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      高效油脂降解菌及其應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:4922861閱讀:687來源:國知局
      高效油脂降解菌及其應(yīng)用的制作方法
      【專利摘要】本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵生產(chǎn)領(lǐng)域,更具體的說是一種高效油脂降解菌及其應(yīng)用。高效油脂降解菌為由不動(dòng)桿菌UC13;其中,不動(dòng)桿菌UC13已于2013年6月24日在中國微生物保存中心保藏,保藏編號為CGMCC?No:7818。所述高效油脂降解菌在含油脂的餐廚垃圾或石油烴類污染物處理中的應(yīng)用;以及高效油脂降解菌在油脂有關(guān)的工業(yè)煉制中的應(yīng)用。生物表面活性劑為由不動(dòng)桿菌UC13經(jīng)發(fā)酵所得發(fā)酵物;所述生物表面活性劑用于清除工業(yè)油脂以及含有油脂的餐廚垃圾中的污染物。本發(fā)明提供了一種操作簡單,產(chǎn)品活性高的生物表面活性劑的提取方法。
      【專利說明】高效油脂降解菌及其應(yīng)用
      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001]本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵生產(chǎn)領(lǐng)域,更具體的說是一種高效油脂降解菌及其應(yīng)用?!颈尘凹夹g(shù)】
      [0002]對油脂類污染的廢水的處理方法主要有三種:物理法、化學(xué)法、和生物法。像鹽析、電解、膜分離等物理化學(xué)方法,具有投資大,占地廣,需特殊設(shè)備等諸多缺點(diǎn)。同時(shí)這類方法不能有效的處理油脂垃圾,還存在產(chǎn)生二次污染的危險(xiǎn)。與此相比,生物處理法則是利用生物主要是微生物,將油脂作為微生物生長所需的碳源和能源,對油脂進(jìn)行轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)化,在酶的催化下將其水解成甘油、脂肪酸,最后降解為H20、C02等。與物理化學(xué)方法相比,生物處理法具有成本低、占地面積少、不需要特殊設(shè)備、不會(huì)帶來二次污染等優(yōu)點(diǎn)。并且生物處理法主要依靠微生物,而微生物具有來源廣、易培養(yǎng)、繁殖速度快、環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),因此生物處理法在處理油脂垃圾方面發(fā)揮著越來越大的作用。目前,日本、歐美一些發(fā)達(dá)國家已將油脂降解菌應(yīng)用到生物垃圾降解、含油廢水的處理、洗滌用酶和生物柴油的生產(chǎn)等多項(xiàng)領(lǐng)域,而我國在這些方面的應(yīng)用尚待加強(qiáng)。
      [0003]廢棄油脂的生物處理技術(shù)有UASB法、生物膜法、生物接觸氧化法、BAC生物處理技術(shù)、超臨界CO2分解技術(shù)等。近年來,人們又發(fā)現(xiàn)了各種高效降解油脂的處理方法,并且通過各種方法的聯(lián)合使用來提高處理效率。通過添加能夠高效降解油脂的微生物無疑是最合適的方法之一。
      [0004]自然界中存在很多能降解油脂的微生物,尤其是在含油量豐富的土壤和廢水中。分解油脂的微生物主要包括細(xì)菌和真菌中的需氧性種類。在已發(fā)現(xiàn)的降解菌當(dāng)中,細(xì)菌較多,真菌菌種較少。主要有細(xì)菌中的假單孢菌屬(Pseudomonas)、黃桿菌屬(Flavobacterium)、產(chǎn)喊桿菌屬(Alcaligenes)、節(jié)桿菌屬(Arthrobacter)、微球菌屬(Micrococcus)、芽抱桿菌屬(Bacillus)、紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonas)、硫桿菌屬(Thiobacillus)、硝化桿菌屬(Nitrobacter)、葡萄球菌屬(StapHylococcus)等,真菌中的假絲酵母屬(Candida)、紅酵母屬(Rhodotorula)、絲孢酵母屬(Trichosporon)、地霉屬(Geotrichum)、Yarrowia屬、擲孢酵母屬(Sporobolomyces)等。目前已有許多針對混合菌群在油脂降解方面的研究,而篩選和獲取高效油脂降解能力的菌株仍是關(guān)鍵之一。
      [0005]同時(shí)生物表面活性劑是由微生物在一定的培養(yǎng)條件下產(chǎn)生的一類集親水基和憎水基與一體的具有表面活性的代謝產(chǎn)物。生物表面活性劑的研究不是從近幾年開始的,早在20世紀(jì)70年代就已經(jīng)開始了對生物表面活性劑的研究?,F(xiàn)在,人們對生物表面活性劑已經(jīng)不再陌生。而且,現(xiàn)在已經(jīng)開發(fā)出許多性能優(yōu)異的生物表面活性劑,生物表面活性劑所應(yīng)用的工業(yè)領(lǐng)域也在不斷擴(kuò)大。生物表面活性劑主要分為兩類:非離子型和陰離子型,陽離子型較為少見。依據(jù)機(jī)構(gòu)特點(diǎn)分類,生物表面活性劑可以分為五類:糖脂、脂肽、多糖蛋白絡(luò)合物、磷脂和脂肪酸或中性脂。
      [0006]生物表面活性劑隨著微生物的不同制取方法也是千差萬別,因而難以給出普遍的理想的生產(chǎn)指導(dǎo)路線。為了獲得大的產(chǎn)率、轉(zhuǎn)化率和最終濃度,選育生物表面活性劑的高產(chǎn)菌株,設(shè)計(jì)高生產(chǎn)力的發(fā)酵工藝和經(jīng)濟(jì)有效的回收方法,己成為人們研究的熱點(diǎn)。生物表面活性劑與合成的表面活性劑相比仍占有較大的劣勢,首先一點(diǎn)是生物表面活性劑的提取分離較復(fù)雜,增加了生產(chǎn)成本。而生物表面活性劑在發(fā)酵液中的低濃度和兩親性常妨礙其有效分離。隨著研究的不斷深入,一些傳統(tǒng)的方法不斷完善,新的方法不斷出現(xiàn)。生物表面活性劑的常用提取方法有:溶劑萃取、結(jié)晶與沉淀、泡沫層析法、超濾法、薄層色譜法(TLC)等。

      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0007]本發(fā)明目的在于一種高效油脂降解菌及其應(yīng)用。
      [0008]為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:
      [0009]一種高效油脂降解菌,高效油脂降解菌為由不動(dòng)桿菌UC13 ;其中,不動(dòng)桿菌UC13已于2013年6月24日在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏,保藏單位地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號,保藏編號為CGMCC No:7818,分類學(xué)命名為不動(dòng)桿菌 Acinetobacter sp.。
      [0010]高效油脂降解菌的應(yīng)用,所述高效油脂降解菌在含油脂的餐廚垃圾或石油烴類污染物處理中的應(yīng)用;以及高效油脂降解菌在油脂有關(guān)的工業(yè)煉制中的應(yīng)用。所述油脂為植物油、動(dòng)物油或礦物油。
      [0011]一種生物表面活性劑,生物表面活性劑是以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)不動(dòng)桿菌UC13所得產(chǎn)物。
      [0012]所述以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基成分為花生油10-20mg/mL,NH4NO30.2-0.5g/L, K2HPO40.5-1.5g/L, KH2PO40.5-1.5g/L, MgSO4.7H200.1-0.5g/L。
      [0013]生物表面活性劑的提取方法,以不動(dòng)桿菌UC13為生產(chǎn)菌株,依次經(jīng)過發(fā)酵培養(yǎng)、發(fā)酵液離心、調(diào)節(jié)上清液PH值、有機(jī)溶劑萃取、有機(jī)相干燥、減壓抽濾、減壓蒸餾后得到表面活性劑。
      [0014]具體步驟為:
      [0015](I)發(fā)酵:按每100ml培養(yǎng)基中加入l-2ml UC13菌株的接種量接種在以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中;在28-30°C的恒溫下以140-160r/min的轉(zhuǎn)速振蕩培養(yǎng)100-120h ;
      [0016](2)離心:取發(fā)酵液在 8000-10000r/min,4_8°C下離心 10_15min ;
      [0017](3)調(diào)pH值:離心后收集上清液,再將上清液調(diào)節(jié)pH值至2.0-3.0 ;
      [0018](4)萃取:將調(diào)好pH的上清液用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯與上清液的體積比為1:1-1:2 ;
      [0019](5)干燥:在萃取后的有機(jī)相中加入6-8%的(質(zhì)量體積比)Na2SO4干燥6_10h ;
      [0020](6 )過濾:去除Na2SO4沉淀;
      [0021](7)蒸餾:在40_45°C下減壓蒸餾除去乙酸乙酯得到表面活性劑。
      [0022]所述將離心所得上清液用4-6mol/L的HCl進(jìn)行調(diào)節(jié)pH值至2.0-3.0。
      [0023]所述以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基成分為花生油10-20mg/mL,NH4NO30.2-0.5g/L, K2HPO40.5-1.5g/L, KH2PO40.5-1.5g/L, MgSO4.7Η200.1-1.5g/L。
      [0024]生物表面活性劑的應(yīng)用,所述生物表面活性劑用于清除工業(yè)油脂以及含有油脂的餐廚垃圾中的污染物。表面活性劑表觀為淺黃色漿狀物。具有較好的乳化和排油性能。
      [0025]不動(dòng)桿菌UC13已于2013年6月24日在中國微生物保存中心保藏,保藏編號為CGMCC No:7818。該菌對大豆油、花生油、豬油、柴油均有一定的降解能力。室溫條件下(25-300C ),24h對濃度為10mg/mL的大豆油、花生油、豬油的降解率分別可達(dá)60%、64%、50%。
      [0026]本發(fā)明所具有的優(yōu)點(diǎn):本發(fā)明生物表面活性劑是經(jīng)一株油脂降解菌發(fā)酵得到活性較好的表面活性劑的產(chǎn)品。利用本發(fā)明的提取方法,可以簡單快速的進(jìn)行生物表面活性劑的提取,所得的生物表面活性劑為淺黃色漿狀物,粗產(chǎn)品的產(chǎn)量為10-15g/L。并具有較好的乳化性能和排油活性。
      【專利附圖】

      【附圖說明】[0027]圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的UC13的生長及花生油降解情況圖。
      [0028]圖2為本發(fā)明實(shí)施例提供的UC13油脂降解能力分析圖。
      [0029]圖3為本發(fā)明實(shí)施例提供的溫度對UC13油脂降解能力的影響圖。
      [0030]圖4為本發(fā)明實(shí)施例提供的pH對UC13油脂降解能力的影響圖
      [0031]圖5為本發(fā)明實(shí)施例提供的表面活性劑的產(chǎn)生及乳化性能測試效果圖,其中A為超聲處理后的樣品;B為靜置24h后樣品。
      [0032]圖6為本發(fā)明實(shí)施例提供的排油性能測試效果圖。
      【具體實(shí)施方式】
      [0033]下面圍繞本發(fā)明所述的菌株所開展的【具體實(shí)施方式】做詳細(xì)的描述,但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
      [0034]實(shí)施例1:菌株富集馴化與分離培養(yǎng)
      [0035]采集山東煙臺市一家食品加工廠油脂處理池的污泥樣品5-10g,加入裝有50-100mL無菌水和無菌玻璃珠的150-300mL三角瓶內(nèi),置于搖床上,150_180r/min充分振蕩10-15min,取混合液5_8mL,加入35_50mL的無菌富集培養(yǎng)液(NaCl0.5,蛋白胨5.0,牛肉膏 0.5,花生油 4mL, ρΗ7.2-7.4,用水定容至 1000mL)中,28-30°C,150_250r/min 培養(yǎng)。每24h觀察油脂降解及消散情況,適量補(bǔ)加花生油至4ml。每4-6d轉(zhuǎn)接5-10mL培養(yǎng)物至30-50mL新的培養(yǎng)基中,以促進(jìn)油脂分解菌的生長。此馴化過程持續(xù)2個(gè)月。
      [0036]制備油脂選擇性平板,分別取胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl 10g,瓊脂粉12g,花生油10g,1.6% (質(zhì)量體積比:g/ml)中性紅水溶液lmL,用蒸餾水定容至1L,加入2_3%(質(zhì)量體積比:g/ml)的瓊脂糖。121°C高溫滅菌30min。取適量上述馴化得到的菌液,經(jīng)水稀釋至10_3-10_6后涂布在上述平板上。選擇具有明顯油脂降解圈的菌落,經(jīng)重復(fù)劃線分離,得到單菌落的純培養(yǎng)物,命名后保存。經(jīng)16s rDNA分析,確定UC13為一株不動(dòng)桿菌(Acinetobacter sp.)。
      [0037]實(shí)施例2:油脂降解活性分析
      [0038]將UC13菌株活化后,接種在以花生油為唯一碳源的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基成分為花生油 10mg/mL,NH4NO30.2g/L, K2HPO40.5g/L, KH2PO40.5g/L, MgSO4.7Η200.lg/L ;在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為28-30°C,轉(zhuǎn)速150-250r/min ;分別取培養(yǎng)至第
      O,6,12,24,30,36,42,48h的菌液。分別測定上述各菌液于600nm條件下吸光值確定細(xì)菌的生長量;同時(shí)分別取不同發(fā)酵時(shí)間的發(fā)酵液各5mL,分別用等體積的正己烷萃取兩次,合并有機(jī)相。合并后的有機(jī)相用無水硫酸鈉除水干燥,置于圓底燒瓶中,40-45°C減壓抽濾,殘余物即為降解后剩余油脂的質(zhì)量。降解率=(50-剩余油脂的質(zhì)量(mg))/50X100%。如圖1所示。隨著細(xì)菌的生長,發(fā)酵液中油脂的降解明顯加強(qiáng)。
      [0039]實(shí)施例3:UC13對不同油脂的降解能力
      [0040]將UC13菌株活化后,分別接種在以花生油、大豆油、芝麻油、豬油、柴油為唯一碳源的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基除油脂種類不同外,同于實(shí)施例2的成分。分別將上述發(fā)酵液在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為28-30°C,轉(zhuǎn)速150-250r/min ;培養(yǎng)至第24h的菌液。測定600nm吸光值確定細(xì)菌的生長量;分別取5mL發(fā)酵液,用正己烷萃取。按照實(shí)施例2的方法計(jì)算降解率。UC1 3對所測的不同油脂的降解情況如圖2所示。UC13對所測的油脂皆有降解能力。對于食用油的降解能力好于工業(yè)用油。食用油中,對于植物類油脂的降解能力稍好于動(dòng)物類油脂。同時(shí)對于工業(yè)柴油具有一定的降解能力。
      [0041 ] 實(shí)施例4:溫度對UC13降解能力的影響
      [0042]將UC13菌株活化后,按照1% (v/v)的接種量接種在以花生油為唯一碳源的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基成分同于實(shí)施例2。將發(fā)酵液分為三份,分別置于25、30、37°C的搖床中,轉(zhuǎn)速150-250r/min培養(yǎng);將上述發(fā)酵液培養(yǎng)48h,分別取5mL發(fā)酵液,用正己烷萃取。按照實(shí)施例2的方法計(jì)算降解率。溫度對UC13降解油脂的影響如圖3所示。25-30°C有利于油脂的降解。
      [0043]實(shí)施例5:pH對UC13降解能力的影響
      [0044]將UC13菌株活化后,按照1% (v/v)的接種量接種在以花生油為唯一碳源的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基成分同于實(shí)施例2。將發(fā)酵液分為三份,分別調(diào)節(jié)pH為6、7、8。將發(fā)酵液置于28-30°C的搖床中,轉(zhuǎn)速150-250r/min培養(yǎng);將上述發(fā)酵液培養(yǎng)48h,分別取5mL發(fā)酵液,用正己烷萃取。按照實(shí)施例2的方法計(jì)算降解率。pH對UC13降解油脂的影響如圖4所示。堿性條件有利于油脂的降解。
      [0045]實(shí)施例6:表面活性劑的提取
      [0046]I)將UC13菌株按照1% (體積比)接種量接種在以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中;在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng);在培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)溫度為28_30°C,培養(yǎng)時(shí)間為96-120h ;恒溫振蕩箱轉(zhuǎn)速為150-250r/min ;培養(yǎng)基成分為花生油10-20mg/mL,NH4NO30.2g/L, K2HPO40.5g/L, KH2PO40.5g/L, MgSO4.7Η200.lg/L ;
      [0047]2)上清液離心:將上述經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)的發(fā)酵液在8000-10000r/min,4-8°C下離心15-20min;
      [0048]3)調(diào)節(jié)上清液的pH值:收集離心后的上清液,上清液用4-6mol/L的HCl調(diào)節(jié)pH值至 2.0-3.0 ;
      [0049]4)有機(jī)溶劑萃取:將調(diào)好pH的上清液用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯與上清液的體積比為 1-1.2:1 ;
      [0050]5)有機(jī)相干燥:合并萃取后的有機(jī)相,加入5-8%的(質(zhì)量體積比,g/ml) Na2SO4干燥 1.5-2h ;。
      [0051]6)過濾:將干燥后的有機(jī)相過濾,得到無Na2SO4雜質(zhì)的萃取相;
      [0052]7)蒸餾:在40_45°C下減壓蒸餾,除去有機(jī)溶劑得到表面活性劑。蒸餾獲得的乙酸乙酯返回步驟(5)再利用。
      [0053]實(shí)施例7:乳化性能分析
      [0054]將UC13菌株按照1% (體積比)接種量接種在以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中;在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng);在培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)溫度為28-30°C,培養(yǎng)時(shí)間為48h ;恒溫振蕩箱轉(zhuǎn)速為150-250r/min ;培養(yǎng)基成分為花生油10-20mg/mL,NH4NO30.2g/L, K2HPO40.5g/L, KH2PO40.5g/L, MgSO4.7H200.lg/L。
      [0055]15mL或50mL離心管中分別加入5mL上述UC13培養(yǎng)24h后的培養(yǎng)液,而后再分別加入5mL液體石蠟。加入石蠟后于80W超聲波處理30S(參見圖5A),25°C下靜置24h (參見圖5B),測定油相,水相和乳化相的體積,以乳化相的體積與總體積之比表示乳化能力(%)。如圖1所示。該表面活性劑的乳化能力可達(dá)50%-55%。
      [0056]實(shí)施例8排油活性分析
      [0057]將UC13菌株按照1% (體積比)接種量接種在以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中;在恒溫振蕩培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng);在培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)溫度為28_30°C,培養(yǎng)時(shí)間為48-96h ;恒溫振蕩箱轉(zhuǎn)速為150-250r/min ;培養(yǎng)基成分為花生油10-20mg/mL,NH4NO30.2g/L, K2HPO40.5g/L, KH2PO40.5g/L, MgSO4.7H200.lg/L。將上述經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)的發(fā)酵液在8000-10000r/min,4-8°C下離心 15_20Min,收集上清液,待用;
      [0058]將直徑為9.5cm的玻璃培養(yǎng)皿經(jīng)酸浸泡、雙蒸水沖洗兩次后,加入30mL的雙蒸水,水面上加入0.2mL花生油形成以薄層油膜,在油膜中心慢慢加入0.1mL上述上清液,中心油膜被擠向四周形成一圓圈,圓圈直徑大約與表面活性劑的含量成正比。(圖6)。
      【權(quán)利要求】
      1.一種高效油脂降解菌,其特征在于:高效油脂降解菌為由不動(dòng)桿菌UC13 ;其中,不動(dòng)桿菌UC13已于2013年6月24日在中國微生物保存中心保藏,保藏編號為CGMCC No:7818。
      2.—種權(quán)利要求1所述的高效油脂降解菌的應(yīng)用,其特征在于:所述高效油脂降解菌在含油脂的餐廚垃圾或石油烴類污染物處理中的應(yīng)用;以及高效油脂降解菌在油脂有關(guān)的工業(yè)煉制中的應(yīng)用。
      3.按權(quán)利要求2所述的高效油脂降解菌的應(yīng)用,其特征在于:所述油脂為植物油、動(dòng)物油或礦物油。
      4.一種生物表面活性劑,其特征在于:生物表面活性劑是以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)不動(dòng)桿菌UC13所得產(chǎn)物。
      5.按權(quán)利要求4所述的生物表面活性劑,其特征在于:所述以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基成分為花生油 10-20mg/mL, NH4NO30.2-0.5g/L, K2HPO40.5-1.5g/L, KH2PO40.5-1.5g/L, MgSO4.7Η200.1-0.5g/L。
      6.一種權(quán)利要求4所述的生物表面活性劑的提取方法,其特征在于:以不動(dòng)桿菌UC13為生產(chǎn)菌株,依次經(jīng)過發(fā)酵培養(yǎng)、發(fā)酵液離心、調(diào)節(jié)上清液PH值、有機(jī)溶劑萃取、有機(jī)相干燥、減壓抽濾、減壓蒸餾后得到表面活性劑。
      7.按權(quán)利要求6所述的生物表面活性劑的提取方法,其特征在于:具體步驟為: (1)發(fā)酵:將UC13菌株按照1-2%(v/v)接種量接種在以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基中;在28-30°C的恒溫下以140-160r/min的轉(zhuǎn)速振蕩培養(yǎng)100_120h ; (2)離心:取發(fā)酵液在8000-10000r/min,4_8°C下離心 10_15min ;` (3)調(diào)pH值:離心后收集上清液,再將上清液調(diào)節(jié)pH值至2.0-3.0 ; (4)萃取:將調(diào)好pH的上清液用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯與上清液的體積比為1:1-1:2 ; (5)干燥:在萃取后的有機(jī)相中加入6-8%的(質(zhì)量體積比)Na2SO4干燥6_10h; (6)過濾:去除Na2SO4沉淀; (7)蒸餾:在40-45°C下減壓蒸餾除去乙酸乙酯得到表面活性劑。
      8.按權(quán)利要求6所述的生物表面活性劑的提取方法,其特征在于:所述將離心所得上清液用4-6mol/L的HCl進(jìn)行調(diào)節(jié)pH值至2.0-3.0。
      9.按權(quán)利要求6所述的生物表面活性劑的提取方法,其特征在于:所述以花生油為唯一碳源的發(fā)酵培養(yǎng)基成分為花生油10-20mg/mL,NH4NO30.2-0.5g/L,K2HPO40.5-1.5g/L, KH2PO40.5-1.5g/L, MgSO4.7H200.1-1.5g/L。
      10.一種權(quán)利要求4所述的生物表面活性劑的應(yīng)用,其特征在于:所述生物表面活性劑用于清除工業(yè)油脂以及含有油脂的餐廚垃圾中的污染物。
      【文檔編號】B01F17/00GK103525720SQ201310403853
      【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年9月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月6日
      【發(fā)明者】焦緒棟, 秦松 申請人:中國科學(xué)院煙臺海岸帶研究所
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