專利名稱：一種蛋白芯片的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及檢測和分析基因表達產物蛋白質和多肽的技術領域。
從理論上講，蛋白芯片技術具有快速高效、靈敏特異、操作簡便、廉價實用等優(yōu)點，在眾多生命學科如預防醫(yī)學、基礎醫(yī)學、臨床醫(yī)學等領域具有十分廣泛的應用前景。在蛋白芯片技術中，芯片基質是核心構件之一，尋找和研制具有良好性能的蛋白芯片基質材料是當前該領域中急待解決的問題之一。目前，正在研制的蛋白芯片多采用玻璃片作為芯片的基質材料，這種基質材料存在兩個嚴重的缺陷(1)蛋白質吸附能力差，直接影響蛋白芯片技術的靈敏性和穩(wěn)定性；(2)生物分子反應必須在固相狀態(tài)下進行，反應速度很慢，需2小時才能達到反應平衡。
本發(fā)明的目的是提供一種高蛋白質吸附容量、靈敏性高和穩(wěn)定性好的蛋白芯片。
本發(fā)明進一步的目的是在實現上述目的的基礎上，提供一種可以使生物分子反應速度快的蛋白芯片。
為實現本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用以下技術方案它包括基質材料及設于基質材料上的捕獲探針，所述基質材料是指孔徑0.6微米以下的多孔纖維素膜。
為實現本發(fā)明進一步的目的，在采用以上技術方案的同時，本發(fā)明再采用以下進一步的技術方案所述纖維素膜孔徑的優(yōu)選范圍是0.2-0.6微米。
上述纖維素膜孔徑的最優(yōu)范圍是0.2-0.45微米。
上述纖維素膜的優(yōu)選是聚偏二氟乙烯印跡膜(即PVDF膜)。。
上述纖維素膜的優(yōu)選是硝酸纖維素膜。
所述捕獲探針是以微陣列方式噴印在多孔纖維素膜上。
由于采用上述技術方案，纖維素膜與玻璃片相比，不僅具有很高的蛋白質吸附能力，對蛋白質的吸附上限可達每平方厘米80微克牛血清白蛋白，而且被吸附的蛋白質在膜表面分布十分均勻，以此作為基質材料的蛋白芯片靈敏性高和穩(wěn)定性好。具有進一步效果的是，纖維素膜還可做成多孔狀，孔徑采用0.2-0.6微米，尤其是0.2-0.45微米，可使參與反應的生物分子在反應腔室中膜的上下自由運動，反應處在高速動態(tài)反應狀態(tài)，大大縮短了反應時間，反應平衡時間只需5分鐘以下，同時也有益于蛋白芯片的靈敏性和穩(wěn)定性。
下面結合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步描述。


圖1為本發(fā)明的放大示意圖。
實施例1本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.3微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是PVDF膜。
實施例2本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.35微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是PVDF膜。
實施例3本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.25微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是硝酸纖維素膜。
實施例4本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.4微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是硝酸纖維素膜。
實施例5本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.2微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是醋酸纖維素膜。
實施例6本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.45微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是硝酸醋酸混合纖維素膜。
實施例7本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.15微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是硝酸纖維素膜。
實施例8本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.5微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是PVDF膜。
實施例9本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.1微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是硝酸纖維素膜。
實施例10本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.55微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是PVDF膜。
實施例11本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.05微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是醋酸纖維素膜。
實施例12本發(fā)明包括基質材料1及設于基質材料上的捕獲探針2，所述基質材料是孔徑0.6微米的多孔纖維素膜，該纖維素膜是硝酸醋酸混合纖維素膜。
本發(fā)明可采用以下方法制造(1)用不銹鋼無菌手術刀片裁取所需大小及所需孔徑的多孔纖維素膜，如1平方厘米的0.2微米孔徑PVDF膜，浸入無水甲醇中5分鐘；(2)用無菌平頭鑷子將該膜轉入0.1M PBS、PH7.4的緩沖液中浸沒5分鐘，取出置室溫涼干；(3)用微量噴印設備將捕獲探針以微陣列形式噴印到PVDF膜上，每點0.5微升，室溫涼干；(4)用含有1％的牛血清白蛋白的0.1MPBS、PH7.4的緩沖液，37℃封閉1小時；(5)80℃真空干燥2小時即為制備好的蛋白芯片。
權利要求
1.一種蛋白芯片，包括基質材料及設于基質材料上的捕獲探針，其特征在于所述基質材料是指孔徑0.6微米以下的多孔纖維素膜。
2.如權利要求1所述的一種蛋白芯片，其特征在于所述纖維素膜孔徑的優(yōu)選范圍是0.2-0.6微米。
3.如權利要求1所述的一種蛋白芯片，其特征在于所述纖維素膜孔徑的最優(yōu)范圍是0.2-0.45微米。
4.如權利要求1所述的一種蛋白芯片，其特征在于所述纖維素膜的優(yōu)選是聚偏二氟乙烯印跡膜(即PVDF膜)。
5.如權利要求1所述的一種蛋白芯片，其特征在于所述纖維素膜的優(yōu)選是硝酸纖維素膜。
6.如權利要求1、2、3、4或5所述的一種蛋白芯片，其特征在于所述捕獲探針是以微陣列方式噴印在多孔纖維素膜上。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種蛋白芯片,它包括基質材料及設于其上的捕獲探針,所述基質材料是指孔徑0.6微米以下的多孔纖維素膜。所述纖維素膜孔徑的優(yōu)選范圍是0.2－0.6微米,最優(yōu)范圍是0.2－0.45微米。本發(fā)明不僅具有很高的蛋白質吸附能力,對蛋白質的吸附上限可達每平方厘米80微克牛血清白蛋白,而且被吸附的蛋白質在膜表面分布十分均勻,靈敏性高和穩(wěn)定性好,反應處在高速動態(tài)反應狀態(tài),大大縮短了反應時間,反應平衡時間只需5分鐘以下。
文檔編號G01N33/68GK1368639SQ0110352
公開日2002年9月11日 申請日期2001年2月2日 優(yōu)先權日2001年2月2日
發(fā)明者徐榮臻, 鄭樹 申請人:徐榮臻, 鄭樹