分子印跡聚合物修飾毛細(xì)管色譜柱的制備
【專利摘要】本發(fā)明屬于無機(jī)化學(xué)與有機(jī)化學(xué)的交叉學(xué)科領(lǐng)域，公開一種分子印跡聚合物修飾毛細(xì)管色譜柱的制備。石英毛細(xì)管，先用硅烷化試劑AMS修飾，其次將1?乙基?(3?二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺單體，EGDMA交聯(lián)劑，AIBN引發(fā)劑溶解于甲苯中，在磷酸鹽緩沖溶液(pH7.0)，存在的條件下，再加入目標(biāo)分子蛋白質(zhì)(催產(chǎn)素或牛血清蛋白的抗原決定簇)，攪拌制成溶液，超聲脫氣。用注射器將此溶液加入上述已修飾好的毛細(xì)管中，毛細(xì)管兩端密封，放在氣相色譜柱溫箱內(nèi)，恒溫75℃，10h，將目標(biāo)分子的N端與?COOH結(jié)合。用無水乙腈洗滌，除去聚合物混合液和印跡分子，然后用氮?dú)鉀_刷，即得毛細(xì)管色譜柱。本發(fā)明制備的毛細(xì)管色譜柱在分離、提純生物大分子方面具有重要的應(yīng)用前景。
【專利說明】
分子印跡聚合物修飾毛細(xì)管色譜柱的制備
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于無機(jī)化學(xué)與有機(jī)化學(xué)交叉學(xué)科技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種分子印跡聚合物修飾毛細(xì)管譜柱的制備。
【背景技術(shù)】
[0002]液相色譜柱的制備目前主要用化學(xué)鍵合法來完成。各種柱子由于化學(xué)健合的物質(zhì)不同，可分離的化合物各類相差很大。加之現(xiàn)代高壓栗技術(shù)、檢測(cè)技術(shù)的提高，液相毛細(xì)管柱開始普遍使用，但傳統(tǒng)的分析制備柱，在實(shí)驗(yàn)室、生產(chǎn)方面仍有不可替代的作用。
[0003]分子印跡聚合物在電化學(xué)、光化學(xué)、質(zhì)量型傳感器、化學(xué)模擬酶催化、臨床藥物分析中起重要的作用。
[0004]我們合成了一種分子印跡聚合物(MIP)修飾的毛細(xì)管譜柱，可用于生物蛋白質(zhì)大分子的分離、提純測(cè)定。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是制備一種分子印跡聚合物修飾毛細(xì)管譜柱，可用于生物蛋白質(zhì)大分子的分離、提純測(cè)定目標(biāo)物。該方法可高效、簡單方便地制備毛細(xì)管色譜柱。
[0006]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下顯著優(yōu)點(diǎn):
[0007]1、分子印跡聚合物修飾毛細(xì)管。
[0008]2、此分子印跡聚合物修飾毛細(xì)管可用生物蛋白質(zhì)大分子的分離、提純測(cè)定。
[0009]3、此法克服現(xiàn)有蛋白質(zhì)印跡技術(shù)中蛋白質(zhì)易變性、模板分子易被包埋和難洗脫、傳質(zhì)速度慢、結(jié)合容量低等缺點(diǎn)，并建立一套簡單且能普遍應(yīng)用的MIP薄膜的制備方法。在生物、醫(yī)藥方面具有很好的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0010]實(shí)施例1
[0011]1、毛細(xì)管分別用1.0mol/L NaOH、去離子水、1.0mol/L HCl、高純水各沖洗20min，取出在110°C下干燥10h。然后加入硅烷化試劑3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MAS)甲苯溶液(1:1，V/V)40mL，電磁攪拌恒溫35 °C，2h，然后用甲苯?jīng)_洗除去過量的MAS。
[0012]2、將0.05g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺(EDCD)單體，0.05g乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)交聯(lián)劑，4.0mg偶氮二異丁腈(AIBN)引發(fā)劑溶解于2.5mL甲苯中，然后加入1.5mL磷酸鹽緩沖溶液(pH7.0)，再加入目標(biāo)分子蛋白質(zhì)(0.05g催產(chǎn)素或牛血清蛋白的抗原決定簇)，攪拌制成溶液，超聲脫氣lOmin。用注射器將此溶液加入上述已修飾好的毛細(xì)管中，毛細(xì)管兩端密封，放在氣相色譜柱溫箱內(nèi)，恒溫75°C，10h，將目標(biāo)分子的N端與-C00H
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[0013]3、用1mL無水乙腈洗滌，除去聚合物混合液和印跡分子，再用20mL高純水沖洗，然后用氮?dú)鉀_刷20min。
[0014]實(shí)施例2
[0015]1、毛細(xì)管分別用1.0mol/L NaOH、去離子水、1.0mol/L HCl、高純水各沖洗20min，取出在110°C下干燥10h。然后加入硅烷化試劑3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MAS)甲苯溶液(1:1，V/V)40mL，電磁攪拌恒溫35 °C，2h，然后用甲苯?jīng)_洗除去過量的MAS。
[0016]2、將0.lg 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺(EDCD)單體，0.1g乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)交聯(lián)劑，8.0mg偶氮二異丁腈(AIBN)引發(fā)劑溶解于5.0mL甲苯中，然后加入3.0mL磷酸鹽緩沖溶液(pH7.0)，再加入目標(biāo)分子蛋白質(zhì)(0.lg催產(chǎn)素或牛血清蛋白的抗原決定簇)，攪拌制成溶液，超聲脫氣lOmin。用注射器將此溶液加入上述已修飾好的毛細(xì)管中，毛細(xì)管兩端密封，放在氣相色譜柱溫箱內(nèi)，恒溫75°C，10h，將目標(biāo)分子的N端與-C00H結(jié)入口 ο
[0017]3、用20mL無水乙腈洗滌，除去聚合物混合液和印跡分子，再用20mL高純水沖洗，然后用氮?dú)鉀_刷20min。
[0018]實(shí)施例3
[0019]1、毛細(xì)管分別用1.0mol/L NaOH、去離子水、1.0mol/L HCl、高純水各沖洗20min，取出在110°C下干燥10h。然后加入硅烷化試劑3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MAS)甲苯溶液(1:1，V/V)40mL，電磁攪拌恒溫35 °C，2h，然后用甲苯?jīng)_洗除去過量的MAS。
[0020]2、將0.15g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺(EDCD)單體，0.15g乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)交聯(lián)劑，12.0mg偶氮二異丁腈(AIBN)引發(fā)劑溶解于8.0mL甲苯中，然后加入4.0mL磷酸鹽緩沖溶液(pH7.0)，再加入目標(biāo)分子蛋白質(zhì)(0.15g催產(chǎn)素或牛血清蛋白的抗原決定簇)，攪拌制成溶液，超聲脫氣lOmin。用注射器將此溶液加入上述已修飾好的毛細(xì)管中，毛細(xì)管兩端密封，放在氣相色譜柱溫箱內(nèi)，恒溫75°C，10h，將目標(biāo)分子的N端與-C00H結(jié)合。
[0021]3、用30mL無水乙腈洗滌，除去聚合物混合液和印跡分子，再用20mL高純水沖洗，然后用氮?dú)鉀_刷20min。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.分子印跡聚合物修飾毛細(xì)管色譜柱的制備，其特征在于:石英毛細(xì)管的烷基化，分子印跡溶液的制備，分子印跡溶液的裝柱和固化。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的石英毛細(xì)管的烷基化，其特征在于:毛細(xì)管分別用NaOH、去離子水、HC1、高純水各沖洗20min，取出在110°C下干燥10h。然后加入一定體積的硅烷化試劑3_(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MAS)甲苯溶液(1:1，V/V)，電磁攪拌恒溫35°C，2h，然后用甲苯?jīng)_洗除去過量的MAS。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分子印跡溶液的制備，其特征在于:一定量的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺(EDCD)單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯(E⑶MA)交聯(lián)劑，偶氮二異丁腈(AIBN)引發(fā)劑溶解于一定量的甲苯中，然后加入一定體積的磷酸鹽緩沖溶液(pH7.0)，再加入目標(biāo)分子蛋白質(zhì)(催產(chǎn)素或牛血清蛋白的抗原決定簇)，攪拌制成溶液，超聲脫氣1min04.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分子印跡溶液的裝柱和固化，其特征在于:用注射器將分子印跡溶液加入上述已修飾好的毛細(xì)管中，毛細(xì)管兩端密封，放在氣相色譜柱溫箱內(nèi)，恒溫75 0C范圍內(nèi)，10h，將目標(biāo)分子的N端與-COOH結(jié)合。然后用1mL無水乙腈洗滌，除去聚合物混合液和印跡分子，再用20mL高純水沖洗，然后用氮?dú)鉀_刷20min。
【文檔編號(hào)】B01D15/26GK106040201SQ201610579149
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年7月7日 公開號(hào)201610579149.9, CN 106040201 A, CN 106040201A, CN 201610579149, CN-A-106040201, CN106040201 A, CN106040201A, CN201610579149, CN201610579149.9
【發(fā)明人】董彥杰, 王偉, 王鈞偉, 何承東, 張?jiān)獜V
【申請(qǐng)人】安慶師范大學(xué)