一種直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法
【專利摘要】一種直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法：蠟質淀粉溶于水加熱糊化后冷卻，加異淀粉酶完全脫支，離心后冷凍干燥得到直鏈糊精粉末；將直鏈糊精粉末溶解后置于結晶溫度下，CLA溶于預熱好的無水乙醇溶液中，然后加入到直鏈糊精溶液中并保溫攪拌一定時間，取出冷卻至室溫離心后，沉淀物用無水乙醇/水混合液洗滌除去未復合的CLA，再次離心得到的沉淀真空干燥獲得含有CLA的微膠囊包埋物。本方法提高了直鏈糊精和CLA復合物的溶解度、CLA的氧化穩(wěn)定性和在水溶液中的生物利用度，從而解決了直鏈淀粉復合物溶解性差、CLA容易自動氧化及生物利用度低的問題，可作為一種營養(yǎng)強化劑添加到功能性營養(yǎng)強化食品及主食中。
【專利說明】一種直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及功能性食品添加劑【技術領域】，尤其是涉及一種采用直鏈糊精包埋共軛亞油酸的方法。
【背景技術】
[0002]共扼亞油酸(CLA)是具有共軛雙鍵的游離脂肪酸，是普遍存在于人和動物體內(nèi)的天然活性營養(yǎng)物質，具有抗癌、抗動脈粥樣硬化、抗氧化、提高機體免疫力、促進生長、降低體脂等眾多的生理功能，在藥物、食品、保健品等領域有廣闊的應用前景。然而，共軛亞油酸水溶性差，在含水體系中的利用率有限；化學穩(wěn)定性較差，易被空氣氧化變質，形成的氧化產(chǎn)物導致產(chǎn)品質量劣變和貨架期縮短；因此不利于生產(chǎn)，儲藏，運輸和應用。
[0003]直鏈糊精是指葡萄糖以α-1，4-糖苷鍵連接而成的一系列具有不同聚合度的葡聚糖，可通過異淀粉酶水解支鏈淀粉得到。其基本結構單元與直鏈淀粉相同，但直鏈糊精的分子量更小、具有很好的水溶性。直鏈淀粉或直鏈糊精由于分子內(nèi)氫鍵的作用，呈中空疏水的左手單螺旋狀?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)直鏈淀粉或直鏈糊精能與醇類、芳香化合物、脂肪酸等生成復合物。這種復合物是V-型結晶結構。近年來關于直鏈淀粉作為微膠囊壁材的研究較多。但由于直鏈淀粉的分子量大，常溫下不溶于水，制備微膠囊時需要有機溶劑助溶，會存在一定毒性，且形成的直鏈淀粉不飽和脂肪酸微膠囊溶解性差，限制了其應用范圍。
[0004]由于與直鏈淀粉結構上的相似性，直鏈糊精可作為一種新型的包埋壁材，與不飽和脂肪酸形成V型結晶復合物，增大不飽和脂肪酸溶解度、提高不飽和脂肪酸的氧化穩(wěn)定性和水中利用率?？蓱檬称芳壍牡矸勖撝В纬芍辨満珜O易氧化的共軛亞油酸進行包埋，擴大CLA應用范圍，并為淀粉質資源的開發(fā)和利用開辟新的發(fā)展空間。
[0005]目前，還沒有關于直鏈糊精作為微膠囊壁材的相關報道。這可能是因為，直鏈糊精及其包合物在制備過程中存在一些問題。制備直鏈糊精要求淀粉充分溶解，若使用有機溶劑助溶，也會存在毒性，而在高壓下較高濃度的淀粉溶液不經(jīng)攪拌容易成為膠狀，黏在容器壁上；在制備微膠囊過程中，直鏈糊精容易再次凝沉，不易與被包埋物均勻混合。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對現(xiàn)有技術存在的上述問題，本 申請人:提供了一種直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法。本方法提供了一種新型的包埋壁材，提高了直鏈糊精和CLA復合物的溶解度、CLA的氧化穩(wěn)定性和在水溶液中的生物利用度，從而解決了直鏈淀粉復合物溶解性差、CLA容易自動氧化及生物利用度低的問題，可作為一種營養(yǎng)強化劑添加到功能性營養(yǎng)強化食品及主食中。
[0007]本發(fā)明的技術方案如下:
一種直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法，具體步驟如下:
(O將蠟質淀粉均勻分散于水中，在沸水浴攪拌預糊化，再于11(T13(TC高壓蒸煮l(T30min至完全糊化后冷卻，所述高壓為0.04?0.17MPa ；(2)向糊化后的淀粉內(nèi)加入異淀粉酶進行脫支，所述異淀粉酶的添加量為1~θυ/g淀粉，反應溫度為3(T60°C，反應時間為12~48h ;完全脫支后滅酶，離心、冷凍干燥得到直鏈糊精粉末；
(3)將直鏈糊精粉末加入NaOH溶液溶解，再依次加入蒸餾水和HCL溶液，稀釋中和至pH=7，得到直鏈糊精溶液，直鏈糊精溶液含有直鏈糊精的質量百分比為0.5~3%，然后將其置于結晶溫度下，所述結晶溫度保持在2(T90°C ；
(4)將共軛亞油酸溶于預熱至結晶溫度的無水乙醇中，所述共軛亞油酸和無水乙醇的用量比為100g: lL~10g: 1L，然后加入直鏈糊精溶液中并保溫攪拌至少5 min，所述直鏈糊精與共軛亞油酸的質量為8: 1~15:1 ；
(5)攪拌后，取出混合物緩慢冷卻至室溫離心后，沉淀物用無水乙醇/水混合液洗滌除去未復合的共軛亞油酸，然后再次離心，將得到的沉淀真空干燥，即得直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊。
[0008]所述蠟質淀粉為蠟質玉米淀粉、蠟質馬鈴薯淀粉、蠟質大米淀粉。
[0009]所述步驟(2)中異淀粉酶的添加量優(yōu)選7.50 U/g淀粉；反應溫度優(yōu)選40°C ;反應時間優(yōu)選12 h。
[0010]所述步驟(3)中直鏈糊精溶液含有直鏈糊精的質量百分比優(yōu)選1% ;結晶溫度優(yōu)選300C。NaOH溶液的濃度為IM ；HCL溶液的濃度為1M，蒸餾水和HCL溶液的體積比為8:1。
[0011]所述步驟(4)中乙 醇的添加量優(yōu)選0.5mL ;保溫攪拌時間優(yōu)選2 h ;直鏈糊精與CLA的比例優(yōu)選12:1。
[0012]所述步驟(5)中無水乙醇/水混合液中，無水乙醇和水的體積比為50:50。
[0013]所述共軛亞油酸用其他不飽和脂肪酸代替、或用抗氧化劑代替。所述不飽和脂肪酸包括亞油酸、亞麻酸、DHA ;所述抗氧化劑包括輔酶Q10、綠原酸。
[0014]本發(fā)明有益的技術效果在于:
1、以往的直鏈淀粉制備包埋物時，需使用有機溶劑二甲亞砜(DMSO)溶解直鏈淀粉和脂肪酸分子；而本申請的包埋壁材直鏈糊精，可以在水溶液中溶解，針對在水中不溶解的共軛亞油酸可采用乙醇溶解后加入直鏈糊精水溶液中，這樣可避免有機溶劑對人體造成的潛在毒性。
[0015]2、因為蠟質玉米淀粉的側鏈鏈長聚合度為6-80葡萄糖殘基，經(jīng)異淀粉酶完全脫支后可得到直鏈糊精，該直鏈糊精分子量小、溶解性好且其基本結構與直鏈淀粉的螺旋結構相同。
[0016]3、步驟(1)中預先糊化攪拌使淀粉均勻分散于水中，防止靜態(tài)高壓蒸煮時，淀粉成膠狀置于試管底部，難于均勻分散，影響異淀粉酶的作用效果。在11(T13(TC、優(yōu)選121°C下高壓蒸煮，可以使淀粉完全糊化，也可避免使用有機溶劑二甲亞砜(DMSO)溶解淀粉，造成對人體的潛在毒性。
[0017]4、現(xiàn)有技術中，有的是將玉米淀粉升溫至75~85°C，然后加入異淀粉酶進行糊化，這樣做無法保證淀粉脫支完全；而本申請的糊化方法可以保證淀粉完全脫支。
[0018]5、由于直鏈糊精在水中容易凝沉下來，因此步驟(2)中直鏈糊精粉末先加入NaOH溶液溶解，再用蒸餾水和HCL溶液稀釋中和，防止溶解后的直鏈糊精再次析出凝沉。
[0019]6、步驟(4)中沉淀物用無水乙醇/水混合液(V:V=50:50)洗滌就可除去未復合的CLA，避免使用其他有毒的有機溶劑，如氯仿，乙醚等。
[0020]7、現(xiàn)有技術中有用環(huán)糊精來包埋CLA的，但是環(huán)糊精有自身缺陷，本申請采用的直鏈糊精和環(huán)糊精的區(qū)別在于:
(I)環(huán)糊精由淀粉酶法合成，是由D-吡喃型葡萄糖單元通過α-1，4糖苷鍵連接而成的一類環(huán)狀低聚麥芽糖，由7個葡萄糖單元組成的環(huán)糊精最為常見。環(huán)糊精的疏水性空腔能夠包埋各種疏水性化合物，形成穩(wěn)定的復合物。但是由于環(huán)糊精空腔的剛性結構，只有一些分子大小正好合適的客體才能夠被包埋，因此環(huán)糊精特別適合包埋帶有芳香環(huán)的化合物。直鏈糊精是由D-吡喃型葡萄糖單元通過α -1, 4糖苷鍵連接而成的鏈狀生物大分子，與環(huán)糊精類似，直鏈糊精也具有內(nèi)部疏水外部親水的雙親性。與環(huán)糊精內(nèi)部空腔的剛性結構不同，直鏈糊精呈現(xiàn)柔性結構，由于存在共軛雙鍵，共軛亞油酸在空間上是彎曲的，因此直鏈糊精更適合作為包埋共軛亞油酸的壁材。
[0021](2)酶法合成和分離純化過程使得環(huán)糊精的價格高昂，而直鏈糊精是由價格低廉的蠟質淀粉完全脫支制得，無需分離，其成本相對較低；
(3)環(huán)糊精復合物的平均粒徑為微米級(μm)，在水溶液中產(chǎn)生大的凝集，延長儲存時不穩(wěn)定，很快沉淀下來；直鏈糊精復合物的平均粒徑小于環(huán)糊精的復合物，為納米級，懸浮液儲存穩(wěn)定性好；
(4)與環(huán)糊精復合物相比，直鏈糊精與CLA的相互作用強，對CLA起到更好的氧化保護作用；
(5)與環(huán)糊精相比，直鏈糊精易被腸道消化酶水解，因此直鏈糊精-CLA復合物在體內(nèi)生物利用度更高，具有更好的靶向釋放性。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0022]圖1為實施例1制備得到的直鏈糊精的HPSEC圖；
圖2為實施例1制備得到的微膠囊的DSC圖；
圖3為實施例1制備得到的微膠囊的V型結晶X-RD衍射圖譜 圖4為實施例1制備得到的微膠囊在不同溫度時間的溶解度變化；
圖5為實施例1制備得到的微膠囊在60°C存放不同時間的過氧化值變化。
【具體實施方式】
[0023]實施例1
本申請?zhí)峁┝艘环N直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法，具體步驟如下:
(1)將Ig蠟質淀粉均勻分散于90mL蒸餾水中，在沸水浴攪拌預糊化，再于121°C、0.1MPa高壓下蒸煮20 min至完全糊化后冷卻至室溫；
(2)向糊化后的蠟質玉米淀粉內(nèi)加入IOmL醋酸鈉緩沖液(0.1M，PH=3.5)及7.5 U/g淀粉的異淀粉酶進行脫支，反應溫度為40°C，反應時間為12h ;完全脫支后，將完成水解反應的溶液于沸水浴中煮沸10 min滅酶,5000 r/min離心5 min除去酶,旋轉蒸發(fā)后冷凍干燥成粉末，即得直鏈糊精。
[0024](3)將500mg直鏈糊精粉末加入5mL濃度為IM的NaOH溶液溶解，再加入40ml蒸餾水稀釋，最后加入5mL濃度為IM的HCL溶液中和至混合溶液的pH=7，得到直鏈糊精的直鏈百分比為1%的溶液。所得溶液用N2排氣后在沸水浴中加熱糊化，使溶液澄清透明，置于30°C的結晶溫度下；
(4)將50mg共軛亞油酸溶于預熱至結晶溫度的ImL無水乙醇中，然后加入500mg的直鏈糊精溶液中并保溫攪拌2h ；
(5)攪拌后,取出混合物緩慢冷卻至室溫離心后(5000r/min, 20 min),沉淀物用無水乙醇/水混合液(50:50=V:V)洗滌兩次，除去未復合的共軛亞油酸，然后再次離心，將得到的沉淀室溫真空干燥，即得直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊。
[0025]將步驟(2)得到的直鏈糊精及原料蠟質玉米淀粉制成1% (w/v)的溶液，使用Shodex OHpak SB-804和SB-802.5柱，柱溫50°C，超純水為流動相，流速0.70mL/min,進樣分析直鏈糊精鏈的聚合度。得到如圖1所示的HPSEC圖，從圖中可以看到，蠟質玉米淀粉基本完全脫支，得到的直鏈糊精分子量較小。
[0026]將步驟(5)得到的微膠囊包埋物在PrislDSC儀器上掃描，以5°C /min的速度從20°C掃描到110°C。得到如圖2所示的DSC圖譜，從圖上可以看到，在83°C有吸熱峰，證明了直鏈糊精-CLA的存在。
[0027]將步驟(5)得到的微膠囊包埋物在BrukerD8_Advance XRD儀器上測試,測試條件為掃描速度4° /min，掃描區(qū)域5° ^35°，采樣步寬0.02°。得到如圖3所示的X射線衍射圖譜。從圖上可以看到，在2 Θ在7.6°、12.5°和19.8°具有特征衍射峰，證明了該直鏈糊精-CLA是V型結晶。
[0028]將步驟(5)得到的微膠囊包埋物0.50g樣品分散于50ml蒸餾水中，分別在20°C、50°C、70°C、90° C的水浴中旋轉震蕩30 min,然后1200r/min離心10min，將25ml的上清液倒入預先稱重的稱量瓶中，110°C干燥4h后稱重。復合物在不同溫度的溶解度變化如圖4所示。其中，室溫下包埋物的溶解度為62.64 %，隨溫度的增大而增大，90°C時溶解度可達到90%。
[0029]將步驟(5)得到的微膠囊包埋物和物理混合物分別在63°C下保存0h、12h、ld、2d、3d、5d、10d后，使用硫氰酸鐵法測定過氧化值，得到了如圖5所示的在60°C存放不同時間的過氧化值變化。從圖中可以發(fā)現(xiàn)該微膠囊復合物顯著提高了共軛亞油酸的氧化穩(wěn)定性。其中，經(jīng)直鏈糊精包埋的共軛亞麻酸過氧化值為1.41meq/kg，未經(jīng)包埋保護的共軛亞油酸過氧化值為28.86meq/kg，物理混合物過氧化值為22.75meq/kg。
[0030]實施例2
本申請?zhí)峁┝艘环N直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法，具體步驟如下:
(O將Ig蠟質淀粉均勻分散于90ml蒸餾水中，在沸水浴攪拌預糊化，再于110°C、0.04MPa高壓下蒸煮30 min至完全糊化后冷卻至室溫；
(2)向糊化后的蠟質玉米淀粉內(nèi)加入IOmL醋酸鈉緩沖液(0.1M，PH=3.5)及I U/g淀粉的異淀粉酶進行脫支，反應溫度為30°C，反應時間為48h ;完全脫支后，將完成水解反應的溶液于沸水浴中煮沸10 min滅酶,5000 r/min離心5 min除去酶,旋轉蒸發(fā)后冷凍干燥成粉末，即得直鏈糊精。
[0031](3)將500mg直鏈糊精粉末加入IOmL濃度為IM的NaOH溶液溶解，再加入80ml蒸餾水稀釋，最后加入IOmL濃度為IM的HCL溶液中和至混合溶液的pH=7，得到直鏈糊精的質量百分比為0.5 %的溶液。所得溶液用N2排氣后在沸水浴中加熱糊化，使溶液澄清透明，置于20°C的結晶溫度下；
(4)將與直鏈糊精的質量為1:8的共軛亞油酸溶于預熱至結晶溫度的5mL無水乙醇中，然后加入500mg的直鏈糊精溶液中并保溫攪拌至少5 min ；
(5)攪拌后,取出混合物緩慢冷卻至室溫離心后(5000r/min, 20 min),沉淀物用無水乙醇/水混合液(50:50=V:V)洗滌兩次，除去未復合的共軛亞油酸，然后再次離心，將得到的沉淀室溫真空干燥，即得直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊。
[0032]實施例3
本申請?zhí)峁┝艘环N直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法，具體步驟如下:
(O將Ig蠟質淀粉均勻分散于90ml蒸餾水中，在沸水浴攪拌預糊化，再于130°C、
0.17MPa高壓下蒸煮IOmin至完全糊化后冷卻至室溫；
(2)向糊化后的玉米淀粉內(nèi)加入IOmL醋酸鈉緩沖液(0.1M，PH=3.5)及10 U/g淀粉的異淀粉酶進行脫支，反應溫度為60°C,反應時間為12h ;完全脫支后,將完成水解反應的溶液于沸水浴中煮沸10 min滅酶,5000 r/min離心5 min除去酶,旋轉蒸發(fā)后冷凍干燥成粉末，即得直鏈糊精。
[0033](3)將500mg直鏈糊精粉末加入1.7mL濃度為IM的NaOH溶液溶解，再加入13.3ml蒸餾水稀釋，最后加入1.7mL濃度為IM的HCL溶液中和至混合溶液的pH=7，得到直鏈糊精的質量百分比為3 %的溶液。所得溶液用N2排氣后在沸水浴中加熱糊化，使溶液澄清透明，置于90°C的結晶溫度下；
(4)將與直鏈糊精的質量為1:15的共軛亞油酸溶于預熱至結晶溫度的0.5mL無水乙醇中，然后加入500mg的直鏈糊精溶液中并保溫攪拌至多4h ；
(5)攪拌后,取出混合物緩慢冷卻至室溫離心后(5000r/min, 20 min),沉淀物用無水乙醇/水混合液(50:50=V:V)洗滌兩次，除去未復合的共軛亞油酸，然后再次離心，將得到的沉淀室溫真空干燥，即得直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊。
[0034]實施例f 3中異淀粉酶的規(guī)格為1000 U/mL,生產(chǎn)廠家是愛爾蘭Megazyme公司，購買廠家是國內(nèi)經(jīng)銷商上海超研生物科技有限公司。
[0035]實施例4
本申請還提供了一種直鏈糊精包埋輔酶QlO的微膠囊的制備方法，具體步驟如下:
(O將Ig蠟質淀粉均勻分散于90ml蒸餾水中，在沸水浴攪拌預糊化，再于121°C、
0.1MPa高壓下蒸煮20 min至完全糊化后冷卻至室溫；
(2)向糊化后的蠟質玉米淀粉內(nèi)加入IOmL醋酸鈉緩沖液(0.1M，PH=3.5)及7.5U/g淀粉的異淀粉酶進行脫支，反應溫度為40°C，反應時間為12h ;完全脫支后，將完成水解反應的溶液于沸水浴中煮沸10 min滅酶,5000 r/min離心5 min除去酶,旋轉蒸發(fā)后冷凍干燥成粉末，即得直鏈糊精。
[0036](3)將500mg直鏈糊精粉末加入5mL濃度為IM的NaOH溶液溶解，再加入40ml蒸餾水稀釋，最后加入5mL濃度為IM的HCL溶液中和至混合溶液的pH=7，得到直鏈糊精的質量百分比為I %的溶液。所得溶液用N2排氣后在沸水浴中加熱糊化，使溶液澄清透明，置于70°C的結晶溫度下；
(4)將IOOmg輔酶QlO溶于預熱至結晶溫度的ImL無水乙醇中，然后加入500mg的直鏈糊精溶液中并保溫攪拌24h ； (5)攪拌后,取出混合物緩慢冷卻至室溫離心后(5000 r/min, 20 min),沉淀物用無水乙醇/水混合液(50:50=V: V)洗滌兩次，除去未復合的輔酶Q10，然后再次離心，將得到的沉淀室溫真空干燥，即得直鏈糊精包埋輔酶QlO的微膠囊。
【權利要求】
1.一種直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊的制備方法，其特征在于具體步驟如下: (1)將蠟質淀粉均勻分散于水中，在沸水浴攪拌預糊化，再于110-130-C高壓蒸煮l0-30min至完全糊化后冷卻，所述高壓為0.04~0.17MPa ； (2)向糊化后的淀粉內(nèi)加入異淀粉酶進行脫支，所述異淀粉酶的添加量為1-10U/g淀粉，反應溫度為30-60°C，反應時間為12~48h ;完全脫支后滅酶，離心、冷凍干燥得到直鏈糊精粉末； (3)將直鏈糊精粉末加入NaOH溶液溶解，再依次加入蒸餾水和HCL溶液，稀釋中和至pH=7，得到直鏈糊精溶液，直鏈糊精溶液含有直鏈糊精的質量百分比為0.5~3%，然后將其置于結晶溫度下，所述結晶溫度保持在20-90°C ； (4)將共軛亞油酸溶于預熱至結晶溫度的無水乙醇中，所述共軛亞油酸和無水乙醇的用量比為100g: lL~10g: 1L，然后加入直鏈糊精溶液中并保溫攪拌至少5 min，所述直鏈糊精與共軛亞油酸的質量為8: 1-15:1 ； (5)攪拌后，取出混合物緩慢冷卻至室溫離心后，沉淀物用無水乙醇/水混合液洗滌除去未復合的共軛亞油酸，然后再次離心，將得到的沉淀真空干燥，即得直鏈糊精包埋共軛亞油酸的微膠囊。
2.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述蠟質淀粉為蠟質玉米淀粉、蠟質馬鈴薯淀粉、蠟質大米淀粉。
3.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中異淀粉酶的添加量優(yōu)選7.50 U/g淀粉；反應溫度優(yōu)選40°C ;反應時間優(yōu)選12 h。
4.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中直鏈糊精溶液含有直鏈糊精的質量百分比優(yōu)選1% ;結晶溫度優(yōu)選30°C。
5.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中乙醇的添加量優(yōu)選0.5mL ;保溫攪拌時間優(yōu)選2 h。
6.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中NaOH溶液的濃度為IM ；HCL溶液的濃度為1M，蒸餾水和HCL溶液的體積比為8:1。
7.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(4)中直鏈糊精與CLA的比例優(yōu)選12:1。
8.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述步驟(5)中無水乙醇/水混合液中，無水乙醇和水的體積比為50:50。
9.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述共軛亞油酸用其他不飽和脂肪酸代替、或用抗氧化劑代替。
10.根據(jù)權利要求9所述的制備方法，其特征在于所述不飽和脂肪酸包括亞油酸、亞麻酸、DHA ;所述抗氧化劑包括輔酶Q10、綠原酸。
【文檔編號】B01J13/02GK103990424SQ201410165152
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年4月23日 優(yōu)先權日:2014年4月23日
【發(fā)明者】周星, 金征宇, 常情情, 孟令儒, 顧麗敏, 田耀旗, 焦愛權, 徐學明 申請人:江南大學