專利名稱：鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的提高，奶制品在國內(nèi)的消費(fèi)量迅速增加；加快發(fā)展奶業(yè)，提高居民奶類消費(fèi)水平是《中國食物與營養(yǎng)發(fā)展綱要(2001～2010年)》優(yōu)先考慮的食物發(fā)展領(lǐng)域。近幾年，我國城鎮(zhèn)居民奶業(yè)消費(fèi)增長幅度都在20％以上，2003年城鎮(zhèn)居民奶類人均消費(fèi)量(折鮮牛奶)已達(dá)25公斤左右，飲用巴氏殺菌奶等液態(tài)奶已在我國漸成習(xí)慣，液態(tài)奶亦成為我國的主要乳制品。
在液態(tài)奶的主要產(chǎn)品中，巴氏殺菌奶因其較高的營養(yǎng)價(jià)值，是我國大力發(fā)展的主要牛奶產(chǎn)品。原料上一般要求采用鮮牛奶，但由于我國奶源增長較慢，許多工廠采用奶粉加工的還原奶或?qū)⑦€原奶摻入到鮮牛奶中來生產(chǎn)巴氏殺菌奶。還原奶，是指將奶粉經(jīng)過處理和勾兌還原成的液態(tài)奶。在國內(nèi)，按一定比例將還原奶摻入鮮牛奶中生產(chǎn)巴氏殺菌奶并進(jìn)行銷售已相當(dāng)普遍。一些企業(yè)生產(chǎn)的超高溫滅菌奶和調(diào)味奶中，還原奶的摻入比例有時(shí)高達(dá)50％以上。從營養(yǎng)角度而言，還原奶的質(zhì)量一定程度上低于純鮮牛奶，因?yàn)檫€原奶是奶粉經(jīng)過加水溶解、高溫殺菌等多種程序制成的，營養(yǎng)不如鮮牛奶，口味、純度、鮮度也相對較差。但由于進(jìn)口奶粉每噸到岸價(jià)有時(shí)僅為1.4萬～1.5萬元，每噸奶粉可還原成8噸液態(tài)奶，而國內(nèi)8噸原料奶的收購?fù)哂诖藘r(jià)。正因?yàn)樯a(chǎn)還原奶具有較好的利潤，所以國內(nèi)有很多企業(yè)在生產(chǎn)液態(tài)奶時(shí)摻入了一定量的還原奶。
國際上，一些缺奶的地區(qū)和國家生產(chǎn)還原奶都有一段歷史了，但他們明確地將還原奶標(biāo)識出來，讓消費(fèi)者明明白白地消費(fèi)。國外液態(tài)奶的“明白消費(fèi)”，不僅保護(hù)了消費(fèi)者的知情權(quán)，也有利于公平競爭。目前，我國的鮮牛奶標(biāo)識執(zhí)行還很不理想，很多企業(yè)用還原奶生產(chǎn)液態(tài)乳制品，但他們標(biāo)識的卻是鮮牛奶，另外，在鮮牛奶中加入一定量的還原奶作為鮮牛奶更有隱藏性，雖然近年來國家有關(guān)管理部門加大了監(jiān)管力度，但到目前為止，還沒有一個(gè)有效的檢測還原奶的辦法，特別是分析鮮牛奶中摻入較低比例還原奶的方法，導(dǎo)致無法由檢測或管理部門做出合理的評估。因此，研究一種快速、簡捷、精確的檢測鮮牛奶中還原奶摻假的檢測機(jī)理和方法，有利于規(guī)范國內(nèi)的乳品市場，有利于乳品企業(yè)的公平競爭，更有利用于維護(hù)消費(fèi)者的權(quán)益。
目前，鮮牛奶中還原奶摻假的方法，國內(nèi)尚未有有關(guān)此類的方法；國外的有1)、可見光譜和紫外光譜(700～240nm)的測定方法，但該方法處理步驟復(fù)雜，時(shí)間長；2)、用HPLC檢測furosine來檢測原料乳和巴氏殺菌奶中是否摻入還原奶，但該方法所需標(biāo)準(zhǔn)品價(jià)格昂貴且處理步驟復(fù)雜；3)、測定牛奶中水的δD和18O穩(wěn)定同位素比率來鑒別鮮牛奶中是否摻有還原奶，但該方法處理過程復(fù)雜，花費(fèi)時(shí)間長以及成本高的缺點(diǎn)。上述方法因?yàn)楦鞣N原因，不能普及使用。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足之處，本發(fā)明提供一種使用簡便、快速，且測試靈敏度高的鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法。
本發(fā)明為達(dá)到以上目的，是通過這樣的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的提供一種鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，依次包括以下步驟1)、取待檢牛奶樣品于離心容器中；再向所述離心容器中加入pH4.6、0.1mol/L的醋酸和醋酸鈉緩沖液，混合均勻后，靜置4～6分鐘，然后在10～20℃的溫度下以3500g～4500g離心8～12分鐘，得上清液；醋酸和醋酸鈉緩沖液與待檢牛奶樣品的體積比為5～7∶1；2)、將上述上清液用0.4～0.5μm的水性濾膜過濾，得過濾液；3)、將上述過濾液與水按照1∶40～60的體積比混合制成待測液；4)、取用上述待測液，以1mg/L的牛血清白蛋白為外標(biāo)，在熒光分光光度計(jì)上測量；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為330nm、發(fā)射波長為420nm時(shí)，記錄美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為290nm、發(fā)射波長為340nm時(shí)，記錄色氨酸的熒光值；5)用上述美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值除以色氨酸的熒光值后再乘以100，得測試值；當(dāng)待檢牛奶樣品為原奶時(shí)，測試值＜10為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥10為不合格品、即摻有還原奶；當(dāng)待檢牛奶樣品為巴氏殺菌奶時(shí)，測試值＜11.5為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥11.5為不合格品、即摻有還原奶。
作為本發(fā)明的鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法的一種改進(jìn)步驟1)中所用的離心容器為具塞離心管。
本發(fā)明的鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，使用簡便、快速、靈敏度高，易于把握操作，適合食品檢測機(jī)構(gòu)、廣大農(nóng)村、城市的奶收購站和奶檢站等機(jī)構(gòu)推廣應(yīng)用。本發(fā)明的鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，是否摻入全脂奶粉還原奶的最低檢出限為5％(體積比)。
當(dāng)原奶中含有5％、10％、20％、30％、40％的還原奶時(shí)，使用本發(fā)明的快速檢驗(yàn)方法，具體測試結(jié)果見表一。
表一

測試結(jié)果表明原奶中含有的還原奶比例越高，測試值的數(shù)據(jù)越大。本發(fā)明的快速檢驗(yàn)方法，是否摻入全脂奶粉還原奶的最低檢出限為5％。
當(dāng)巴氏殺菌奶中含有5％、10％、20％、30％、40％的還原奶時(shí)，使用本發(fā)明的快速檢驗(yàn)方法，具體測試結(jié)果見表二。
表二

測試結(jié)果表明巴氏殺菌奶中含有的還原奶比例越高，測試值的數(shù)據(jù)越大。本發(fā)明的快速檢驗(yàn)方法，是否摻入全脂奶粉還原奶的最低檢出限為5％。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、一種鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，依次進(jìn)行以下步驟
1)、取1ml待檢牛奶樣品于具塞離心管中；再向所述具塞離心管中加入6mlpH4.6、0.1mol/L的醋酸和醋酸鈉緩沖液，混合均勻后，靜置5分鐘，然后在10～20℃的溫度下以3500g～4500g離心8～12分鐘，得上清液；2)、將上述上清液用0.45μm的水性濾膜過濾，得過濾液；3)、選用上述0.1ml的過濾液與5ml的水混合制成待測液；4)、取用上述待測液，以1mg/L的牛血清白蛋白為外標(biāo)，在熒光分光光度計(jì)上測量；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為330nm、發(fā)射波長為420nm時(shí)，記錄美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為290nm、發(fā)射波長為340nm時(shí)，記錄色氨酸的熒光值；5)用上述美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值除以色氨酸的熒光值后再乘以100，得測試值；當(dāng)待檢牛奶樣品為原奶時(shí)，測試值＜10為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥10為不合格品、即摻有還原奶；當(dāng)待檢牛奶樣品為巴氏殺菌奶時(shí)，測試值＜11.5為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥11.5為不合格品、即摻有還原奶。
實(shí)施例2、一種鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，依次進(jìn)行以下步驟1)、取1ml待檢牛奶樣品于具塞離心管中；再向所述具塞離心管中加入5mlpH4.6、0.1mol/L的醋酸和醋酸鈉緩沖液，混合均勻后，靜置4～6分鐘，然后在10～20℃的溫度下以3500g～4500g離心8～12分鐘，得上清液；2)、將上述上清液用0.45μm的水性濾膜過濾，得過濾液；3)、選用上述0.1ml的過濾液與4ml的水混合制成待測液；4)、取用上述待測液，以1mg/L的牛血清白蛋白為外標(biāo)，在熒光分光光度計(jì)上測量；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為330nm、發(fā)射波長為420nm時(shí)，記錄美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為290nm、發(fā)射波長為340nm時(shí)，記錄色氨酸的熒光值；5)用上述美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值除以色氨酸的熒光值后再乘以100，得測試值；當(dāng)待檢牛奶樣品為原奶時(shí)，測試值＜10為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥10為不合格品、即摻有還原奶；當(dāng)待檢牛奶樣品為巴氏殺菌奶時(shí)，測試值＜11.5為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥11.5為不合格品、即摻有還原奶。
實(shí)施例3、一種鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，依次進(jìn)行以下步驟1)、取1ml待檢牛奶樣品于具塞離心管中；再向所述具塞離心管中加入7mlpH4.6、0.1mol/L的醋酸和醋酸鈉緩沖液，混合均勻后，靜置4～6分鐘，然后在10～20℃的溫度下以3500g～4500g離心8～12分鐘，得上清液；2)、將上述上清液用0.45μm的水性濾膜過濾，得過濾液；3)、選用上述0.1ml的過濾液與6ml的水混合制成待測液；4)、取用上述待測液，以1mg/L的牛血清白蛋白為外標(biāo)，在熒光分光光度計(jì)上測量；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為330nm、發(fā)射波長為420nm時(shí)，記錄美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為290nm、發(fā)射波長為340nm時(shí)，記錄色氨酸的熒光值；5)用上述美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值除以色氨酸的熒光值后再乘以100，得測試值；當(dāng)待檢牛奶樣品為原奶時(shí)，測試值＜10為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥10為不合格品、即摻有還原奶；當(dāng)待檢牛奶樣品為巴氏殺菌奶時(shí)，測試值＜11.5為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥11.5為不合格品、即摻有還原奶。
最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個(gè)具體實(shí)施例。顯然，本發(fā)明不限于以上實(shí)施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，其特征是依次包括以下步驟1)、取待檢牛奶樣品于離心容器中；再向所述離心容器中加入pH4.6、0.1mol/L的醋酸和醋酸鈉緩沖液，混合均勻后，靜置4～6分鐘，然后在10～20℃的溫度下以3500g～4500g離心8～12分鐘，得上清液；所述醋酸和醋酸鈉緩沖液與待檢牛奶樣品的體積比為5～7∶1；2)、將上述上清液用0.4～0.5μm的水性濾膜過濾，得過濾液；3)、將上述過濾液與水按照1∶40～60的體積比混合制成待測液；4)、取用上述待測液，以1mg/L的牛血清白蛋白為外標(biāo)，在熒光分光光度計(jì)上測量；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為330nm、發(fā)射波長為420nm時(shí)，記錄美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值；調(diào)整熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長為290nm、發(fā)射波長為340nm時(shí)，記錄色氨酸的熒光值；5)用上述美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值除以色氨酸的熒光值后再乘以100，得測試值；當(dāng)待檢牛奶樣品為原奶時(shí)，測試值＜10為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥10為不合格品、即摻有還原奶；當(dāng)待檢牛奶樣品為巴氏殺菌奶時(shí)，測試值＜11.5為合格品、即不摻有還原奶，測試值≥11.5為不合格品、即摻有還原奶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，其特征是所述步驟1)中所用的離心容器為具塞離心管。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，依次包括以下步驟1)將待檢牛奶樣品、醋酸和醋酸鈉緩沖液混合后，離心得上清液；2)將上清液過濾得過濾液；3)將過濾液與水混合制成待測液；4)取用待測液，以1mg/L的牛血清白蛋白為外標(biāo)，在熒光分光光度計(jì)上測量；得美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值和色氨酸的熒光值；5)用美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光值除以色氨酸的熒光值后再乘以100，得測試值；當(dāng)牛奶樣品為原奶時(shí)，測試值＜10為不摻有還原奶的合格品；當(dāng)待檢牛奶樣品為巴氏殺菌奶時(shí)，測試值＜11.5為不摻有還原奶的合格品。本發(fā)明的鮮牛奶中是否摻有還原奶的快速檢驗(yàn)方法，使用簡便、快速，測試靈敏度高。
文檔編號G01N1/28GK1715875SQ20051005052
公開日2006年1月4日 申請日期2005年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月30日
發(fā)明者關(guān)榮發(fā), 葉興乾, 劉東紅, 童軍鋒, 陳健初 申請人:浙江大學(xué)