檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種多層硅膠凈化色譜柱的制備和填充方法，該方法包括如下步驟：1)多層硅膠凈化色譜柱填充物硝酸銀硅膠、硫酸硅膠和氫氧化鈉硅膠的制備；2)多層硅膠凈化色譜柱填充物硅膠和無水硫酸鈉的處理；3)多層硅膠凈化色譜柱的填充。采用該方法制備的多層硅膠凈化色譜柱能克服復(fù)雜的基體效應(yīng)，能對含多溴聯(lián)苯類化合物的基體中的多種雜質(zhì)進行吸附分離，從而有效地除去多種雜質(zhì)，避免了對后續(xù)多溴聯(lián)苯類化合物檢測的干擾，且該方法制備的多層硅膠凈化色譜柱具有操作簡單、重現(xiàn)性好、靈敏度高和準(zhǔn)確度高的優(yōu)點。
【專利說明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法，屬于環(huán)境 或食品檢測【技術(shù)領(lǐng)域】。 檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法

【背景技術(shù)】
[0002] 目前，環(huán)境和食品中的有機污染物種類越來越多，如多溴聯(lián)苯類化合物，且這類有 機污染物所處的基體也十分復(fù)雜，基體里往往含有各種酸性化合物、堿性化合物、芳香族化 合物、含硫化物和含水化合物等雜質(zhì)，如果這些雜質(zhì)不經(jīng)處理，則會對后續(xù)有機污染物的檢 測結(jié)果產(chǎn)生較大干擾，影響檢測的結(jié)果。硅膠作為一種良好的吸附，普通硅膠色譜柱制備方 法制備的硅膠色譜柱雖然可以去除基體中的部分雜質(zhì)，但是當(dāng)基體情況較復(fù)雜，檢測基體 中的多溴聯(lián)苯類化合物類有機污染物時，采用普通硅膠色譜柱制備方法制備的硅膠色譜柱 很難將基體中的各種酸性化合物、堿性化合物、芳香族化合物、含硫化物和含水化合物等雜 質(zhì)去除，對后續(xù)多溴聯(lián)苯類化合物的檢測產(chǎn)生的干擾還是很大。因此，普通硅膠色譜柱制備 方法制備的硅膠色譜柱不能用于檢測復(fù)雜基體中多溴聯(lián)苯類化合物類有機污染物。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為解決現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明提供了檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈 化色譜柱的制備方法，采用該方法制備的多層硅膠凈化色譜柱能克服復(fù)雜的基體效應(yīng)，能 對含多溴聯(lián)苯類化合物的基體中的多種雜質(zhì)進行吸附分離，從而有效地除去多種雜質(zhì)，避 免了對后續(xù)多溴聯(lián)苯類化合物檢測的干擾，且該方法制備的多層硅膠凈化色譜柱具有操作 簡單、重現(xiàn)性好、靈敏度高和準(zhǔn)確度高的優(yōu)點。
[0004] 實現(xiàn)本發(fā)明目的所采取的技術(shù)方案為：
[0005] -種檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法，包括如下步驟：
[0006] 1. 1多層硅膠凈化色譜柱填充物硝酸銀硅膠、硫酸硅膠和氫氧化鈉硅膠的制備：
[0007] 1. 1. 1硝酸銀硅膠的制備：
[0008] 配制質(zhì)量百分濃度為10%?20%的硝酸銀溶液，按質(zhì)量比硝酸銀溶液：硅膠= 1:8?10,在攪拌和避光條件下將硝酸銀溶液滴加到硅膠中，每滴加一滴硝酸銀溶液都要 攪拌至分散均勻后再滴加下一滴硝酸銀溶液，硝酸銀溶液滴加完畢后，在避光條件下用振 蕩器將硝酸銀溶液與硅膠的混合體系持續(xù)震蕩至反應(yīng)完畢后，在避光條件下進行分段干 燥，先在50?70°C下烘烤2?3小時，然后在80?100°C下烘烤2?3小時，再在110? 130°C下烘烤4?5小時，得到硝酸銀硅膠；
[0009] 1. 1. 2硫酸硅膠的制備：
[0010] 按質(zhì)量比濃硫酸：硅膠=11:14?18,在攪拌條件下將質(zhì)量百分比濃度為95%? 97 %的濃濃硫酸滴加到硅膠中，每滴加一滴濃硫酸都要攪拌至分散均勻后再滴加下一滴濃 硫酸，濃硫酸滴加完畢后，用振蕩器將濃硫酸與硅膠的混合體系持續(xù)震蕩至反應(yīng)完畢，得到 硫酸硅膠；
[0011] 1. 1. 3氫氧化鈉硅膠的制備：
[0012] 按質(zhì)量比氫氧化鈉溶液：硅膠=1:2?3,在攪拌條件下將濃度為0.8mol/L? 1. 2mol/L的氫氧化鈉溶液滴加到硅膠中，每滴加一滴氫氧化鈉溶液都要攪拌至分散均勻后 再滴加下一滴氫氧化鈉溶液，滴加完畢后，用振蕩器將氫氧化鈉溶液與硅膠的混合體系持 續(xù)震蕩至反應(yīng)完畢，得到氫氧化鈉硅膠；
[0013] 1. 2多層硅膠凈化色譜柱填充物硅膠和無水濃硫酸鈉的處理：
[0014] 將硅膠在240?260°C下烘烤10?12小時后備用，再將無水濃硫酸鈉在500? 600°C下烘烤10?12小時后備用；
[0015] 1. 3多層硅膠凈化色譜柱的填充：
[0016] 1. 3. 1多層硅膠凈化色譜柱中從下至上各填充物的填充順序和質(zhì)量份為：
[0017] ①玻璃奸維 1?2份： @硅膠 4?6份t ③ 氫氧化_聽膠 6?9份： ④ fiK 10?15份； ⑤ 硫酸硅膠 25?30份； _纖 卜6份； ⑦ 葡酸銀砧膠 6?9汾； ⑧ ￡水濃硫1梭鈉 25?30份；
[0018] 1. 3. 2取一支干燥潔凈的色譜柱，所述色譜柱內(nèi)徑與長度之比為1:8?10,按步驟 1. 3. 1所述質(zhì)量份稱取各填充物，再按照步驟1. 3. 1的填充順序?qū)⒏魈畛湮镆来螐纳V柱 的上端口灌入，每種填充物從色譜柱的上端口灌入后，讓灌入的每種填充物平鋪均勻，且色 譜柱內(nèi)壁無填充物附著，灌裝硝酸銀硅膠時，硝酸銀硅膠灌裝好后，用錫箔紙包住色譜柱使 硝酸銀硅膠層避光，所有填充物灌裝完成后，打開色譜柱下端的旋轉(zhuǎn)活塞，在色譜柱的下端 口接入真空泵，打開真空泵，邊抽真空邊用軟木棒敲打色譜柱的外壁，當(dāng)色譜柱內(nèi)填充物的 高度不再下降時，繼續(xù)抽真空至少3分鐘后，旋緊色譜柱下端活塞；
[0019] 1. 3. 3打開色譜柱下端的活塞，使流入色譜柱的液體的流速最大，將二氯甲烷自色 譜柱上端口沿色譜柱內(nèi)壁緩緩注入色譜柱，使所有填充物全部被潤濕且無氣泡，當(dāng)色譜柱 內(nèi)各填充物層次清晰、形態(tài)均一時，停止注入二氯甲烷，最后用足量的環(huán)己烷洗脫色譜柱， 洗脫完畢后關(guān)閉色譜柱下端的活塞。
[0020] 對上述技術(shù)方案進行改進，步驟1)中，制備硝酸銀硅膠、硫酸硅膠和氫氧化鈉硅 膠時，用振蕩器震蕩的時間均為6?8個小時；每種填充物從色譜柱的上端口灌入后，先用 手輕輕搖動色譜柱，然后用軟木棒沿著色譜柱的外壁輕輕敲打，邊敲打邊旋轉(zhuǎn)色譜柱，直至 色譜柱內(nèi)壁無填充物附著；灌裝玻璃纖維時，邊敲打色譜柱邊旋轉(zhuǎn)色譜柱至色譜柱內(nèi)壁沒 有玻璃纖維附著后，用玻璃棒將玻璃纖維層的表面壓實壓平整。
[0021] 由上述技術(shù)方案可知，該方法對硅膠采用了不同的改性方法進行了改性，得到了 硝酸銀硅膠、硫酸硅膠和氫氧化鈉硅膠三種改性硅膠，硝酸銀硅膠能有效吸附含多溴聯(lián)苯 類化合物的基體中的硫和含硫化合物，硫酸硅膠能有效吸附含多溴聯(lián)苯類化合物的基體中 的堿性物質(zhì)、脂肪、蛋白質(zhì)和芳香族化合物，氫氧化鈉硅膠能有效吸附含多溴聯(lián)苯類化合物 的基體中的酸性物質(zhì)。在制備這三種改性硅膠的方法中，滴加硝酸銀溶液、硫酸和氫氧化鈉 溶液時滴加速度有嚴格要求，每滴加一滴硝酸銀溶液、濃硫酸或氫氧化鈉溶液后，都必須攪 拌至充分混合均勻后才能滴加下一滴，而且滴加完成后，必須用振蕩器震蕩6?8個小時。 采用這種方法制備的硝酸銀硅膠、硫酸硅膠和氫氧化鈉硅膠具有均勻性好、分散度高和吸 附雜質(zhì)的能力強等優(yōu)點。制備硝酸銀硅膠時，采用分段干燥的方法對硝酸銀硅膠進行干燥， 采用分段干燥，溫度上升平緩，硝酸銀硅膠內(nèi)部和外部都徹底而緩慢地干燥，解決了硝酸銀 硅膠容易發(fā)黑和結(jié)塊的問題。
[0022] 該方法中在色譜柱的最底層填充玻璃纖維，玻璃纖維性質(zhì)穩(wěn)定，不與其他化合物 反應(yīng)，在填充過程中將玻璃纖維層壓實壓平整，能有效支撐硅膠層和過濾固體雜質(zhì)。該方法 中各改性硅膠層之間填充硅膠作為緩沖層，能有效防止各改性硅膠層相互間進行反應(yīng)。該 方法中在色譜柱的最上層填充無水硫酸鈉，能有效去除基體中的水分。針對環(huán)境和食品中 的多溴聯(lián)苯類化合物類有機污染物，為消除雜質(zhì)的干擾，檢測出多溴聯(lián)苯類化合物類有機 污染物，該方法中色譜柱的填充物采用了特殊的填充順序和填充量，這種填充順序和填充 量有如下好處：最上層的硫酸鈉先去除樣品中的水分，硝酸銀硅膠去除硫和含硫化合物，硫 酸化硅膠去除樣品中的堿性化合物、脂肪、蛋白質(zhì)和芳香族化合物，最后氫氧化鈉化硅膠去 除酸性化合物，還可以中和從硫酸化硅膠層帶下的酸。
[0023] 該方法在填充過程中采用真空填充技術(shù)，使填充物質(zhì)均勻、致密，且填充物質(zhì)表面 平整，加入溶劑后，各填充物能被溶劑全部潤濕，各填充物形態(tài)均一、層次清晰，且色譜質(zhì)內(nèi) 無氣泡。
[0024] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果和優(yōu)點在于：
[0025] 該方法中制備的改性硅膠性能優(yōu)越，而且該方法中填充物的填充順序針對性強， 填充順序合理，因此，該方法制備的多層硅膠凈化色譜柱能克服復(fù)雜的基體效應(yīng)，能去除含 多溴聯(lián)苯類化合物類有機污染物基體中的多種雜質(zhì)，消除了對后續(xù)多溴聯(lián)苯類化合物類有 機污染物檢測產(chǎn)生的干擾。更重要的是，該方法制備的多層硅膠凈化色譜柱操作簡單，經(jīng)試 驗表明，使用該方法制備的多層硅膠色譜柱檢測多溴聯(lián)苯類化合物等有機污染物具有靈敏 度高、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好和回收率高的優(yōu)點。

【具體實施方式】
[0026] 為檢驗本發(fā)明提供的檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法 制備的多層硅膠凈化色譜柱的可行性和優(yōu)越性，在水和底泥中加入多溴聯(lián)苯醚及其代謝物 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，將含有多溴聯(lián)苯醚及其代謝物的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的水和底泥采用本發(fā)明提 供的檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法制備的多層硅膠凈化色譜 柱進行吸附分離，檢測經(jīng)多層硅膠凈化色譜柱吸附分離后的水和底泥中的多溴聯(lián)苯醚及其 代謝物的含量，根據(jù)檢出的結(jié)果濃度和已知的多溴聯(lián)苯醚及其代謝物濃度的差異，對該方 法制備的多層硅膠凈化色譜柱可行性和優(yōu)越性進行評估。
[0027] 實施例1
[0028] 1)制備多層硅膠凈化色譜柱
[0029] 稱取lOg硝酸銀，溶解在lOOmL水里，制成質(zhì)量百分濃度為10 %硝酸銀溶液。稱 取20g硝酸銀溶液，逐滴滴加到160g的硅膠60中，每滴加一滴都要用玻璃棒不停的攪動至 分散均勻。硝酸銀溶液滴加完畢后，用振蕩器將硝酸銀溶液與硅膠60的混合體系持續(xù)搖動 8個小時后，將所得物進行分段干燥處理，在50°C下烘烤3小時；在80°C下烘烤3小時；在 110°C下烘烤5小時，得到硝酸銀硅膠，整個過程都要避光，最后將硝酸銀硅膠儲存在棕色 玻璃瓶中。
[0030] 稱取55g質(zhì)量百分比濃度為97 %的濃硫酸，將濃硫酸逐滴滴加到70g的硅膠60 中，每滴加一滴都要用玻璃棒不停的攪動至分散均勻后再才能滴加下一滴。濃硫酸滴加完 畢后，用振蕩器將硫酸與硅膠60的混合體系震蕩6小時，得到硫酸硅膠，最后將硫酸硅膠儲 存在棕色玻璃瓶中。
[0031] 稱取4g氫氧化鈉，溶解在100mL水里，配制成濃度為lmol/L的氫氧化鈉溶液。稱 取33g氫氧化鈉溶液，逐滴滴加到66g的硅膠60中，每滴加一滴都要用玻璃棒不停的攪動 至分散均勻。氫氧化鈉溶液滴加完畢后，用振蕩器將氫氧化鈉溶液與娃膠60的混合體系震 蕩6小時，得到氫氧化鈉硅膠，最后將氫氧化鈉硅膠儲存在棕色玻璃瓶中。
[0032] 稱取200g硅膠60在240°C下烘烤10小時后備用，再稱取50g無水硫酸鈉在500°C 下烘烤12小時后備用。
[0033] 稱取3份質(zhì)量分別為2g、5g和2g的娃膠60,再稱取0. 5g玻璃纖維、3g氫氧化鈉 硅膠、12. 5g硫酸硅膠、3g硝酸銀硅膠和12. 5g無水硫酸鈉，取一支干燥潔凈的色譜柱，色譜 柱的內(nèi)徑為2cm，長度為19cm，按照玻璃纖維、娃膠602g、氫氧化鈉娃膠、娃膠605g、硫酸娃 膠、硅膠602g、硝酸銀硅膠和無水硫酸鈉的順序?qū)⒏魈畛湮镆来螐纳V柱的上端口灌入，每 種填充物從色譜柱的上端口灌入后，先用手輕輕搖動色譜柱，讓灌入的每種填充物平鋪均 勻，然后用軟木棒沿著色譜柱的外壁輕輕敲打，邊敲打邊旋轉(zhuǎn)色譜柱，使附著在色譜柱內(nèi)壁 上的微量硅膠滑落下去，直至色譜柱內(nèi)壁無填充物附著。灌裝玻璃纖維時，邊敲打色譜柱 邊旋轉(zhuǎn)色譜柱至色譜柱內(nèi)壁沒有玻璃纖維附著后，用玻璃棒將玻璃纖維層的表面壓實壓平 整，灌裝硝酸銀硅膠時，硝酸銀硅膠灌裝好后，用錫箔紙包住色譜柱使硝酸銀硅膠層避光。 所有填充物灌裝完成后，打開色譜柱下端的旋轉(zhuǎn)活塞，在色譜柱的下端口接入真空泵，打開 真空泵，邊抽真空邊用軟木棒敲打色譜柱的外壁，當(dāng)色譜柱內(nèi)填充物的高度不再下降時，繼 續(xù)抽真空3分鐘，關(guān)掉真空泵并卸下真空泵，旋緊色譜柱下端活塞。本實施例中所用的硅膠 60可以用其它的硅膠來代替。
[0034] 打開色譜柱下端的活塞至活塞，使流入色譜柱的液體的流速最大，將二氯甲烷自 色譜柱上端口沿色譜柱內(nèi)壁緩緩注入色譜柱，注意不要使填充物質(zhì)被二氯甲烷沖起，使填 充物全部被潤濕時且無氣泡，當(dāng)色譜柱柱內(nèi)各填充物層次清晰、形態(tài)均一時，停止注入二氯 甲烷，最后用50mL環(huán)己烷洗脫色譜柱，洗脫完畢后關(guān)閉色譜柱下端的活塞。
[0035] 2)對上述方法制備的多層硅膠凈化色譜柱進行評估
[0036] 量取500mL水樣，將水樣加入到2L分液漏斗，加入13種多溴聯(lián)苯醚混標(biāo)溶液 (BDE17、BDE28、BDE47、BDE66、BDE71、BDE85、BDE99、BDE100、BDE138、BDE153、BDE154、 BDE183、BDE190) ;8 種甲氧基多溴聯(lián)苯醚混標(biāo)溶液（2, -Me〇-BDE68、6-Me〇-BDE47、 5-Me〇-BDE47、4' -Me〇-BDE49、5' -Me0-BDE100、4' -Me0-BDE103、5' -Me〇-BDE99、 4' -Me〇-BDE101) ;7 種定量用同位素內(nèi)標(biāo) Surrogate internal standards 溶液 (13C12-BDE-28、13C12-BDE-47、 13C12-BDE-99、13C12-BDE-100、 13C12-BDE-153、13C12-BDE-154、 13C12-BDE-183)，設(shè)置3個加標(biāo)水平即0· 05 μ g/L、0. 2 μ g/L、0. 5 μ g/L。將溶液混合均勻并 平衡1?2h。
[0037] 加入60mL二氯甲烷進行萃取，萃取完畢后，在經(jīng)二氯甲烷潤洗的分液漏斗上疊上 濾紙，在濾紙上裝入體積大約為漏斗體積二分之一的無水硫酸鈉，將經(jīng)二氯甲烷萃取后的 混合物倒入漏斗中，并在漏斗的下端放一個濃縮瓶接收漏斗流出的液體。
[0038] 重復(fù)上述兩個步驟兩次，再用20mL二氯甲烷清洗分液漏斗，并在分液漏斗的下端 放一個濃縮瓶接收漏斗流出的液體。重復(fù)二氯甲烷清洗分液漏斗的步驟1次。
[0039] 將各濃縮瓶接收的液體混合，約220mL，然后濃縮至5mL并轉(zhuǎn)移至玻璃試管中，并 加入甲苯或異辛烷作為保護劑，再用氮吹儀濃縮至近干，最后加入2mL正己烷溶解濃縮后 的殘留物，得到正己烷提取液。
[0040] 將2mL正己烷提取液倒入多層硅膠凈化色譜柱中，用2mL的正己烷清洗玻璃試管， 總共清洗2次，并將清洗后的液體倒入多層硅膠凈化色譜柱中。先用50mL環(huán)己烷洗脫多層 硅膠凈化色譜柱，然后用40mL環(huán)己烷和10mL二氯甲烷的混合液體洗脫多層硅膠凈化色譜 柱，收集兩次洗脫多層硅膠凈化色譜柱時流出的液體，多層硅膠凈化色譜柱流出的液體即 為接收液，合并兩次收集的接收液并轉(zhuǎn)移至玻璃試管中，加入2mL甲苯或異辛烷作保護劑， 再用氮吹儀濃縮至近干，最后加入lmL正己烷溶解濃縮后的殘留物。
[0041] 用同位素稀釋法或GC-MS法測定正己烷溶解的殘留物中多溴聯(lián)苯類化合物的含 量，測定的結(jié)果為：
[0042] 水樣中多溴聯(lián)苯醚（13種）和甲氧基多溴聯(lián)苯醚（8種）在0· 05 μ g/L的加標(biāo)水 平下的回收率為：72%?90% ;
[0043] 水樣中多溴聯(lián)苯醚（13種）和甲氧基多溴聯(lián)苯醚（8種）在0. 2 μ g/L的加標(biāo)水平 下的回收率為：78%?103% ;
[0044] 水樣中多溴聯(lián)苯醚（13種）和甲氧基多溴聯(lián)苯醚（8種）在0. 5 μ g/L的加標(biāo)水平 下的回收率為：86%?102%。
[0045] 上述回收率的結(jié)果滿足歐盟指令（European Union document2002/657/EC)中的 相關(guān)要求。即P < lug/L時回收率需在50%?120%范圍內(nèi)，P指待測物的濃度。
[0046] 實施例2
[0047] 1)制備多層硅膠凈化色譜柱
[0048] 稱取20g硝酸銀，溶解在100mL水里，制成質(zhì)量百分濃度為20%硝酸銀溶液。稱取 20g硝酸銀溶液，逐滴滴加到200g的硅膠60中，每滴加一滴都要用玻璃棒不停的攪動至分 散均勻后才能滴加下一滴。硝酸銀溶液滴加完畢后，用振蕩器將硝酸銀溶液與硅膠60的混 合體系持續(xù)搖動6個小時后，將所得物進行分段干燥處理，在70°C下烘烤2小時；在100°C 下烘烤2小時；在130°C下烘烤4小時，得到硝酸銀硅膠，整個過程都要避光，最后將硝酸銀 硅膠儲存在棕色玻璃瓶中。
[0049] 稱取55g的濃度為95 %的濃硫酸，將濃硫酸逐滴滴加到90g的硅膠60中，每滴加 一滴都要用玻璃棒不停的攪動至分散均勻。濃硫酸滴加完畢后，用振蕩器將濃硫酸與硅膠 60的混合體系震蕩8小時，得到硫酸硅膠，最后將硫酸硅膠儲存在棕色玻璃瓶中。
[0050] 稱取4. 8g氫氧化鈉，溶解在100mL水里，配制成濃度為L 2mol/L的氫氧化鈉溶 液。稱取33g氫氧化鈉溶液，逐滴滴加到99g的硅膠60中，每滴加一滴都要用玻璃棒不停 的攪動至分散均勻。氫氧化鈉溶液滴加完畢后，用振蕩器將氫氧化鈉溶液與硅膠60的混合 體系震蕩8小時，得到氫氧化鈉硅膠，最后將氫氧化鈉硅膠儲存在棕色玻璃瓶中。
[0051] 稱取200g硅膠60在260°C下烘烤12小時后備用，再稱取50g無水硫酸鈉在550°C 下烘烤12小時后備用。
[0052] 稱取3份質(zhì)量分別為3g、7. 5g和3g的硅膠60,再稱取lg玻璃纖維、4. 5g氫氧化 鈉硅膠、15g硫酸硅膠、4. 5g硝酸銀硅膠和15g無水硫酸鈉，取一支干燥潔凈的色譜柱，色譜 柱的內(nèi)徑為2. 5cm，長度為25cm，按照玻璃纖維、娃膠603g、氫氧化鈉娃膠、娃膠607. 5g、硫 酸硅膠、硅膠603g、硝酸銀硅膠和無水硫酸鈉的順序?qū)⒏魈畛湮镆来螐纳V柱的上端口灌 入，每種填充物從色譜柱的上端口灌入后，先用手輕輕搖動色譜柱，讓灌入的各填充物平鋪 均勻，然后用軟木棒沿著色譜柱的外壁輕輕敲打，邊敲打邊旋轉(zhuǎn)色譜柱，使附著在色譜柱內(nèi) 壁上的微量硅膠滑落下去，直至色譜柱內(nèi)壁無填充物附著。灌裝玻璃纖維時，邊敲打色譜柱 邊旋轉(zhuǎn)色譜柱至色譜柱內(nèi)壁沒有玻璃纖維附著后，用玻璃棒將玻璃纖維層的表面壓實壓平 整。灌裝硝酸銀硅膠時，硝酸銀硅膠灌裝好后，用錫箔紙包住色譜柱使硝酸銀硅膠層避光。 所有填充物灌裝完成后，打開色譜柱下端的旋轉(zhuǎn)活塞，在色譜柱的下端口接入真空泵，打開 真空泵，邊抽真空邊用軟木棒敲打色譜柱的外壁，當(dāng)色譜柱內(nèi)填充物的高度不再下降時，繼 續(xù)抽真空5分鐘，關(guān)掉真空泵并卸下真空泵，旋緊色譜柱下端活塞。
[0053] 打開色譜柱下端的活塞至活塞，使流入色譜柱的液體的流速最大，將二氯甲烷自 色譜柱上端口沿色譜柱內(nèi)壁緩緩注入色譜柱，注意不要使填充物質(zhì)被二氯甲烷沖起，使填 充物全部被潤濕時且無氣泡，當(dāng)色譜柱柱內(nèi)各填充物層次清晰、形態(tài)均一時，停止注入二氯 甲烷，最后用80mL環(huán)己烷洗脫色譜柱，洗脫完畢后關(guān)閉色譜柱下端的活塞。
[0054] 2)對上述方法制備的多層硅膠凈化色譜柱進行評估
[0055] 稱取10g底泥樣品加入到研磨器中，加入3g無水硫酸鈉（加入無水硫酸鈉是為 了吸收樣品中的水分），再加入13種多溴聯(lián)苯醚混標(biāo)溶液（BDE17、BDE28、BDE47、BDE66、 BDE71、BDE85、BDE99、BDE100、BDE138、BDE153、BDE154、BDE183、BDE190) ;8 種甲氧基多溴聯(lián) 苯醚混標(biāo)溶液（2，-Me〇-BDE68、6-Me〇-BDE47、5-Me〇-BDE47、4，-Me〇-BDE49、5，-Me〇-BDE 100、 4' -Me0-BDE103、5' -Me〇-BDE99、4' -MeO-BDElOl) ;7 種定量用同位素內(nèi)標(biāo) Surrogate internal standards 溶液（13C12-BDE-28、13C12-BDE-47、 13C12-BDE-99、13C12-BDE-100、 13C12-BDE-153、13C12-BDE-154、 13C12-BDE-183)，設(shè)置 3 個加標(biāo)水平即 2. 5μ g/kg、10y g/kg、 25 μ g/kg。將溶液混合均勻并平衡1?2h，轉(zhuǎn)移到濾紙筒中。
[0056] 加入125mL丙酮和125mL二氯甲烷的混合液體，再采用索氏提取的方法提取16個 小時，并收集提取后的提取液，提取液約250mL。將提取液濃縮至5?10mL后，轉(zhuǎn)移至玻璃 試管中，加入2mL甲苯或異辛烷作保護劑，再用氮吹儀濃縮至近干，最后加入2mL正己烷溶 解濃縮后的殘留物，得到正己烷提取液。
[0057] 將2mL正己烷提取液倒入多層硅膠凈化色譜柱中，用2mL的正己烷清洗玻璃試管， 總共清洗2次，并將清洗后的液體倒入多層硅膠凈化色譜柱中。先用50mL環(huán)己烷洗脫多層 硅膠凈化色譜柱，然后用40mL環(huán)己烷和10mL二氯甲烷的混合液體洗脫多層硅膠凈化色譜 柱，收集兩次洗脫多層硅膠凈化色譜柱時流出的液體，多層硅膠凈化色譜柱流出的液體即 為接收液，合并兩次收集的接收液并轉(zhuǎn)移至玻璃試管中，加入2mL甲苯或異辛烷作保護劑，
【權(quán)利要求】
1.檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法，其特征在于包括如下步 驟： 1. 1多層硅膠凈化色譜柱填充物硝酸銀硅膠、硫酸硅膠和氫氧化鈉硅膠的制備： 1. 1. 1硝酸銀硅膠的制備： 配制質(zhì)量百分濃度為10%?20%的硝酸銀溶液，按質(zhì)量比硝酸銀溶液：硅膠=1:8? 10,在攪拌和避光條件下將硝酸銀溶液滴加到硅膠中，每滴加一滴硝酸銀溶液都要攪拌至 分散均勻后再滴加下一滴硝酸銀溶液，硝酸銀溶液滴加完畢后，在避光條件下用振蕩器將 硝酸銀溶液與硅膠的混合體系持續(xù)震蕩至反應(yīng)完畢后，在避光條件下進行分段干燥，先在 50?70°C下烘烤2?3小時，然后在80?100°C下烘烤2?3小時，再在110?130°C下 烘烤4?5小時，得到硝酸銀硅膠； 1. 1. 2硫酸硅膠的制備： 按質(zhì)量比濃硫酸：硅膠=11:14?18,在攪拌條件下將質(zhì)量百分比濃度為95%?97% 的濃濃硫酸滴加到硅膠中，每滴加一滴濃硫酸都要攪拌至分散均勻后再滴加下一滴濃硫 酸，濃硫酸滴加完畢后，用振蕩器將濃硫酸與硅膠的混合體系持續(xù)震蕩至反應(yīng)完畢，得到硫 酸硅膠； 1. 1. 3氫氧化鈉硅膠的制備： 按質(zhì)量比氫氧化鈉溶液：硅膠=1:2?3,在攪拌條件下將濃度為0· 8mol/L?1. 2mol/ L的氫氧化鈉溶液滴加到硅膠中，每滴加一滴氫氧化鈉溶液都要攪拌至分散均勻后再滴加 下一滴氫氧化鈉溶液，滴加完畢后，用振蕩器將氫氧化鈉溶液與娃膠的混合體系持續(xù)震蕩 至反應(yīng)完畢，得到氫氧化鈉硅膠； 1. 2多層硅膠凈化色譜柱填充物硅膠和無水濃硫酸鈉的處理： 將硅膠在240?260°C下烘烤10?12小時后備用，再將無水濃硫酸鈉在500?600°C 下烘烤10?12小時后備用； 1. 3多層硅膠凈化色譜柱的填充： 1. 3. 1多層硅膠凈化色譜柱中從下至上各填充物的填充順序和質(zhì)量份為： ① 玻璃纖維 1?2份； ② 硅膠 4?6份； ③ Μ氣化鈉 tt膠 6?9份； ④ 硅膠 10?15份； ⑤ 硫_硅膠 25?30份； ⑥ tt膠 4?6份； ⑦ 硝酸《硅膠 6?9份; ⑧ 無水濃硫變鈉 25?30份； 1. 3. 2取一支干燥潔凈的色譜柱，所述色譜柱內(nèi)徑與長度之比為1:8?10,按步驟 1. 3. 1所述質(zhì)量份稱取各填充物，再按照步驟1. 3. 1的填充順序?qū)⒏魈畛湮镆来螐纳V柱 的上端口灌入，每種填充物從色譜柱的上端口灌入后，讓灌入的每種填充物平鋪均勻，且色 譜柱內(nèi)壁無填充物附著，灌裝硝酸銀硅膠時，硝酸銀硅膠灌裝好后，用錫箔紙包住色譜柱使 硝酸銀硅膠層避光，所有填充物灌裝完成后，打開色譜柱下端的旋轉(zhuǎn)活塞，在色譜柱的下端 口接入真空泵，打開真空泵，邊抽真空邊用軟木棒敲打色譜柱的外壁，當(dāng)色譜柱內(nèi)填充物的 高度不再下降時，繼續(xù)抽真空至少3分鐘后，旋緊色譜柱下端活塞； 1. 3. 3打開色譜柱下端的活塞，使流入色譜柱的液體的流速最大，將二氯甲烷自色譜柱 上端口沿色譜柱內(nèi)壁緩緩注入色譜柱，使所有填充物全部被潤濕且無氣泡，當(dāng)色譜柱內(nèi)各 填充物層次清晰、形態(tài)均一時，停止注入二氯甲烷，最后用足量的環(huán)己烷洗脫色譜柱，洗脫 完畢后關(guān)閉色譜柱下端的活塞。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法，其 特征在于：步驟1)中，制備硝酸銀硅膠、硫酸硅膠和氫氧化鈉硅膠時，用振蕩器震蕩的時間 均為6?8個小時。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法，其 特征在于：每種填充物從色譜柱的上端口灌入后，先用手輕輕搖動色譜柱，然后用軟木棒沿 著色譜柱的外壁輕輕敲打，邊敲打邊旋轉(zhuǎn)色譜柱，直至色譜柱內(nèi)壁無填充物附著。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測多溴聯(lián)苯類化合物的多層硅膠凈化色譜柱的制備方法，其 特征在于：灌裝玻璃纖維時，邊敲打色譜柱邊旋轉(zhuǎn)色譜柱至色譜柱內(nèi)壁沒有玻璃纖維附著 后，用玻璃棒將玻璃纖維層的表面壓實壓平整。
【文檔編號】B01J20/281GK104084180SQ201410308520
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年6月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月30日
【發(fā)明者】胡小鐘, 胡德聰, 陳魏 申請人:中華人民共和國湖北出入境檢驗檢疫局