一種手性固定相拆分萘普生的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種手性固定相拆分萘普生的方法。本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，描述了纖維素三肉桂酸酯的合成，并將其涂敷于小孔硅膠上制得手性固定相用于萘普生的拆分，通過優(yōu)化流動相及溫度，使得萘普生異構(gòu)體得到拆分。
【專利說明】一種手性固定相拆分萘普生的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及的是一種手性固定相拆分萘普生的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]手性是自然界的一個(gè)基本特征。作為生命活動重要基礎(chǔ)的生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖和核酸等都具有手性特征。而手性對映體藥物的藥理作用是通過與生物體內(nèi)大分子之間的嚴(yán)格手性匹配與分子識別而實(shí)現(xiàn)的。在許多情況下，化合物的一對對映體在生物體內(nèi)的藥理活性、代謝過程、代謝速率及毒性等均存在顯著的差異。因此手性藥物的分離及分析檢測，對研究手性藥物的體內(nèi)藥動學(xué)過程，確定藥動學(xué)參數(shù)，藥理和毒理作用機(jī)制，以及手性藥物質(zhì)量控制等都具有重要意義。消旋體藥物的“手性轉(zhuǎn)換”也成為當(dāng)前醫(yī)藥行業(yè)的一個(gè)重要趨勢。
[0003]萘普生(Naproxen)，即2-?-甲氧基_2_萘基)丙酸，是重要的芳基烷酸類非甾體抗炎藥，臨床上廣泛用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性脊椎炎及產(chǎn)后、術(shù)后止痛等。萘普生存在一對光學(xué)活性異構(gòu)體即(S)_(+)_萘普生和(R)-(-)-萘普生，其中(S)_(+)_萘普生藥效為(R)-(-)_萘普生的28倍。采用單一對映異構(gòu)體用藥可確保療效，減少胃部刺激，保證用藥安全。故萘普生的手性拆分顯得十分重要。
[0004]萘普生拆分的方法有:(I)采用手性胺如(_)-a-苯乙胺、葡辛胺等通過結(jié)晶法選擇性拆分，選擇性結(jié)晶后對拆分劑進(jìn)行回收，產(chǎn)品反復(fù)精制得到對映純萘普生。但該方法需要較昂貴的拆分劑，且結(jié)晶拆分后需對拆分劑進(jìn)行回收，產(chǎn)品需反復(fù)精制。(2)酶促萘普生酯的選擇性水解:萘普生先衍生為酯，然后在酶的催化作用下，其中一種構(gòu)型優(yōu)先水解，另一構(gòu)型沒有水解，從而達(dá)到分離的目的。但該方法需要用到酶，反應(yīng)條件有一定的限制，且不容易放大。(3)液相色譜手性拆分:目前人們開發(fā)的拆分萘普生的手性固定相有:環(huán)糊精及其衍生物手性固定相、多糖衍生物手性固定相(主要是纖維素或淀粉的異氰酸酯衍生物)、以及刷型手性固定相等。但這些手性固定相較昂貴，故限制了其應(yīng)用。
`[0005]因此，現(xiàn)有技術(shù)存在缺陷，需要改進(jìn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種手性固定相拆分萘普生的方法。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0008]一種手性固定相拆分萘普生的方法，其步驟如下:
[0009](I)稱取干燥的微晶纖維素于三頸燒瓶中，加入新蒸吡啶，室溫氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將肉桂酰氯快速加入上述攪拌中的混合溶液中；
[0010](2) 120°C下加熱回流混合物；
[0011](3)反應(yīng)液冷卻后倒入冰水混合物中攪拌，過濾，水洗至溶液無色，乙醇充分洗滌，烘干得土黃色粗產(chǎn)品；[0012](4) 土黃色粗產(chǎn)品經(jīng)四氫呋喃溶解、乙醇沉淀析出兩次精制得纖維素三肉桂酸酷；
[0013](5)將纖維素三肉桂酸酯溶于四氫呋喃中，攪拌使其完全溶解；
[0014](6)將活化過的小孔硅膠載體加入步驟(5)的溶液中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀緩慢蒸出四氫呋喃；
[0015](7)待四氫呋喃蒸出后，加入正己烷/乙醇混合溶液，攪拌后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸掉溶劑，使纖維素三肉桂酸酯均勻涂覆于載體表面，真空干燥得手性固定相；
[0016](8)所得手性固定相以體積比為70/30的正己烷/異丙醇為勻漿液，體積比為60/40的正己烷/異丙醇為頂替液裝柱制得手性色譜柱；
[0017](9)以正己烷/乙醇/醋酸作為流動相拆分萘普生。
[0018]所述的方法，步驟(1)中，微晶纖維素與肉桂酰氯的摩爾比為:1:3_5。
[0019]所述的方法,小孔硅膠的孔徑為9nm-30nm。
[0020]所述的方法，步驟(7)中，正己烷/乙醇的體積比為90:10。
[0021]所述的方法，步驟(9)中， 流動相中醋酸的體積百分比為0.1-0.5%,乙醇的體積百分比為5-20%。
[0022]本發(fā)明方法簡便、成本較低，使得該法不僅可用于萘普生的分離分析，也可用于其制備性分離。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0023]圖1為纖維素三肉桂酸酯的合成示意圖。
[0024]圖2為萘普生在小孔硅膠涂敷纖維素酯上拆分的典型色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0025]以下結(jié)合具體實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0026]圖1為纖維素三肉桂酸酯的合成示意圖，由圖1可以看出，纖維素上的羥基和肉桂酰氯上的酰氯基團(tuán)在吡啶堿的作用下可脫去HCl而生成酯，從而制得纖維素肉桂酸酯。
[0027]實(shí)施例
[0028]稱取5g干燥的微晶纖維素于三頸燒瓶中，加入75mL新蒸吡啶，室溫氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將15mL的肉桂酰氯快速加入上述攪拌中的混合溶液中，120°C下加熱回流混合物40h。反應(yīng)液冷卻后倒入250mL冰水混合物中攪拌，過濾，水洗至溶液無色。乙醇充分洗滌，烘干得土黃色粗產(chǎn)品。土黃色粗產(chǎn)品經(jīng)30mL四氫呋喃溶解、300mL乙醇沉淀析出兩次精制得纖維素三肉桂酸酯。稱取0.Sg纖維素三肉桂酸酯溶于20mL四氫呋喃中，攪拌使其完全溶解。稱取活化過的孔徑為9nm的小孔硅膠載體4.0g加入該溶液中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀緩慢蒸出四氫呋喃，待大部分四氫呋喃蒸出后，加入正己烷/乙醇(90/10，v/v)混合溶液150mL，攪拌后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸掉溶劑，使纖維素三肉桂酸酯均勻涂覆于載體表面，60°C真空干燥12h得手性固定相。所得手性固定相4.0g以70/30 (v/v)的正己烷/異丙醇25mL為勻漿液，60/40(v/v)的正己烷/異丙醇150mL為頂替液在40MPa壓力下裝柱制得手性色譜柱。以體積比為93.5:6:0.5的正己烷/乙醇/醋酸作為流動相拆分萘普生，柱溫為25°C，流速為1.0mL/mirio分尚因子可達(dá)1.61,分尚度聞達(dá)7.16。[0029]圖2為拆分的萘普生色譜圖，從圖中可以看出R-萘普生出峰在前。
[0030]應(yīng)當(dāng)理解的是，對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說，可以根據(jù)上述說明加以改進(jìn)或變換，而所有這些改進(jìn)和 變換都應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種手性固定相拆分萘普生的方法，其特征是，步驟如下: (1)稱取干燥的微晶纖維素于三頸燒瓶中，加入新蒸吡啶，室溫氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將肉桂酰氯快速加入上述攪拌中的混合溶液中； (2)120°C下加熱回流混合物； (3)反應(yīng)液冷卻后倒入冰水混合物中攪拌，過濾，水洗至溶液無色，乙醇充分洗滌，烘干得土黃色粗產(chǎn)品；(4)土黃色粗產(chǎn)品經(jīng)四氫呋喃溶解、乙醇沉淀析出兩次精制得纖維素三肉桂酸酯； (5)將纖維素三肉桂酸酯溶于四氫呋喃中，攪拌使其完全溶解； (6)將活化過的小孔硅膠載 體加入步驟(5)的溶液中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀緩慢蒸出四氫呋喃； (7)待四氫呋喃蒸出后，加入正己烷/乙醇混合溶液，攪拌后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸掉溶劑，使纖維素三肉桂酸酯均勻涂覆于載體表面，真空干燥得手性固定相； (8)所得手性固定相以體積比為70/30的正己烷/異丙醇為勻漿液，體積比為60/40的正己烷/異丙醇為頂替液裝柱制得手性色譜柱； (9)以正己烷/乙醇/醋酸作為流動相拆分萘普生。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟(1)中，微晶纖維素與肉桂酰氯的摩爾比為:1:3-5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，小孔硅膠的孔徑為9nm-30nm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟(7)中，正己烷/乙醇的體積比為90:10。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟(9)中，流動相中醋酸的體積百分比為0.1-0.5%，乙醇的體積百分比為5-20%。
【文檔編號】B01J20/29GK103739481SQ201310754293
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月31日
【發(fā)明者】姚碧霞, 翁文, 劉國慶 申請人:閩南師范大學(xué), 姚碧霞