一種新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開一種新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管。它包括抗體結(jié)合收集管管體,在抗體結(jié)合收集管管體內(nèi)還具有圓柱體。本實(shí)用新型在抗體結(jié)合收集管管體內(nèi)設(shè)置圓柱體,其能夠起到很好的引流作用,使抗體和Protein?A或G瓊脂糖樹脂珠的混合液在低轉(zhuǎn)速條件下能夠輕易溫和的流動(dòng),從而更好的混合均勻,使抗體更加均勻有效的結(jié)合到Protein?A或G瓊脂糖樹脂珠上。
【專利說明】一種新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本實(shí)用新型屬于生物器械領(lǐng)域,具體涉及一種新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管。
【背景技術(shù)】:
[0002]目前在科研和檢測(cè)工作中驗(yàn)證蛋白質(zhì)之間的相互作用的方法主要有,酵母雙雜交,Pulldown和免疫共沉淀等,其中免疫共沉淀(Co-1mmunoprecipitation, Co-1P)是最為有效、直接的證明蛋白之間相互作用的方法,現(xiàn)在幾乎所有的文獻(xiàn)報(bào)道中證明蛋白之間相互作用的實(shí)驗(yàn)都是使用免疫共沉淀的方法來證實(shí)。其具體的原理是,利用抗體將相應(yīng)特定分子沉淀的同時(shí),與該分子特異性結(jié)合的其他分子也會(huì)被帶著一起沉淀出來的技術(shù)。這種技術(shù)常用于驗(yàn)證蛋白質(zhì)之間相互特異性結(jié)合。即:先將抗興趣蛋白的抗體與瓊脂糖樹脂珠一起撫育,使其結(jié)合到瓊脂糖樹脂珠上的Protein A或G上,即抗體結(jié)合實(shí)驗(yàn)部分。然后將含有我們感興趣的蛋白的細(xì)胞裂解液加入到之前結(jié)合了抗體的瓊脂糖樹脂珠收集管中進(jìn)行撫育,孵育后若細(xì)胞中含有與興趣蛋白結(jié)合的目的蛋白,就可以形成這樣一種復(fù)合物:“目的蛋白一興趣蛋白一抗興趣蛋白抗體一Protein A或G瓊脂糖樹脂珠”,然后經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,復(fù)合物又被分開。然后經(jīng)免疫印跡或質(zhì)譜檢測(cè)目的蛋白。這種方法得到的目的蛋白是在細(xì)胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的,符合體內(nèi)實(shí)際情況,得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。其主要具有一下優(yōu)點(diǎn):
[0003](I)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài)。
[0004](2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的,可以避免人為的影響。
[0005](3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。
[0006]然而,現(xiàn)行的免疫共沉淀試劑盒中抗體結(jié)合的試驗(yàn)部分,存在一定的問題即:
[0007]抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠結(jié)合時(shí)由于混合液體表面張力大,難以形成液流,使其難以均勻有效的結(jié)合,導(dǎo)致抗體與興趣蛋白的結(jié)合效率下降,可能使得結(jié)果出現(xiàn)假陰性,進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)論可靠性。
[0008]具體為抗體和Protein A或G瓊脂糖樹脂珠及一些試劑加到抗體結(jié)合收集管中時(shí),由于形成的混合液濃度及成分的變化,使其混合液體表面的張力和粘度增大,因此在均勻搖動(dòng)的過程中需要很高的轉(zhuǎn)速才能使得液體沖破表面張力,形成液流。但是在這種高轉(zhuǎn)速的情況下形成的液流速度過大,抗體和Protein A或G瓊脂糖樹脂珠很難結(jié)合,導(dǎo)致抗體結(jié)合的效率大幅度減小,如果抗體結(jié)合的少,將影響其后面的與蛋白結(jié)合,進(jìn)而影響拉下目的蛋白的實(shí)驗(yàn),可能使實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)假陰性或是弱陽性的結(jié)果,致使整體實(shí)驗(yàn)的結(jié)論受到影響,因此保證抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠的結(jié)合率對(duì)用免疫共沉淀法來驗(yàn)證蛋白之間的相互作用尤為重要。具體的原因是目前的抗體結(jié)合收集管(圖1所示),由于其內(nèi)壁光滑,無任何導(dǎo)流裝置,對(duì)液體沒有導(dǎo)流作用,抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠形成的混合液表面張力很大,不在高轉(zhuǎn)速條件下,難以形成流動(dòng)液流,難以搖勻,而在這種高速轉(zhuǎn)動(dòng)的條件下,即使形成液體的混合流動(dòng),抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠也難以均勻有效結(jié)合的。
【發(fā)明內(nèi)容】
:
[0009]本實(shí)用新型的目的是提供一種能夠在低轉(zhuǎn)速的情況下,也能形成混合液液流,從而使抗體與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠能均勻有效結(jié)合的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管。
[0010]本實(shí)用新型是通過以下技術(shù)方案予以實(shí)施的:
[0011]本實(shí)用新型的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管,包括抗體結(jié)合收集管管體,其特征在于,在抗體結(jié)合收集管管體內(nèi)還具有圓柱體。
[0012]優(yōu)選,所述的圓柱體的直徑(橫截面)為抗體結(jié)合收集管內(nèi)壁直徑的1/5,長(zhǎng)度為抗體結(jié)合收集管管身長(zhǎng)度的2/3。
[0013]所述的圓柱體只要放于抗體結(jié)合收集管管內(nèi)都能起到效果,優(yōu)選豎直貼于抗體結(jié)合收集管的內(nèi)壁上。
[0014]本實(shí)用新型在抗體結(jié)合收集管管體內(nèi)設(shè)置圓柱體,其能夠起到很好的引流作用,使抗體和Protein A或G瓊脂糖樹脂珠的混合液在低轉(zhuǎn)速條件下能夠輕易溫和的流動(dòng),從而更好的混合均勻,使抗體更加均勻有效的結(jié)合到Protein A或G瓊脂糖樹脂珠上。其原理在于,液體對(duì)突起弧線有一定的吸附作用,在有突起弧線存在的條件下,液體會(huì)對(duì)弧形突起有一定的吸附作用更易隨著突起線條流動(dòng)。這樣就可以減少液體沖破表面張力所需要的動(dòng)量,減少形成液流所需的轉(zhuǎn)速,使得搖勻時(shí)轉(zhuǎn)速條件更加溫和,這樣Protein A或G瓊脂糖樹脂珠就能夠在底轉(zhuǎn)速的條件下,溫和的在混合液中懸浮流動(dòng),抗體也更容易均勻地與Protein A或G瓊脂糖樹脂珠有效結(jié)合。
[0015]本實(shí)用新型的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管相比于現(xiàn)有技術(shù)的抗體結(jié)合收集管,其具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0016]1、相比目前通用的光滑內(nèi)壁的抗體結(jié)合收集管更加容易使得液體在內(nèi)壁產(chǎn)生流動(dòng),這樣可以在搖床上任意轉(zhuǎn)速下隨意的控制液體的流動(dòng)速度,更好的控制抗體與瓊脂糖樹脂的撫育結(jié)合。
[0017]2、本實(shí)用新型的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管還可以用于其它的實(shí)驗(yàn)用途,如一些藥物的搖勻,防止沉積。溶液的混勻,磁珠的混勻,各種液體物質(zhì)的均勻混合等。
[0018]3、本實(shí)用新型的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管能夠很好的應(yīng)用與免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中抗體的撫育,有利于更好的純化蛋白質(zhì)。
[0019]4、本實(shí)用新型的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管能夠更溫和的搖勻,更好的保護(hù)抗體和蛋白質(zhì)的天然活性狀態(tài),進(jìn)而得到理想的實(shí)驗(yàn)效果。
[0020]5、本實(shí)用新型的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,增強(qiáng)抗體和ProteinA或G瓊脂糖樹脂珠結(jié)合的效果明顯。
【專利附圖】
【附圖說明】:
[0021]圖1是現(xiàn)有技術(shù)中的抗體結(jié)合收集管的結(jié)構(gòu)示意圖;
[0022]圖2是本實(shí)用新型的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管的結(jié)構(gòu)示意圖;
[0023]其中1、抗體結(jié)合收集管管體;2、圓柱體?!揪唧w實(shí)施方式】:
[0024]以下是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明,而不是對(duì)本發(fā)明的限制。
[0025]實(shí)施例1:
[0026]如圖2所示,本實(shí)施例的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管,包括抗體結(jié)合收集管管體I,在抗體結(jié)合收集管管體內(nèi)壁上還豎直貼有一圓柱體2,圓柱體的直徑(橫截面)為抗體結(jié)合收集管內(nèi)壁直徑的1/5,長(zhǎng)度為抗體結(jié)合收集管管身長(zhǎng)度的2/3。
【權(quán)利要求】
1.一種新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管,包括抗體結(jié)合收集管管體,其特征在于,在抗體結(jié)合收集管管體內(nèi)還具有圓柱體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管,其特征在于,所述的圓柱體的直徑為抗體結(jié)合收集管內(nèi)壁直徑的1/5,長(zhǎng)度為抗體結(jié)合收集管管身長(zhǎng)度的2/3。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的新型導(dǎo)流柱式抗體結(jié)合收集管,其特征在于,所述的圓柱體豎直貼于抗體結(jié)合收集管的內(nèi)壁上。
【文檔編號(hào)】B01D15/22GK203494219SQ201320497668
【公開日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年8月14日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月14日
【發(fā)明者】李志遠(yuǎn), 尹士魁, 李彩月, 馬文波 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院