專利名稱：六味地黃制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及六味地黃制劑，特別是六味地黃軟件囊的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
六味地黃丸是滋補腎陰的代表方，用于腎陰虧損，頭暈耳鳴，腰膝酸軟，骨蒸潮熱，盜汗遺精，消渴。近代對其作了許多研究，認為它具有增強人體機能、調(diào)整和提高人體的代謝功能的作用。在此基礎(chǔ)上，為服用方便、提高療效等目的，研制了許多除蜜丸外的其他劑型，如水丸、口服液、軟膠囊等。軟膠囊為我公司產(chǎn)品，部頒質(zhì)量標準中，定性鑒別方法包括薄層色譜法定性鑒別產(chǎn)品中的熊果酸和丹皮酚，沒有產(chǎn)品的定量質(zhì)控方法，為了更好地控制六味地黃軟膠囊的成品質(zhì)量，使之達到穩(wěn)定、可控、均一，我們對原部頒標準進行標準提高。通過試驗研究，在原質(zhì)量標準基礎(chǔ)上增加了薄層色譜法定性鑒別產(chǎn)品中的熟地黃和澤瀉這二個專屬性較強的鑒別方法，并將原質(zhì)量標準中丹皮酚的薄層色譜鑒別方法修訂為氣相色譜鑒別；增加二個含量測定項，即采用薄層掃描法測定熊果酸含量，采用毛細管柱氣相色譜法測定丹皮酚含量。通過改進質(zhì)量標準，對本品的工藝要求更嚴格，同時質(zhì)量標準更嚴謹，科學(xué)。這些質(zhì)量控制方法不僅適用于六味地黃軟膠囊，而且適用于以六味地黃的處方制備的任何劑型的六味地黃類制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供六味地黃類制劑，尤其是六味地黃軟膠囊的新的質(zhì)量控制方法。其內(nèi)容如下含量測定1.氣相色譜法測定產(chǎn)品中丹皮酚的含量 照氣相色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIE)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 5％二苯基-95％二甲基硅烷共聚物為固定相的毛細管色譜柱(30m×0.32mm×0.25μm)；進樣口溫度240℃；檢測器溫度(FID)240℃；分流進樣測定(分流比為50∶1)；柱溫150℃；載氣流速1.0ml/min；理論板數(shù)按丹皮酚峰計算應(yīng)不低于25000；丹皮酚峰與內(nèi)標物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于1.5。
校正因子測定 取正十五烷對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成確定濃度的溶液，作為內(nèi)標溶液。另取丹皮酚對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成與內(nèi)標溶液相近濃度的溶液，搖勻即得。精密量取對照品溶液及內(nèi)標溶液各適量，置同一容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取適量體積的溶液注入氣相色譜儀，計算校正因子。
測定法 精密取符合裝量差異標準的產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物適量，以無水乙醇適量提取，定容。精密量取提取液及內(nèi)標溶液各適量，置適當體積的容量瓶中，加無水乙醇定容，搖勻，精密吸取適量體積，注入氣相色譜儀，測定，即得。
2.薄層掃描法測定產(chǎn)品中熊果酸的含量 精密取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物適量，以甲醇提取，定容，作為供試品溶液；另取熊果酸對照品，加甲醇制成確定濃度的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000年一部附錄VIB)試驗，精密吸取供試品溶液，并定量吸取不同體積的對照品溶液，供試品溶液與每一體積的對照品溶液分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸(12∶4∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在110℃烘至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層掃描法)進行掃描，波長λS＝520nm，λR＝700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
鑒別
(1)取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物適量，加乙醇提取，提取液蒸干，殘渣加少量乙醇溶解，作為供試品溶液。另取熟地黃對照藥材適量，提取后制成對照藥材的甲醇溶液；照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部 附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(70∶30∶5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，105℃烘至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)丹皮酚的定性鑒別 用無水乙醇提取產(chǎn)品制成供試品溶液，制備丹皮酚標準品的無水乙醇溶液為對照品溶液，按[含量測定]項下的氣相色譜條件測定，色譜圖中，供試品主峰保留時間應(yīng)與對照品一致。
(3)取澤瀉對照藥材適量，以乙醇提取，提取液蒸干，殘渣加甲醇適量使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液及[鑒別](1)項下的供試品溶液各適量，點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘數(shù)分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
定量及定性鑒別方法中所述的提取包括超聲波提取、回流。
以上定量及定性質(zhì)量控制方法是基于六味地黃組方而制定的，不僅適用于六味地黃軟膠囊，而且適于作為以六味地黃的組方制備的任何劑型的產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法。
實施例實施例1制備六味地黃軟膠囊取原料熟地黃480g，山茱萸(制)240g，牡丹皮180g，山藥240g，茯苓180g，澤瀉180g。
以上六味，牡丹皮蒸餾，提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集；山茱萸用70％乙醇回流提取二次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液備用；熟地黃、山藥、澤瀉加水煎煮二次，第一次2小時，第二次1小時，合并煎液，濾過，濾液與牡丹皮蒸餾后的水溶液合并，減壓濃縮至相對密度為1.15～1.20(50℃熱測)的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達70％，靜置48小時，取上清液與上述山茱萸提取液合并，減壓回收乙醇至無醇味，備用；茯苓加水煮沸后，于80℃溫浸二次，每次1.5小時，合并浸出液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.15～1.20(50℃熱測)的清膏，與上述備用液合并，濃縮至相對密度為1.30(50℃熱測)的稠膏，減壓干燥，粉碎成細粉，加入牡丹皮揮發(fā)油及植物油、適量輔料，混勻，制成軟膠囊1000粒，即得。
本品為軟膠囊，內(nèi)容物為棕褐色粘稠狀液體；味甜，微酸。每粒含內(nèi)容物0.38g?？诜?，一次3粒，一日2次。
實施例2氣相色譜法測定六味地黃軟膠囊中牡丹皮的含量色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 5％二苯基-95％二甲基硅烷共聚物為固定相的毛細管色譜柱(30m×0.32mm×0.25μm)；進樣口溫度240℃；檢測器溫度(FID)240℃；分流進樣測定(分流比為50∶1)；柱溫150℃；載氣流速1.0ml/min；理論板數(shù)按丹皮酚峰計算應(yīng)不低于25000；丹皮酚峰與內(nèi)標物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于1.5。
校正因子測定 取正十五烷對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，搖勻，作為內(nèi)標溶液。另取丹皮酚對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含丹皮酚1mg的溶液，搖勻，即得。精密量取對照品溶液2ml及內(nèi)標溶液1ml置10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，吸取5μl，注入氣相色譜儀，計算校正因子。
測定法 取符合裝量差異標準的六味地黃軟膠囊內(nèi)容物約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇20ml，密塞，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，稱定重量，用無水乙醇補足減失重量，搖勻，離心。精密量取上清液5ml及內(nèi)標溶液1ml，置10ml量瓶中，加無水乙醇至刻度，搖勻，吸取5μl，注入氣相色譜儀，測定，即得。
本品每粒含牡丹皮以丹皮酚(C9H10O3)計，應(yīng)不得少于0.80mg。
實施例3薄層掃描法測定六味地黃軟膠囊中山茱萸的含量取本品內(nèi)容物10g，精密稱定，精密加入甲醇40ml，密塞，稱定重量，超聲提取40分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，離心，精密量取上清液20ml，水浴蒸至適量，殘渣用甲醇溶解至5ml量瓶內(nèi)，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取熊果酸對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000年一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液5μl、對照品溶液4μl與8μl，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸(12∶4∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在110℃烘至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層掃描法)進行掃描，波長λS＝520nm，λR＝700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
本品每粒含山茱萸以熊果酸(C30H48O3)計，不得少于0.11mg。
實施例4薄層色譜法定性鑒別六味地黃軟膠囊中的熟地黃取本品內(nèi)容物1g，加乙醇20ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加5ml乙醇使溶解，作為供試品溶液。另取熟地黃對照藥材1g，加乙醇20ml，置水浴中加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(70∶30∶5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，105℃烘至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
實施例5薄層色譜法定性鑒別六味地黃軟膠囊中的澤瀉取澤瀉對照藥材0.5g，研碎，加乙醇20ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液及按實施例4方法制備的供試品溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘數(shù)分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
實施例6氣相色譜法定性鑒別六味地黃軟膠囊中的牡丹皮取本品內(nèi)容物1g，加無水乙醇10ml，超聲提取20分鐘，濾過，作為供試品溶液。取丹皮酚標準品，以無水乙醇制成每1ml含丹皮酚約1mg的溶液，作為對照品溶液，按實施例2氣相色譜法測定產(chǎn)品中丹皮酚含量的氣相色譜條件測定，色譜圖中，供試品主峰保留時間應(yīng)與對照品一致。
權(quán)利要求
1.一種六味地黃制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下含量測定中的一種或二種a.氣相色譜法測定丹皮酚含量色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗5％二苯基-95％二甲基硅烷共聚物為固定相的毛細管色譜柱，柱參數(shù)為30m×0.32mm×0.25μm；進樣口溫度240℃；FID檢測器溫度240℃；分流進樣測定分流比為50∶1；柱溫150℃；載氣流速1.0ml/min；理論板數(shù)按丹皮酚峰計算應(yīng)不低于25000；丹皮酚峰與內(nèi)標物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于1.5；校正因子測定 取正十五烷對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成確定濃度的溶液，作為內(nèi)標溶液；另取丹皮酚對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成與內(nèi)標溶液相近濃度的溶液；精密量取對照品溶液及內(nèi)標溶液各適量置同一容量瓶中，以無水乙醇稀釋定容；精密吸取適量體積的溶液注入氣相色譜儀，計算校正因子；測定法 精密取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物適量，以無水乙醇適量提取，定容；精密量取提取液及內(nèi)標溶液各適量，置同一適當體積的容量瓶中，加無水乙醇定容，搖勻，精密吸取適量體積，注入氣相色譜儀，測定，即得；b.薄層掃描法測定熊果酸精密取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物適量，以甲醇提取，定容，作為供試品溶液；另取熊果酸對照品，加甲醇制成確定濃度的溶液，作為對照品溶液；精密吸取供試品溶液，并定量吸取不同體積的對照品溶液，供試品溶液與每一體積的對照品溶液分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，以體積配比為12∶4∶0.5的甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸混合溶劑為展開劑，展開，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，以薄層掃描儀進行掃描，波長λS＝520nm，λR＝700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
2.一種六味地黃制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中含有如下定性鑒別中的一種或幾種a.熟地黃的定性鑒別 取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物適量，加乙醇提取，提取液作為供試品溶液；另取熟地黃對照藥材適量，提取后制成對照藥材的甲醇溶液；吸取上述兩種溶液各適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積配比為70∶30∶5的氯仿-甲醇-水為展開劑展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；b.丹皮酚的定性鑒別 用無水乙醇提取產(chǎn)品或產(chǎn)品內(nèi)容物，制成供試品溶液，制備丹皮酚標準品的無水乙醇溶液為對照品溶液，按權(quán)利要求1所述的氣相色譜條件測定，色譜圖中，供試品主峰保留時間應(yīng)與對照品一致；c.澤瀉的定性鑒別 取澤瀉對照藥材適量，提取后制成甲醇溶液，作為對照藥材溶液；吸取對照藥材溶液及本權(quán)利要求鑒別a項下的供試品溶液各適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積配比為9∶1的苯-醋酸乙酯混合溶劑為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至顯色，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，顏色的斑點。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述的提取包括回流和超聲波提取。
4.一種六味地黃軟膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中含有如下含量測定中的一種或二種a.氣相色譜法測定丹皮酚含量色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 5％二苯基-95％二甲基硅烷共聚物為固定相的毛細管色譜柱，柱參數(shù)為30m×0.32mm×0.25μm；進樣口溫度240℃；FID檢測器溫度240℃；分流進樣測定分流比為50∶1；柱溫150℃；載氣流速1.0ml/min；理論板數(shù)按丹皮酚峰計算應(yīng)不低于25000；丹皮酚峰與內(nèi)標物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于1.5；校正因子測定 取正十五烷對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，搖勻，作為內(nèi)標溶液；另取丹皮酚對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含丹皮酚1mg的溶液，；精密量取對照品溶液2ml及內(nèi)標溶液1ml置10ml量瓶中，加無水乙醇定容，吸取5μl，注入氣相色譜儀，計算校正因子；測定法 取六味地黃軟膠囊內(nèi)容物約2g，精密稱定，精密加入無水乙醇20ml，稱定重量，超聲提取20分鐘，用無水乙醇補足減失重量，搖勻，離心；精密量取上清液5ml及內(nèi)標溶液1ml，置10ml量瓶中，加無水乙醇至刻度，搖勻，吸取5μl，注入氣相色譜儀，測定，即得；b.薄層掃描法測定六味地黃軟膠囊中山茱萸的含量取本品內(nèi)容物10g，精密稱定，精密加入甲醇40ml，密塞，稱定重量，超聲提取40分鐘，放冷，稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，離心，精密量取上清液20ml，水浴蒸至適量，殘渣用甲醇溶解至5ml量瓶內(nèi)，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取熊果酸對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；吸取供試品溶液5μl、對照品溶液4μl與8μl，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，以體積配比為12∶4∶0.5的甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸混合溶劑為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，以薄層掃描儀進行掃描，波長λS＝520nm，λR＝700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算，即得。
5.一種六味地黃軟膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中含有如下定性鑒別中的一種或幾種a.熟地黃的定性鑒別取產(chǎn)品內(nèi)容物1g，加乙醇20ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加5ml乙醇使溶解，作為供試品溶液；另取熟地黃對照藥材1g，加乙醇20ml，置水浴中加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積配比為70∶30∶5的氯仿-甲醇-水混合溶劑為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茴香醛試液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；b.澤瀉的定性鑒別取澤瀉對照藥材0.5g，研碎，加乙醇20ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為對照藥材溶液；吸取對照藥材溶液及按本權(quán)利要求步驟a所述熟地黃的定性鑒別方法制備的供試品溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積配比為9∶1的苯-醋酸乙酯混合溶劑為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至顯色清楚，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點c.牡丹皮的定性鑒別用無水乙醇提取軟膠囊的內(nèi)容物制成供試品溶液，制備丹皮酚標準品的無水乙醇溶液為對照品溶液，按權(quán)利要求4所述氣相色譜條件測定，色譜圖中，供試品主峰保留時間應(yīng)與對照品一致。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法，其中所述的取樣量、提取樣品或溶解提取物及標準品所用溶劑的用量、定容或溶解后的體積、點樣量或進樣量可以以所述具體值為基準改變，或按比例改變。
7.權(quán)利要求4或5所述的方法，其中的提取既可以采用超聲波提取，也可以采用回流提取。
全文摘要
本發(fā)明涉及六味地黃制劑，特別是六味地黃軟件囊的質(zhì)量控制方法。在原質(zhì)量標準基礎(chǔ)上增加了薄層色譜法定性鑒別產(chǎn)品中的熟地黃和澤瀉這二個專屬性較強的鑒別方法，并將原質(zhì)量標準中丹皮酚的薄層色譜鑒別方法修訂為氣相色譜鑒別；增加二個含量測定項目，即采用薄層掃描法測定熊果酸含量，采用毛細管柱氣相色譜法測定丹皮酚含量。
文檔編號G01N30/00GK1527053SQ0311928
公開日2004年9月8日 申請日期2003年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月7日
發(fā)明者蕭偉, 戴翔翎, 凌婭, 沈靜, 畢宇安, 蕭 偉 申請人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司