專利名稱:測(cè)定蘆薈多糖含量的新方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及蘆薈產(chǎn)品的測(cè)定方法。
背景技術(shù):
蘆薈系百合科多年生草本植物,近年來以鮮葉和蘆薈制品為原料在化妝品、食品、飲料和保健品等行業(yè)的應(yīng)用日趨廣泛。蘆薈多糖是蘆薈的主要生物活性成份,其含量是蘆薈產(chǎn)品的重要理化檢驗(yàn)指標(biāo)之一。蘆薈多糖的測(cè)定,國(guó)內(nèi)外應(yīng)用最多的是Fehling試劑法和Dubois試驗(yàn)法。這些方法都是依據(jù)將蘆薈多糖轉(zhuǎn)化為單糖,進(jìn)而測(cè)定單糖含量的原理,因而蘆薈產(chǎn)品當(dāng)中的一些常見摻假物如麥芽糊精等多糖、蔗糖等低聚糖和葡萄糖等單糖不能有效區(qū)分,對(duì)蘆薈多糖的測(cè)定產(chǎn)生了干擾。蘆薈多糖與剛果紅顯色的可見分光光度法也有報(bào)道,這種方法的選擇性較好,麥芽糊精等多糖、蔗糖等低聚糖和葡萄糖等單糖對(duì)測(cè)定干擾較小,但是要求被測(cè)產(chǎn)品的蘆薈多糖含量不能過高、也不能過低。當(dāng)多糖含量較高時(shí),由于多糖顯酸性會(huì)中和部分堿,從而使溶液的pH值大大降低,降到一定程度,剛果紅將顯現(xiàn)出黑色甚至出現(xiàn)混濁;當(dāng)多糖含量較低時(shí),方法的靈敏度較低、測(cè)定誤差較大。所以,這種方法的應(yīng)用也受到了很大的限制。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于找到一種選擇性好、測(cè)定范圍更廣的測(cè)定蘆薈多糖含量的新方法,從而測(cè)定蘆薈產(chǎn)品中蘆薈多糖的含量。
本發(fā)明的目的可以由下述方案來實(shí)現(xiàn)1.氫氧化鈉溶液的制備稱取氫氧化鈉0.8g于100mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻。
2.顯色劑溶液的制備稱取剛果紅7mg于50mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻。
3.助色劑溶液的制備吸取100g/L人體免疫球蛋白1.2mL于100mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻。
4.蘆薈多糖含量的測(cè)定取1mL顯色劑溶液于試管中,加入5mL氫氧化鈉溶液及1mL助色劑溶液,再加入3mL含蘆薈多糖的樣品溶液,搖勻。5分鐘后,試劑空白作參比,1cm比色皿,525nm處測(cè)定溶液的吸光度。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的進(jìn)一步描述
本方法的原理是利用蘆薈多糖與顯色劑剛果紅及助色劑人體免疫球蛋白在強(qiáng)堿性條件下生成一種穩(wěn)定的三元有色化合物,從而達(dá)到測(cè)定蘆薈多糖含量的目的。蘆薈多糖與顯色劑剛果紅及助色劑人體免疫球蛋白的作用較專一,在所確定的條件下,蘆薈產(chǎn)品的常見摻假物β-環(huán)糊精、淀粉、蔗糖和葡萄糖等的數(shù)量5倍于蘆薈多糖時(shí),對(duì)本方法仍無影響;等量的麥芽糊精也無影響,5倍量的麥芽糊精僅有較小的影響。按測(cè)定蘆薈多糖含量的新方法,用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定100∶1蘆薈凝膠制品中多糖含量,平行測(cè)定5組并且進(jìn)行回收率分析。測(cè)定結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%,回收率90~96%。由此可以看出,測(cè)定蘆薈多糖含量的新方法具有儀器簡(jiǎn)單、操作方法易掌握、分析速度快、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。本方法適用于簡(jiǎn)便、快速、選擇性地測(cè)定蘆薈鮮葉和蘆薈制品中蘆薈多糖的含量,尤其適用于假冒蘆薈制品和摻假蘆薈制品的檢測(cè)。彌補(bǔ)了現(xiàn)行蘆薈制品中蘆薈多糖分析方法的不足,具有很高的實(shí)用價(jià)值。
權(quán)利要求
1.測(cè)定蘆薈多糖的新方法其特征在于pH值的控制、顯色劑和助色劑的選擇及測(cè)定步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定蘆薈多糖的新方法,其特征還在于用氫氧化鈉控制溶液的pH值,氫氧化鈉溶液的用量為5mL(濃度為0.2M)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定蘆薈多糖的新方法,其特征還在于所用的顯色劑為剛果紅,顯色劑的用量為1mL(濃度為2.0×10-4M)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定蘆薈多糖的新方法,其特征還在于所用的助色劑為人體免疫球蛋白,助色劑的用量為1mL(濃度為1.2g/L)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定蘆薈多糖的新方法,其特征還在于測(cè)定步驟為取1mL顯色劑溶液于試管中,加入5mL氫氧化鈉溶液及1mL助色劑溶液,再加入3mL含蘆薈多糖的樣品溶液,搖勻。5分鐘后,試劑空白作參比,1cm比色皿,525nm處測(cè)定溶液的吸光度。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種定量測(cè)定蘆薈多糖含量的新方法。以可見分光光度法為理論依據(jù),在堿性條件下蘆薈多糖溶液與一種顯色劑及一種助色劑作用,生成一種穩(wěn)定的三元有色化合物,試劑空白作參比,分光光度法測(cè)定溶液的吸光度。本測(cè)定方法選擇性強(qiáng),工作曲線線性相關(guān)性好,適用范圍廣,試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、回收率均達(dá)定量分析的要求,可用于蘆薈鮮葉和蘆薈制品中多糖的含量測(cè)定。
文檔編號(hào)G01N21/78GK1707247SQ20041004800
公開日2005年12月14日 申請(qǐng)日期2004年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月11日
發(fā)明者杜海燕, 孫家躍, 庚梅 申請(qǐng)人:杜海燕, 孫家躍, 庚梅