專(zhuān)利名稱(chēng)：血清銅、鐵、鋅快速靈敏檢測(cè)試劑盒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及分別用于檢測(cè)血清中銅、鐵、鋅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒及其各試劑盒的制備方法。
背景技術(shù)：
銅、鐵、鋅是人體必需的微量元素。
血清銅增高見(jiàn)于白血病、何杰金氏病、色素沉著癥、肺結(jié)核、惡性貧血、惡性腫瘤等。血清銅降低見(jiàn)于嬰兒貧血、嬰兒營(yíng)養(yǎng)不良Menkes卷發(fā)綜合癥、肝豆?fàn)詈俗冃缘?。測(cè)定血清銅的方法很多，目前臨床上首選的方法是原子吸收分光光度法、國(guó)外大部分實(shí)驗(yàn)室采用該法，但該法儀器昂貴，在我國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室中難以普及，目前臨床上廣泛實(shí)驗(yàn)的是分光光度法，分光光度法第一種方法是采用雙環(huán)己酮酰二腙(簡(jiǎn)稱(chēng)銅試劑)，該法靈敏度低(ε為1.6×104L·mol-1·cm-1)，血清用量大，且需去蛋白，操作時(shí)間長(zhǎng)、繁；第二種方法是采用2，9-二甲基4，7-二苯基-1，10-菲啰啉，該法靈敏度不高(ε為1.4×104L·mol-1·cm-1)，試劑價(jià)格貴，需進(jìn)口。
鋅是許多金屬酶的輔助因子。由于合成DNA、RNA必需的許多金屬酶都需要鋅，因此它是細(xì)胞分裂所必不可少的，尤其是在生命的高速生長(zhǎng)期是如此，如嬰兒、青少年、孕婦。血清鋅有“生命之花”的美稱(chēng)。血清鋅升高常見(jiàn)于鋅中毒。目前，鋅的測(cè)定方法較多，但長(zhǎng)期以來(lái)，尚缺乏可以在臨床上推廣的檢測(cè)法。絡(luò)合物滴定法樣品用量大(血清2ml)，操作費(fèi)時(shí)，特異性低；熒光光度法儀器價(jià)格貴，難以普及；原子吸收分光光度法也存在操作繁、成本高等缺點(diǎn)。目前已有報(bào)道的分光光度比色法，均需引入抗壞血酸還原，劇毒氰化鉀掩蔽干擾離子，再用水合氯醛解蔽。因其試劑種類(lèi)多，操作步驟繁且要求高而難以推廣。
血清鐵降低，常見(jiàn)于生理性鐵需要量增加、各種慢性失血引起的鐵丟失過(guò)多及鐵攝入不足，如缺鐵性貧血、急性感染、惡性腫瘤等。血清鐵增高，常見(jiàn)于急性肝炎、惡性貧血、再生障礙性貧血、溶血性貧血等。血清鐵水平不穩(wěn)定，易受進(jìn)食狀況及其他生理情況影響。目前，常用的鐵的測(cè)定方法有亞鐵嗪比色法，利用血清鐵和運(yùn)鐵蛋白結(jié)合成復(fù)合物，在酸性介質(zhì)中鐵從復(fù)合物中解離出來(lái)，再被還原劑還原成二價(jià)鐵，并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物，在波長(zhǎng)562nm處有一吸收峰，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)液比較，即可求得血清鐵的含量，該法價(jià)格昂貴、步驟繁雜；還有利用雙聯(lián)吡啶比色法，其是利用在酸性條件下使鐵從與蛋白質(zhì)結(jié)合狀態(tài)中游離出來(lái)。用鹽酸羥胺作還原劑使血清中三價(jià)鐵還原成二價(jià)鐵，后者與雙聯(lián)吡啶顯色劑反應(yīng)生成紅色螯合物，在520nm處比色定量。本法簡(jiǎn)便快速，但靈敏度差，干擾因素較多，尤以鐵質(zhì)污染最為嚴(yán)重，溶血也會(huì)影響結(jié)果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種用于測(cè)定血清中銅、鐵、鋅含量的操作簡(jiǎn)便快速、靈敏度高且不需去蛋白的試劑盒，為此，本發(fā)明還要提供一種該試劑盒的制備方法。
本發(fā)明試劑盒的原理是在表面活性劑存在下的緩沖體系中，血清中與蛋白結(jié)合的銅、鐵、鋅解離，與吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物絡(luò)合顯色，顯色絡(luò)合物在波長(zhǎng)550-600nm處有最大吸收波長(zhǎng)，反應(yīng)液在波長(zhǎng)550-600nm處的吸光度與銅、鐵、鋅離子濃度在一定范圍內(nèi)成正比，適用手工測(cè)定和自動(dòng)分析。
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是1、用于檢測(cè)血清中銅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒，它由下列試劑組成(1)氧化劑濃度為30g/L的雙氧水或過(guò)硫酸鉀；(2)吡啶偶氮類(lèi)顯色液每升顯色液中固形物由20-100mg吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物、5-20g表面活性劑和20-100g掩蔽劑組成，液體由pH＝3.5-5.0醋酸-醋酸鈉水溶液和無(wú)水乙醇按199∶1-19∶1的比例組成，所述表面活性劑為所述表面活性劑為聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯異辛基苯基醚、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸單脂、聚氧乙烯失水山梨醇油酸單脂或聚乙烯吡咯烷酮，所述掩蔽劑為檸檬酸、氟化鈉或六偏磷酸鈉。
(3)銅標(biāo)準(zhǔn)液濃度為15.74-31.48μmol/L。
所述吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法為每升顯色液稱(chēng)取吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物100-500mg，用無(wú)水乙醇配成100ml貯備液，取貯備液5-20ml，加5-20g的表面活性劑，用pH＝3.5-5.0的醋酸-醋酸鈉溶液稀釋至1000ml。
所述吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物為2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基酚)、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚、2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚或2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二鈉。
2、用于檢測(cè)血清中鋅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒，其特征在于它由下列試劑組成(1)吡啶偶氮類(lèi)顯色液每升顯色液中固形物由20-100mg吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物、5-20g表面活性劑和20-100g掩蔽劑組成，液體由pH＝8.0-10的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽水溶液和無(wú)水乙醇按199∶1-19∶1的比例組成，所述表面活性劑為聚氧乙烯異辛基苯基醚、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸單脂、聚氧乙烯失水山梨醇油酸單脂或聚乙烯吡咯烷酮，所述掩蔽劑為銅鐵試劑、檸檬酸、巰基乙酸、硫脲或六偏磷酸鈉。
(2)鋅標(biāo)準(zhǔn)液濃度為15.3-30.6μmol/L。
所述吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法為每升顯色液稱(chēng)取吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物100-500mg和20-100g的掩蔽劑，用無(wú)水乙醇配成100ml貯備液，取貯備液5-50ml，加5-20g的表面活性劑，用pH＝8.0-10.0的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽水溶液稀釋至1000ml。
所述吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物為2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基酚)、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚、2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚(簡(jiǎn)稱(chēng)3，5-diBr-DMPAP)或2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二鈉。
3、用于檢測(cè)血清中鐵含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒，它由下列試劑組成(1)吡啶偶氮類(lèi)顯色液每升顯色液中固形物由20-100mg吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物、5-20g表面活性劑和20-100g掩蔽劑組成，液體由pH＝3.5-5.0醋酸-醋酸鈉水溶液和無(wú)水乙醇按199∶1-19∶1的比例組成，所述表面活性劑為聚氧乙烯異辛基苯基醚、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸單脂、聚氧乙烯失水山梨醇油酸單脂或聚乙烯吡咯烷酮，所述掩蔽劑為巰基乙酸或硫脲。
(2)鐵標(biāo)準(zhǔn)液濃度為17.9-35.8μmol/L。
所述吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法為稱(chēng)取吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物100-500mg和20-100g掩蔽劑，用無(wú)水乙醇配成100ml貯備液，取貯備液5-50ml，加5-20g的表面活性劑，用pH＝3.5-5.0的醋酸-醋酸鈉溶液稀釋至1000ml。
所述吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物為2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基酚)、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚、2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚或2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二鈉。
本發(fā)明所能達(dá)到的有益效果是血清用量少，試劑單一溫定，且不必去蛋白操作快速簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度好，靈敏度高。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一一種血清銅快速靈敏檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下物質(zhì)組成的氧化劑(30g/L的雙氧水) 1瓶顯色液(吡啶偶氮類(lèi)顯色劑) 1瓶銅標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為31.48μmol/L) 1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(1)30g/L的雙氧水是常規(guī)方法配置；(2)吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法a、稱(chēng)取2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基酚)200mg，b、將a中的試劑用無(wú)水乙醇配成100ml的貯備液，c、取b的貯備液5ml加入10g聚氧乙烯異辛基苯基醚和20g檸檬酸，用pH4.0的醋酸-醋酸鈉水溶液稀釋至1000ml；(3)銅標(biāo)準(zhǔn)液精確稱(chēng)取100.0mg的金屬銅(99.9％)，用適量50％的醋酸水溶液溶解后以雙蒸水稀釋至1000ml，再用水稀釋為50倍的31.48μmol/L的銅標(biāo)準(zhǔn)液。
檢測(cè)方法1.手工分析法血清(U管)、銅標(biāo)準(zhǔn)液(S管)、去離子水(B管)各取0.20ml，然后在各管中分別加入3％的雙氧水0.05ml，靜置1分鐘，再分別加入2.5ml吡啶偶氮類(lèi)顯色液，混勻，置37℃水浴保溫5分鐘，可保證血清銅完全釋出。在分光光度計(jì)上用1cm光徑比色皿空白管調(diào)零，然后在550-600nm處讀取各管的吸光度(A)。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類(lèi)型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)600nm；反應(yīng)溫度37℃；3％的雙氧水5μl；吡啶偶氮類(lèi)顯色液250μl；標(biāo)本30μl；讀數(shù)時(shí)間180秒。
血清銅的含量(μmol/L)＝31.48×Au/As實(shí)施例二一種血清銅快速靈敏檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下物質(zhì)組成的氧化劑(30g/L的過(guò)硫酸鉀) 1瓶顯色液(吡啶偶氮類(lèi)顯色劑)1瓶銅標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為15.74μmol/L)1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(1)30g/L的過(guò)硫酸鉀是常規(guī)方法配置(2)吡啶偶氮類(lèi)顯色劑的制備方法a、稱(chēng)取2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚100mg，b、將a中的試劑用無(wú)水乙醇配成100ml的貯備液，c、取b的貯備液50ml加入20g聚氧乙烯月桂醚和50g氟化鈉，用PH3.8的醋酸-醋酸鈉水溶液稀釋至1000ml。
(3)銅標(biāo)準(zhǔn)液精確稱(chēng)取100.0mg的金屬銅(99.9％)，用適量50％的醋酸水溶液溶解后以雙蒸水稀釋至1000ml，再用水稀釋為100倍的15.74μmol/L的銅標(biāo)準(zhǔn)液。
檢測(cè)方法1.手工分析法血清(U管)、銅標(biāo)準(zhǔn)液(S管)、去離子水(B管)各取0.20ml，然后在各管中分別加入3％的雙氧水0.05ml，靜置1分鐘，再分別加入2.5ml吡啶偶氮類(lèi)顯色液，混勻，置37℃水浴保溫5分鐘，可保證血清銅完全釋出。在分光光度計(jì)上用1cm光徑比色皿空白管調(diào)零，然后在550-600nm處讀取各管的吸光度(A)。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類(lèi)型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)600nm；反應(yīng)溫度37℃；3％的雙氧水5μl；吡啶偶氮類(lèi)顯色液250μl；標(biāo)本30μl；讀數(shù)時(shí)間180秒。
血清銅的含量(μmol/L)＝15.74×Au/As
實(shí)施例三一種血清鋅快速靈敏檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下試劑組成的顯色液(吡啶偶氮類(lèi)顯色劑) 1瓶鋅標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為15.3μmol/L)1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(1)吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法a、稱(chēng)取2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚300mg，b、將a中的試劑用無(wú)水乙醇配成100ml的貯備液，c、取b的貯備液30ml加入15g聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸單脂和20g的銅鐵試劑，用pH8.0的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽水溶液稀釋至1000ml。
(2)鋅標(biāo)準(zhǔn)液精確稱(chēng)取100.0mg的金屬鋅(99.9％)，用適量50％的硝酸溶液溶解后以雙蒸水稀釋至1000ml，再用水稀釋為15.30μmol/L的鋅標(biāo)準(zhǔn)液。
檢測(cè)方法1.手工分析法測(cè)定管(U)、標(biāo)準(zhǔn)管(S)、空白管(B)分別加入血清、鋅標(biāo)準(zhǔn)液、蒸餾水各0.3ml，每管各加吡啶偶氮類(lèi)顯色液2.50ml，混勻，置37℃水浴保溫5分鐘，以空白管調(diào)零，用1cm光徑比色杯，在550--600nm波長(zhǎng)處測(cè)定各管吸光度A。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類(lèi)型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)600nm；反應(yīng)溫度37℃；吡啶偶氮類(lèi)顯色液250μl；標(biāo)本30μl；讀數(shù)時(shí)間180秒。
血清鋅的含量(μmol/L)＝15.30×Au/As實(shí)施例四一種血清鋅快速靈敏檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下試劑組成的顯色液(吡啶偶氮類(lèi)顯色劑)1瓶鋅標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為30.6μmol/L) 1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(1)吡啶偶氮類(lèi)顯色劑的制備方法a、稱(chēng)取2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二鈉150mg，b、將a中的試劑用無(wú)水乙醇配成100ml的貯備液，c、取b的貯備液15ml加入15g聚乙二醇辛基苯基醚和80g的硫脲，用PH8.0的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽水溶液稀釋至1000ml。
(2)鋅標(biāo)準(zhǔn)液精確稱(chēng)取100.0mg的金屬鋅(99.9％)，用適量50％的醋酸水溶液溶解后以雙蒸水稀釋至1000ml，再用水稀釋為50倍的30.60μmol/L的鋅標(biāo)準(zhǔn)液。
檢測(cè)方法1.手工分析法測(cè)定管(U)、標(biāo)準(zhǔn)管(S)、空白管(B)分別加入血清、鐵標(biāo)準(zhǔn)液、蒸餾水各0.3ml，每管各加吡啶偶氮類(lèi)顯色液2.50ml，混勻，置37℃水浴保溫5分鐘，以空白管調(diào)零，用1cm光徑比色杯，在550--600nm波長(zhǎng)處測(cè)定各管吸光度A。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類(lèi)型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)600nm；反應(yīng)溫度37℃；吡啶偶氮類(lèi)顯色液250μl；標(biāo)本30μl；讀數(shù)時(shí)間180秒。
血清鋅的含量(μmol/L)＝30.60×Au/As實(shí)施例五一種血清鐵快速靈敏檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下試劑組成的顯色液(吡啶偶氮類(lèi)顯色劑) 1瓶鐵標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為17.9μmol/L)1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(2)吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法
a、稱(chēng)取2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚300mg，b、將a中的試劑用無(wú)水乙醇配成100ml的貯備液，c、取b的貯備液30ml加入15g聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸單脂和20g的巰基乙酸，用pH3.5的醋酸醋酸鈉水溶液稀釋至1000ml。
(3)鐵標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為17.9μmol/L)精確稱(chēng)取100.0mg的金屬鐵(99.9％)，用適量的硝酸溶解后以雙蒸水稀釋至1000ml，再用水稀釋為濃度為17.9μmol/L標(biāo)準(zhǔn)液。
檢測(cè)方法1.手工分析法測(cè)定管(U)、標(biāo)準(zhǔn)管(S)、空白管(B)分別加入血清、鐵標(biāo)準(zhǔn)液、蒸餾水各0.3ml，每管各加吡啶偶氮類(lèi)顯色液2.50ml，混勻，置37℃水浴保溫5分鐘，以空白管調(diào)零，用1cm光徑比色杯，在550--600nm波長(zhǎng)處測(cè)定各管吸光度A。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類(lèi)型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)600nm；反應(yīng)溫度37℃；吡啶偶氮類(lèi)顯色液250μl；標(biāo)本30μl；讀數(shù)時(shí)間300秒。
血清鐵的含量(μmol/L)＝17.90×Au/As實(shí)施例六一種血清鐵快速靈敏檢測(cè)試劑盒，本試劑盒是由以下試劑組成的顯色液(吡啶偶氮類(lèi)顯色劑) 1瓶鐵標(biāo)準(zhǔn)液(濃度為35.8μmol/L)1瓶本試劑盒的制備方法是通過(guò)如下步驟實(shí)現(xiàn)的(1)吡啶偶氮類(lèi)顯色劑的制備方法a、稱(chēng)取2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基酚)150mg，b、將a中的試劑用無(wú)水乙醇配成100ml的貯備液，c、取b的貯備液15ml加入15g聚乙二醇辛基苯基醚和40g硫脲，用PH4.0的醋酸醋酸鈉水溶液稀釋至1000ml。
(2)鋅標(biāo)準(zhǔn)液精確稱(chēng)取100.0mg的金屬鋅(99.9％)，用適量50％的醋酸水溶液溶解后以雙蒸水稀釋至1000ml，再用水稀釋為50倍的35.80μmol/L的鋅標(biāo)準(zhǔn)液。
檢測(cè)方法1.手工分析法測(cè)定管(U)、標(biāo)準(zhǔn)管(S)、空白管(B)分別加入血清、鐵標(biāo)準(zhǔn)液、蒸餾水各0.3ml，每管各加吡啶偶氮類(lèi)顯色液2.50ml，混勻，置37℃水浴保溫5分鐘，以空白管調(diào)零，用1cm光徑比色杯，在550--600nm波長(zhǎng)處測(cè)定各管吸光度A。
2.自動(dòng)分析儀分析參數(shù)反應(yīng)類(lèi)型終點(diǎn)法；波長(zhǎng)600nm；反應(yīng)溫度37℃；吡啶偶氮類(lèi)顯色液250μl；標(biāo)本30μl；讀數(shù)時(shí)間300秒。
血清鐵的含量(μmol/L)＝35.80×Au/As
權(quán)利要求
1.用于檢測(cè)血清中銅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒，其特征在于它由下列試劑組成(1)氧化劑濃度為30g/L的雙氧水或過(guò)硫酸鉀；(2)吡啶偶氮類(lèi)顯色液每升顯色液中固形物由20-100mg吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物、5-20g表面活性劑和20-100g掩蔽劑組成，液體由pH＝3.5-5.0醋酸-醋酸鈉水溶液和無(wú)水乙醇按199∶1-19∶1的比例組成，所述表面活性劑為所述表面活性劑為聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯異辛基苯基醚、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸單脂、聚氧乙烯失水山梨醇油酸單脂或聚乙烯吡咯烷酮，所述掩蔽劑為檸檬酸、氟化鈉或六偏磷酸鈉；(3)銅標(biāo)準(zhǔn)液濃度為15.74-31.48μmol/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測(cè)血清中銅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒的制備方法，其特征在于所述吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法為每升顯色液稱(chēng)取吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物100-500mg，用無(wú)水乙醇配成100ml貯備液，取貯備液5-20ml，加5-20g的表面活性劑，用pH＝3.5-5.0的醋酸-醋酸鈉溶液稀釋至1000ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測(cè)血清中銅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物為2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基酚)、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚、2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚或2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二鈉。
4.用于檢測(cè)血清中鋅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒，其特征在于它由下列試劑組成(1)吡啶偶氮類(lèi)顯色液每升顯色液中固形物由20-100mg吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物、5-20g表面活性劑和20-100g掩蔽劑組成，液體由pH＝8.0-10的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽水溶液和無(wú)水乙醇按199∶1-19∶1的比例組成，所述表面活性劑為聚氧乙烯異辛基苯基醚、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸單脂、聚氧乙烯失水山梨醇油酸單脂或聚乙烯吡咯烷酮，所述掩蔽劑為銅鐵試劑、檸檬酸、巰基乙酸、硫脲或六偏磷酸鈉；(2)鋅標(biāo)準(zhǔn)液濃度為15.3-30.6μmol/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于檢測(cè)血清中鋅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒的制備方法，其特征在于所述吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法為每升顯色液稱(chēng)取吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物100-500mg和20-100g的掩蔽劑，用無(wú)水乙醇配成100ml貯備液，取貯備液5-50ml，加5-20g的表面活性劑，用pH＝8.0-10.0的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽水溶液稀釋至1000ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于檢測(cè)血清中鋅含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒所述吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物為2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基酚)、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚、2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚(簡(jiǎn)稱(chēng)3，5-diBr-DMPAP)或2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二鈉。
7.用于檢測(cè)血清中鐵含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒，其特征在于它由下列試劑組成(1)吡啶偶氮類(lèi)顯色液每升顯色液中固形物由20-100mg吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物、5-20g表面活性劑和20-100g掩蔽劑組成，液體由pH＝3.5-5.0醋酸-醋酸鈉水溶液和無(wú)水乙醇按199∶1-19∶1的比例組成，所述表面活性劑為聚氧乙烯異辛基苯基醚、聚乙二醇辛基苯基醚、聚氧乙烯失水山梨醇月桂酸單脂、聚氧乙烯失水山梨醇油酸單脂或聚乙烯吡咯烷酮，所述掩蔽劑為巰基乙酸或硫脲；(2)鐵標(biāo)準(zhǔn)液濃度為17.9-35.8μmol/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于檢測(cè)血清中鐵含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒的制備方法，其特征在于所述吡啶偶氮類(lèi)顯色液的制備方法為稱(chēng)取吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物100-500mg和20-100g掩蔽劑，用無(wú)水乙醇配成100ml貯備液，取貯備液5-50ml，加5-20g的表面活性劑，用pH＝3.5-5.0的醋酸-醋酸鈉溶液稀釋至1000ml。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于檢測(cè)血清中鐵含量的快速靈敏檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物為2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基酚)、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚、2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚、2-(3，5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚或2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二鈉。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于測(cè)定血清中銅、鐵、鋅含量的操作簡(jiǎn)便快速、靈敏度高且不需去蛋白的試劑盒，為此，本發(fā)明還提供了該試劑盒的制備方法。本發(fā)明試劑盒在表面活性劑存在下的緩沖體系中，血清中與蛋白結(jié)合的銅、鐵、鋅解離，與吡啶偶氮類(lèi)有機(jī)物絡(luò)合顯色，顯色絡(luò)合物在波長(zhǎng)550－600nm處有最大吸收波長(zhǎng)，反應(yīng)液在波長(zhǎng)550－600nm處的吸光度與銅、鐵、鋅離子濃度在一定范圍內(nèi)成正比，適用手工測(cè)定和自動(dòng)分析。
文檔編號(hào)G01N33/84GK1635379SQ200410096340
公開(kāi)日2005年7月6日 申請(qǐng)日期2004年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月30日
發(fā)明者曹建明 申請(qǐng)人:曹建明