專利名稱：在血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行紅細(xì)胞血型抗原檢測的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)學(xué)上紅細(xì)胞血型抗原的檢測方法，特別是涉及一種在血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行的紅細(xì)胞血型抗原檢測的方法，主要應(yīng)用于紅細(xì)胞血型鑒定。
背景技術(shù)：
一、什么是血型，什么是紅細(xì)胞血型，什么是紅細(xì)胞血型抗原，什么是紅細(xì)胞血型鑒定，什么是紅細(xì)胞血型抗原檢測。
血型是人類血液特征之一，是來自父母雙方以抗原抗體為表現(xiàn)形式的有規(guī)律的遺傳性狀。最初血型是指存在于紅細(xì)胞上不同的特異性抗原而言；后來發(fā)現(xiàn)除紅細(xì)胞外，白細(xì)胞、血小板、血清蛋白等均具有其特有的血型。紅細(xì)胞血型是指由存在于紅細(xì)胞上不同的特異性抗原特征而決定的血型系統(tǒng)。紅細(xì)胞血型抗原是指存在于紅細(xì)胞表面的特異性血型抗原物質(zhì)。
根據(jù)紅細(xì)胞表面的抗原種類不同，目前已發(fā)現(xiàn)27個紅細(xì)胞血型系統(tǒng)，但對臨床意義最大的是ABO和Rh兩個血型系統(tǒng)。目前臨床上所應(yīng)用的紅細(xì)胞血型鑒定主要是指紅細(xì)胞ABO和Rh兩個血型系統(tǒng)的檢測鑒定。ABO血型系統(tǒng)的抗原有H、A、B三種抗原，根據(jù)紅細(xì)胞表面所具有的抗原不同而分為A、B、O、AB四種血型表現(xiàn)型，紅細(xì)胞上無A和B血型抗原者為O型；紅細(xì)胞上有A抗原，而無B抗原者為A型；紅細(xì)胞上有B抗原，而無A抗原者為B型；紅細(xì)胞上有A和B血型抗原者為AB型；H抗原則均存在于O型、A型、B型和AB型紅細(xì)胞上。Rh血型系統(tǒng)的抗原有D、C、E、c、e五種抗原，臨床上常以D抗原存在與否來表示Rh血型的陽性和陰性。
血型鑒定是指應(yīng)用生物學(xué)檢測技術(shù)，檢測紅細(xì)胞表面的血型抗原種類情況以判定紅細(xì)胞血型的方法。紅細(xì)胞血型抗原檢測是紅細(xì)胞血型鑒定的主要方法。臨床應(yīng)用最為廣泛的是ABO和Rh兩個血型系統(tǒng)的檢測鑒定，即通過生物學(xué)檢測方法檢測紅細(xì)胞上是否存在有H、A、B抗原來判定紅細(xì)胞的ABO血型；檢測紅細(xì)胞上是否存在有D抗原來判定紅細(xì)胞的Rh血型。
二、現(xiàn)用血型抗原檢測方法介紹現(xiàn)用紅細(xì)胞血型抗原的檢測方法主要是紅細(xì)胞鹽水凝集法。在免疫檢驗(yàn)學(xué)中，紅細(xì)胞特異性凝集反應(yīng)是指紅細(xì)胞表面的抗原與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)介質(zhì)中結(jié)合，使原來混勻狀態(tài)的反應(yīng)體系中，產(chǎn)生由兩個或兩個以上紅細(xì)胞結(jié)合成的凝集快，而出現(xiàn)肉眼可見的凝集反應(yīng)。血型抗原檢測是根據(jù)待測紅細(xì)胞與已知血型抗體是否發(fā)生特異性凝集反應(yīng)，來判斷紅細(xì)胞表面是否存在有與已知血型抗體對應(yīng)的血型抗原?，F(xiàn)用的血型抗體一般有兩種，分別是人源的標(biāo)準(zhǔn)血清和應(yīng)用單克隆技術(shù)制備的標(biāo)準(zhǔn)血清。
具體檢測法有玻片法和試管法所需試劑和材料1、標(biāo)準(zhǔn)血清(如抗A、抗B、抗H、抗D等)。
2、受檢者5％紅細(xì)胞鹽水混懸液。
(一)玻片法1、取潔凈玻片一塊，分別滴加標(biāo)準(zhǔn)血清和受檢者5％紅細(xì)胞鹽水懸液各1滴。
2、轉(zhuǎn)動玻片，以使紅細(xì)胞和標(biāo)準(zhǔn)血清充分混勻，室溫放置10-15分鐘，轉(zhuǎn)動玻片觀察結(jié)果。
3、結(jié)果判定若出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集反應(yīng)，可判定為紅細(xì)胞存在有與加入已知標(biāo)準(zhǔn)血清對應(yīng)的血型抗原；若無出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集反應(yīng)，可判定為紅細(xì)胞不存在有與加入已知標(biāo)準(zhǔn)血清對應(yīng)的血型抗原。
(二)試管法1、取一支干凈小試管，分別滴加標(biāo)準(zhǔn)血清和受檢者5％紅細(xì)胞鹽水懸液各1滴。
2、混勻后在室溫放置5分鐘。
3、以1000轉(zhuǎn)/分的條件離心1-2分鐘，輕彈試管，觀察紅細(xì)胞有無凝集。
4、結(jié)果判斷若出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集反應(yīng)，可判定為紅細(xì)胞存在有與加入已知標(biāo)準(zhǔn)血清對應(yīng)的血型抗原；若無出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集反應(yīng)，可判定為紅細(xì)胞不存在有與加入已知標(biāo)準(zhǔn)血清對應(yīng)的血型抗原。
三、現(xiàn)用血型抗原檢測法的不足紅細(xì)胞鹽水凝集法已廣泛用于臨床檢驗(yàn)，是最常規(guī)的血型鑒定技術(shù)。但僅適用于手工操作，且具有操作繁瑣、容易誤判、容易受冷凝集、假凝集因素影響而使結(jié)果難以判斷等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺點(diǎn)，提供一種在血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行血型抗原檢測的方法。根據(jù)本發(fā)明的方法，可以在血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行血型抗原檢測，也可以設(shè)計制作出能同時進(jìn)行血細(xì)胞分析和血型抗原檢測的血細(xì)胞分析儀器或能進(jìn)行血型抗原檢測的分析裝置。
為實(shí)現(xiàn)上述目的本發(fā)明的解決方案為在血細(xì)胞分析儀上依次通過預(yù)稀釋、反應(yīng)、測定步驟，分別檢測由待測紅細(xì)胞和已知血型抗體構(gòu)成的反應(yīng)體系，和由未加入血型抗體的待測紅細(xì)胞混懸液構(gòu)成的對照體系的紅細(xì)胞參數(shù)；然后通過計算得出兩個體系紅細(xì)胞參數(shù)的變化情況，與介定范圍進(jìn)行比較分析，可判斷出反應(yīng)體系中是否發(fā)生了凝集反應(yīng)，從而間接檢測出待測紅細(xì)胞上是否存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原。
所述的血細(xì)胞分析儀是指能夠進(jìn)行血細(xì)胞計數(shù)或體積分析的儀器或裝置。
所述的變化情況是由于在反應(yīng)體系中，紅細(xì)胞與相應(yīng)血型抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，可使游離紅細(xì)胞數(shù)量減少，而由兩個或兩個以上紅細(xì)胞結(jié)合而成的紅細(xì)胞凝集顆粒增多；在進(jìn)行細(xì)胞粒子計數(shù)時，紅細(xì)胞凝集顆?？梢暈橐环N比單個游離紅細(xì)胞體積大的大紅細(xì)胞；因此，發(fā)生凝集反應(yīng)后細(xì)胞群的體積和體積分布情況與未發(fā)生凝集反應(yīng)時比較，會發(fā)生改變；通過血細(xì)胞分析儀測定出的兩個體系紅細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行計算，計算得出兩者的差值、比值或差值與對照體系參數(shù)值的比值作為變化情況參數(shù)值。如 所述的比較分析是通過血細(xì)胞分析儀測定計算出的兩個體系紅細(xì)胞參數(shù)的變化情況參數(shù)值與介定范圍進(jìn)行比較，如果變化情況參數(shù)值超出介定范圍為分析結(jié)果陽性，反之為陰性；可選定一個或一個以上紅細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行比較分析，若選定參數(shù)的變化情況參數(shù)值分析結(jié)果陽性，可判定為紅細(xì)胞存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原，若選定參數(shù)的變化情況參數(shù)值分析結(jié)果陰性，可判定為紅細(xì)胞不存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原。
所述的介定范圍是指在無凝集反應(yīng)發(fā)生時，血細(xì)胞分析儀測定反應(yīng)體系和對照體系的某一紅細(xì)胞參數(shù)變化情況的允許誤差范圍；為提高準(zhǔn)確度，介定范圍可選定為該允許誤差范圍的1-50倍。
反應(yīng)體系是指由血樣與稀釋液和血型抗體試劑按照一定的比例混合而成的混懸液；對照體系是指由血樣與稀釋液按照一定比例稀釋而成的混懸液。
血型抗體試劑是指含有能夠與紅細(xì)胞血型抗原發(fā)生特異性凝集反應(yīng)的抗體或凝集素的試劑溶液，試劑基質(zhì)的滲透壓、酸堿度、離子強(qiáng)度、導(dǎo)電率要與反應(yīng)體系使用的稀釋液相同。
預(yù)稀釋是指在計數(shù)前用稀釋液將血樣稀釋成一定紅細(xì)胞濃度的混懸液，在加入血型抗體反應(yīng)時，既有利于紅細(xì)胞凝集反應(yīng)的發(fā)生，也可以防止因紅細(xì)胞濃度太高而形成可以導(dǎo)致測定小孔堵孔的大紅細(xì)胞凝集快；預(yù)稀釋的比例可以為1∶1-1∶50000。
反應(yīng)是指在經(jīng)預(yù)稀釋的紅細(xì)胞混懸液中加入血型抗體試劑，使待測紅細(xì)胞與血型抗體接觸，經(jīng)過一定的時間進(jìn)行凝集反應(yīng)；血型抗體試劑也可以在預(yù)稀釋時與稀釋液同時加入；加入血型抗體試劑后，血樣與血型抗體試劑和稀釋液的比例可以為1∶1-1∶50000。
用于結(jié)果分析的紅細(xì)胞參數(shù)分別有1)紅細(xì)胞總數(shù)是指血細(xì)胞分析儀所測定得出的紅細(xì)胞數(shù)量參數(shù)，表示每升血樣中的紅細(xì)胞數(shù)。不同的分析儀所界定紅細(xì)胞計數(shù)的甄別閾值體積范圍不同，通常界定在36-360fL范圍的粒子計數(shù)為紅細(xì)胞，在血型抗原分析時，因?yàn)榧t細(xì)胞凝集顆粒的形成，反應(yīng)體系中的粒子體積比原血樣中的細(xì)胞粒子體積大，因此儀器紅細(xì)胞計數(shù)的甄別閾值體積范圍可擴(kuò)大至1-1000fL范圍。
2)紅細(xì)胞平均體積是指血細(xì)胞分析儀所測定得出的紅細(xì)胞平均體積參數(shù)。
3)紅細(xì)胞比積是指血細(xì)胞分析儀所測定得出的紅細(xì)胞比積參數(shù)。
4)某一體積段范圍的紅細(xì)胞數(shù)量在儀器界定的紅細(xì)胞計數(shù)甄別閾值體積范圍內(nèi)，某一體積段范圍紅細(xì)胞的數(shù)量參數(shù)。
5)某一體積段范圍的紅細(xì)胞比例在儀器界定的紅細(xì)胞計數(shù)甄別閾值體積范圍內(nèi)，某一體積段范圍紅細(xì)胞的數(shù)量占紅細(xì)胞總數(shù)的比例。
6)兩個體積段范圍的紅細(xì)胞數(shù)比值在儀器界定的紅細(xì)胞計數(shù)甄別閾值體積范圍內(nèi)，兩個體積段范圍紅細(xì)胞數(shù)量的比值。
7)紅細(xì)胞體積分布寬度是指血細(xì)胞分析儀所測定得出的紅細(xì)胞體積分布寬度參數(shù)。
8)其它參數(shù)以上述紅細(xì)胞參數(shù)為基礎(chǔ)計算的其它分析參數(shù)。本發(fā)明達(dá)到的效果和優(yōu)點(diǎn)根據(jù)本發(fā)明的方法，可以在血細(xì)胞分析以上進(jìn)行血型抗原檢測，并可通過與對照體系的分析比較，在一定程度上可克服紅細(xì)胞的自身冷凝集、假凝集等非特性凝集因素對測定準(zhǔn)確性的影響，從而提高臨床檢驗(yàn)工作的準(zhǔn)確性和工作效率。也可以根據(jù)本方法原理設(shè)計制作出能同時進(jìn)行血細(xì)胞分析和血型抗原檢測的血細(xì)胞分析儀器或能進(jìn)行血型抗原檢測的分析裝置。與現(xiàn)用方法比較，本發(fā)明方法具有準(zhǔn)確性高，自動化程度高等優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明方法的實(shí)施例一本發(fā)明在深圳邁瑞公司產(chǎn)BC-2200半自動血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行血型抗原檢測的方法因凝集反應(yīng)可使游離紅細(xì)胞減少，紅細(xì)胞總數(shù)減少，因此以紅細(xì)胞總數(shù)為比較分析參數(shù)。先對儀器的紅細(xì)胞總數(shù)介定范圍進(jìn)行確定，然后在儀器上分別對反應(yīng)樣本和對照樣本的紅細(xì)胞總數(shù)進(jìn)行檢測，通過計算得出紅細(xì)胞總數(shù)變化率，與介定范圍比較，從而判斷出紅細(xì)胞是否存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原。具體檢測方法是(一)試劑和血樣準(zhǔn)備1、稀釋液為血細(xì)胞分析儀專用稀釋液。
2、血型抗體試劑為長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)的抗A血型定型試劑，含單克隆抗A抗體。
3、血樣EDTA二鉀抗凝的靜脈血2毫升。
(二)紅細(xì)胞總數(shù)介定范圍的確定1、使用儀器生產(chǎn)商提供的紅細(xì)胞總數(shù)的變異系數(shù)的1-4倍作為介定范圍。
2、在本實(shí)驗(yàn)室建立介定范圍的方法在血細(xì)胞分析以上，按照儀器的操作規(guī)程，對血樣連續(xù)重復(fù)測定20次，得出每次測定的紅細(xì)胞總數(shù)，應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)分析方法，計算出紅細(xì)胞總數(shù)的變異系數(shù)。為排除隨機(jī)誤差對判斷結(jié)果準(zhǔn)確度的影響，以1-4倍的變異系數(shù)值作為紅細(xì)胞總數(shù)的參數(shù)介定范圍。
(三)樣本檢測1、預(yù)稀釋取兩個樣本杯，分別標(biāo)注為反應(yīng)杯和對照杯，用稀釋器各加稀釋液9.98ml，用微量吸血管分別在反應(yīng)杯和對照杯中加入血樣0.02ml，輕輕搖勻，此即預(yù)稀釋比例為1∶500的反應(yīng)樣本和對照樣本。
2、反應(yīng)在反應(yīng)杯中加入抗A血型定型試劑0.1ml，混輕輕搖動勻，靜置20秒；在對照杯中加入稀釋液0.1ml，輕輕搖勻。
3、測定另取兩個樣本杯，分別標(biāo)注為反應(yīng)測定杯和對照測定杯，用稀釋器各加稀釋液9.98ml，用定量吸血管在反應(yīng)杯中吸0.1ml混懸液到反應(yīng)測定杯中，輕輕搖勻；用定量吸血管在對照杯中吸0.1ml混懸液到對照測定杯中，輕輕搖勻。分別將反應(yīng)測定杯和對照測定杯放到儀器的紅細(xì)胞檢測探頭上進(jìn)行測定，得出反應(yīng)樣本和對照樣本的紅細(xì)胞總數(shù)。
(四)結(jié)果分析根據(jù)測定得出的反應(yīng)樣本和對照樣本紅細(xì)胞總數(shù)，計算紅細(xì)胞總數(shù)變化率 如果變化率大于介定范圍為結(jié)果陽性，反之為陰性。若結(jié)果陽性，可判定為紅細(xì)胞存在有A抗原，若結(jié)果陰性，可判定為紅細(xì)胞不存在有A抗原。
本發(fā)明方法的實(shí)施例二本發(fā)明在深圳邁瑞公司產(chǎn)BC-2800全自動血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行血型抗原檢測的方法因凝集反應(yīng)產(chǎn)生的紅細(xì)胞凝集顆粒，一般體積在150-250fL左右，因此以150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)的百分比為比較分析參數(shù)。先對儀器的150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)百分比的介定范圍進(jìn)行確定，然后在儀器上對反應(yīng)樣本和對照樣本的150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)的百分比進(jìn)行檢測，通過計算得出兩個樣本的150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)百分比的變化率，與介定范圍比較，從而判斷出紅細(xì)胞是否存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原。具體檢測方法是(一)試劑和血樣準(zhǔn)備同實(shí)施例一。
(二)150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)的百分比介定范圍的確定在本實(shí)驗(yàn)室建立介定范圍的方法在血細(xì)胞分析以上，按照儀器的操作規(guī)程，對血樣連續(xù)重復(fù)測定20次，得出每次測定的紅細(xì)胞總數(shù)。進(jìn)入儀器的手工校正程序，改變紅細(xì)胞計數(shù)體積閾值界標(biāo)為150-250fL，得出每次測定的150-250fL體積段的紅細(xì)胞數(shù)。計算出每次的150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)的百分比，應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)分析方法，計算出變異系數(shù)。為排除隨機(jī)誤差對判斷結(jié)果準(zhǔn)確度的影響，以1-4倍的變異系數(shù)值作為150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)百分比的參數(shù)介定范圍。
(一)對照樣本檢測在血細(xì)胞分析以上，按照儀器全自動檢測模式的操作規(guī)程，對血樣進(jìn)行測定，得出紅細(xì)胞總數(shù)。進(jìn)入儀器的手工校正程序，改變紅細(xì)胞計數(shù)體積閾值界標(biāo)為150-250fL，得出150-250fL體積段的紅細(xì)胞數(shù)。計算出150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)的百分比。
(二)測定樣本檢測1.預(yù)稀釋應(yīng)用儀器的預(yù)稀釋功能，取一個樣本杯，按動儀器的預(yù)稀釋加注稀釋液鍵，在樣本杯中加注稀釋液1.6ml，用微量吸血管加入血樣0.02ml，輕輕搖勻，此即預(yù)稀釋比例為1∶80的反應(yīng)樣本。
2.反應(yīng)在反應(yīng)杯中加入抗A血型定型試劑0.05ml，輕輕搖勻，靜置20秒。
3.測定進(jìn)入儀器的預(yù)稀釋樣本測定程序，將樣本杯放到進(jìn)樣針上，按動預(yù)稀釋樣本計數(shù)鍵，儀器自動對樣本進(jìn)行測定，得出紅細(xì)胞總數(shù)。進(jìn)入儀器的手工校正程序，改變紅細(xì)胞計數(shù)體積閾值界標(biāo)為150-250fL，得出150-250fL體積段的紅細(xì)胞數(shù)。計算出150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)的百分比。
(三)結(jié)果分析根據(jù)測定得出的150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)的百分比，計算出150-250fL體積段紅細(xì)胞數(shù)占總紅細(xì)胞數(shù)的百分比的變化率 如果變化率大于介定范圍為結(jié)果陽性，反之為陰性。若結(jié)果陽性，可判定為紅細(xì)胞存在有A抗原，若結(jié)果陰性，可判定為紅細(xì)胞不存在有A抗原。
權(quán)利要求
1.在血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行紅細(xì)胞血型抗原檢測的方法，其特征在于在血細(xì)胞分析儀上依次通過預(yù)稀釋、反應(yīng)、測定步驟，分別檢測由待測紅細(xì)胞和已知血型抗體構(gòu)成的反應(yīng)體系，和由未加入血型抗體的待測紅細(xì)胞混懸液構(gòu)成的對照體系的紅細(xì)胞參數(shù)；然后通過計算得出兩個體系紅細(xì)胞參數(shù)的變化情況，與介定范圍進(jìn)行比較分析，可判斷出反應(yīng)體系中是否發(fā)生了凝集反應(yīng)，從而間接檢測出待測紅細(xì)胞上是否存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原。
2.根據(jù)權(quán)力要求1所述的方法，其特征在于所述的血細(xì)胞分析儀是指能夠進(jìn)行血細(xì)胞計數(shù)或體積分析的儀器或裝置。
3.根據(jù)權(quán)力要求1所述的方法，其特征在于所述的變化情況是由于在反應(yīng)體系中，紅細(xì)胞與相應(yīng)血型抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，可使游離紅細(xì)胞數(shù)量減少，而由兩個或兩個以上紅細(xì)胞結(jié)合而成的紅細(xì)胞凝集顆粒增多；在進(jìn)行細(xì)胞粒子計數(shù)時，紅細(xì)胞凝集顆?？梢暈橐环N比單個游離紅細(xì)胞體積大的大紅細(xì)胞；因此，發(fā)生凝集反應(yīng)后細(xì)胞群的體積和體積分布情況與未發(fā)生凝集反應(yīng)時比較，會發(fā)生改變；通過血細(xì)胞分析儀測定出的兩個體系紅細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行計算，計算得出兩者的差值、比值或差值與對照體系參數(shù)值的比值作為變化情況參數(shù)值。
4.根據(jù)權(quán)力要求1或3所述的方法，其特征在于所述的比較分析是通過血細(xì)胞分析儀測定計算出的兩個體系紅細(xì)胞參數(shù)的變化情況參數(shù)值與介定范圍進(jìn)行比較，如果變化情況參數(shù)值超出介定范圍為分析結(jié)果陽性，反之為陰性；可選定一個或一個以上紅細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行比較分析，若選定參數(shù)的變化情況參數(shù)值分析結(jié)果陽性，可判定為紅細(xì)胞存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原，若選定參數(shù)的變化情況參數(shù)值分析結(jié)果陰性，可判定為紅細(xì)胞不存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原。
5.根據(jù)權(quán)力要求1所述的方法，其特征在于所述的介定范圍是指在無凝集反應(yīng)發(fā)生時，血細(xì)胞分析儀測定反應(yīng)體系和對照體系的某一紅細(xì)胞參數(shù)變化情況的允許誤差范圍；為提高準(zhǔn)確度，介定范圍可選定為該允許誤差范圍的1-50倍。
6.根據(jù)權(quán)力要求1所述的方法，其特征在于反應(yīng)體系是指由血樣與稀釋液和血型抗體試劑按照一定的比例混合而成的混懸液；對照體系是指由血樣與稀釋液按照一定比例稀釋而成的混懸液。
7.根據(jù)權(quán)力要求6所述的方法，其特征在于血型抗體試劑是指含有能夠與紅細(xì)胞血型抗原發(fā)生特異性凝集反應(yīng)的抗體或凝集素的試劑溶液，試劑基質(zhì)的滲透壓、酸堿度、離子強(qiáng)度、導(dǎo)電率要與反應(yīng)體系使用的稀釋液相同。
8.根據(jù)權(quán)力要求1所述的方法，其特征在于預(yù)稀釋是指在計數(shù)前用稀釋液將血樣稀釋成一定紅細(xì)胞濃度的混懸液，在加入血型抗體反應(yīng)時，既有利于紅細(xì)胞凝集反應(yīng)的發(fā)生，也可以防止因紅細(xì)胞濃度太高而形成可以導(dǎo)致測定小孔堵孔的大紅細(xì)胞凝集快；預(yù)稀釋的比例可以為1∶1-1∶50000。
9.根據(jù)權(quán)力要求1所述的方法，其特征在于反應(yīng)是指在經(jīng)預(yù)稀釋的紅細(xì)胞混懸液中加入血型抗體試劑，使待測紅細(xì)胞與血型抗體接觸，經(jīng)過一定的時間進(jìn)行凝集反應(yīng)；血型抗體試劑也可以在預(yù)稀釋時與稀釋液同時加入；加入血型抗體試劑后，血樣與血型抗體試劑和稀釋液的比例可以為1∶1-1∶50000。
10.根據(jù)權(quán)力要求1所述的方法，其特征在于用于結(jié)果分析的紅細(xì)胞參數(shù)分別有1)紅細(xì)胞總數(shù)是指血細(xì)胞分析儀所測定得出的紅細(xì)胞數(shù)量參數(shù)，表示每升血樣中的紅細(xì)胞數(shù)，不同的分析儀所界定紅細(xì)胞計數(shù)的甄別閾值體積范圍不同，通常界定在36-360fL范圍的粒子計數(shù)為紅細(xì)胞，在血型抗原分析時，因?yàn)榧t細(xì)胞凝集顆粒的形成，反應(yīng)體系中的粒子體積比原血樣中的細(xì)胞粒子體積大，因此儀器紅細(xì)胞計數(shù)的甄別閾值體積范圍可擴(kuò)大至1-1000fL范圍；2)紅細(xì)胞平均體積是指血細(xì)胞分析儀所測定得出的紅細(xì)胞平均體積參數(shù)；3)紅細(xì)胞比積是指血細(xì)胞分析儀所測定得出的紅細(xì)胞比積參數(shù)；4)某一體積段范圍的紅細(xì)胞數(shù)量在儀器界定的紅細(xì)胞計數(shù)甄別閾值體積范圍內(nèi)，某一體積段范圍紅細(xì)胞的數(shù)量參數(shù)；5)某一體積段范圍的紅細(xì)胞比例在儀器界定的紅細(xì)胞計數(shù)甄別閾值體積范圍內(nèi)，某一體積段范圍紅細(xì)胞的數(shù)量占紅細(xì)胞總數(shù)的比例；6)兩個體積段范圍的紅細(xì)胞數(shù)比值在儀器界定的紅細(xì)胞計數(shù)甄別閾值體積范圍內(nèi)，兩個體積段范圍紅細(xì)胞數(shù)量的比值；7)紅細(xì)胞體積分布寬度是指血細(xì)胞分析儀所測定得出的紅細(xì)胞體積分布寬度參數(shù)；8)其它參數(shù)以上述紅細(xì)胞參數(shù)為基礎(chǔ)計算的其它分析參數(shù)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種醫(yī)學(xué)上紅細(xì)胞血型抗原的檢測方法，特別是涉及一種在血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行的紅細(xì)胞血型抗原檢測的方法，主要應(yīng)用于紅細(xì)胞血型鑒定。該方法具體是在血細(xì)胞分析儀上依次通過預(yù)稀釋、反應(yīng)、測定步驟，分別檢測由待測紅細(xì)胞和已知血型抗體構(gòu)成的反應(yīng)體系，和由未加入血型抗體的待測紅細(xì)胞混懸液構(gòu)成的對照體系的紅細(xì)胞參數(shù)；然后通過計算得出兩個體系紅細(xì)胞參數(shù)的變化情況，與介定范圍進(jìn)行比較分析，可判斷出反應(yīng)體系中是否發(fā)生了凝集反應(yīng)，從而間接檢測出待測紅細(xì)胞上是否存在有與已知血型抗體相對應(yīng)的血型抗原。與現(xiàn)用方法比較，本發(fā)明方法具有準(zhǔn)確性高，自動化程度高等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號G01N33/49GK1904618SQ20061003685
公開日2007年1月31日 申請日期2006年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月31日
發(fā)明者潘干華 申請人:潘干華