其程序包括:①分尚玻璃板與膠室，②分開(kāi)玻璃板，③割除損壞膠，④裝回玻璃板，⑤裝回膠室，⑥封閉膠室側(cè)縫，⑦灌注濃縮膠，⑧凝固濃縮膠，具體如下: ①分尚玻璃板與膠室:旋松電泳槽旋鈕，將膠室取出，刮去膠室與玻璃板底部、兩側(cè)結(jié)合處的瓊脂凝膠，將玻璃板從膠室內(nèi)取出； ②分開(kāi)玻璃板:用刀片插入右側(cè)底部?jī)蓧K玻璃板接觸部位，撬開(kāi)兩塊玻璃板； ③割除損壞膠:用刀片從分離膠和損壞的濃縮膠的分界處割開(kāi)膠體，摒棄已損壞的濃縮膠，用蒸餾水將原濃縮膠處的玻璃板位置沖洗干凈； ④裝回玻璃板:將兩塊玻璃板貼緊，裝入膠室； ⑤裝回膠室:將膠室裝入電泳槽，旋緊旋鈕； ⑥封閉膠室側(cè)縫:用瓊脂溶液封閉膠室的側(cè)邊縫隙； ⑦灌注濃縮膠:將濃縮膠灌入分離膠上層至短玻璃板最高限的下邊Icm處，接著灌入蒸餾水至短玻璃板最高限； ⑧凝固濃縮膠:將整 個(gè)電泳槽轉(zhuǎn)移25°C下凝固。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種PAGE濃縮膠修復(fù)技術(shù)，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。在同工酶分離的試驗(yàn)中，當(dāng)出現(xiàn)濃縮膠不凝固的現(xiàn)象時(shí)，現(xiàn)有的做法是毀棄整個(gè)膠體，全部返工，費(fèi)工，費(fèi)時(shí)，也浪費(fèi)試驗(yàn)材料。本發(fā)明提出了部分返工，針對(duì)性地修復(fù)濃縮膠的技術(shù)方案，克服了上述缺點(diǎn)。
文檔編號(hào)B01D57/02GK103071387SQ201310000268
公開(kāi)日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2013年1月3日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月3日
發(fā)明者胡能兵, 隋益虎, 舒英杰, 周玉麗, 何克勤, 張子學(xué), 崔廣榮 申請(qǐng)人:安徽科技學(xué)院