專利名稱：高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法及其裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及檢測(cè)微量白蛋白的技術(shù)，特別涉及一種高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法及其裝置。
背景技術(shù)：
血清白蛋白(HSA)是血清中含量最多的蛋白，大約占血清蛋白總量的40％～60％。它在藥物的運(yùn)輸和維持血液正常滲透壓發(fā)揮著重要的作用。
目前，分析白蛋白常用的方法有(1)干試紙帶檢測(cè)法；利用指示劑的蛋白質(zhì)誤差原理(即拽示劑離子因與白蛋白攜帶電荷相反而結(jié)合，故使其反應(yīng)顯示的pH顏色變?yōu)檩^高pH顏色變化，這種pH顏色改變的幅度與白蛋白含量成正比)而建立的。(2)加熱乙酸法；加熱煮沸使蛋白變性、凝固，然后加酸使PH接近蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(pH4.7)有利于已變性蛋白下沉，同時(shí)可消除某些磷酸鹽因加熱析出所致的混濁。(3)磺基水楊酸法；其基本原理為在略低于蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的pH條件下，蛋白質(zhì)帶有正電荷的氨基與帶負(fù)電荷的磺基水楊酸根相結(jié)合，形成不溶性蛋白質(zhì)鹽而沉淀。這些檢測(cè)方法雖然簡(jiǎn)單、藥品便宜，但是靈敏度不夠、檢測(cè)線性范圍窄，誤差較大。而在定量分析檢測(cè)白蛋白方面主要有以下幾種方法(1)考馬斯亮藍(lán)G-250法；考馬斯亮藍(lán)G-250溶液可呈現(xiàn)兩種顏色，即紅色和藍(lán)色酸性考馬斯亮藍(lán)為紅色試劑，與蛋白質(zhì)結(jié)合后變成藍(lán)色，與標(biāo)準(zhǔn)液相比，即可測(cè)出蛋白質(zhì)含量；(2)電化學(xué)法；利用某種物質(zhì)在特定的pH條件下有及譜還原峰，加入白蛋白后其峰電位不變而峰電流下降。峰電流下降值同白蛋白的濃度在一定范圍內(nèi)有線性關(guān)系；(3)分光光度法；利用與白蛋白形成復(fù)合物，而這復(fù)合物有特征吸收峰；用特定波長(zhǎng)的光激發(fā)復(fù)合物的得到吸收值；復(fù)合物濃度一定范圍內(nèi)服從比爾定律，對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)溶液吸收值可以算出樣品中白蛋白的濃度。(4)免疫化學(xué)技術(shù)；一定波長(zhǎng)的光線通過(guò)免疫反應(yīng)樣品時(shí)被免疫復(fù)合物反射、吸收而減弱，在一定范圍內(nèi)，透射光被吸收的量(A值變化)與復(fù)合物量呈正相關(guān)，而復(fù)合物量與抗原和抗體的量呈函數(shù)關(guān)系。固定某一物量可從標(biāo)準(zhǔn)曲線得知另一物量。這些方法雖然靈敏度比較高，但是操作比較復(fù)雜，所用儀器昂貴，檢測(cè)成本高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有檢測(cè)方法存在的缺點(diǎn)和不足，提供一種快速、高靈敏、低成本、抗干擾性強(qiáng)的檢測(cè)微量白蛋白的方法；同時(shí)將一種高選擇性、高靈敏度檢測(cè)單態(tài)氧(1O2)的化學(xué)發(fā)光探針(海螢熒光素類似物，簡(jiǎn)稱FCLA)巧妙運(yùn)用來(lái)測(cè)定白蛋白的濃度。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種實(shí)現(xiàn)上述方便的高靈敏、快捷、抗干擾性強(qiáng)的檢測(cè)白蛋白的裝置。
本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，其特征在于包括下述步驟(1)制備穩(wěn)定單態(tài)氧源。
(2)將單態(tài)氧迅速與一種對(duì)單態(tài)氧高選擇、高靈敏度的海螢熒光素類似物(FCLA)反應(yīng)，經(jīng)過(guò)脫羧和質(zhì)子化形成激發(fā)態(tài)羰基化合物，隨后退激發(fā)輻射出特定波長(zhǎng)的光子，形成化學(xué)發(fā)光。
(3)加入白蛋白(HSA)增敏化學(xué)發(fā)光光強(qiáng)；經(jīng)過(guò)內(nèi)涂純硫酸鋇(BaSO4)的積分球?qū)l(fā)散到各個(gè)方向的化學(xué)發(fā)光收集起來(lái)并均勻化處理；積分球可大大提高化學(xué)發(fā)光的收集效率。
(4)安放在檢測(cè)窗的透鏡擴(kuò)大收集角，將積分球均勻化化學(xué)發(fā)光聚焦到高靈敏度的光電倍增管(PMT)的陰極感光板上，將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)。
(5)將電信號(hào)通過(guò)前置放大后將電信號(hào)轉(zhuǎn)化成數(shù)字信號(hào)，由計(jì)算機(jī)軟件處理得出化學(xué)發(fā)光隨時(shí)間衰減信號(hào)圖。
(6)將數(shù)字信號(hào)輸入計(jì)算機(jī)后由軟件統(tǒng)計(jì)出化學(xué)發(fā)光積累量。
所述步驟(1)中穩(wěn)定單態(tài)氧的制備方法可為以下幾種(1)光敏反應(yīng)；(2)化學(xué)反應(yīng)(過(guò)氧化氫與次氯酸鹽反應(yīng))；(3)生物體系的氧化(超氧陰離子自由基的氧化、過(guò)氧化物酶催化H2O2的反應(yīng)、臭氧低溫分解、內(nèi)氧化物的熱分解作用、唾液過(guò)氧化物產(chǎn)生1O2等)。其中化學(xué)反應(yīng)體系相比其它方式具有如下的優(yōu)點(diǎn)無(wú)需激發(fā)光源，避免激發(fā)光干擾，能提高信噪比，并且1O2的產(chǎn)率高；其中過(guò)氧化氫與次氯酸鈉生產(chǎn)單態(tài)氧的效率幾乎為100％。
所述化學(xué)反應(yīng)制備單態(tài)氧源中次氯酸鈉的濃度優(yōu)選為5～50mmol/L；所述過(guò)氧化氫的濃度優(yōu)選為1～5mmol/L。
所述海螢熒光素類似物(FCLA)能特異性地檢測(cè)單態(tài)氧(1O2)和超氧陰離子，所述海螢熒光素類似物的濃度優(yōu)選為1～10umol/L；化學(xué)發(fā)光的波長(zhǎng)是522nm。
所述步驟(3)中積分球在可見(jiàn)光區(qū)(400～760nm)反射率為0.98～0.99，由積分球原理，散射光在球面上經(jīng)歷無(wú)數(shù)次反射，不斷衰減最終均勻化，也就是說(shuō)球面上的每點(diǎn)光強(qiáng)是相等的。由公式E=Φ4πR2·ρ1-ρ]]>知道檢測(cè)窗的光強(qiáng)可以推算出整個(gè)反應(yīng)的發(fā)光強(qiáng)度。
所述步驟(5)中處理數(shù)據(jù)反應(yīng)光強(qiáng)時(shí)只需求5秒內(nèi)的化學(xué)發(fā)光積累量；因?yàn)榉磻?yīng)速度相當(dāng)快，單態(tài)氧相當(dāng)快就衰減完。
一種實(shí)現(xiàn)上述方法的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白化學(xué)發(fā)光裝置，包括暗室、樣品池、微量進(jìn)樣器、積分球、化學(xué)發(fā)光接收組件、電脈沖處理組件、計(jì)算機(jī)，所述樣品池、微量進(jìn)樣器、積分球、化學(xué)發(fā)光接收組件設(shè)置于暗室內(nèi)，化學(xué)發(fā)光接收組件、電脈沖處理組件依次與計(jì)算機(jī)連接；微量進(jìn)樣器懸在樣品池上；樣品池固定在積分球球壁上。
所述化學(xué)發(fā)光接收組件包括透鏡、光電倍增管，所述透鏡通過(guò)光纖與光電倍增管相連接；透鏡增大化學(xué)發(fā)光的收集角，將光會(huì)聚后由光纖輸入光電倍增管。因?yàn)榛瘜W(xué)發(fā)光比較弱并且時(shí)間短，所以所用的接收組件必須是高靈敏、低噪音、能快速響應(yīng)的。
所述電脈沖處理組件包括前置放大器、計(jì)數(shù)卡，前置放大器與計(jì)數(shù)卡相連接。
所述計(jì)算機(jī)處理軟件可采用National Instruments公司開(kāi)發(fā)的Labview軟件。
本發(fā)明的作用原理是化學(xué)反應(yīng)體系產(chǎn)生穩(wěn)定的單態(tài)氧，單態(tài)氧壽命極短(十幾微秒)；單態(tài)氧迅速被選擇性的與高靈敏度發(fā)光探針捕獲，化學(xué)反應(yīng)通過(guò)脫羧和質(zhì)子化形成激發(fā)態(tài)羰基化合物、隨后退激發(fā)輻射出特定波長(zhǎng)的光子；光子經(jīng)超微弱高靈敏度的光電倍增管轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)反映到計(jì)算機(jī)上；控制溫度、pH值等條件加入一定量的白蛋白，從計(jì)算機(jī)軟件統(tǒng)計(jì)上可以明顯知道白蛋白提高化學(xué)發(fā)光；化學(xué)發(fā)光增敏的程度在一定范圍內(nèi)與白蛋白的濃度成線性關(guān)系。
分析FCLA與HSA的吸收光譜發(fā)現(xiàn)，當(dāng)兩者混合后FCLA的吸收峰有5nm的紅移；HSA在279nm光激發(fā)下337nm處出現(xiàn)熒光峰，加入FCLA后熒光強(qiáng)度下降，并且隨著FCLA濃度的增加HSA熒光強(qiáng)度不斷下降。我們分析了FCLA淬滅HSA的機(jī)制是屬于靜態(tài)淬滅，利用Forster能量轉(zhuǎn)移理論，可以計(jì)算出FCLA與HSA的結(jié)合距離以及結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)目。這些都說(shuō)明FCLA與HSA存在分子間的締合。締合后存在分子內(nèi)的能量轉(zhuǎn)移。HSA與單態(tài)氧反應(yīng)后生成蛋白羰基，其激發(fā)態(tài)能在分子內(nèi)轉(zhuǎn)移給FCLA。這樣就有兩個(gè)FCLA介入的化學(xué)發(fā)光過(guò)程。一個(gè)是FCLA與單態(tài)氧反應(yīng)的化學(xué)發(fā)光過(guò)程。FCLA+1O2.FCLA＝O*.FCLA＝O+h.′，F(xiàn)CLA與單態(tài)氧反應(yīng)后化學(xué)結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生改變。另一個(gè)發(fā)光過(guò)程是激發(fā)態(tài)FCLA退激發(fā)的過(guò)程，可以不斷的產(chǎn)生光子。兩個(gè)反應(yīng)累加大大增強(qiáng)了化學(xué)發(fā)光。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下的優(yōu)點(diǎn)及有益效果(1)靈敏度高、檢測(cè)速度快本發(fā)明運(yùn)用一種高靈敏度的化學(xué)發(fā)光探針FCLA與單態(tài)氧反應(yīng)化學(xué)發(fā)光，極微量的白蛋白都能夠提高發(fā)光強(qiáng)度，從數(shù)值信號(hào)的統(tǒng)計(jì)上可以明顯檢測(cè)出。這比觀測(cè)顏色變化、吸收值變化以及電流變化都要靈敏多；同時(shí)，控制實(shí)驗(yàn)處于最適條件下(溫度、pH值、反應(yīng)濃度等)，反應(yīng)物混合均勻迅速化學(xué)反應(yīng)生成單態(tài)氧，而FCLA能高靈敏地檢測(cè)單態(tài)氧，但單態(tài)氧壽命極短，檢測(cè)時(shí)間也就5秒左右；白蛋白增敏化學(xué)發(fā)光也處于FCLA檢測(cè)單態(tài)氧的過(guò)程，故檢測(cè)白蛋白速度快，時(shí)間為5秒左右，這與其他方法(熒光光譜法、甲苯酚藍(lán)等需要十幾分鐘)相比迅速得多。
(2)低成本本發(fā)明所采用的裝置結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，生產(chǎn)裝配較為容易，造價(jià)相對(duì)較低；在操作過(guò)程中使用的藥品用量少，操作使用方便，整體成本較為低廉。
(3)利用本發(fā)明檢測(cè)微量白蛋白具有一定的抗干擾性，為以后生產(chǎn)實(shí)踐中高靈敏地檢測(cè)白蛋白提供一種有益的借鑒。


圖1是本發(fā)明高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白化學(xué)發(fā)光裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是FCLA-HSA體系中由Labview統(tǒng)計(jì)的實(shí)時(shí)化學(xué)發(fā)光信號(hào)衰減圖。
圖3是有無(wú)白蛋白條件下化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度比較圖。
圖4是微量白蛋白濃度與增敏化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度柱狀關(guān)系圖。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
實(shí)施例圖1示出了本發(fā)明裝置的具體結(jié)構(gòu)，由圖1可見(jiàn)，本高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白化學(xué)發(fā)光裝置包括暗室1、透明超薄樣品池2、微量進(jìn)樣器3、積分球4、化學(xué)發(fā)光接收組件、電脈沖處理組件、計(jì)算機(jī)10、電源11、光電倍增管的穩(wěn)壓器12；所述透明超薄樣品池2、微量進(jìn)樣器3、積分球4、化學(xué)發(fā)光接收組件設(shè)置于暗室內(nèi)，化學(xué)發(fā)光接收組件、電脈沖處理組件依次與計(jì)算機(jī)10連接；微量進(jìn)樣器3懸在樣品池2上；樣品池2固定在積分球4球壁上；化學(xué)發(fā)光接收組件、計(jì)算機(jī)10與電源11連接。所述化學(xué)發(fā)光接收組件包括透鏡5、光電倍增管6、光纖7，所述透鏡5通過(guò)光纖7與光電倍增管6相連接；所述透鏡5可選用8mm凸透鏡，所述光纖7可選用8mm光纖；所述電脈沖處理組件包括前置放大器8、計(jì)數(shù)卡9，前置放大器8與計(jì)數(shù)卡9相連接；所述計(jì)數(shù)卡9選用ADVANTECH PCL-836；積分球4是向上海億奧光學(xué)科技有限公司定做的；球體直徑150mm，球壁開(kāi)2個(gè)窗口(兩個(gè)窗口呈直角，一個(gè)窗口為放置樣品池的，另外一個(gè)為檢測(cè)窗口)，樣品窗開(kāi)口直徑8mm，檢測(cè)窗直徑為8.5mm。計(jì)算機(jī)10選用Intel公司的Pentium III型微機(jī)。
利用上述裝置實(shí)現(xiàn)的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法具體操作如下在室溫(25℃)條件下，并在黑暗環(huán)境中將pH7.4的磷酸緩沖液(PBS)660uL、50umol/LHSA 10uL、100umol/L FCLA 30uL、濃度為100umol/L的NaClO 100uL按順序加入透明超薄樣品池2中，用微量進(jìn)樣器注射濃度為10umol/L的H2O2200uL，迅速打開(kāi)PMT模塊檢測(cè)化學(xué)發(fā)光，計(jì)算機(jī)的軟件程序開(kāi)始計(jì)數(shù)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，得到如圖2所示的實(shí)時(shí)化學(xué)發(fā)光信號(hào)衰減圖。
將pH7.4的磷酸緩沖液體積660uL、濃度為100umol/L的NaClO 100uL、，100umol/L FCLA 30uL、10umol/L的H2O2200uL，其它實(shí)驗(yàn)條件不變，分別不加入白蛋白和加入50umol/L白蛋白10uL，每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次統(tǒng)計(jì)的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度(選取前5秒計(jì)數(shù)值的積累量)，取平均值，得出存在白蛋白和不存在白蛋白條件下化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的積累量如圖3。
改變HSA的濃度分別選用0umol/L、0.01umol/L、0.03umol/L、0.05umol/L，0.08umol/L，其它實(shí)驗(yàn)條件不變，每個(gè)實(shí)驗(yàn)樣重復(fù)3次取實(shí)驗(yàn)結(jié)果(選取統(tǒng)計(jì)結(jié)果前100個(gè)點(diǎn)的數(shù)據(jù)積累)的平均值，測(cè)得化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度減去無(wú)HSA發(fā)光強(qiáng)度與白蛋白濃度的柱狀關(guān)系圖4。
操作結(jié)果分析(1)由圖2所示FCLA-HSA體系中檢測(cè)到實(shí)時(shí)化學(xué)發(fā)光信號(hào)衰減圖可看出次氯酸鈉和過(guò)氧化氫的化學(xué)反應(yīng)非常迅速，單態(tài)氧壽命極短，但FCLA能靈敏探測(cè)到單態(tài)氧。從圖2中看出，化學(xué)發(fā)光收集的有效數(shù)據(jù)也就是前100個(gè)點(diǎn)，其后化學(xué)發(fā)光迅速衰減到本底。
(2)圖3是有無(wú)白蛋白條件下化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度比較圖；可以看出加入0.05umol/L的白蛋白能夠明顯提高化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度。
(3)圖4是微量白蛋白濃度與增敏化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度柱狀關(guān)系圖。根據(jù)圖4可明顯知道在一定范圍隨著白蛋白濃度的增加，化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度不斷增加；并且0.01umol/L白蛋白與無(wú)白蛋白化學(xué)發(fā)光相比一定的差別，這暗示提高靈敏度還有大的空間，將數(shù)據(jù)作線性擬合線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.978。
上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，其特征在于包括下述步驟(1)制備穩(wěn)定單態(tài)氧源；(2)將單態(tài)氧迅速與海螢熒光素類似物反應(yīng)，經(jīng)過(guò)脫羧和質(zhì)子化形成激發(fā)態(tài)羰基化合物，隨后退激發(fā)輻射出特定波長(zhǎng)的光子，形成化學(xué)發(fā)光；(3)加入白蛋白增敏化學(xué)發(fā)光光強(qiáng)；經(jīng)過(guò)內(nèi)涂純硫酸鋇(BaSO4)的積分球?qū)l(fā)散到各個(gè)方向的化學(xué)發(fā)光收集起來(lái)并均勻化處理；(4)安放在檢測(cè)窗的透鏡擴(kuò)大收集角，將積分球均勻化化學(xué)發(fā)光聚焦到高靈敏度的光電倍增管(PMT)的陰極感光板上，將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)；(5)將電信號(hào)通過(guò)前置放大后將電信號(hào)轉(zhuǎn)化成數(shù)字信號(hào)，由計(jì)算機(jī)軟件處理得出化學(xué)發(fā)光隨時(shí)間衰減信號(hào)圖；(6)將數(shù)字信號(hào)輸入計(jì)算機(jī)后由軟件統(tǒng)計(jì)出化學(xué)發(fā)光積累量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，其特征在于所述步驟(1)中穩(wěn)定單態(tài)氧的制備方法為以下幾種(1)光敏反應(yīng)；(2)化學(xué)反應(yīng)；(3)生物體系的氧化。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，其特征在于所述化學(xué)反應(yīng)為過(guò)氧化氫與次氯酸鹽反應(yīng)或過(guò)氧化氫與腈反應(yīng)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，其特征在于所述次氯酸鈉的濃度為5～50mmol/L；所述過(guò)氧化氫的濃度為1～5mmol/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，其特征在于所述海螢熒光素類似物檢測(cè)單態(tài)氧和超氧陰離子，所述海螢熒光素類似物的濃度為1～10umol/L；化學(xué)發(fā)光的波長(zhǎng)是522nm。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，其特征在于所述步驟(3)中積分球在可見(jiàn)光區(qū)反射率為0.98～0.99，收集所有的散射光子并將其均勻化。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，其特征在于所述步驟(5)中處理數(shù)據(jù)反應(yīng)光強(qiáng)時(shí)只求5秒內(nèi)的化學(xué)發(fā)光積累量。
8.一種實(shí)現(xiàn)權(quán)利要求1～7任一項(xiàng)所述方法的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白化學(xué)發(fā)光裝置，其特征在于包括暗室、樣品池、微量進(jìn)樣器、積分球、化學(xué)發(fā)光接收組件、電脈沖處理組件、計(jì)算機(jī)，所述樣品池、微量進(jìn)樣器、積分球、化學(xué)發(fā)光接收組件設(shè)置于暗室內(nèi)，化學(xué)發(fā)光接收組件、電脈沖處理組件依次與計(jì)算機(jī)連接；微量進(jìn)樣器懸在樣品池上；樣品池固定在積分球球壁上。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白化學(xué)發(fā)光裝置，其特征在于所述化學(xué)發(fā)光接收組件包括透鏡、光電倍增管，所述透鏡通過(guò)光纖與光電倍增管相連接；透鏡增大化學(xué)發(fā)光的收集角，將光會(huì)聚后由光纖輸入光電倍增管。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白化學(xué)發(fā)光裝置，其特征在于所述電脈沖處理組件包括前置放大器、計(jì)數(shù)卡，前置放大器與計(jì)數(shù)卡相連接。
全文摘要
本發(fā)明提供一種高靈敏度檢測(cè)微量白蛋白的化學(xué)發(fā)光方法，包括化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生穩(wěn)定的單氧源；單態(tài)氧和高選擇性、高靈敏度的化學(xué)發(fā)光探針FCLA反應(yīng)產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物，迅速退激發(fā)發(fā)出光子；微量的白蛋白與FCLA結(jié)合后很大地增敏化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，化學(xué)發(fā)光增敏的大小與白蛋白的濃度成線性關(guān)系；通過(guò)發(fā)光強(qiáng)度的變化對(duì)應(yīng)白蛋白濃度的改變，從而檢測(cè)出微量白蛋白。一種實(shí)現(xiàn)前述方法的裝置，包括暗室、樣品池、微量進(jìn)樣器、積分球、化學(xué)發(fā)光接收組件、電脈沖處理組件、計(jì)算機(jī)等。本發(fā)明所需樣品少，裝置容易實(shí)現(xiàn)，耗時(shí)短，成本低，操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，有一定的抗干擾性。
文檔編號(hào)G01N21/76GK1900718SQ20061003670
公開(kāi)日2007年1月24日 申請(qǐng)日期2006年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月27日
發(fā)明者邢達(dá), 徐未, 周靜 申請(qǐng)人:華南師范大學(xué)