專利名稱:農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,其技術(shù)領(lǐng)域?qū)儆谵r(nóng)藥分析方法。
背景技術(shù):
印楝素是從印楝種仁中提取的一種植物源殺蟲(chóng)活性成分,對(duì)多種昆蟲(chóng)具有良好的殺蟲(chóng)活性。印楝素的作用機(jī)制是使昆蟲(chóng)拒食、忌避及抑制昆蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育,對(duì)大多數(shù)害蟲(chóng)具有驅(qū)殺效果,而對(duì)溫血?jiǎng)游餆o(wú)毒無(wú)害,不會(huì)使害蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性,并具持效時(shí)間長(zhǎng)的特點(diǎn)??捎糜诜乐?00多種農(nóng)、林、倉(cāng)儲(chǔ)和衛(wèi)生害蟲(chóng),尤其對(duì)鱗翅目、鞘翅目和雙翅目等害蟲(chóng)有特效,是世界上公認(rèn)的廣譜、高效、低毒、易降解、無(wú)殘留的環(huán)境友好新型殺蟲(chóng)劑。目前含印楝素的農(nóng)藥制劑以乳油為主。印楝素的水基型制劑與乳油相比,具有生產(chǎn)成本低、環(huán)境相容性好、符合無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)農(nóng)藥使用規(guī)范等優(yōu)點(diǎn),是印楝素農(nóng)藥制劑的未來(lái)發(fā)展方向。關(guān)于印楝素水基型制劑的制備和應(yīng)用,相關(guān)科技文獻(xiàn)已有報(bào)道。由于水基型制劑中的助劑較多,整個(gè)體系的成分比較復(fù)雜,如果采用通常的直接取樣進(jìn)行分析,雜質(zhì)對(duì)有效成分的測(cè)定會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的干擾。有關(guān)能有效將水基型制劑中的雜質(zhì)除去,進(jìn)行水基型制劑中印楝素的分析方法,到目前為止尚無(wú)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速、可靠的特點(diǎn),對(duì)農(nóng)藥水基型制劑中有效成分印楝素的定量分析,有重要的實(shí)用價(jià)值。
本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取50~2000mg印楝素標(biāo)樣于容量瓶中,用有機(jī)溶劑溶解后定容;2.試樣預(yù)處理及試樣溶液的配制稱取含有相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)溶液中印楝素有效成分的印楝素水基型制劑于容量瓶中,加入與標(biāo)準(zhǔn)溶液配制容量瓶體積相同的有機(jī)溶劑和水,有機(jī)溶劑與水的比例為1∶1~10,超聲波振蕩萃取1~10min,靜置或離心分層后取出有機(jī)相過(guò)濾。移取5~50mL過(guò)濾后的有機(jī)相于容器中蒸干,加入有機(jī)溶劑5~50mL在超聲波振蕩器上反萃取1~10min,轉(zhuǎn)至體積與移取液體積相同的容量瓶中用有機(jī)溶劑定容,過(guò)濾后待測(cè)。
3.測(cè)定將步驟(2)的待測(cè)樣品使用不同極性的高效液相色譜柱,用有機(jī)溶劑或水或有機(jī)溶劑與水的混合液體作流動(dòng)相,在柱箱溫度為10~50℃;流動(dòng)相流速為0.1~10mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為190~900nm的色譜條件下,采用紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器,對(duì)印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
本發(fā)明中所述的水基型制劑是水劑、水乳劑、微乳劑、濃乳劑、水懸浮劑、膠懸劑、濃懸浮劑和可溶性液劑中的一種。
本發(fā)明中所述的有機(jī)溶劑是二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二甲苯、甲醇、乙腈、乙醚、己烷、正己烷、環(huán)己烷中的一種或幾種混合。
本發(fā)明中所述的不同極性的高效液相色譜柱是硅膠柱、C8柱或C18柱。
所述的檢測(cè)波長(zhǎng)是190~210nm或220~900nm。
本發(fā)明中所述的紫外檢測(cè)器是固定波長(zhǎng)為254nm的紫外檢測(cè)器或可變波長(zhǎng)范圍為190~900nm的紫外檢測(cè)器。
目前含印楝素的農(nóng)藥制劑以乳油為主,水基型制劑與乳油相比,具有生產(chǎn)成本低、環(huán)境相容性好、符合無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)農(nóng)藥使用規(guī)范等優(yōu)點(diǎn),是印楝素農(nóng)藥制劑的未來(lái)發(fā)展方向。關(guān)于印楝素水基型制劑的制備和應(yīng)用,相關(guān)科技文獻(xiàn)已有報(bào)道。由于水基型制劑中的助劑較多,整個(gè)體系的成分比較復(fù)雜,如果采用通常的直接取樣進(jìn)行分析,雜質(zhì)對(duì)有效成分的測(cè)定會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的干擾。本發(fā)明采用的方法是將干擾雜質(zhì)除去后,再對(duì)有效成分進(jìn)行測(cè)定,能準(zhǔn)確、快速、可靠地對(duì)水基型制劑中印楝素的定量分析。這種水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,到目前為止尚無(wú)報(bào)道。有效的水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法的建立,對(duì)準(zhǔn)確、快速、可靠地對(duì)水基型制劑中印楝素的定量分析和拓展印楝素水基型制劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用,具有重要意義。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取50mg印楝素標(biāo)樣于25mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾。
2.試樣預(yù)處理及試樣溶液的配制稱取含有50mg印楝素有效成分的印楝素水基型制劑于25mL容量瓶中,加入25mL有機(jī)溶劑和水的混合液體,有機(jī)溶劑與水的比例為1∶1,超聲波振蕩萃取1min,靜置或離心分層后取出有機(jī)相過(guò)濾。移取5mL過(guò)濾后的有機(jī)相于容器中蒸干,加入有機(jī)溶劑5mL在超聲波振蕩器上反萃取1min,轉(zhuǎn)至體積與移取液體積相同的容量瓶中用有機(jī)溶劑定容,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾后待測(cè)。
3.測(cè)定將步驟2的待測(cè)樣品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色譜柱,用體積比為水+乙腈=56+44的混合液體作流動(dòng)相,在柱箱溫度為10℃;流動(dòng)相流速為0.1mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為190nm的色譜條件下,采用紫外檢測(cè)器對(duì)印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
實(shí)施例二1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取100mg印楝素標(biāo)樣于25mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾。
2.試樣預(yù)處理及試樣溶液的配制稱取含有100mg印楝素有效成分的印楝素水基型制劑于25mL容量瓶中,加入25mL有機(jī)溶劑和水的混合液體,有機(jī)溶劑與水的比例為1∶5,超聲波振蕩萃取5min,靜置或離心分層后取出有機(jī)相過(guò)濾。移取10mL過(guò)濾后的有機(jī)相于容器中蒸干,加入有機(jī)溶劑10mL在超聲波振蕩器上反萃取5min,轉(zhuǎn)至體積與移取液體積相同的容量瓶中用有機(jī)溶劑定容,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾后待測(cè)。
3.測(cè)定將步驟2的待測(cè)樣品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色譜柱,用體積比為水+乙腈=56+44的混合液體作流動(dòng)相,在柱箱溫度為10℃;流動(dòng)相流速為1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為218nm的色譜條件下,采用紫外檢測(cè)器對(duì)印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
實(shí)施例三1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取2000mg印楝素標(biāo)樣于50mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾。
2.試樣預(yù)處理及試樣溶液的配制稱取含有2000mg印楝素有效成分的印楝素水基型制劑于50mL容量瓶中,加入50mL有機(jī)溶劑和水的混合液體,有機(jī)溶劑與水的比例為1∶10,超聲波振蕩萃取10min,靜置或離心分層后取出有機(jī)相過(guò)濾。移取50mL過(guò)濾后的有機(jī)相于容器中蒸干,加入有機(jī)溶劑50mL在超聲波振蕩器上反萃取10min,轉(zhuǎn)至體積與移取液體積相同的容量瓶中用有機(jī)溶劑定容,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾后待測(cè)。
3.測(cè)定將步驟2的待測(cè)樣品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色譜柱,用體積比為水+乙腈=56+44的混合液體作流動(dòng)相,在柱箱溫度為50℃;流動(dòng)相流速為10mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為900nm的色譜條件下,采用紫外檢測(cè)器對(duì)印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
實(shí)施例四1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取50mg印楝素標(biāo)樣于25mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾。
2.試樣預(yù)處理及試樣溶液的配制稱取含有50mg印楝素有效成分的印楝素水基型制劑于25mL容量瓶中,加入25mL有機(jī)溶劑和水的混合液體,有機(jī)溶劑與水的比例為1∶1,超聲波振蕩萃取1min,靜置或離心分層后取出有機(jī)相過(guò)濾。移取5mL過(guò)濾后的有機(jī)相于容器中蒸干,加入有機(jī)溶劑5mL在超聲波振蕩器上反萃取1min,轉(zhuǎn)至體積與移取液體積相同的容量瓶中用有機(jī)溶劑定容,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾后待測(cè)。
3.測(cè)定將步驟2的待測(cè)樣品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色譜柱,用體積比為水+乙腈=56+44的混合液體作流動(dòng)相,在柱箱溫度為10℃;流動(dòng)相流速為0.1mL/min 檢測(cè)波長(zhǎng)為190nm的色譜條件下,采用二極管陣列檢測(cè)器對(duì)印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
實(shí)施例五1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取100mg印楝素標(biāo)樣于25mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾。
2.試樣預(yù)處理及試樣溶液的配制稱取含有100mg印楝素有效成分的印楝素水基型制劑于25mL容量瓶中,加入25mL有機(jī)溶劑和水的混合液體,有機(jī)溶劑與水的比例為1∶5,超聲波振蕩萃取5min,靜置或離心分層后取出有機(jī)相過(guò)濾。移取10mL過(guò)濾后的有機(jī)相于容器中蒸干,加入有機(jī)溶劑10mL在超聲波振蕩器上反萃取5min,轉(zhuǎn)至體積與移取液體積相同的容量瓶中用有機(jī)溶劑定容,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾后待測(cè)。
3.測(cè)定將步驟2的待測(cè)樣品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色譜柱,用體積比為水+乙腈=56+44的混合液體作流動(dòng)相,在柱箱溫度為10℃;流動(dòng)相流速為1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為218nm的色譜條件下,采用二極管陣列檢測(cè)器對(duì)印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
實(shí)施例六1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取2000mg印楝素標(biāo)樣于50mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾。
2.試樣預(yù)處理及試樣溶液的配制稱取含有2000mg印楝素有效成分的印楝素水基型制劑于50mL容量瓶中,加入50mL有機(jī)溶劑和水的混合液體,有機(jī)溶劑與水的比例為1∶10,超聲波振蕩萃取10min,靜置或離心分層后取出有機(jī)相過(guò)濾。移取50mL過(guò)濾后的有機(jī)相于容器中蒸干,加入有機(jī)溶劑50mL在超聲波振蕩器上反萃取10min,轉(zhuǎn)至體積與移取液體積相同的容量瓶中用有機(jī)溶劑定容,0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾后待測(cè)。
3.測(cè)定將步驟2的待測(cè)樣品使用150mm×4.0mm(i.d)的C18高效液相色譜柱,用體積比為水+乙腈=56+44的混合液體作流動(dòng)相,在柱箱溫度為50℃;流動(dòng)相流速為10mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為900nm的色譜條件下,采用二極管陣列檢測(cè)器對(duì)印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
權(quán)利要求
1.農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,其步驟是(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取50~2000mg印楝素標(biāo)樣于容量瓶中,用有機(jī)溶劑溶解后定容;(2)試樣預(yù)處理及試樣溶液的配制稱取含有相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)溶液中印楝素有效成分的印楝素水基型制劑于容量瓶中,加入與標(biāo)準(zhǔn)溶液配制容量瓶體積相同的有機(jī)溶劑和水,有機(jī)溶劑與水的比例為1∶1~10,超聲波振蕩萃取1~10min,靜置或離心分層后取出有機(jī)相過(guò)濾,移取5~50mL過(guò)濾后的有機(jī)相于容器中蒸干,加入有機(jī)溶劑5~50mL在超聲波振蕩器上反萃取1~10min,轉(zhuǎn)至體積與移取液體積相同的容量瓶中用有機(jī)溶劑定容,過(guò)濾后待測(cè);(3)測(cè)定將步驟(2)的待測(cè)樣品使用不同極性的高效液相色譜柱,用有機(jī)溶劑或水或有機(jī)溶劑與水的混合液體作流動(dòng)相,在柱箱溫度為10~50℃;流動(dòng)相流速為0.1~10mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為190~900nm的色譜條件下,采用紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器,對(duì)印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,其特征在于所述的水基型制劑是水劑、水乳劑、微乳劑、濃乳劑、水懸浮劑、膠懸劑、濃懸浮劑和可溶性液劑中的一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,其特征在于所述的有機(jī)溶劑是二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯、二甲苯、甲醇、乙腈、乙醚、己烷、正己烷、環(huán)己烷中的一種或幾種混合。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,其特征在于所述的不同極性的高效液相色譜柱是硅膠柱或C8柱或C18柱。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,其特征在于所述的檢測(cè)波長(zhǎng)是190~210nm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,其特征在于所述的檢測(cè)波長(zhǎng)是220~900nm。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法,其特征在于所述的紫外檢測(cè)器是固定波長(zhǎng)為254nm的紫外檢測(cè)器或可變波長(zhǎng)范圍為190~900nm的紫外檢測(cè)器。
全文摘要
本發(fā)明涉及一類(lèi)制劑中農(nóng)藥有效成分的分析,具體是農(nóng)藥水基型制劑中印楝素的高效液相色譜分析方法。采用液—液分配的方法對(duì)水基型制劑樣品凈化除雜,用有機(jī)溶劑或水作流動(dòng)相,使用不同極性的高效液相色譜柱,采用紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器,對(duì)農(nóng)藥水基型制劑中的印楝素進(jìn)行高效液相色譜定量分析。
文檔編號(hào)G01N30/74GK1790010SQ200510048760
公開(kāi)日2006年6月21日 申請(qǐng)日期2005年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月27日
發(fā)明者葉敏, 朱有勇, 李成云, 李正躍, 肖春 申請(qǐng)人:云南農(nóng)業(yè)大學(xué)