專利名稱：脂氧素受體fprl1作為一種用于鑒定能有效治療疼痛和炎癥化合物的工具的制作方法
技術領域：
以下描述的發(fā)明的方面涉及脂氧素受體FPRL1作為一種工具，用于鑒定能有效治療疼痛和炎癥的化合物。該工具可被用于篩選化合物，但并不局限于這種用途的應用。特別地，鑒定出的對這種受體具有活性的化合物將是有效的治療物，它可以減輕嗜中性粒細胞的激活引起的免疫反應癥狀，所述嗜中性粒細胞的激活會導致血管收縮性疾病、炎癥、骨髓抑制性疾病、心血管病、胃腸疾病和伴隨這些疾病的并發(fā)疼痛。另外，鑒定出的對這種受體具有活性的化合物將是在發(fā)炎損傷前施用的有效治療物，發(fā)炎會導致嗜中性粒細胞的激活，進而導致血管收縮性疾病、炎癥、骨髓抑制性疾病、心血管病、胃腸疾病和伴隨這些疾病的并發(fā)疼痛。
背景技術：
人類的免疫反應是一個能夠由內(nèi)源和外源刺激觸發(fā)的復雜級聯(lián)事件，一旦其被觸發(fā)而又未加以制止，將會導致顯著的組織損傷和最終的死亡。在該反應中包括不同種類的內(nèi)源調(diào)節(jié)物，其中類二十烷酸例如前列腺素和白細胞三烯發(fā)揮關鍵的作用。這些分子通過激活受體對各種白細胞群包括嗜中性粒細胞發(fā)揮其作用。嗜中性粒細胞在宿主防御的第一線發(fā)揮它們吞噬微生物的功能，這樣保護宿主免受感染，然而，它們也會引起血管損傷和導致血管滲透性增加、浮腫及隨后的趨化因子釋放。
為了努力平衡嗜中性粒細胞的激活，人類和其它生物已經(jīng)建立起一套負反饋通路，其起到阻斷信號的作用。孤受體(orphan receptor)FPRL1主要在嗜中性粒細胞和單核細胞上表達，其可以成為啟動這種炎癥平衡、使細胞恢復靜止狀態(tài)的很可能的候選物。
Murphy等人首先鑒定出FPRL1，其是N-甲酰肽受體(FPR)的一種結(jié)構同源物。在感染過程中，在這種肽由細菌釋放出來時，其表現(xiàn)出介導趨化現(xiàn)象和脫粒。另外，在著眼于趨化現(xiàn)象的體外實驗和用于測定鈣流(calciummobilization)的分析中，六肽WKYMVM均表現(xiàn)出是FPRL1受體的一種激動劑。
到目前為止，還沒能提供任何證據(jù)來決定性地支持FPRL1受體在體內(nèi)炎癥反應中的作用。這里通過對FPRL1受體具有選擇性和在體內(nèi)具有活性的化合物來證明FPRL1受體與緩和疼痛和炎癥之間的聯(lián)系，從而突出FPRL1受體在這個有著醫(yī)療需求領域作為藥物開發(fā)努力中治療靶的重要性。已經(jīng)證明，大多數(shù)衍生于花生四烯酸代謝的類二十烷酸，能加劇多種疾病中的疼痛和炎癥，所述疾病如哮喘病、血管球性腎炎、風濕性關節(jié)炎以及阿爾茨海默癥。相反，這里所述的具有選擇性的FPRL1化合物被證實可預防性地作為炎癥緩和劑，這證實了FPRL1受體是一種用于藥物開發(fā)的有價值的靶，由此開發(fā)的藥物可以減少多種疾病中的炎癥和減輕伴隨這些疾病的疼痛，所述疾病如哮喘病、血管球性腎炎、風濕性關節(jié)炎、阿爾茨海默癥。
發(fā)明概述在第一個實施方式中，本發(fā)明包括FPRL1受體作為一種工具在鑒定能有效治療炎癥和相關疼痛的化合物中的用途。
在第二個實施方式中，本發(fā)明包括FPRL1受體作為一種篩選工具在鑒定能有效治療炎癥和相關疼痛的化合物中的用途。
在第三個實施方式中，本發(fā)明包括對FPRL1受體具有特異活性的化合物作為治療炎癥和相關疼痛的治療物的用途。
在第四個實施方式中，本發(fā)明包括對FPRL1受體具有特異活性的化合物作為阻斷炎癥和相關疼痛的治療物預防疾病的用途。
在第五個實施方式中，本發(fā)明包括一種篩選能影響一種FPRL1受體一種或多種活性的化合物的方法，其包括以下步驟a)將重組細胞與測試化合物接觸，其中所述重組細胞包含表達所述FPRL1受體的重組核酸，假設所述細胞不含有來自內(nèi)源核酸的功能性FPRL1受體表達；b)確定所述測試化合物影響所述FPRL1受體一種或多種活性的能力，并將所述能力與所述測試化合物在不含有所述重組核酸的細胞中影響所述一種或多種FPRL1受體活性的能力相比較；
其中所述的重組核酸包含一種選自由下列組成的組的FPRL1受體核酸i)SEQ ID NO1的核酸，ii)編碼SEQ ID NO2氨基酸的核酸，iii)i)or ii)中任一核酸分子的一種衍生物，其中所述的衍生物編碼具有所述FPRL1受體一種或多種活性的受體，其包含至少20個可以在嚴格雜交條件下與SEQ ID NO1的互補序列雜交的連續(xù)核苷酸。
在第五個實施方式的一個方面中，編碼SEQ ID NO2衍生物氨基酸序列的所述FPRL1受體核酸包含至少20個連續(xù)的核苷酸，其可以在嚴格雜交條件下與編碼SEQ ID NO2氨基酸序列的至少20個連續(xù)的核苷酸的互補序列0雜交。
在第六個實施方式中，本發(fā)明包括治療任何類型的急性或慢性炎癥的方法，其包括將生物體與有效量的至少一種式I、II或III化合物接觸，其中化合物激活一種FPRL1受體亞型。在該實施方式的一個方面，炎癥與下述病癥相關糖尿病、病毒感染、腸易激綜合癥(IBS)、切除術、癌、細菌感染、包括物理創(chuàng)傷和輻射暴露的物理損傷、哮喘引起的血管收縮、過敏性反應、過敏癥反應、休克、糖尿病、風濕性關節(jié)炎、痛風、牛皮癬、過敏性鼻炎、成人呼吸窘迫綜合癥、克羅恩氏病(Crohn′s disease)、內(nèi)毒素性休克、創(chuàng)傷性休克、失血性休克、腸缺血性休克、腎小球腎病、良性前列腺增生、心肌缺血、心肌梗塞、循環(huán)性休克、包括缺血性和出血性休克的腦損傷、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎病、心血管病和高血壓或化學損傷。
在第七個實施方式中，本發(fā)明包括鑒定是FPRL1受體激動劑的化合物的方法，該方法包括將一種FPRL1受體與至少一種式I、II或III的測試化合物接觸；和確定所述FPRL1受體活性水平的任何提高，這樣鑒定出是FPRL1受體激動劑的測試化合物。
在第八個實施方式中，本發(fā)明包括鑒定是FPRL1受體激動劑的化合物的方法，該方法包括培養(yǎng)表達FPRL1受體的細胞；將細胞或從細胞中提取出的組分與至少一種式I、II或III的測試化合物孵育；和確定所述FPRL1受體活性的任何提高，這樣鑒定出是FPRL1受體激動劑的測試化合物。
在第八個實施方式的一個方面，所培養(yǎng)的細胞過表達所述FPRL1受體。在第八個實施方式的另一個方面，所鑒定出的激動劑對FPRL1受體具有選擇性。
在第九個實施方式中，本發(fā)明包括治療炎癥的方法，包括將患有炎癥的個體與有效量的至少一種式I、II或III的化合物接觸，由此一種或多種炎癥的癥狀得到減輕。
在第九個實施方式的一個方面，該方法進一步包括在施藥步驟前鑒別需要炎性治療的個體的步驟。在第九個實施方式的另一個方面，所述式I、II或III的化合物選擇性地激活FPRL1受體亞型。在第九個實施方式的再一個方面，炎性反應是由白細胞的激活引起的，其中激活包括白細胞遷移和產(chǎn)生活性氧(ROS)，引起血管滲出和浮腫。在第九個實施方式的又一個方面，炎性反應與風濕性關節(jié)炎、阿爾茨海默癥或哮喘相關。在第九個實施方式的另一個方面，炎性反應是由物理性損傷包括物理傷害和輻射暴露導致的。
本發(fā)明的第十個實施方式包括治療或預防對象中炎癥或炎性反應的方法，其包括給個體施用有效抗炎量的式I、II或III的化合物。
本發(fā)明的第十一個實施方式包括一種誘導血管舒張以治療或者防止血管收縮性反應或癥狀的方法，其包括為對象施加血管舒張有效量的式I、II或者III的化合物。在第十一個實時方式的一個方面，血管收縮性反應或癥狀選自由下列組成的組包括腎小球炎的腎血液動力學疾病，以及包括高血壓、心肌梗塞和心肌缺血的心血管疾病。
本發(fā)明的第十二個實施方式包括拮抗對象中對硫化肽白細胞三烯的血管收縮性反應的方法，包括給對象施用式I、II或III的組合物。在第十二個實施方式的一個方面，對所述白細胞三烯的血管收縮性反應與選自由下列組成的組的一種醫(yī)學紊亂相關哮喘、過敏反應、過敏癥反應、休克、炎癥、風濕性關節(jié)炎、痛風、牛皮癬、過敏性鼻炎、成人呼吸窘迫綜合癥、克羅恩氏病、內(nèi)毒素性休克、創(chuàng)傷性休克、失血性休克、腸缺血性休克、腎小球腎病、良性前列腺增生、炎性腎病、心肌缺血、心肌梗塞、循環(huán)系統(tǒng)的休克、腦損傷、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎病、心血管病和高血壓。在第十二個實施方式的另一個方面，血管收縮性反應是腎的血管收縮性反應包括輕微的血管收縮如慢性腎病和慢性嚴重的血管收縮如腎小球腎病。
本發(fā)明的第十三個實施方式包括刺激對象中的細胞增殖以治療或預防骨髓抑制性紊亂的方法，包括給對象施用有效量的式I、II或III的化合物。
本發(fā)明的第十四個實施方式包括式I的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物， 其中R1選自由C1-C10直鏈或支鏈亞烷基、氧、硫、NQ、CHCN、C＝O、C＝S、C＝NQ、S＝O、S(＝O)2、C＝NOQ組成的組，其中Q獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；R2、R3、R4和R5的每一個獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，并且各個R7獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或R3、R4和它們連接的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)。
R6可以出現(xiàn)0-5次并獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C4直鏈或支鏈的烷基、環(huán)烷基、任選地被取代的芳基或雜芳基、羥基、硝基、氨基、鹵素、磺酸鹽、全鹵烷基、-OR7、-N(R8)2、-CN、-C(＝Z)R8、-C(＝Z)OR8、-C(＝Z)N(R8)2、-N(R8)-C(＝Z)R8、-N(R8)-C(＝Z)N(R8)2、-OC(＝Z)R8和-SR8，其中Z是氧或硫，并且各個R8獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或“R6”形成融合的芳基或雜環(huán)。
在第十四個實施方式的一個方面中，R1是氫或C1-C10直鏈烷基。在第十四個實施方式的另一個方面中，R1是C1-C5直鏈亞烯基。在第十四個實施方式的再一個方面中，R1選自由下列組成的組亞甲基、乙烯基、正丙稀基、異丙稀基、正丁烯基、仲丁烯基、叔丁烯基、正戊二烯基以及異戊二烯基。在第十四個實施方式的又一個方面中，R2選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、氨基、芳基、雜芳基、-OR7和-N(R7)2，其中R7是氫或C1-C10直鏈烷基。例如，在前述的方面中，R7可以是氫或C1-C3直鏈烷基。在第十四個實施方式的再一個方面中，R2選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、芳基、雜芳基、甲氧基和乙氧基。在第十四個實施方式的另一個方面中，R3選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、芳基、雜芳基、氨基、-OR7和-N(R7)2，其中R7是氫或C1-C10直鏈烷基。在第十四個實施方式的另一個方面中，R7是氫或C1-C3直鏈烷基。在第十四個實施方式的另一個方面中，R3選自由下列組成的組氫、硝基、芳基、雜芳基。在第十四個實施方式的再一個方面中，其中R4選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、-OR7和-N(R7)2，其中R7是任選地被芳基取代的C1-C10直鏈烷基。在第十四個實施方式的又一個方面中，R4選自由下列組成的組氫、C1-C3直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、-OR7和-N(R7)2，并且R7是任選的被芳基取代的C1-C3直鏈烷基。在第十四個實施方式的又一個方面中，R4選自由下列組成的組氫、甲基、乙基、羥基、硝基、氨基、氯、氟、甲氧基、乙氧基、甲氨基、二甲氨基、二乙氨基和芐氧基。在第十四個實施方式的又一個方面中，R5選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7和-N(R7)2，其中R7是任選的被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基。在第十四個實施方式的附加的一個方面中，R5選自由下列組成的組氫、C1-C3直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7和-N(R7)2，其中R7是C1-C3直鏈烷基。在第十四個實施方式的再一個方面中，R5選自由下列組成的組氫、羥基、氯、溴、三氟甲基和甲氧基。在第十四個實施方式的某些方面中，R6是氫。在第十四個實施方式的另一個方面，R2、R3和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)。例如，在前述的方面中，環(huán)可以是雜環(huán)的烷基環(huán)。在有些情況下，雜環(huán)的烷基環(huán)可以選自一下的組N-嗎啉和吡咯。
本發(fā)明的第十五個實施方式包括選自由下列組成的組的化合物
本發(fā)明的第十六個實施方式包括式II的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物， 其中
X1和X2的每一個獨立地是氧或氟，R1選自由C1-C10直鏈或支鏈亞烷基、氧、硫、NQ、CHCN、C＝O、C＝S、C＝NQ、S＝O、S(＝O)2、C＝NOQ組成的組，其中Q選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；R2、R3的每一個獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，并且各個R7獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基。
在第十六個實施方式的一個方面中，R1選自由氧和NQ所組成的組，其中Q選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C5直鏈或支鏈烷基。例如，在第十六個實施方式的前述方面的有些形式中，Q是C1-C3直鏈或支鏈烷基。在第十六個實施方式的前述方面的另一些形式中，Q選自由下列組成的組甲基、乙基和丙基。在第十六個實施方式的前述方面的進一步形式中，Q是甲基。在第十六個實施方式的另一個方面中，R2選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C3-C10環(huán)烷基和任選地被取代的芳基。例如，在前述方面的一種形式中，R2是被取代的芳基。在前述方面的另一些形式中，R2選自由下列組成的組4-烷基苯基、4-烷氧基苯基、4-烷氧羰基苯基。在前述方面的進一步形式中，R2選自由下列組成的組4-甲基苯基、4-乙氧基苯基和乙氧基羰基苯基。在第十六個實施方式的另一個方面，R3選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C3-C10環(huán)烷基和任選地被取代的芳基。例如，在前述方面的一種形式中，R3是被取代的芳基。在前述方面的另一種形式中，R3選自由下列組成的組4-烷基苯基、4-烷氧基苯基、4-鹵代苯基。例如，在某些情況下，R3可以選自由下列組成的組4-氯代苯基、4-溴代苯基和4-甲氧苯基。
本發(fā)明的第十七個實施方式包括式III的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物， 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6的每一個獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的雜環(huán)、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，其中每個R7獨立地選自由下列組成的組任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或R3、R4和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)；R5、R6和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)；或R1、R2、與R1相連的碳和與R2相連的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)。
在第十七個實施方式的一個方面，R1選自由下列組成的組氫、任選地被取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基。在第十七個實施方式的前述方面的一種形式中，R1是任選地被一種芳基或雜芳基環(huán)取代的C1-C2直鏈或支鏈烷基。例如，在一些情況下，所述的芳基環(huán)是苯基。在另一些情況下，所述的雜芳基環(huán)含有氮。在有些實例中，所述的雜芳基環(huán)是引哚。在第十七個實施方式的另一個方面中，R1選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。在第十七個實施方式的又一個方面中，R1選自由下列組成的組甲基、吲哚甲基、芐基和仲丁基。在第十七個實施方式的另一個方面中，R1、R2、與R1相連的碳和與R2相連的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)。在前述方面的有些形式中，所述的雜環(huán)是吡咯烷(pyrolidine)。在第十七個實施方式的再一個方面中，R2、R3和R5的每一個獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C4直鏈或支鏈烷基、C2-C5直鏈或支鏈烯基、C2-C5直鏈或支鏈炔基。在前述方面的有些形式中，所述的烷基選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。在前述方面的其它形式中，R2、R3和R5是氫。在第十七個實施方式的另一個方面中，R4是任選地被取代的芳基。例如，在前述方面的有些形式中，所述的芳基是苯基。在前述方面的另一些形式中，所述芳基任選地被鹵素、烷氧基、烷基、硫代烷基和全鹵代烷基。在前述方面的另一些形式中，R4選自由下列組成的組4-氯代苯基、4-溴代苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、2，6-二異丙基苯基、3，4-二氯苯基、4-甲氧基苯基、4-甲基巰基苯基、4-三氟甲基苯基。在第十七個實施方式的另一個方面中，R6選自由下列組成的組任選地被取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基，和任選地被取代的雜環(huán)。在前述方面的有些形式中，所述的烷基選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和1-甲基丁基。例如，在某些情況下，所述的烷基被一種雜環(huán)或一種被取代的胺取代。在一些實例中，所述雜環(huán)是嗎啉。在另一些實例中，所述的雜環(huán)是哌啶或嗎啉。在第十七個實施方式的另一個方面，R6選自由下列組成的組1-甲基-4-二乙基氨基丁基、2-N-嗎啉乙基，N-苯甲基哌啶-4-基(N-benzylpiperidin-4-yl)。在第十七個實施方式的再一個方面，R5、R6和它們連接的氮連接形成一種任選地被取代的融合雜芳基或一種任選地被取代的雜環(huán)。在前述方面的一些形式中，所述的雜環(huán)是哌啶或苯并哌啶。在第十七個實施方式的另一個方面，R5、R6和它們連接的氮連接形成一種選自以下的取代基
本發(fā)明的第十八個實施方式包括選自由下列組成的組的一種化合物 在某個實施方式中，F(xiàn)PRL1受體被用作鑒定能有效治療炎癥和發(fā)炎時并發(fā)的疼痛的化合物的工具。該受體可以是動物來源的，但在優(yōu)選實施方式中來源于人。該受體可用于基于細胞的轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，其能溝通過將被FPRL1轉(zhuǎn)染的細胞與缺乏FPRL1受體的細胞所引起的反應進行比較，來鑒定出與FPRL1受體相互作用的分子。這種比較可以通過檢測受體的結(jié)合特性或通過當細胞表達FPRL1時由細胞引起的功能反應進行，所述反應被確定為在存在或不存在額外的化合物時顯示出一種新的表型特征，而該化合物由此可被確定為是FPRL1受體的一種激動劑、拮抗劑或反激動劑。
在某些實施方式中，其中所公開的是鑒定作為FPRL1受體激動劑的化合物的方法，該方法包括培養(yǎng)表達FPRL1受體的細胞，將細胞與至少一種化合物孵育并測定FPRL1受體活性的任何提高，這樣鑒定出是FPRL1受體的激動劑的化合物。
在一些實施方式中，所培養(yǎng)的細胞過表達所述的FPRL1受體。在另一些實施方式中，本發(fā)明涉及鑒定FPRL1受體基因中存在的突變的方法，該突變被懷疑賦予了受體的組成活性(constitutive activity)，該方法包括(a)從患有推定與FPRL1受體的組成活性相關的紊亂或疾病的個體的生物樣品中提取核酸；(b)從所提取的核酸制備cDNA；(c)從步驟(b)中的cDNA中選擇編碼FPRL1受體的cDNA；(d)使用包含所述選擇的cDNA的表達載體轉(zhuǎn)染細胞；(e)選擇表達具有組成活性的FPRL1受體的細胞；和(f)對所述選擇細胞內(nèi)的cDNA進行測序以檢測突變。
在又一個方面，發(fā)明涉及診斷與FPRL1受體的組成活性相關的紊亂或疾病或是對紊亂或疾病的易感性的方法，該方法包括(a)從推定患有或易感于與FPRL1受體的組成活性相關的紊亂或疾病的個體中獲得生物樣品；(b)從所述的生物樣品中分離編碼所述受體的核酸序列或其部分，或者相應于通過上述突變鑒定方法鑒定為包含突變的基因部分的部分所述核酸序列；和(c)檢測所述核酸序列或其所述部分中是否存在突變。
例如，通過對核酸進行測序并與已知或先前鑒定為包含突變的序列進行比較等方法，可以檢測出核酸序列中的一個或多個突變的存在。
在另一個方面中，本發(fā)明涉及檢測編碼FPRL1受體的基因中突變的檢測試劑盒，所述突變賦予了FPRL1受體的組成活性，檢測試劑盒包括相應于通過上述突變鑒定方法鑒定的基因部分的核酸序列，所述序列中包含至少一個突變。
在某些實施方式中，其所公開的是一種鑒定化合物的方法，該化合物是FPRL1受體的激動劑，所述方法包括培養(yǎng)表達FPRL1受體的細胞；將細胞與至少一種化合物孵育并確定FPRL1受體活性的任何提高，從而鑒定出是FPRL1受體激動劑的化合物。
在某些實施方式中，培養(yǎng)的細胞過表達所述的FPRL1受體。在另一些實施方式中，鑒定的激動劑對FPRL1受體具有選擇性。
在某些實施方式中，其所公開的是一種鑒定化合物的方法，該化合物是FPRL1受體的拮抗劑或反激動劑，所述方法包括培養(yǎng)表達FPRL1受體的細胞；將細胞與至少一種化合物孵育并確定FPRL1受體活性的任何降低，從而鑒定出是FPRL1受體的拮抗劑或反激動劑的化合物。
在某一些實施方式中，培養(yǎng)的細胞過表達所述的FPRL1受體。在另一些實施方式中，鑒定的拮抗劑或反激動劑對FPRL1受體具有選擇性。
可以被本領域技術人員所理解的是，對本發(fā)明可以進行多種多樣的修改而不離開本發(fā)明所公開的原理。因此，應該清楚地理解的是，這里所公開的形式只是說明性的且不是為了對這里公開的范圍作出限制。
這里進一步公開的是這里定義的式I、II或III的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物，它們能選擇性激活FPRL1受體。

進一步公開了減輕發(fā)炎反應的方法，該方法通過給予對象治療有效量的式I、式II或式III的化合物、經(jīng)由調(diào)節(jié)白細胞運送中的關鍵步驟和防止嗜中性粒細胞介導的組織損傷進行。另外，還公開了調(diào)節(jié)或特異激動FPRL1受體的方法，給予有效量的式I、式II或式III的化合物的方法。
以下公開的是本發(fā)明的其它實施方式。
附圖的簡要說明

圖1說明了在不同時間點不同劑量的化合物7對熱痛覺過敏的效應。
圖2說明了不同劑量的化合物7對熱痛覺過敏的效應。
圖3說明了在化合物7的不同劑量時觀察到的痛覺過敏百分數(shù)。
圖4說明了不同劑量的化合物7對浮腫形成的效應。
優(yōu)選實施方式的詳細說明第一方面，這里公開了一種式I的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物， 其中R1選自由C1-C10直鏈或支鏈亞烷基、氧、硫、NQ、CHCN、C＝O、C＝S、C＝NQ、S＝O、S(＝O)2、C＝NOQ組成的組，其中Q獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；R2、R3、R4和R5的每一個獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，并且各個R7獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或R3、R4和它們連接的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)。
R6可以出現(xiàn)0-5次并獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C4直鏈或支鏈烷基、環(huán)烷基、任選地被取代的芳基或雜芳基、羥基、硝基、氨基、鹵素、磺酸鹽、全鹵烷基、-OR7、-N(R8)2、-CN、-C(＝Z)R8、-C(＝Z)OR8、-C(＝Z)N(R8)2、-N(R8)-C(＝Z)R8、-N(R8)-C(＝Z)N(R8)2、-OC(＝Z)R8和-SR8，其中Z是氧或硫，并且其中各個R8獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或“R6”形成融合的芳基或雜環(huán)。
在某些實施方式中，式I化合物中的R1是C1-C10直鏈亞烯基。在一些實施方式中，R1是C1-C5直鏈亞烯基。在進一步的實施方式中，R1選自由下列組成的組亞甲基、乙烯基、正丙稀基、異丙烯基、正丁烯基、仲丁烯基、叔丁烯基、正戊二烯基和異戊二烯基。
在一些實施方式中，式I化合物中的R2選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、氨基、鹵素、-OR7和-N(R7)2，其中R7是氫、芳基、雜芳基或C1-C10直鏈烷基。在某些實施方式中，R2選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、鹵素和-OR7，其中R7是氫或C1-C3直鏈烷基。在另一些實施方式中，R2選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、甲氧基和乙氧基。
在某些實施方式中，式I化合物中的R3選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、氨基、鹵素、-OR7和-N(R7)2，其中R7是氫、芳基、雜芳基或C1-C10直鏈烷基。在一些實施方式中，R3選自由下列組成的組氫、羥基、硝基和-OR7，其中R7是氫或C1-C3直鏈烷基。在另一些實施方式中，R3選自由下列組成的組氫、硝基、羥基、甲氧基和乙氧基。
實施方式包括那些，其中式I化合物中的R4選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、-OR7和-N(R7)2，其中各個R7獨立地為任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基。在一些實施方式中，R4選自由下列組成的組氫、C1-C3直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、-OR7和-N(R7)2，其中各個R7獨立地為任選地被芳基取代的C1-C3直鏈烷基。在另一些實施方式中，R4選自由下列組成的組氫、甲基、乙基、羥基、硝基、氨基、氯、氟、甲氧基、乙氧基、甲氨基、二甲氨基、二乙氨基和芐氧基。
在進一步的實施方式中，式I化合物中的R5選自由下列組成的組氫、芳基、雜芳基、C1-C10直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7和-N(R7)2，其中各個R7獨立地為任選的被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基。在另一些實施方式中，R5選自由下列組成的組氫、C1-C3直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7和-N(R7)2，其中各個R7獨立地為C1-C3直鏈烷基。在某些實施方式中，R5選自由下列組成的組氫、羥基、氯、溴、三氟甲基和甲氧基。
在一些實施方式中，R6是氫。
如上所述的，在一些實施方式中，R2、R3和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)。在一些實施方式中，該環(huán)是融合的雜環(huán)的烷基環(huán)，其可以為N-嗎啉和吡咯。
在一些實施方式中，式I化合物選自由下列組成的組
在另一個方面中，其所公開的是式II的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物，
其中X1和X2的每一個獨立地是氧或氟，R1選自由C1-C10直鏈或支鏈亞烷基、氧、硫、NQ、CHCN、C＝O、C＝S、C＝NQ、S＝O、S(＝O)2、C＝NOQ組成的組，其中Q選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；R2和R3的每一個獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，其中各個R7獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基。
在某些實施方式中，式II的化合物選自由下列組成的組
在另一個方面，這里公開了式III的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物，
其中R1、R2、R3、R4、R5和R6的每一個獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的雜環(huán)、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，其中各個R7獨立地選自由下列組成的組任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或R3、R4和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)；R5、R6和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)；或R1、R2、與R1相連的碳和與R2相連的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)。
在某些實施方式中，式III的化合物中的R1選自由下列組成的組氫、任選地被取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基。在另一些實施方式中，R1可以是任選地被一種芳基或雜芳基環(huán)取代的C1-C5直鏈烷基。在一些實施方式中，芳基環(huán)是苯基，在另一些實施方式中，雜芳基環(huán)含有氮。一些實施方式包括那些，其中的雜芳基環(huán)是吲哚。在一些實施方式中，R1的烷基基團選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。在某些實施方式中，R1選自由下列組成的組甲基、吲哚甲基、芐基和仲丁基。
在一些實施方式中，R1、R2、與R1相連的碳和與R2相連的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)。雜環(huán)可以是吡咯烷(pyrolidine)。
在一些實施方式中，式III的化合物的R2、R3和R5各自獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C4直鏈或支鏈烷基、C2-C5直鏈或支鏈烯基、C2-C5直鏈或支鏈炔基。在一些實施方式中，烷基選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。在進一步的實施方式中，R2、R3和R5是氫。
在一些實施方式中，式III的化合物的R4是任選地被取代的芳基。在某些實施方式中，芳基是苯基。在這些實施方式中的一些中，芳基任選地被鹵素、烷氧基、烷基、硫代烷基和全鹵代烷基取代。在進一步的實施方式中，芳基任選地被氯、溴、甲基、乙基、異丙基、甲氧基、硫代甲基和三氟甲基取代。在一些實施方式中，R4選自由下列組成的組4-氯代苯基、4-溴代苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、2，6-二異丙基苯基、3，4-二氯苯基、4-甲氧基苯基、4-甲基巰基苯基、4-三氟甲基苯基。
本公開的實施方式包括那些，其中式III的化合物的R6選自由下列組成的組任選地被取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基，和任選地被取代的雜環(huán)。在一些實施方式中，烷基選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和1-甲基丁基。在進一步的實施方式中，烷基被雜環(huán)或被取代的胺取代。在一些實施方式中，烷基被取代的雜環(huán)是嗎啉。在某些實施方式中，R6為任選地被取代的雜環(huán)，所述的雜環(huán)可以是哌啶或嗎啉。在進一步的實施方式中，R6選自由下列組成的組1-甲基-4-二乙基氨基丁基、2-N-嗎啉乙基，N-苯甲基哌啶-4-基。
在一些實施方式中，式III的化合物的R5、R6和它們連接的氮連接形成一種任選地被取代的融合雜芳基或一種任選地被取代的雜環(huán)。在某些實施方式中，雜環(huán)是哌啶或苯并哌啶。在另一些實施方式中，R5、R6和它們連接的氮連接形成一種選自由下列組成的組的取代基 在某些實施方式中，式III的化合物選自由下列組成的組



術語“藥學上可接受的鹽”指一種化合物配方，其不會對給藥的生物體造成顯著的刺激，也不會使該化合物的生物活性和特性缺失。通過將這里公開的化合物與無機酸反應制備藥物鹽，無機酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲基磺酸、乙基磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸之類。藥物鹽還可以通過將這里公開的化合物與一種基團反應形成相應的鹽所得到，例如銨鹽，堿金屬鹽如鈉鹽或鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣鹽或鎂鹽，有機基團的鹽如二環(huán)己基胺、N-甲基-D-葡糖胺、三(羥甲基)甲胺，和含有氨基酸如精氨酸、賴氨酸之類的鹽。
術語“酯”指一種具有通式-(R)n-COOR’的化學成分(chemical moiety)，其中R或R’獨立地選自由下列組成的組烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基(通過環(huán)碳結(jié)合)和異脂環(huán)(通過環(huán)碳結(jié)合)，且n為0或1。
“酰胺”是具有通式-(R)n-C(O)NHR’或-(R)n-NHC(O)R’的化學成分，其中R或R’各自獨立地選自由下列組成的組烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基(通過環(huán)碳結(jié)合)和異脂環(huán)(通過環(huán)碳結(jié)合)，且n為0或1。酰胺可以是與這里公開的分子連接的氨基酸或肽分子，從而形成一種前體藥物。
這里公開的化合物上的任何胺、羥基或羧基側(cè)鏈可以被酯化或酰胺化。獲得這種結(jié)果所使用的方法和特定基團對于本領域技術人員來說是已知的，并可以在參考文獻(如Greene和Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，3rdEd.，John Wiley & Sons，紐約，NY，1999)中容易地找到，這里將該文獻作為參考全文引用。
“前體藥物”指一種在體內(nèi)能轉(zhuǎn)化成母體藥物(parent drug)的制劑。前體藥物被經(jīng)常使用是因為在一些情形下，它們要比母體藥物更容易給藥。它們可以例如通過口服而被生物利用，但母體藥物卻不能。與母體藥物相比，前體藥物還可以在藥物組合物中具有改善的溶解性。例如但沒有限制地，前體藥物可以是這里公開的一種化合物，該化合物作為酯(“前體藥物”)被施用以促進穿越細胞膜的傳輸，因為水溶性對于細胞膜處的遷移是不利的，不過一旦進入細胞內(nèi)前體藥物就會被代謝水解成羧酸和活性實體，而此時水溶性在細胞內(nèi)是有益的。前體藥物的一個進一步的例子是一種與一種酸基結(jié)合的短肽(聚氨基酸)，其中的肽被代謝后暴露出活性部分。
術語“芳香基”指具有至少一個環(huán)的芳基，包括碳環(huán)形烷基(如苯)和雜環(huán)烷基(如嘧啶)，其中所述的環(huán)具有一個共扼的π電子系統(tǒng)。該術語包括單環(huán)的或融合環(huán)聚環(huán)的(如分享臨近碳原子對的環(huán))基團。術語“碳環(huán)的”指含有一個或多個共價相鄰的環(huán)結(jié)構的化合物，其中形成環(huán)骨架的原子均為碳原子。因此該術語將碳環(huán)形環(huán)與環(huán)骨架中含有至少一個不同于碳原子的原子的雜環(huán)形環(huán)區(qū)別開來。術語“雜芳香基”或“雜芳基”指含有至少一個雜環(huán)的芳香基團芳基環(huán)的例子包括但不局限于苯，和被取代了的苯如甲苯、苯胺之類，萘和被取代了的萘，以及甘菊環(huán)。
雜芳基環(huán)的例子包括但不局限于呋喃、噻吩、吡咯、吡咯啉、吡咯烷、噁唑、噻唑、咪唑、咪唑啉、咪唑烷、吡唑、吡唑啉、吡唑烷、異噁唑、異噻唑、三唑、噻二唑、吡喃、吡啶、哌啶、嗎啉、硫代嗎啉、噠嗪、嘧啶、吡嗪、哌嗪、三嗪，以及 和 其中R如這里所定義的。
這里使用的術語“烷基”指脂肪烴基團。烷基成分可以是“飽和烷基”基團，即其不含有任一烯烴或炔烴成分。烷基成分還可以是一種“不飽和烷基”成分，即其含有至少一個烯烴或炔烴成分?！跋N”成分指含有至少兩個碳原子和至少一個碳-碳雙鍵的基團，“炔烴”成分指含有至少兩個碳原子和至少一個碳-碳三鍵的基團。不管飽和或不飽和，烷基成分可以是支鏈的、直鏈的或環(huán)狀的。
烷基基團可以具有1-20個碳原子(無論在這里何時出現(xiàn)，數(shù)字的范圍如“1-20”指在給定范圍內(nèi)的每一個整數(shù)，如“1-20個碳原子”指烷基基團可以由1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子、等等至多達到包括20個碳原子組成，盡管該定義還覆蓋了沒有指定數(shù)字范圍的術語“烷基”的存在)。烷基基團可以是具有1～10個碳原子的中等大小的烷基。烷基基團還可以是具有1至5個碳原子的較低烷基。這里公開的化合物的烷基基團可以被指定為“C1-C4烷基”或類似的指定。只是作為例子，“C1-C4烷基”指在烷基鏈中有1至4個碳原子，即烷基鏈選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。
烷基基團可以被取代或未被取代。當被取代時，取代基基團是各自獨立地選自以下的一個或多個基團環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜脂環(huán)基、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、硫代烷基、硫代芳基、氰基、鹵素、羰基、硫代羰基、O-氨基甲酰、N-氨基甲酰、O-硫代氨基甲酰、N-硫代氨基甲酰、C-酰氨基、N-酰胺基、S-磺酰胺基、N-磺酰胺基、C-羧基、O-羧基、異氰?；?、硫代氰?；?、異硫代氰?；⑾趸?、甲硅烷基、三鹵代甲基磺?；桶被捌渌鼈兊谋槐Ｗo的衍生物，其中氨基包括單或雙取代的氨基基團。典型的烷基基團包括但不以任何方式局限于甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、己基、乙烯基、丙稀基、丁烯基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基之類。無論何處的取代基被描述為被“任意地取代的”，即取代基可以由上述的一種取代基取代。
術語“亞烷基”指一種這里定義的烷基基團，其是一種二價自由基并與其它兩個成分相連。這樣，亞烯基的例子如但不局限于亞甲基(-CH2-)、乙烯基(-CH2CH2-)、丙稀基(-CH2CH2CH2-)、異丙稀基(-CH2-CH(CH3)-)和異丁烯基(-CH2-CH(CH3)-CH2-)。
單獨出現(xiàn)且沒有數(shù)字指定的取代基“R”指選自由下列組成的組的取代基烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基(通過一個環(huán)碳結(jié)合)和雜脂環(huán)族的基團(通過一個環(huán)碳結(jié)合)。
“O-羧基”基團指RC(＝O)O-基團，其中R為這里所定義的。
“C-羧基”基團指-C(＝O)OR基團，其中R為這里所定義的。
“乙酰基”基團指-C(＝O)CH3基團。
“三鹵代甲基磺?；被鶊F指X3CS(＝O)2-基團，其中X是鹵素。
“氰基”基團指-CN基團。
“異氰?；被鶊F指-NCO基團。
“硫代氰酰基”基團指-CNS基團。
“異硫代氰酰基”基團指-NCS基團。
“亞硫酰基”基團指-S(＝O)-R基團，其中R為這里所定義的。
“S-磺酰胺基”基團指-S(＝O)2NR基團，其中R為這里所定義的。
“N-磺酰胺基”基團指RS(＝O)2NH-基團，其中R為這里所定義的。
“三鹵代甲基磺酰胺基”基團指X3CS(＝O)2NR-基團，其中X和R為這里所定義的。
“O-氨基甲?；被鶊F指-OC(＝O)-NR，其中R為這里所定義的。
“N-氨基甲酰基”基團指ROC(＝O)NH-，其中R為這里所定義的。
“O-硫代氨基甲?；被鶊F指-OC(＝S)-NR，其中R為這里所定義的。
“N-硫代氨基甲酰基”基團指ROC(＝S)NH-，其中R為這里所定義的。
“C-酰氨基”基團指-C(＝O)-NR2，其中R為這里所定義的。
“N-酰氨基”基團指RC(＝O)NH-，其中R為這里所定義的。
術語“全鹵代烷基”指一種其中所有的氫原子被鹵素原子取代的烷基基團。
當兩個取代基和它們所連接的碳形成環(huán)時，意味著以下的結(jié)構 其代表物是下面結(jié)構
在上述的例子中，R1和R2和它們連接的碳原子形成了一個六元芳香族環(huán)。
當兩個取代基和它們所連接的氮形成融合的雜芳基或雜環(huán)狀環(huán)時，意味著以下的結(jié)構 其代表物是下面的結(jié)構 除非有另外的說明，當一個取代基被認為是被“任意地取代的”，意味著取代基是一個可以被一個或多個各自獨立地選自由下列組成的組的基團所取代的基團，該組基團有環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)、羥基、烷氧基、芳氧基、巰基、硫代烷基、硫代芳基、氰基、鹵素、羰基、硫代羰基、O-氨基甲酰、N-氨基甲酰、O-硫代氨基甲酰、N-硫代氨基甲酰、C-酰氨基、N-酰胺基、S-磺酰胺基、N-磺酰胺基、C-羧基、O-羧基、異氰?；?、硫代氰?；惲虼桴；⑾趸?、甲硅烷基、三鹵代甲基磺?；桶被捌渌鼈兊谋槐Ｗo的衍生物，其中氨基包括單和雙取代的氨基基團?？梢孕纬缮鲜鋈〈谋Ｗo性衍生物的保護基團對于本領域技術人員來說是已知的，可以從如上述的Greene和Wuts的文獻中找到。
這里公開的某些化合物可以以立體異構體的形式存在，包括光學異構體。本發(fā)明公開的范圍包括所有的立體異構體和這種立體異構體的外消旋混合物以及可以根據(jù)本領域普通技術人員熟知的方法分離出的個別的對應異構體。
在另一個方面，這里公開的化合物選自由下列組成的組
以下闡述的方案提供了合成這里公開的化合物的概括性方案。方案1描述了式I化合物的合成。
方案1 方案2描述了式II化合物的合成。
方案2 方案3描述了式III化合物的合成。
方案3 在另一個方面，其公開了FPRL1受體作為篩選工具在鑒定有效治療炎癥的化合物中的用途。在一些實施方式中，這種用途可以通過篩選能影響FPRL1受體一種或多種活性的化合物的方法而產(chǎn)生作用，包括以下的步驟a)將重組細胞與測試化合物接觸，其中重組細胞包括表達FPRL1受體的重組核酸，假定細胞不含有表達自內(nèi)源性核酸的功能性FPRL1受體，和b)測定測試化合物影響FPRL1受體一種或多種活性的能力，和將這種能力與測試化合物在不含有重組核酸的細胞中影響一種或多種FPRL1受體的能力進行比較；其中重組核酸包括一種選自由下列組成的組的FPRL1受體核酸i)SEQ ID NO1的核酸，ii)編碼SEQ ID NO2的氨基酸的核酸，iii)在i)或ii)中的任一核酸分子的衍生物，其中衍生物編碼一種具有一種或多種FPRL1受體活性的受體，其包括能在嚴格雜交條件下與SEQ ID NO1的核酸的互補序列雜交的至少20個連續(xù)的核苷酸。
在某些實施方式中，F(xiàn)PRL1受體核酸編碼SEQ ID NO2所示氨基酸序列的衍生物，所述核酸包含在嚴格雜交條件下與編碼SEQ ID NO2的氨基酸序列的至少20個連續(xù)核苷酸的互補序列雜交的至少20個連續(xù)的核苷酸。
在一些實施方式中，衍生物包括至少50個、至少100、至少150、至少200、至少250、至少300、至少350、至少400、至少450、至少500、至少600、至少700、至少800、至少900、至少1000、至少1100、至少1200、至少1300、至少1400、至少1500、至少1600、至少1700、至少1800、至少1900、至少2000、至少2100、至少2200、至少2300、至少2400或至少2500個連續(xù)的核苷酸，所述的連續(xù)核苷酸能在嚴格雜交條件下與編碼SEQ ID NO2的氨基酸序列的連續(xù)核苷酸的互補序列雜交。
在另一個方面，本發(fā)明的公開涉及治療任一種急性或慢性炎癥的方法，包括將生物體與有效量的至少一種式I、II或III的化合物接觸，其中該化合物激活FPRL1受體亞型。
在另一個方面，本發(fā)明的公開涉及一種治療炎癥的方法，其包括將患有炎癥的個體與有效量的至少一種式I、II或III的化合物接觸，這樣炎癥的一種或者多種綜合癥得到了降低。
在某些實施方式中，上面的方法還包括在接觸步驟之前鑒定需要治療炎癥的個體的步驟。
在另外一些實施方式中，式I、II和III的化合物選擇性地激活FPRL1受體亞型。
在另一個方面，本發(fā)明的公開涉及治療或預防個體炎癥或炎性反應的方法，包括給予個體有效抗炎量的式I、II或III的化合物。在某些實施方式中，炎性反應導致白細胞的激活，白細胞的激活包括白細胞的遷移和產(chǎn)生活性氧以引起血管的滲漏或浮腫。在另一些實施方式中，炎性反應與風濕性關節(jié)炎、阿爾茨海默癥或哮喘相關。在其它一些實施方式中，炎性反應是由物理性損傷包括物理傷害和輻射暴露導致的。
在另一個方面，本發(fā)明的公開涉及誘導血管舒張以預防血管收縮性反應或疾病的方法，包括給予個體有效血管擴張量的式I、II或III的化合物。在某些實施方式中，血管收縮性反應或疾病選自腎血液動力學疾病包括腎小球病，和心血管疾病包括高血壓、心肌梗塞和心肌缺血。
在此外的一個方面中，本發(fā)明的公開涉及拮抗個體對硫肽(sulfidopeptide)白細胞三烯的血管收縮性反應的方法，包括給予個體式I、II或III的化合物。在一些實施方式中，對所述白細胞三烯的血管收縮性反應與選自由下列組成的組的一種醫(yī)學紊亂相關哮喘、過敏性反應、過敏癥反應、休克、炎癥、風濕性關節(jié)炎、痛風、牛皮癬、過敏性鼻炎、成人呼吸窘迫綜合癥、克羅恩氏病、內(nèi)毒素性休克、創(chuàng)傷性休克、出血性休克、腸缺血性休克、腎小球腎炎、良性前列腺肥大、炎性腸病、心肌缺血、心肌梗塞、循環(huán)系統(tǒng)的休克、腦損傷、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎病、心血管病和高血壓。在另一些實施方式中，血管收縮性反應是腎血管收縮性反應，例如腎小球腎炎。
在另一個方面，本發(fā)明的公開涉及刺激個體體內(nèi)的細胞增殖以治療或預防骨髓抑制性紊亂的方法，包括給予個體有效量的式I、II或III的化合物。
在某些實施方式中，本發(fā)明公開的方法還指治療急性或慢性炎癥的方法。這里公開的用于該方法的特別優(yōu)選的化合物的實施方式由化合物1、2、3、4、5、6、7代表。
化合物1 化合物2 化合物3 化合物4
化合物5 化合物6 化合物7在另一個方面，所公開的是治療急性或慢性疼痛的方法，包括鑒別需要所述治療的個體并將所述個體與治療有效量的至少一種這里定義的式I、式II或式III的化合物接觸，其中一種或多種疼痛癥狀被減輕。
這里公開的又一方面是發(fā)現(xiàn)了公開的FPRL1化合物是FPRL1受體的特異性激動劑。因此，這些激動劑被認為與FPRL1受體結(jié)合和誘導抗炎性反應。這里公開的FPRL1受體的激動劑可以用于治療急性或慢性炎癥。
這樣，在一些實施方式中，式I、式II或式III的化合物激活了FPRL1受體。在某些實施方式中，化合物選擇性地激活FPRL1受體亞型，但不激活FPR或FPRL2受體。
術語“激活”指提高FPRL1受體的細胞功能。受體功能優(yōu)選為與天然的結(jié)合伴侶互作。術語“天然的結(jié)合伴侶”指在細胞內(nèi)與FPRL1受體結(jié)合的分子。
在某些實施方式中，通過這里公開的方法治療的炎癥與以下因素相關細菌感染、病毒感染、物理性損傷包括外傷和輻射暴露、哮喘引起的血管收縮、過敏反應、過敏癥反應、糖尿病、風濕性關節(jié)炎、痛風、牛皮癬、過敏性鼻炎、成人呼吸窘迫綜合癥、克羅恩氏病、內(nèi)毒素性休克、創(chuàng)傷性休克、出血性休克、腸缺血性休克、腎小球腎炎、良性前列腺肥大、炎性腸病、心肌缺血、心肌梗塞、循環(huán)系統(tǒng)的休克、腦損傷包括缺血性休克和出血性休克、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎病、心血管病和高血壓或化學損傷。
在又一個方面，這里公開了鑒定能減輕個體炎癥的化合物的方法，包括鑒別患有炎癥的對象；提供給對象至少一種如這里定義的式I、式II或式III的化合物；和確定所述至少一種化合物是否減輕了對象的炎癥。
在再一個方面，這里公開了鑒定作為FPRL1受體激動劑的一種式I、式II或式III的化合物的方法，該方法包括將FPRL1受體與這里所定義的至少一種式I、式II或式III的化合物接觸；測定FPRL1受體活性水平的任何提高，從而鑒定出是FPRL1受體激動劑的式I、式II或式III的化合物。
在本發(fā)明公開的前后文中，“激動劑”被定義為能提高受體基礎活性(也就是受體介導的信號轉(zhuǎn)導)的化合物?！稗卓箘北欢x為一種化合物，該化合物能阻斷一種受體激動劑的活性。“部分激動劑”被定義為一種顯示出有限的或少于全部活性的激動劑，這樣它不能在體外激活受體，在體內(nèi)作為拮抗劑發(fā)揮功能。
術語“對象”指的是一種動物，優(yōu)選一種哺乳動物，更優(yōu)選人類，是治療、觀察或試驗的對象。哺乳動物可以選自由下列組成的組小鼠、大鼠、兔子、豚鼠、狗、貓、綿羊、山羊、牛、靈長類如猴子、黑猩猩和猿及人類。
這里使用的術語“治療有效量”指一定量的活性化合物或藥物制劑，其能夠引起特定的生物學或醫(yī)學反應。該反應可以出現(xiàn)在被研究者、獸醫(yī)、內(nèi)科醫(yī)生或其它臨床醫(yī)生所檢測的組織、系統(tǒng)、動物或人中，其包括緩和所治療疾病的癥狀。
在更進一步的方面，這里公開了鑒定是FPRL1受體激動劑的化合物的方法，該方法包括培養(yǎng)表達FPRL1受體的細胞；將細胞與至少一種這里定義的式I、式II或式III的化合物孵育；測定FPRL1受體任何活性的提高，從而鑒定出是FPRL1受體激動劑的一種式I、式II或式III的化合物。
在某些實施方式中，培養(yǎng)的細胞過表達所述的FPRL1受體。在其它一些實施方式中，鑒定的化合物對FPRL1受體具有選擇性。
在另一些方面，這里公開了包含一種上述式I、式II或式III的化合物和生理學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑或其組合的藥物組合物。
術語“藥物組合物”指這里公開的化合物與其它化學成分如稀釋劑或載體的混合物。藥用組合物使得對生物體施用藥物變得容易。多種化合物給藥的技術在文獻中均有記載，包括但不局限于口服、注射、噴霧、胃腸外給藥和局部給藥。藥物組合物還可以通過將化合物與無機或有機酸反應制備，所述酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲基磺酸、乙基磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸之類。
術語“載體”指一種能促進化合物滲入細胞或組織內(nèi)的化學成分。例如二甲基亞砜(DMSO)是一種普遍使用的載體，由于它能促進許多進入生物體的細胞或組織內(nèi)的有機化合物的吸收。
術語“稀釋劑”指一種在水中稀釋的化學成分，它能溶解感興趣的化合物并穩(wěn)定該化合物的生物學活性形式。溶解于緩沖溶液的鹽在本領域中被作為稀釋劑使用。一種普遍使用的緩沖的溶液是磷酸緩沖的生理鹽水，因為它能模擬人體血液的鹽環(huán)境。由于緩沖鹽可以在低濃度時控制溶液的pH，故緩沖的稀釋劑幾乎不改變化合物的生物學活性。
術語“生理學上可接受的”定義了一種不會使化合物的生物學活性和特性消失的載體或稀釋劑。
這里描述的藥物組合物可以被單獨為人類患者施用、或以藥物組合物的形式，其中在藥物組合物中其與其他的活性成分(在組合治療中)或者適當?shù)妮d體或者賦形劑混合。本申請中化合物的制備或給藥技術可以參見文獻《Remington’s Pharmaceutical Sciences》(Mack Publishing Co.，Easton，PA，18th edition，，1990)。
合適的給藥途徑例如包括經(jīng)口腔、經(jīng)直腸、經(jīng)黏膜或腸內(nèi)給藥；胃腸外的給藥途徑如肌肉、皮下、靜脈內(nèi)、骨髓內(nèi)注射，以及膜內(nèi)的、直接心室內(nèi)的、腹膜內(nèi)的、鼻內(nèi)的或眼內(nèi)的注射。
可以選擇地，可以經(jīng)由化合物直接注入疼痛部位以局部而不是全身的方式施用化合物，通常以一種包埋物(depot)或持續(xù)釋放的形式給藥。進一步地，可以通過靶向藥物釋放系統(tǒng)來施用藥物，例如，以覆蓋有組織特異性抗體的脂質(zhì)體給藥。脂質(zhì)體將被靶向于器官并被器官選擇性吸收。
這里所公開的的藥物組合物可以通過已知的方法制備，如通過常規(guī)的混合方法、溶解方法、?；椒ā⑻且峦柚圃旆椒?、粉碎方法、乳化方法、形成膠囊的方法、圈閉(entrapping)或壓片的方法。
這樣，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可以通過傳統(tǒng)的方法配制，其使用一種或者多種可以藥物上使用的生理學上可接受的載體包括賦形劑和佐劑以促進活性化合物加工成制劑。合適的制劑依賴于所選擇的給藥途徑?？梢允褂萌我环N熟知的合適的技術、載體和賦形劑，如從文獻如上述的《Remington’sPharmaceutical Sciences》中所了解的那些。
用于注射時，這里公開的藥劑可以制成在水溶液中，優(yōu)選生理學上可接受的緩沖液如Hank’s溶液、Ringer’s溶液或生理鹽水緩沖液。在經(jīng)黏膜給藥時，在制劑中使用適合于滲入屏障的滲透劑。這種滲透劑在本領域通常是已知的。
用于口服給藥時，可以通過將活性化合物與本領域熟知的制藥學上可接受的載體相結(jié)合，以容易地制成組合物。這些載體使得這里公開的化合物可被制成相應的劑型用于被治療的患者口服吸收，這些劑型如藥片、藥丸、糖衣丸、膠囊、流劑、凝膠體、糖漿、漿狀劑、懸浮液之類。用于口服的藥物制劑可以通過混合一種或多種固體賦形劑與這里公開的藥物化合物制備，如果需要，在加入合適的佐劑后，可任選地將形成的混合物制粉和對顆粒狀的混合物進行加工，從而獲得藥片或糖衣丸核。合適的賦形劑優(yōu)選填料如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纖維素制劑，如玉米淀粉、小麥淀粉、米淀粉、馬鈴薯淀粉、凝膠、黃薯膠、甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可以加入崩解劑，如交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、褐藻酸或其鹽如褐藻酸鈉。
糖衣丸核用合適的包衣提供。為了該目的，使用濃縮的糖溶液，所述的糖溶液可以任選地包含阿拉伯樹膠、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚羰乙烯膠、聚乙二醇、和/或二氧化鈦、漆溶液和合適的有機溶劑或溶劑混合物?？梢詫⒅珓┗蛏丶尤胨幤蛱且峦璋轮杏糜诒嬲J或是表征不同的活性化合物劑量的組合。
可被口服使用的藥物制劑包括由凝膠制備的推入配合(push-fit)膠囊，以及有凝膠和一種塑形劑如甘油或山梨醇制成的密封軟膠囊。推入配合膠囊在混合物中含有活性成分和填料如乳糖、粘合劑如淀粉和/或潤滑劑如滑石粉或硬脂酸鎂和任選的穩(wěn)定劑。在軟膠囊中，活性化合物可溶解于或懸浮于合適的液體中，這種液體如脂肪油、液體石蠟或液體狀聚乙二醇。另外，可以加入穩(wěn)定劑。用于口服的的所有制劑必須是以適合于這種給藥的劑量存在。
用于口腔給藥時，可以采取用常規(guī)方法將組合物制成藥片或止咳糖的形式。
用于吸入給藥時，與本發(fā)明公開相一致的適合于使用的化合物可以通過從加壓的容器或一種噴霧器中以氣霧劑噴霧呈遞的方式來方便地釋放，其中使用一種合適的推進劑如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它適合的氣體。在加壓的氣霧劑例子中，劑量單位可以通過一個顯示計量數(shù)量的閥來確定。如用于吸入器或吹藥器中的凝膠膠囊或藥筒可以制成含有該化合物和一種合適的粉末成分如乳糖或淀粉的粉末混合物。
化合物制劑可以經(jīng)腸胃外給藥，如通過注射如大丸藥注射或持續(xù)灌注。注射制劑可以以劑量單位的形式存在，如一次用量的針劑或多劑量的容器，并添加防腐劑。組合物可以采用在油或水介質(zhì)中的懸浮液、溶液或乳狀液的形式，其中可以包含配方藥劑如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或崩解劑。
腸胃外投藥的藥物制劑包括以水溶液形式的活性化合物的水溶液。另外，活性化合物的懸浮液可以制成合適的油注射懸浮液。合適的親脂性溶劑或介質(zhì)包括脂肪油如麻油或合成的脂肪酸酯如乙基油酸酯、甘油三酸酯或脂質(zhì)體。注射水懸浮液可以含有能提高懸浮液粘性的物質(zhì)，例如羧甲級纖維素鈉、山梨醇或葡聚糖。任選地，懸浮液還可以包含合適的穩(wěn)定劑或能提高化合物溶解度以制備高濃度溶液的藥劑。
可以選擇地，活性成分可以呈粉末的形式，在使用前與一種合適的介質(zhì)如無熱原的滅菌水組合。
化合物還可被制成用于直腸給藥的組合物如栓劑或停滯灌腸劑，所述制劑中含有常規(guī)栓劑成分如可可黃油或其它甘油酯。
除了前面描述的制劑外，還可以將化合物制成一種包埋制劑。這種長時間起作用的制劑可以通過植入(如皮下或肌肉地)或肌內(nèi)注射來給藥。這樣，例如，化合物可以與合適的聚合或疏水材料(如作為一種可接受油的乳劑)或離子交換樹脂形成制劑，或形成少量可溶的衍生物，例如少量可溶的鹽。
這里公開的疏水化合物的藥物載體是一種助溶劑體系包括苯甲醇、無極性的表面活性劑、水易混合的有機聚合物和水相。一種普遍使用的助溶劑體系是VPD助溶劑體系，其是一種含有3％w/v苯甲醇、8％w/v無極性的表面活性劑Polysorbate 80TM和65％w/v聚乙二醇300的溶液，制成在純的乙醇中的量。自然地，助溶劑體系的比例可以在不破壞它的可溶性和毒性的前提下進行相當多的變化。進一步地，助溶劑組分本身可以發(fā)生改變，例如可以使用其它低毒的無極性表面活性劑代替POLYSORBATE 80TM；聚乙二醇的片段大小可以發(fā)生變化；其它生物適合的聚合物可以替換聚乙二醇，如聚乙烯吡咯烷酮；和其它的糖或多聚糖可以代替葡萄糖。
作為選擇，也可以使用其它疏水藥物組合物的釋放系統(tǒng)。脂質(zhì)體和乳劑是熟知的疏水藥物的釋放介質(zhì)或載體。某些有機溶劑如二甲亞砜也可以使用，雖然通常的代價是更大的毒性。另外，可以通過持續(xù)釋放系統(tǒng)來釋放化合物，如含有所述治療劑的固體疏水聚合物的半透性基質(zhì)。各種持續(xù)釋放的材料已經(jīng)被確立并被本領域技術人員熟知。持續(xù)釋放的膠囊可以根據(jù)它們化學藥品的性質(zhì)，持續(xù)釋放化合物幾周至100天以上?；诨瘜W藥品的性質(zhì)和治療藥劑的生物學穩(wěn)定性，其它用于蛋白穩(wěn)定的策略也可使用。
這里公開的在藥物組合物中使用的許多化合物可以以具有藥學上適合的抗衡離子的鹽給藥。藥學上適合的鹽可以通過與許多酸反應形成，所述的酸包括但不局限于鹽酸、硫酸、醋酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、琥珀酸等。鹽類在水性的或其它質(zhì)子的溶劑中比相應的游離酸或鹽基形式更趨向于可溶。
適合于在這里公開的方法中使用的藥物組合物包括其中含有活性成分的組合物，所述活性成分以有效達到其預定目的的量存在。更明確的是所述的有效量意味著能有效預防、減輕或改善疾病的癥狀或延長被治療的個體的存活時間的化合物的量。治療有效量的確定明顯屬于本領域技術人員的能力范圍之內(nèi)，特別是考慮到這里提供了詳細的公開之后。
對于這里公開的藥物組合物的確切的劑型、給藥的途徑和劑量可以由個別醫(yī)生在考慮了患者的病情后作出選擇。(參見如Fingl等，1975，“ThePharmacological Basis of Therapeutics”，Ch.1，p.1)。給予患者組合物的劑量范圍通常是每公斤患者體重約0.5至1000mg，或1至500mg，或10至500mg，或50至100mg。根據(jù)患者的需要，使用的劑量可以是一天或多天期間給藥的單一劑量或是連續(xù)的兩劑量或多劑量。對于幾乎所有在目前的公開中提及的特定化合物而言，人類至少有些疾病的治療時所需的劑量已經(jīng)確定。因此，在多數(shù)情況下，在此公開的方法將使用那些相似的劑量，或使用劑量在已確定的人用劑量的約0.1％和500％之間，或約25％和250％之間，或50％和100％之間。在人用劑量沒有確定時，如對于新發(fā)現(xiàn)的藥物化合物的例子來說，適合的人用劑量可以根據(jù)ED50或ID50值或是根據(jù)來源于體外或體內(nèi)研究的其它適當?shù)闹低茢喑鰜?，如通過動物的毒性研究和功效試驗的結(jié)果來確定。
雖然確切的劑量可以在藥接著藥(drug by drug)的基礎上進行確定，但在多數(shù)的例子中，可以作出一些有關劑量的概括。用于成年病人的每日的劑量水平可以是，例如一劑口服劑量，其中每種成分在0.1mg和500mg之間，優(yōu)選在1mg和250mg之間，如5至200mg，或是一劑靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)注射的劑量，其中每種成分在0.01mg和100mg之間，優(yōu)選在0.1mg和60mg之間，如1至40mg，上述的每種成分均包含于這里公開的藥物組合物或按自由鹽基計算的其藥學上可接受的鹽，組合物每天給藥1至4次?？蛇x擇地，這里公開的組合物可以通過連續(xù)靜脈注入的方式給藥，優(yōu)選以每天一劑每種成分相當于400mg的量給藥。因此，通過口服方式每種成分總的每日用量通常在1至2000mg范圍內(nèi)，通過腸胃外給藥的方式總的每日用量通常在0.1至400mg的范圍內(nèi)。相應地，化合物可用于一段時期連續(xù)治療的給藥，例如給藥一個星期或更多，或幾月或幾年。
可以對劑量數(shù)量和間隔進行個別調(diào)整，以提供足以維持調(diào)節(jié)效應或最低有效濃度(MEC)的活性成分的血漿水平。MEC會隨化合物的不同而不同，但能通過體外的數(shù)據(jù)估計出來。獲得MEC必需的劑量依賴于個體特征或給藥途徑。然而，通過HPLC分析或生物測定可以確定血漿濃度。
劑量間隔也能通過MEC值確定。組合物必須基于一種方式給藥，如維持血漿水平在MEC之上10-90％的時間，優(yōu)選在30-90％之間和更優(yōu)選在50-90％之間。
局部給藥或選擇性吸收時，藥物的有效的局部濃度可以與血漿濃度無關。
當然給予組合物的量由取決于被治療者、被治療者的體重、病痛的嚴重性、給藥的方式和開藥醫(yī)生的判斷。
組合物可以以包裝或分配器的形式存在，其中包括一個或多個含有活性成分的單位劑量形式。包裝可以如包含金屬或塑料薄片，例如一種起泡包裝。包裝或分配器附帶有給藥的用法說明。包裝或分配器還可以附帶加入容器的書面告知，其以監(jiān)管醫(yī)藥品的制造、用途或銷售的政府機構所規(guī)定的形式列出，該告知是用于人或牲畜的藥品得到部門正式批準的反映。這種告知，例如可以是由美國食品和藥品管理部門對處方藥核準的標志，或是經(jīng)核準的產(chǎn)品插入物。還可以制備含有一種這里公開的化合物和一種適合的制藥學載體的組合物，所述的組合物被置于適當?shù)娜萜髦胁俗⒂糜谥委熞环N指明的疾病。
可以被本領域技術人員所理解的是，對本發(fā)明可以進行多種多樣的修改而不背離本發(fā)明公開的精神。因此，應該清楚地理解這里公開的形式只是說明性的且無意對這里公開的范圍作出限制。
實施例1受體選擇和擴增技術分析功能性受體分析、受體選擇和擴增技術(R-SAT)被用于研究已知或新的FPRL1激動劑的藥理學特性。R-SAT公開與美國專利號5,707,798、5,912,132和5,955,281中，所有這些在這里被全部(包括任何附圖)引入作為參考。
簡要地來說，NIH 3T3細胞在96孔組織培養(yǎng)板上生長至70-80％融合，按照每個廠商的說明使用Polyfect(Qiagen Inc.)將質(zhì)粒DNAs轉(zhuǎn)染細胞16-20小時。通常以每孔3ng受體和20ng β-半乳糖苷酶質(zhì)粒DNA來進行R-SATs。使用的所有受體和G-蛋白結(jié)構處于如前所述的pSI來源的哺乳動物表達載體(Promega Inc)中。通過PCR從基因組DNA中擴增FPRL1受體基因，其中使用的寡脫氧核苷引物基于公開的序列(GenBank Accession# M84562)。對于大規(guī)模的轉(zhuǎn)染，細胞被轉(zhuǎn)染16-20小時，然后在DMSO中經(jīng)胰蛋白酶作用和被凍結(jié)。隨后解凍冷凍的細胞，以每孔～10000個細胞在含有藥物的96半面孔板上鋪細胞。在兩種方法中，細胞隨后在充有5％CO2的潮濕空氣中生長五天。然后將培養(yǎng)基從板上移走，通過加入β-半乳糖苷酶底物鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG，在含有0.5％NP-40的PBS中)測定標記基因活性。通過分光光度孔板閱讀儀(Titertek Inc.)測定420nm處的比色反應。利用計算機程序XLFit(IDBSm)分析所有的數(shù)據(jù)。效力是與一種對照化合物(FPRL1例中的WKYMVm)激活相比的最大激活百分數(shù)。pEC50是log(EC50)的負數(shù)，其中EC50為產(chǎn)生50％最大激活的計算的摩爾濃度。
試驗為每一種相對人FPLR1受體的這些制劑提供了一種分子輪廓或指紋。通過表1可以看出，這些化合物選擇性地激活相對于模擬轉(zhuǎn)染細胞的FPLR1受體。
表1
效力是相對于配體WKYMVm而言的。
實施例2FPRL1受體結(jié)合試驗使用以下的試劑、用品和方法，可以在受體結(jié)合試驗中容易地確定這里公開的化合物結(jié)合FPRL1受體的能力。
1.FPRL1受體轉(zhuǎn)染的COS細胞(或用另一種轉(zhuǎn)染的不能內(nèi)源性表達FPRL1受體的細胞系取代)在24孔培養(yǎng)板上適合的培養(yǎng)基中生長。
2.制備放射性標記的測定溶液，其是將245μl、0.25nM的[125I]WKYMVm工作液與5μl的下述溶液(每一溶液)混合50μM未標記的WKYMVm工作液、0.25nM[125I]WKYMVm工作液、單獨的HEPES緩沖液或50×測試化合物。
3.用與真空裝置相連的巴斯德移液管從24孔板上吸出培養(yǎng)基。不沖洗細胞。
4.加入250μl步驟2中制備的放射性測定溶液至每一個測定孔，并將板置于軌道振蕩器上于室溫(～22℃)低速振蕩孵育60分鐘。
5.通過用24孔Brandel細胞收集器吸出放射性溶液終止孵育。通過細胞收集器用0.5ml冰冷的HEPES溶液洗滌細胞三次。
6.用微型移液管從孔中吸出溶液并轉(zhuǎn)入12×75-mm聚苯乙烯試管中。用γ計數(shù)器(Packard，Cobra II)分析。
7.確定特異性結(jié)合和計算IC50值。
實施例3檢測轉(zhuǎn)染的HL-60細胞內(nèi)細胞溶質(zhì)鈣的變化1.用磷酸緩沖的鹽洗滌經(jīng)FPRL1或一種對照受體轉(zhuǎn)染的HL-60細胞，所述HL-60細胞的濃度為每毫升1-3×106個細胞。
2.在細胞中加入2μM Fura-2，在存在或不存在可變濃度的化合物時對胞內(nèi)鈣的升高進行測定。
3.在100nM時，將反應與通過應用標準的參照配體WKYMVm產(chǎn)生的反應相比較。
4.胞內(nèi)自由鈣濃度通過以下公式計算出[Ca2+]1=Kd(F-Fmin)Fmax-F]]>其中對于Fura-2的Kd是在224nM時得出，F(xiàn)max是在存在0.04％Triton-X100時的熒光強度，F(xiàn)mn是在加入5mM在30mM Tris-HCl(pH7.4)中的EGTA后獲得的熒光強度。
實施例4測定FPRL1特異性化合物的抗炎癥和止痛效應1.使用52℃加熱板，測定雄的野生Sprague-Dawley大鼠(175-200g；每組6只)對有害的熱刺激產(chǎn)生的基本反應。
2.向動物腹膜內(nèi)注射介質(zhì)、布洛芬(100mg/kg)或不同劑量的式I、II或III的FPRL1的特異性化合物。
3.通過在左后掌的被側(cè)面注入0.10ml 2％的λ-角叉藻聚糖(IV型；分離自兩種海藻Gigartina aciculaire和G.Pistillata)15分鐘后，動物產(chǎn)生急性炎癥疼痛。
4.在施用化合物后在60、90、120和180分鐘時測定反應的潛伏時間，以便檢測在熱敏感性方面可能的變化。在舔后爪潛伏時間(hot plate latency)的顯著降低被解釋為存在熱痛覺過敏。
5.另外，在180分鐘的時間點測定后緊接著測定掌的厚度，以便量化局部浮腫。
結(jié)果在圖1-4中示出。如在圖1-3中所示，給予化合物7后降低了熱痛覺過敏。如圖4所示，給予化合物7還防止了浮腫形成。
實施例5對FPRL1測序以下的SEQ ID NO1是編碼FPRL1受體的DNA序列。以下的SEQ IDNO2是FPRL1受體的多肽序列。
SEQ ID NO11 ggcacgagga acaacctatt tgcaaagttg gcgcaaacat tcctgcctga caggaccatg61 gacacaggtt gtagagatag agatggctct ggctgtgcat tcagcagatt ctgtagatag121 aattaatagg acttggatgg gattgtggtg agagaaagtg aaatgaaaga taagttctag181 tttggaagtt ttaacaactg aatgtttaaa ctcaaataga cacaaaatat tggaagagtg241 gcaggtttgg gaggatgaga caatcaactg tttggttgag ccacgttagg tttgaaatgt301 ctacgggatc ccgtggggag aggttatatc agactggagc accagagaga ggccaaggct361 gatagtttag atgaaaagag agcatgatat tttaagccct gagactggat aatatcacct421 atagaaagac tatatagaga taagagaggt ggggaacaag taaaagctgc gggacactcc481 taaatttaga gtcaaattta gagcagaaaa tactagcaaa ggggactgaa aagcggtggc541 caattgagct tcaaatgcaa gtgaaagtgt gttgtgtgta catttatcat ctcatggcac601 aggaaaaacg tgatttaagg agaaggaagc gatccaatgg gaagaagaga tccaatggat
661 cctctatcac gaagatattg agataagaac caatatggat ttgcacccac tgcatttgca721 gccttgaggt cataagcatc ctcaggaaaa tgcaccaggt gctgctggca agatggaaac781 caacttctcc actcctctga atgaatatga agaagtgtcc tatgagtctg ctggctacac841 tgttctgcgg atcctcccat tggtggtgct tggggtcacc tttgtcctcg gggtcctggg901 caatgggctt gtgatctggg tggctggatt ccggatgaca cgcacagtca ccaccatctg961 ttacctgaac ctggccctgg ctgacttttc tttcacggcc acattaccat tcctcattgt1021 ctccatggcc atgggagaaa aatggccttt tggctggttc ctgtgtaagt taattcacat1081 cgtggtggac atcaacctct ttggaagtgt cttcttgatt ggtttcattg cactggaccg1141 ctgcatttgt gtcctgcatc cagtctgggc ccagaaccac cgcactgtga gtctggccat1201 gaaggtgatc gtcggacctt ggattcttgc tctagtcctt accttgccag ttttcctctt1261 tttgactaca gtaactattc caaatgggga cacatactgt actttcaact ttgcatcctg1321 gggtggcacc cctgaggaga ggctgaaggt ggccattacc atgctgacag ccagagggat1381 tatccggttt gtcattggct ttagcttgcc gatgtccatt gttgccatct gctatgggct1441 cattgcagcc aagatccaca aaaagggcat gattaaatcc agccgtccct tacgggtcct1501 cactgctgtg gtggcttctt tcttcatctg ttggtttccc tttcaactgg ttgcccttct1561 gggcaccgtc tggctcaaag agatgttgtt ctatggcaag tacaaaatca ttgacatcct1621 ggttaaccca acgagctccc tggccttctt caacagctgc ctcaacccca tgctttacgt1681 ctttgtgggc caagacttcc gagagagact gatccactcc ctgcccacca gtctggagag1741 ggccctgtct gaggactcag ccccaactaa tgacacggct gccaattctg cttcacctcc1801 tgcagagact gagttacagg caatgtgagg atggggtcag ggatattttg agttctgttc1861 atcctaccct aatgccagtt ccagcttcat ctacccttga gtcatattga ggcattcaag1921 gatgcacagc tcaagtattt attcaggaaa aatgcttttg tgtccctgat ttggggctaa1981 gaaatagaca gtcaggctac taaaatatta gtgttatttt ttgttttttg acttctgcct2041 ataccctggg gtaagtggag ttgggaaata caagaagaga aagaccagtg gggatttgta2101 agacttagat gagatagcgc ataataaggg gaagacttta aagtataaag taaaatgttt2161 gctgtaggtt ttttatagct attaaaaaaa atcagattat ggaagttttc ttctattttt2221 agtttgctaa gagttttctg tttctttttc ttacatcatg agtggacttt gcattttatc2281 aaatgcattt tctacatgta ttaagatggt catattattc ttcttctttt atgtaaatca2341 ttataaataa tgttcattaa gttctgaatg ttaaactact cttgaattcc tggaataaac
2401 cacacttagt cctgatgtac tttaaatatt tatatctcac aggagttggt tagaatttct2461 gtgtttatgt ttatatactg ttatttcact ttttctacta tccttgctaa gttttcatag2521 aaaataagga acaaagagaa acttgtaatg gtctctgaaa aggaattgag aagtaattcc2581 tctgattctg ttttctggtg ttatatcttt attaaatatt cagaaaaatt cSEQ ID NO2METNFSTPLNEYEEVSYESAGYTVLRILPLVVLGVTFVLGVLGNGLVIWVAGFRMTRTVTTICYLNLALADFSFTATLPFLIVSMAMGEKWPFGWFLCKLIHIVVDINLFGSVFLIGFIALDRCICVLHPVWAQNHRTVSLAMKVIVGPWILALVLTLPVFLFLTTVTIPNGDTYCTFNFASWGGTPEERLKVAITMLTARGIIRFVIGFSLPMSIVAICYGLIAAKIHKKGMIKSSRPLRVLTAVVASFFICWFPFQLVALLGTVWLKEMLFYGKYKIIDILVNPTSSLAFFNSCLNPMLYVFVGQDFRERLIHSLPTSLERALSEDSAPTNDTAANSASPPAETELQAM
序列表<110>阿卡蒂亞藥品公司<120>對脂氧素受體具有活性的化合物的鑒定<130>ACADIA.040VPC<150>60/518,476<151>2003-11-07<160>2<170>FastSEQ for Windows Version 4.0<210>1<211>2631<212>DNA<213>人<400>1ggcacgagga acaacctatt tgcaaagttg gcgcaaacat tcctgcctga caggaccatg 60gacacaggtt gtagagatag agatggctct ggctgtgcat tcagcagatt ctgtagatag 120aattaatagg acttggatgg gattgtggtg agagaaagtg aaatgaaaga taagttctag 180tttggaagtt ttaacaactg aatgtttaaa ctcaaataga cacaaaatat tggaagagtg 240gcaggtttgg gaggatgaga caatcaactg tttggttgag ccacgttagg tttgaaatgt 300ctacgggatc ccgtggggag aggttatatc agactggagc accagagaga ggccaaggct 360gatagtttag atgaaaagag agcatgatat tttaagccct gagactggat aatatcacct 420atagaaagac tatatagaga taagagaggt ggggaacaag taaaagctgc gggacactcc 480taaatttaga gtcaaattta gagcagaaaa tactagcaaa ggggactgaa aagcggtggc 540caattgagct tcaaatgcaa gtgaaagtgt gttgtgtgta catttatcat ctcatggcac 600aggaaaaacg tgatttaagg agaaggaagc gatccaatgg gaagaagaga tccaatggat 660cctctatcac gaagatattg agataagaac caatatggat ttgcacccac tgcatttgca 720gccttgaggt cataagcatc ctcaggaaaa tgcaccaggt gctgctggca agatggaaac 780caacttctcc actcctctga atgaatatga agaagtgtcc tatgagtctg ctggctacac 840tgttctgcgg atcctcccat tggtggtgct tggggtcacc tttgtcctcg gggtcctggg 900caatgggctt gtgatctggg tggctggatt ccggatgaca cgcacagtca ccaccatctg 960ttacctgaac ctggccctgg ctgacttttc tttcacggcc acattaccat tcctcattgt 1020ctccatggcc atgggagaaa aatggccttt tggctggttc ctgtgtaagt taattcacat 1080cgtggtggac atcaacctct ttggaagtgt cttcttgatt ggtttcattg cactggaccg 1140ctgcatttgt gtcctgcatc cagtctgggc ccagaaccac cgcactgtga gtctggccat 1200gaaggtgatc gtcggacctt ggattcttgc tctagtcctt accttgccag ttttcctctt 1260tttgactaca gtaactattc caaatgggga cacatactgt actttcaact ttgcatcctg 1320gggtggcacc cctgaggaga ggctgaaggt ggccattacc atgctgacag ccagagggat 1380tatccggttt gtcattggct ttagcttgcc gatgtccatt gttgccatct gctatgggct 1440cattgcagcc aagatccaca aaaagggcat gattaaatcc agccgtccct tacgggtcct 1500cactgctgtg gtggcttctt tcttcatctg ttggtttccc tttcaactgg ttgcccttct 1560gggcaccgtc tggctcaaag agatgttgtt ctatggcaag tacaaaatca ttgacatcct 1620ggttaaccca acgagctccc tggccttctt caacagctgc ctcaacccca tgctttacgt 1680ctttgtgggc caagacttcc gagagagact gatccactcc ctgcccacca gtctggagag 1740ggccctgtct gaggactcag ccccaactaa tgacacggct gccaattctg cttcacctcc 1800tgcagagact gagttacagg caatgtgagg atggggtcag ggatattttg agttctgttc 1860atcctaccct aatgccagtt ccagcttcat ctacccttga gtcatattga ggcattcaag 1920gatgcacagc tcaagtattt attcaggaaa aatgcttttg tgtccctgat ttggggctaa 1980gaaatagaca gtcaggctac taaaatatta gtgttatttt ttgttttttg acttctgcct 2040
ataccctggg gtaagtggag ttgggaaata caagaagaga aagaccagtg gggatttgta 2100agacttagat gagatagcgc ataataaggg gaagacttta aagtataaag taaaatgttt 2160gctgtaggtt ttttatagct attaaaaaaa atcagattat ggaagttttc ttctattttt 2220agtttgctaa gagttttctg tttctttttc ttacatcatg agtggacttt gcattttatc 2280aaatgcattt tctacatgta ttaagatggt catattattc ttcttctttt atgtaaatca 2340ttataaataa tgttcattaa gttctgaatg ttaaactact cttgaattcc tggaataaac 2400cacacttagt cctgatgtac tttaaatatt tatatctcac aggagttggt tagaatttct 2460gtgtttatgt ttatatactg ttatttcact ttttctacta tccttgctaa gttttcatag 2520aaaataagga acaaagagaa acttgtaatg gtctctgaaa aggaattgag aagtaattcc 2580tctgattctg ttttctggtg ttatatcttt attaaatatt cagaaaaatt c 2631<210>2<211>351<212>PRT<213>人<400>2Met Glu Thr Asn Phe Ser Thr Pro Leu Asn Glu Tyr Glu Glu Val Ser1 5 10 15Tyr Glu Ser Ala Gly Tyr Thr Val Leu Arg Ile Leu Pro Leu Val Val20 25 30Leu Gly Val Thr Phe Val Leu Gly Val Leu Gly Asn Gly Leu Val Ile35 40 45Trp Val Ala Gly Phe Arg Met Thr Arg Thr Val Thr Thr Ile Cys Tyr50 55 60Leu Asn Leu Ala Leu Ala Asp Phe Ser Phe Thr Ala Thr Leu Pro Phe65 70 75 80Leu Ile Val Ser Met Ala Met Gly Glu Lys Trp Pro Phe Gly Trp Phe85 90 95Leu Cys Lys Leu Ile His Ile Val Val Asp Ile Asn Leu Phe Gly Ser100 105 110Val Phe Leu Ile Gly Phe Ile Ala Leu Asp Arg Cys Ile Cys Val Leu115 120 125His Pro Val Trp Ala Gln Asn His Arg Thr Val Ser Leu Ala Met Lys130 135 140Val Ile Val Gly Pro Trp Ile Leu Ala Leu Val Leu Thr Leu Pro Val145 150 155 160Phe Leu Phe Leu Thr Thr Val Thr Ile Pro Asn Gly Asp Thr Tyr Cys165 170 175Thr Phe Asn Phe Ala Ser Trp Gly Gly Thr Pro Glu Glu Arg Leu Lys180 185 190Val Ala Ile Thr Met Leu Thr Ala Arg Gly Ile Ile Arg Phe Val Ile195 200 205Gly Phe Ser Leu Pro Met Ser Ile Val Ala Ile Cys Tyr Gly Leu Ile210 215 220Ala Ala Lys Ile His Lys Lys Gly Met Ile Lys Ser Ser Arg Pro Leu225 230 235 240Arg Val Leu Thr Ala Val Val Ala Ser Phe Phe Ile Cys Trp Phe Pro245 250 255Phe Gln Leu Val Ala Leu Leu Gly Thr Val Trp Leu Lys Glu Met Leu260 265 270Phe Tyr Gly Lys Tyr Lys Ile Ile Asp Ile Leu Val Asn Pro Thr Ser275 280 285Ser Leu Ala Phe Phe Asn Ser Cys Leu Asn Pro Met Leu Tyr Val Phe290 295 300Val Gly Gln Asp Phe Arg Glu Arg Leu Ile His Ser Leu Pro Thr Ser
305 310 315 320Leu Glu Arg Ala Leu Ser Glu Asp Ser Ala Pro Thr Asn Asp Thr Ala325 330 335Ala Asn Ser Ala Ser Pro Pro Ala Glu Thr Glu Leu Gln Ala Met340 345 350
權利要求
1.FPRL1受體作為一種工具在鑒定能有效治療炎癥和相關疼痛的化合物中的用途。
2.FPRL1受體作為一種篩選工具在鑒定能有效治療炎癥和相關疼痛的化合物中的用途。
3.對FPRL1受體具有特異活性的化合物作為治療炎癥和相關疼痛的治療物的用途。
4.對FPRL1受體具有特異活性的化合物作為阻斷炎癥和相關疼痛的治療物的預防疾病用途。
5.一種篩選能影響一種FPRL1受體一種或多種活性的化合物的方法，包括以下步驟a)將重組細胞與測試化合物接觸，其中所述的重組細胞包含表達所述FPRL1受體的重組核酸，假設所述的細胞不含有內(nèi)源性核酸表達的功能性FPRL1受體；b)確定所述測試化合物影響所述FPRL1受體一種或多種活性的能力，并將所述的能力與所述測試化合物在不含有所述重組核酸的細胞中影響所述一種或多種FPRL1受體活性的能力相比較；其中所述的重組核酸包含一種選自由下列組成的組的FPRL1受體核酸i)SEQ ID NO1的核酸，ii)編碼SEQ ID NO2氨基酸的核酸，iii)i)or ii)中任一核酸的一種衍生物，其中所述的衍生物編碼具有所述FPRL1受體一種或多種活性的受體，其包含至少20個可以在嚴格雜交條件下與SEQ ID NO1的互補序列雜交的連續(xù)核苷酸。
6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其中所述的FPRL1受體核酸編碼SEQID NO2氨基酸序列的衍生物，，其包含至少20個連續(xù)的核苷酸，可以在嚴格雜交條件下與編碼SEQ ID NO2氨基酸序列的至少20個連續(xù)的核苷酸的互補序列雜交。
7.一種治療任何類型的急性或慢性炎癥的方法，其包括將生物體與有效量的至少一種式I、II或III化合物接觸，其中該化合物激活一種FPRL1受體亞型。
8.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中炎癥與下述病癥相關糖尿病、病毒感染、腸易激綜合癥、切除術、癌、細菌感染、包括物理傷害和輻射暴露的物理損傷、哮喘引起的血管收縮、過敏性反應、過敏癥反應、休克、糖尿病、風濕性關節(jié)炎、痛風、牛皮癬、過敏性鼻炎、成人呼吸窘迫綜合癥、克羅恩氏病、內(nèi)毒素性休克、創(chuàng)傷性休克、失血性休克、腸缺血性休克、腎小球腎病、良性前列腺增生、心肌缺血、心肌梗塞、循環(huán)系統(tǒng)的休克、包括缺血性和出血性休克的腦損傷、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎病、心血管病和高血壓或化學損傷。
9.一種鑒定是FPRL1受體激動劑的化合物的方法，該方法包括將一種FPRL1受體與至少一種式I、II或III的測試化合物接觸；和測定所述FPRL1受體活性水平的任何一種提高，這樣鑒定出是FPRL1受體激動劑的測試化合物。
10.一種鑒定是FPRL1受體激動劑的化合物的方法，該方法包括培養(yǎng)表達FPRL1受體的細胞；將細胞或從細胞中提取出的組分與至少一種式I、II或III的測試化合物孵育；和測定所述FPRL1受體活性水平的任何一種提高，這樣鑒定出是FPRL1受體激動劑的測試化合物。
11.根據(jù)權利要求10所述的方法，其中培養(yǎng)的細胞過表達所述的FPRL1受體。
12.根據(jù)權利要求9或10所述的方法，其中鑒定出的激動劑對FPRL1受體具有選擇性
13.一種治療炎癥的方法，該方法包括將患有炎癥的個體與有效量的至少一種式I、II或III的化合物接觸，其中一種或多種炎癥的癥狀減輕。
14.根據(jù)權利要求13所述的方法，該方法進一步包括在施藥步驟前鑒別需要炎性治療的個體的步驟。
15.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中所述的式I、II或III的化合物選擇性地激活FPRL1受體亞型。
16.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中炎性反應是由白細胞的激活引起的，其中激活包括白細胞遷移和產(chǎn)生活性氧，引起血管滲出和浮腫。
17.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中炎性反應與風濕性關節(jié)炎、阿爾茨海默癥或哮喘相關。
18.根據(jù)權利要求13所述的方法，其中炎性反應是由包括物理傷害和放射暴露的物理損傷引起的。
19.一種治療或預防個體炎癥或炎性反應的方法，包括給個體施用有效抗炎量的式I、II或III的化合物。
20.一種誘導血管舒張來治療或防止血管收縮性反應或癥狀的方法，包括給個體施用有效血管舒張量的式I、II或III的化合物。
21.根據(jù)權利要求20所述的方法，其中血管收縮性反應或癥狀選自由下列組成的組包括腎小球炎的腎血液動力學疾病，以及包括高血壓、心肌梗塞和心肌缺血的心血管疾病。
22.一種拮抗對硫化肽白細胞三烯的血管收縮性反應的方法，包括給個體施用有效血管舒張量的式I、II或III的化合物。
23.根據(jù)權利要求22所述的方法，其中對所述白細胞三烯的血管收縮性反應與選自由下列組成的組的一種醫(yī)學紊亂相關哮喘、過敏反應、過敏癥反應、休克、炎癥、風濕性關節(jié)炎、痛風、牛皮癬、過敏性鼻炎、成人呼吸窘迫綜合癥、克羅恩氏病、內(nèi)毒素性休克、創(chuàng)傷性休克、失血性休克、腸缺血性休克、腎小球腎病、良性前列腺增生、炎性腎病、心肌缺血、心肌梗塞、循環(huán)系統(tǒng)的休克、腦損傷、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎病、心血管病和高血壓。
24.根據(jù)權利要求22所述的方法，其中血管收縮性反應是腎的血管收縮性反應，包括輕微的血管收縮如慢性腎病和慢性嚴重的血管收縮如腎小球腎病。
25.一種刺激個體體內(nèi)的細胞增殖以治療或預防骨髓抑制性紊亂的方法，包括給個體施用有效量的式I、II或III的化合物。
26.一種式I的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物， 其中R1選自由C1-C10直鏈亞烷基或支鏈亞烷基、氧、硫、NQ、CHCN、C＝O、C＝S、C＝NQ、S＝O、S(＝O)2、C＝NOQ組成的組，其中Q獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；R2、R3、R4和R5的每一個獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，并且各個R7獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或R3、R4和它們連接的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)；R6可以出現(xiàn)0-5次并獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C4直鏈或支鏈的烷基、環(huán)烷基、任選地被取代的芳基或雜芳基、羥基、硝基、氨基、鹵素、磺酸鹽、全鹵烷基、-OR7、-N(R8)2、-CN、-C(＝Z)R8、-C(＝Z)OR8、-C(＝Z)N(R8)2、-N(R8)-C(＝Z)R8、-N(R8)-C(＝Z)N(R8)2、-OC(＝Z)R8和-SR8，其中Z是氧或硫，并且各個R8獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或“R6”形成融合的芳基或雜環(huán)。
27.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R1是氫或C1-C10直鏈烷基。
28.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R1是C1-C5直鏈亞烯基。
29.根據(jù)權利要求28所述的化合物，其中R1選自由下列組成的組亞甲基、乙烯基、正丙稀基、異丙烯基、正丁烯基、仲丁烯基、叔丁烯基、正戊二烯基、異戊二烯基。
30.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R2選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、氨基、芳基、雜芳基、-OR7和-N(R7)2，其中R7是氫或C1-C10直鏈烷基。
31.根據(jù)權利要求30所述的化合物，其中R7可以是氫或C1-C3直鏈烷基。
32.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R2選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、芳基、雜芳基、甲氧基和乙氧基。
33.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R3選自由下列組成的組氫、羥基、硝基、芳基、雜芳基、氨基、-OR7和-N(R7)2，其中R7是氫或C1-C10直鏈烷基。
34.根據(jù)權利要求33所述的化合物，其中R7可以是氫或C1-C3直鏈烷基。
35.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R3選自由下列組成的組氫、硝基、芳基、雜芳基。
36.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R4選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、-OR7和-N(R7)2，其中R7是任選地被一種芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基。
37.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R4選自由下列組成的組氫、C1-C3直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、-OR7和-N(R7)2，其中R7是任選地被一種芳基取代的C1-C3直鏈烷基。
38.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R4選自由下列組成的組氫、甲基、乙基、羥基、硝基、氨基、氯、氟、甲氧基、乙氧基、甲氨基、二甲氨基、二乙氨基和芐氧基。
39.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R5選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7和-N(R7)2，其中R7是任選的被一種芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基。
40.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R5選自由下列組成的組氫、C1-C3直鏈烷基、羥基、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7和-N(R7)2，其中R7是C1-C3直鏈烷基。
41.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R5選自由下列組成的組氫、羥基、氯、溴、三氟甲基和甲氧基。
42.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R6是氫。
43.根據(jù)權利要求26所述的化合物，其中R2、R3和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)。
44.根據(jù)權利要求43所述的化合物，其中環(huán)是雜環(huán)烷基環(huán)。
45.根據(jù)權利要求44所述的化合物，其中雜環(huán)烷基環(huán)選自N-嗎啉和吡咯。
46.一種選自由下列組成的組的化合物
47.一種式II的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物， 其中X1和X2的每一個獨立地是氧或氟，R1選自由C1-C10直鏈或支鏈亞烷基、氧、硫、NQ、CHCN、C＝O、C＝S、C＝NQ、S＝O、S(＝O)2、C＝NOQ組成的組，其中Q獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；R2、R3各自獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，并且各個R7獨立地選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基。
48.根據(jù)權利要求47所述的化合物，其中R1選自氧或NQ，其中Q選自由下列組成的組氫、任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C5直鏈或支鏈烷基。
49.根據(jù)權利要求48所述的化合物，其中Q是C1-C3直鏈或支鏈烷基。
50.根據(jù)權利要求48所述的化合物，其中Q選自由下列組成的組甲基、乙基和丙基。
51.根據(jù)權利要求48所述的化合物，其中Q是甲基。
52.根據(jù)權利要求47所述的化合物，其中R2選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C3-C10環(huán)烷基和任選地被取代的芳基。
53.根據(jù)權利要求52所述的化合物，其中R2被取代的芳基。
54.根據(jù)權利要求53所述的化合物，其中R2選自由下列組成的組4-烷基苯基、4-烷氧基苯基、4-烷氧羰基苯基。
55.根據(jù)權利要求53所述的化合物，其中R2選自由下列組成的組4-甲基苯基、4-乙氧基苯基和乙氧基羰基苯基。
56.根據(jù)權利要求47所述的化合物，其中R3選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C3-C10環(huán)烷基和任選地被取代的芳基。
57.根據(jù)權利要求56所述的化合物，其中R3是被取代的芳基。
58.根據(jù)權利要求57所述的化合物，其中R3選自由下列組成的組4-烷基苯基、4-烷氧基苯基、4-鹵代苯基。
59.根據(jù)權利要求58所述的化合物，其中R3選自以下的組4-氯代苯基、4-溴代苯基和4-甲氧苯基。
60.一種式III的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯、酰胺或前體藥物， 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6各自獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C10直鏈或支鏈烷基、C2-C10直鏈或支鏈烯基、C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基、被取代或未被取代的雜環(huán)、羥基、鹵化醚、硝基、氨基、鹵素、全鹵烷基、-OR7、-N(R7)2、-CN、-C(＝Z)R7、-C(＝Z)OR7、-C(＝Z)N(R7)2、-N(R7)-C(＝Z)R7、-N(R7)-C(＝Z)N(R7)2、-OC(＝Z)R7和-SR7，其中Z是氧或硫，并且各個R7獨立地選自由下列組成的組任選地被芳基或雜芳基取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈烯基、任選地被芳基或雜芳基取代的C2-C10直鏈或支鏈炔基、C3-C10環(huán)烷基和C5-C10環(huán)烯基；或R3、R4和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)；R5、R6和它們連接的氮形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)；或R1、R2、與R1相連的碳和與R2相連的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)。
61.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R1選自由下列組成的組氫、任選地被取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基。
62.根據(jù)權利要求61所述的化合物，其中R1是被一種任選地被芳基或雜芳基環(huán)取代的C1-C5直鏈烷基。
63.根據(jù)權利要求62所述的化合物，其中所述的芳基環(huán)是苯基。
64.根據(jù)權利要求62所述的化合物，其中所述的雜芳基環(huán)含有氮。
65.根據(jù)權利要求64所述的化合物，其中所述的雜芳基環(huán)是吲哚。
66.根據(jù)權利要求61所述的化合物，其中R1選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。
67.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R1選自由下列組成的組甲基、吲哚甲基、芐基和仲丁基。
68.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R1、R2、與R1相連的碳和與R2相連的氮連接形成一個融合的雜芳基或雜環(huán)。
69.根據(jù)權利要求68所述的化合物，其中所述的雜環(huán)是吡咯烷。
70.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R2、R3和R5各自獨立地選自由下列組成的組氫、C1-C4直鏈或支鏈烷基、C2-C5直鏈或支鏈烯基、C2-C5直鏈或支鏈炔基。
71.根據(jù)權利要求70所述的化合物，其中所述的烷基選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基和叔丁基。
72.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R2、R3和R5是氫。
73.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R4是任選地被取代的芳基。
74.根據(jù)權利要求73所述的化合物，其中所述的芳基是苯基。
75.根據(jù)權利要求73所述的化合物，其中所述芳基任選地被鹵素、烷氧基、烷基、硫代烷基和全鹵代烷基。
76.根據(jù)權利要求73所述的化合物，其中所述的芳基任選地被氯、溴、甲基、乙基、異丙基、甲氧基、硫代甲基和三氟甲基取代。
77.根據(jù)權利要求73所述的化合物，其中R4選自由下列組成的組4-氯代苯基、4-溴代苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、2，6-二異丙基苯基、3，4-二氯苯基、4-甲氧基苯基、4-甲基巰基苯基、4-三氟甲基苯基.
78.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R6選自由下列組成的組任選地被取代的C1-C10直鏈或支鏈烷基，和任選地被取代的雜環(huán)。
79.根據(jù)權利要求78所述的化合物，其中所述的烷基選自由下列組成的組甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和1-甲基丁基。
80.根據(jù)權利要求79所述的化合物，其中所述的烷基被一種雜環(huán)或一種被取代的胺取代。
81.根據(jù)權利要求80所述的化合物，其中所述雜環(huán)是嗎啉。
82.根據(jù)權利要求80所述的化合物，其中所述的雜環(huán)是哌啶或嗎啉。
83.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R6選自由下列組成的組1-甲基-4-二乙基氨基丁基、2-N-嗎啉乙基，N-苯甲基哌啶-4-基。
84.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R5、R6和它們連接的氮連接形成一種任選地被取代的融合雜芳基或一種任選地被取代的雜環(huán)。
85.根據(jù)權利要求84所述的化合物，其中所述的雜環(huán)是哌啶或苯并哌啶。
86.根據(jù)權利要求60所述的化合物，其中R5、R6和它們連接的氮連接形成一種選自以下的取代基
87.一種選自由下列組成的組的化合物
全文摘要
本發(fā)明公開了選擇性地激活FPRL1受體的化合物。進一步公開了通過調(diào)節(jié)白細胞運輸中的關鍵步驟和防止嗜中性粒細胞介導的組織損傷以減輕炎性反應的方法，其中給予對象治療有效量的這里公開的化合物。另外，本發(fā)明還提供了通過給予治療有效量的這里公開的化合物以調(diào)節(jié)或特異性激動FPRL1受體的方法。
文檔編號G01N33/50GK1894580SQ200480036284
公開日2007年1月10日 申請日期2004年11月4日 優(yōu)先權日2003年11月7日
發(fā)明者諾曼·那什, 奧德拉·L.·斯卡利, 盧斯·加戴爾, 羅杰·奧爾森, 馬格那斯·古斯塔夫森 申請人:阿卡蒂亞藥品公司